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应用两步氯化钙转化法高效制备双自杀基因重组腺病毒
被引量：
3
1
作者
郑权
黄宗海
+2 位作者
汤福祥
黄媛媛
车小燕
《第一军医大学学报》
CSCD
北大核心
2003年第6期575-577,共3页
目的构建巨细胞病毒(CMV)启动子驱动下的双自杀基因重组腺病毒。方法应用PCR扩增出CD和TK基因,经适当改造后插入pAdtrack CMV中构建成转移质粒pAdtrack CMV-CDTK,经酶切线性化后,转化用氯化钙制备的感受态AdEasier-1细菌,获得重组腺病...
目的构建巨细胞病毒(CMV)启动子驱动下的双自杀基因重组腺病毒。方法应用PCR扩增出CD和TK基因,经适当改造后插入pAdtrack CMV中构建成转移质粒pAdtrack CMV-CDTK,经酶切线性化后,转化用氯化钙制备的感受态AdEasier-1细菌,获得重组腺病毒质粒。最后将线性化的重组腺病毒质粒转染293细胞包装获得重组腺病毒,滴度测定后,体外感染血管内皮细胞ECV304。结果PCR检测表明已成功构建了含CD、TK融合基因的重组腺病毒,为进一步开展肿瘤的双自杀基因治疗研究奠定了基础。结论应用改进后的AdEasy系统构建腺病毒相比于传统AdEasy系统,方法更简便、成功率更高、实验周期更短。
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关键词
两步
氯化钙
转化
法
制备
双自杀基因重组腺病毒
基因治疗
下载PDF
职称材料
题名
应用两步氯化钙转化法高效制备双自杀基因重组腺病毒
被引量：
3
1
作者
郑权
黄宗海
汤福祥
黄媛媛
车小燕
机构
第一军医大学珠江医院普外科
第一军医大学珠江医院中心实验室
出处
《第一军医大学学报》
CSCD
北大核心
2003年第6期575-577,共3页
基金
国家863计划项目(2001AA217171)
广东省自然科学基金(013072)~~
文摘
目的构建巨细胞病毒(CMV)启动子驱动下的双自杀基因重组腺病毒。方法应用PCR扩增出CD和TK基因,经适当改造后插入pAdtrack CMV中构建成转移质粒pAdtrack CMV-CDTK,经酶切线性化后,转化用氯化钙制备的感受态AdEasier-1细菌,获得重组腺病毒质粒。最后将线性化的重组腺病毒质粒转染293细胞包装获得重组腺病毒,滴度测定后,体外感染血管内皮细胞ECV304。结果PCR检测表明已成功构建了含CD、TK融合基因的重组腺病毒,为进一步开展肿瘤的双自杀基因治疗研究奠定了基础。结论应用改进后的AdEasy系统构建腺病毒相比于传统AdEasy系统,方法更简便、成功率更高、实验周期更短。
关键词
两步
氯化钙
转化
法
制备
双自杀基因重组腺病毒
基因治疗
Keywords
adenovirus
double suicide gene therapy
AdEasy system
CaCl2 transformation method
分类号
R346 [医药卫生—基础医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
应用两步氯化钙转化法高效制备双自杀基因重组腺病毒
郑权
黄宗海
汤福祥
黄媛媛
车小燕
《第一军医大学学报》
CSCD
北大核心
2003
3
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