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羊呼吸道主要支原体和细菌病原的多重PCR检测方法的建立及应用 被引量：11
1
作者 胡玉婷 刀筱芳 +3 位作者 王成龙 丁可莉 宋明彤 杨发龙 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期416-420,430,共6页
为建立一种能够同时检测绵羊肺炎支原体、丝状支原体簇成员、多杀性巴氏杆菌和溶血性曼氏杆菌4种羊呼吸道主要病原的多重PCR方法,本研究采用各病原的特异性引物,经优化反应条件,建立了一种可以同时检测以上4种病原的多重PCR方法,并对12... 为建立一种能够同时检测绵羊肺炎支原体、丝状支原体簇成员、多杀性巴氏杆菌和溶血性曼氏杆菌4种羊呼吸道主要病原的多重PCR方法,本研究采用各病原的特异性引物,经优化反应条件,建立了一种可以同时检测以上4种病原的多重PCR方法,并对128份临床样品进行了检测。结果显示,该方法对其它细菌和支原体扩增结果均为阴性,特异性强;该方法对以上4种病原基因组DNA的检测下限分别为2.2×10~3拷贝、2.1×10~3拷贝、1.1×10~3拷贝和8.3×10~2拷贝。该方法特异性强、敏感性高,为上述4种病原的快速检测和鉴定,以及临床羊呼吸道疾病的诊断提供了一种方便、快捷和准确的工具。 展开更多
关键词 绵羊肺炎支原体 丝状支原体簇 多杀性巴氏杆菌 溶血性曼氏杆菌 多重PCR
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山羊主要支原体感染的研究 被引量：8
2
作者 党斌 潘玉坤 吴禹熹 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2016年第1期155-158,共4页
山羊支原体感染普遍发生于世界各养羊国家和地区,山羊支原体病主要有传染性无乳症、山羊传染性胸膜肺炎、绵羊传染性胸膜肺炎、传染性角膜结膜炎等。虽然这些疾病导致的死亡率低,但却给养羊业造成了巨大的经济损失。文章简述了无乳支原... 山羊支原体感染普遍发生于世界各养羊国家和地区,山羊支原体病主要有传染性无乳症、山羊传染性胸膜肺炎、绵羊传染性胸膜肺炎、传染性角膜结膜炎等。虽然这些疾病导致的死亡率低,但却给养羊业造成了巨大的经济损失。文章简述了无乳支原体、绵羊肺炎支原体、丝状支原体簇和结膜支原体等几种在临床上主要感染山羊的支原体,以及它们感染病畜后的临床症状、病理变化、诊断及预防治疗。 展开更多
关键词 山羊 支原体感染 无乳支原体 绵羊肺炎支原体 丝状支原体簇 结膜支原体
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丝状支原体簇及绵羊肺炎支原体双重PCR方法的建立及应用 被引量：6
3
作者 杨发龙 王华 +1 位作者 岳华 王永 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2011年第5期92-94,共3页
为了快速检测和鉴别丝状支原体和绵羊肺炎支原体,试验采用2对检测丝状支原体和绵羊肺炎支原体的特异性引物,成功建立了一种能同时检测丝状支原体和绵羊肺炎支原体的双重PCR方法。结果表明:该方法特异性强、敏感性高,对临床病料的检测效... 为了快速检测和鉴别丝状支原体和绵羊肺炎支原体,试验采用2对检测丝状支原体和绵羊肺炎支原体的特异性引物,成功建立了一种能同时检测丝状支原体和绵羊肺炎支原体的双重PCR方法。结果表明:该方法特异性强、敏感性高,对临床病料的检测效果好。 展开更多
关键词 丝状支原体簇 绵羊肺炎支原体 双重PCR
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羊口疮病毒和丝状支原体簇双重PCR检测方法的建立及应用 被引量：7
4
作者 林裕胜 江锦秀 +2 位作者 江斌 游伟 胡奇林 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期292-295,共4页
为建立一种同时快速检测羊口疮病毒(ORFV)和丝状支原体簇(Mm cluster)的方法,本研究根据ORFV的B2L基因和Mm cluster的16S r RNA基因序列,设计合成了2对特异性引物,通过条件优化,建立了同时检测ORFV核酸和Mm cluster核酸的双重PCR方法。... 为建立一种同时快速检测羊口疮病毒(ORFV)和丝状支原体簇(Mm cluster)的方法,本研究根据ORFV的B2L基因和Mm cluster的16S r RNA基因序列,设计合成了2对特异性引物,通过条件优化,建立了同时检测ORFV核酸和Mm cluster核酸的双重PCR方法。该方法可以同时扩增出ORFV和Mm cluster的特异性片段,而对其它常见病原的DNA模板均无扩增,对ORFV和Mm cluster的最低检出量分别为3.8×10~4拷贝/μL和1.3×10~3拷贝/μL。利用该方法对36份临床样品进行检测,结果显示双重PCR检测结果与单一PCR检测结果符合率为100%。本研究建立的双重PCR方法特异性强,敏感性高,可重复性好,为临床ORFV和Mm cluster的快速检测、诊断及流行病学调查提供了方法。 展开更多
关键词 羊口疮病毒 丝状支原体簇 双重PCR 检测
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丝状支原体簇和多杀性巴氏杆菌双重PCR方法的建立及应用
5
作者 王成龙 吴禹熹 +1 位作者 冯旭飞 杨发龙 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2014年第4期22-26,共5页
本研究旨在建立丝状支原体簇和多杀性巴氏杆菌的双重PCR检测方法,从而为临床上同时检测这2类病原的感染提供一种更方便、快捷、准确的工具。本研究采用2对特异性检测丝状支原体簇和多杀性巴氏杆菌的引物,对PCR反应体系和反应条件进行了... 本研究旨在建立丝状支原体簇和多杀性巴氏杆菌的双重PCR检测方法,从而为临床上同时检测这2类病原的感染提供一种更方便、快捷、准确的工具。本研究采用2对特异性检测丝状支原体簇和多杀性巴氏杆菌的引物,对PCR反应体系和反应条件进行了优化,并对双重PCR的特异性及敏感性进行了评价,随后采用该方法对52份临床样本进行了检测。结果显示,所建立的双重PCR方法能同时扩增丝状支原体簇成员和多杀性巴氏杆菌的DNA,而对来源于其他常见病原的DNA均无扩增;对丝状支原体簇和多杀性巴氏杆菌的最低检测限分别为24.8和28.9pg;能成功地从临床样本中检测丝状支原体簇成员和多杀性巴氏杆菌。结果表明,本研究所建立的双重PCR方法具有很好的特异性和敏感性,为临床丝状支原体簇和多杀性巴氏杆菌感染的快速诊断、病原鉴定及流行病学调查提供了有效的方法。 展开更多
关键词 丝状支原体簇 多杀性巴氏杆菌 双重PCR
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羊丝状支原体簇环介导等温扩增检测方法的建立 被引量：3
6
作者 谢秀兰 康晓冬 +2 位作者 储岳峰 马小明 岳彩娟 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2012年第12期24-26,共3页
本试验利用环介导等温扩增技术(LAMP)建立了羊丝状支原体簇的快速检测方法,该方法以羊丝状支原体簇成员的保守性基因16S rRNA为靶序列,设计了4条特异性引物,在65℃等温条件下,60 min一步完成反应。在反应管中预先添加羟基萘酚蓝(HNB),... 本试验利用环介导等温扩增技术(LAMP)建立了羊丝状支原体簇的快速检测方法,该方法以羊丝状支原体簇成员的保守性基因16S rRNA为靶序列,设计了4条特异性引物,在65℃等温条件下,60 min一步完成反应。在反应管中预先添加羟基萘酚蓝(HNB),阳性呈蓝色,阴性呈紫色。丝状支原体簇成员——丝状支原体山羊亚种(Mmc)、丝状支原体丝状亚种LC型(Mmm LC)、山羊支原体山羊肺炎亚种(Mccp)的LAMP检测为阳性;对其他病原菌没有交叉反应。以Mmc的核酸为模板进行灵敏度检测,LAMP的最低检出限为10 pg/μL。结果表明,本试验建立了一种特异、敏感、快速、简便的羊丝状支原体簇的LAMP方法。 展开更多
关键词 羊丝状支原体簇 LAMP 诊断
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