目的探究丝氨酸-精氨酸蛋白激酶1(serine-arginine protein kinase 1,SRPK1)在肺腺癌中的表达及其促进肺腺癌恶性进展的机制。方法检索Human Protein Atlas数据库,比较SRPK1在正常肺组织和肺腺癌组织的表达水平;检索Kaplan Meier Plotte...目的探究丝氨酸-精氨酸蛋白激酶1(serine-arginine protein kinase 1,SRPK1)在肺腺癌中的表达及其促进肺腺癌恶性进展的机制。方法检索Human Protein Atlas数据库,比较SRPK1在正常肺组织和肺腺癌组织的表达水平;检索Kaplan Meier Plotter数据库,分析SRPK1的表达水平与肺腺癌患者生存预后的关系。采用慢病毒感染法在肺腺癌细胞A549、H1299中稳定过表达SRPK1,通过RT-qPCR和Western blot检测对照组和SRPK1过表达组细胞中SRPK1的表达水平。检索文献寻找SRPK1影响肿瘤进展的可能机制,通过Western blot检测对照组和SRPK1过表达组细胞中黏着斑激酶(focal adhesion kinase,FAK)及pFAK(Y397)的表达水平;检索癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)数据库中肺腺癌队列的RNA-Seq数据,对SRPK1和丝氨酸蛋白酶抑制剂mRNA结合蛋白1(serpine 1 mRNA binding protein 1,SERBP1)的表达进行皮尔森相关性分析。通过细胞免疫荧光实验鉴定A549和H1299细胞中SRPK1和SERBP1的共定位情况;通过co-IP实验鉴定A549和H1299细胞中SRPK1和SERBP1的结合情况;采用慢病毒感染法在A549和H1299中稳定过表达SERBP1,通过RT-qPCR和Western blot检测对照组和SERBP1过表达组细胞中SERBP1的表达水平;通过RT-qPCR检测对照组和SERBP1过表达组细胞中SRPK1的表达水平;通过Western blot检测对照组和SERBP1过表达组细胞中SRPK1、FAK、pFAK(Y397)的表达水平。结果Human Protein Atlas数据库的数据显示,与正常肺组织相比,肺腺癌组织中SRPK1表达明显上调;Kaplan Meier Plotter数据库中数据显示,SRPK1表达水平越高,肺腺癌患者的预后越差(P=1.5×10^(-8))。RT-qPCR和Western blot结果显示,与对照组相比,SRPK1过表达组细胞SRPK1的表达水平上调(P<0.001);Western blot结果显示,与对照组相比,SRPK1过表达组细胞中FAK的表达基本不变,pFAK(Y397)的表达上调。皮尔森相关性分析显示,在TCGA数据库的肺腺癌队列数据中,SERBP1的基因表达与SRPK1的展开更多
