miR-138靶向调控PDK1基因抑制人结肠癌SW620细胞侵袭 被引量：12

1

作者 英舟 万义增 陈素贤 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期340-344,共5页

目的探讨人结肠癌SW620细胞中miR-138和PDK1基因的表达,阐明miR-138对PDK1基因的靶向调控作用以及对SW620细胞侵袭性的影响。方法培养SW620细胞并应用免疫荧光检测PDK1基因在细胞中的表达。采用生物信息学方法对miR-138和PDK1基因的靶... 目的探讨人结肠癌SW620细胞中miR-138和PDK1基因的表达,阐明miR-138对PDK1基因的靶向调控作用以及对SW620细胞侵袭性的影响。方法培养SW620细胞并应用免疫荧光检测PDK1基因在细胞中的表达。采用生物信息学方法对miR-138和PDK1基因的靶向匹配关系进行预测并应用双荧光素酶报告基因系统鉴定。脂质体2000转染miR-138模拟物后,qRT-PCR检测miR-138和PDK1基因的表达,Western blot检测PDK1蛋白的表达,Transwell小室检测SW620细胞体外的侵袭性。结果倒置相差显微镜下可见人结肠癌SW620细胞均匀分布,形态规则均一;细胞免疫荧光显示细胞内有PDK1蛋白的表达,显示红色荧光。靶基因预测软件miRanda和Target Scan显示miR-138和PDK1基因匹配良好,双荧光素酶报告基因系统鉴定发现miR-138能够结合PDK1 m RNA 3’UTR并有效抑制其表达。qRTPCR和Western blot检测结果表明过表达miR-138能够导致PDK1基因表达的下降。Transwell实验表明miR-138的过表达能够抑制SW620细胞的侵袭。结论 miR-138通过靶向作用于PDK1 m RNA 3’UTR能够负性调控PDK1基因的表达,并能够抑制人结肠癌SW620细胞的侵袭。 展开更多

关键词 微小RNA 丙酮酸脱氢酶激酶-1 结肠癌SW620细胞

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植物丙酮酸脱氢酶系及其调节酶的研究进展 被引量：1

2

作者 谭才邓 《广西轻工业》 2007年第6期7-9,共3页

糖类需氧氧化过程的限速步骤是丙酮酸的脱羧氧化,催化此反应的酶是丙酮酸脱氢酶系(pyruvate dehydroge-nase complex,PDC)。PDC存在于线粒体中,其核心结构由三种酶组成。丙酮酸脱氢酶激酶(pyruvate dehydrogenase kinase,PDK),是PDC的... 糖类需氧氧化过程的限速步骤是丙酮酸的脱羧氧化,催化此反应的酶是丙酮酸脱氢酶系(pyruvate dehydroge-nase complex,PDC)。PDC存在于线粒体中,其核心结构由三种酶组成。丙酮酸脱氢酶激酶(pyruvate dehydrogenase kinase,PDK),是PDC的负调控酶,负责催化丙酮酸脱氢酶(Pyruvate dehydrogenase,PDH)磷酸化使其失活。丙酮酸脱氢酶磷酸酶(Pyruvate dehydrogenase phosphatase,PDP)则催化已磷酸化的PDH去磷酸化使其复活。本文主要从酶的结构及作用机制方面作简单概述。 展开更多

关键词 丙酮酸脱氢酶系 丙酮酸脱氢酶激酶 丙酮酸脱氢酶磷酸酶

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丙酮酸脱氢酶激酶在恶性肿瘤中的研究进展 被引量：4

3

作者 王秋月 贾方 王菊勇 《肿瘤预防与治疗》 2019年第10期945-950,共6页

正常细胞能量代谢以线粒体的氧化磷酸化为主,而癌细胞则以有氧糖酵解为主。这种代谢特征的偏移与丙酮酸脱氢酶激酶及其相关蛋白密切相关。本文通过介绍该激酶功能及相关蛋白、抑制剂的研究情况等,以阐述其在恶性肿瘤发生发展等方面的研... 正常细胞能量代谢以线粒体的氧化磷酸化为主,而癌细胞则以有氧糖酵解为主。这种代谢特征的偏移与丙酮酸脱氢酶激酶及其相关蛋白密切相关。本文通过介绍该激酶功能及相关蛋白、抑制剂的研究情况等,以阐述其在恶性肿瘤发生发展等方面的研究进展,进一步深入了解其在临床中的应用价值。 展开更多

关键词 有氧糖酵解 丙酮酸脱氢酶激酶 恶性肿瘤

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RNA干扰PDK-1对5-FU诱导结肠癌细胞凋亡的促进作用 被引量：4

4

作者 谢贛丰 梁后杰 +1 位作者 童晶涛 何金霞 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期9-12,共4页

目的探讨以丙酮酸脱氢酶激酶-1(pyruvate dehydrogenase kinase isozyme 1,PDK-1)为靶标的短发夹RNA(shRNA)与化疗药5-氟尿嘧啶(5-FU)联合应用对人结肠癌LS174T细胞的促凋亡作用。方法针对PDK-1序列设计3段干扰序列及1个阴性对照,分别构... 目的探讨以丙酮酸脱氢酶激酶-1(pyruvate dehydrogenase kinase isozyme 1,PDK-1)为靶标的短发夹RNA(shRNA)与化疗药5-氟尿嘧啶(5-FU)联合应用对人结肠癌LS174T细胞的促凋亡作用。方法针对PDK-1序列设计3段干扰序列及1个阴性对照,分别构建pGenesil.1-PDK-1重组质粒表达载体及pGenesil.1-NC阴性对照载体,利用脂质体分别将质粒转染入LS174T,并用G418对细胞进行药物筛选,并通过Real-time PCR和Western blot检测有干扰序列的有效性。MTT实验检测5-FU对干扰组和对照组细胞生长、增殖的影响,流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果 Real-time PCR和Western blot证实3个干扰组均抑制PDK-1表达,其中最大敲减效率超过70%。MTT实验结果显示,经5-FU同样处理48 h后,PDK-1干扰的LS174T细胞生长抑制率较对照组显著增高(P<0.05);流式细胞仪结果显示,干扰组细胞凋亡率较对照组增高(P<0.05)。结论 PDK-1 shRNA能特异性下调LS174T细胞中PDK-1的表达,PDK-1干扰联合5-FU可促进结肠癌细胞化疗诱导凋亡。 展开更多

关键词 结肠肿瘤 丙酮酸脱氢酶激酶-1 细胞增殖 化学治疗 凋亡

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鼻咽癌组织中VEGF及受体、CXCL10、PDK1表达与复发转移的相关性

5

作者 李玉宁 黄小芳 +1 位作者 王淑云 陈加艳 《实用癌症杂志》 2024年第10期1614-1617,共4页

目的探讨鼻咽癌组织内血管内皮生长因子(VEGF)及受体、趋化因子配体10(CXCL10)、丙酮酸脱氢酶激酶-1(PDK1)表达与复发转移间的关系。方法回顾性分析89例鼻咽癌患者临床资料,放疗前采集所有患者肿瘤组织及癌旁正常组织,开展免疫组化SP法... 目的探讨鼻咽癌组织内血管内皮生长因子(VEGF)及受体、趋化因子配体10(CXCL10)、丙酮酸脱氢酶激酶-1(PDK1)表达与复发转移间的关系。方法回顾性分析89例鼻咽癌患者临床资料,放疗前采集所有患者肿瘤组织及癌旁正常组织,开展免疫组化SP法检测VEGF、VEGF受体-2(VEGFR-2)、CXCL10、PDK1表达,并比较其在肿瘤组织及癌旁正常组织中表达的差异性;比较不同年龄、性别、肿瘤分期、淋巴结转移患者间VEGF及受体、CXCL10、PDK1表达的差异。随访2年,统计复发转移情况及其与VEGF及受体、CXCL10、PDK1表达间的关系。结果肿瘤组织内VEGF及受体、CXCL10、PDK1阳性表达高于癌旁正常组织,差异有统计学意义(P<0.05);临床分期Ⅲ~Ⅳ期、有淋巴结转移患者VEGF及受体、CXCL10、PDK1阳性表达率高于临床分期Ⅰ~Ⅱ期、无淋巴结转移患者,差异有统计学意义(P<0.05)。随访2年,89例中27例复发转移,复发转移率为30.34%(27/89);复发转移患者VEGF及受体、CXCL10、PDK1阳性表达率高于未复发转移患者,差异有统计学意义(P<0.05)。结论VEGF及受体、CXCL10、PDK1在鼻咽癌组织中存在较高表达,其高表达与肿瘤复发转移关系密切,临床需高度重视,以完善早期治疗方案。 展开更多

关键词 鼻咽癌 血管内皮生长因子 趋化因子配体10 丙酮酸脱氢酶激酶-1 复发转移

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丙酮酸脱氢酶激酶-1在人结肠癌中的表达及意义 被引量：4

6

作者 童晶涛 梁后杰 +3 位作者 陈建芳 江恒 谢赣丰 刘平 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期257-260,共4页

目的检测丙酮酸脱氢酶激酶-I(pyruvate dehydrogenase kinase-I,PDK1)在人结肠癌组织和细胞中的表达。探讨抑制PDK1对结肠癌细胞活性的影响。方法应用RT-PCR、荧光定量PCR和免疫荧光法、Western blot检测结肠癌组织、癌旁组织以及4种人... 目的检测丙酮酸脱氢酶激酶-I(pyruvate dehydrogenase kinase-I,PDK1)在人结肠癌组织和细胞中的表达。探讨抑制PDK1对结肠癌细胞活性的影响。方法应用RT-PCR、荧光定量PCR和免疫荧光法、Western blot检测结肠癌组织、癌旁组织以及4种人结肠癌细胞PDK1基因的表达情况。在PDK1抑制剂(dichloroacetate,DCA)的诱导下,通过MTT法观察结肠癌细胞活性。结果PDK1基因在结肠癌组织中表达较癌旁组织中高;在4种人结肠癌细胞中明显表达。抑制PDK1能抑制结肠癌细胞增殖活性,抑制效应随药物浓度而递增,其中90 mmol/L DCA的活性细胞率分别为(23.90±2.79)%、(5.90±1.31)%、(32.82±4.50)%和(29.72±3.03)%。结论PDK1基因在结肠癌组织和细胞中高表达,在癌旁组织中低表达,抑制PDK1明显抑制结肠癌细胞增殖活性,PDK1可望成为结肠癌有效治疗靶点。 展开更多

关键词 结肠肿瘤 糖原酵解 丙酮酸脱氢酶激酶-1

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丙酮酸脱氢酶激酶抑制剂的研究进展 被引量：2

7

作者 张作鹏 仲烨 +1 位作者 程卯生 刘洋 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第11期2549-2557,共9页

肿瘤细胞通过抑制线粒体中丙酮酸脱氢酶复合物(pyruvate dehydrogenase complex,PDC)的活性,将葡萄糖经由糖酵解途径分解为生物大分子的合成中间体。在这一过程中,丙酮酸脱氢酶激酶(pyruvate dehydrogenase kinases,PDKs)发挥着关键作... 肿瘤细胞通过抑制线粒体中丙酮酸脱氢酶复合物(pyruvate dehydrogenase complex,PDC)的活性,将葡萄糖经由糖酵解途径分解为生物大分子的合成中间体。在这一过程中,丙酮酸脱氢酶激酶(pyruvate dehydrogenase kinases,PDKs)发挥着关键作用。抑制肿瘤细胞中PDKs活性可以有效阻断这一代谢途径,同时起到激活线粒体氧化代谢、诱导细胞凋亡的作用。PDKs抑制剂的研究也成为药物化学领域研究热点之一,能够靶向经典结合位点的新颖结构不断被发现,部分化合物也进入了临床研究阶段。本文综述了近年来PDKs抑制剂的研究进展,旨在总结相关新化学实体的研发现状,并发掘其在临床中的应用价值。 展开更多

关键词 丙酮酸脱氢酶复合物 丙酮酸脱氢酶激酶 结合位点 糖酵解 氧化代谢

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丙酮酸脱氢酶激酶-1在复发鼻咽癌组织中的表达及其与预后的关系 被引量：2

8

作者 项光早 陈丽雅 +2 位作者 曹辉 林少雄 林森 《中国医刊》 CAS 2023年第3期294-297,共4页

目的探讨丙酮酸脱氢酶激酶-1(pyruvate dehydrogenase kinase-1,PDK1)在局部复发鼻咽癌组织中的表达情况,并分析其与患者临床病理特征及预后的关系。方法选取2013年1月至2017年12月上海大学附属第二医院(温州市中心医院)和汕头大学医学... 目的探讨丙酮酸脱氢酶激酶-1(pyruvate dehydrogenase kinase-1,PDK1)在局部复发鼻咽癌组织中的表达情况,并分析其与患者临床病理特征及预后的关系。方法选取2013年1月至2017年12月上海大学附属第二医院(温州市中心医院)和汕头大学医学院第一附属医院收治的92例局部复发鼻咽癌和45例初发鼻咽癌患者的临床标本,采用免疫组织化学法检测PDK1的表达情况,并分析其与患者临床病理特征的关系。采用Kaplan-Meier法进行生存分析,并采用Cox回归模型分析鼻咽癌局部复发的危险因素。结果初发鼻咽癌高表达PDK1蛋白的比例为31.11%,明显低于局部复发鼻咽癌(50.00%),差异有显著性(χ^(2)=4.38,P<0.05)。局部复发鼻咽癌组织中PDK1的表达情况与T分期、N分期、临床分期、远处转移、脑神经侵犯及颅底骨质破坏有关(P<0.05)。Kaplan-Meier生存分析表明,高表达PDK1的局部复发鼻咽癌患者5年生存率明显明显低于低表达者(P<0.05)。Cox回归模型多因素分析显示,高表达PDK1、远处转移、脑神经侵犯是鼻咽癌局部复发的独立危险因素(P<0.05)。结论高表达PDK1可能是鼻咽癌放疗后局部复发及预后不良的重要影响因素。 展开更多

关键词 鼻咽肿瘤 丙酮酸脱氢酶激酶-1 肿瘤复发 局部

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橡胶树丙酮酸脱氢酶激酶基因的克隆与表达分析

9

作者 阳江华 龙翔宇 秦云霞 《植物学研究》 2018年第5期528-535,共8页

丙酮酸脱氢酶激酶(PDK)通过磷酸化丙酮酸脱氢酶复合体(PDC),负调控PDC的酶活性,抑制丙酮酸的氧化脱羧反应,在中间物代谢过程中起着重要的调控作用。橡胶树丙酮酸脱氢酶激酶基因,HbPDK,编码区长1110 bp,编码369个氨基酸。HbPDK主要在橡... 丙酮酸脱氢酶激酶(PDK)通过磷酸化丙酮酸脱氢酶复合体(PDC),负调控PDC的酶活性,抑制丙酮酸的氧化脱羧反应,在中间物代谢过程中起着重要的调控作用。橡胶树丙酮酸脱氢酶激酶基因,HbPDK,编码区长1110 bp,编码369个氨基酸。HbPDK主要在橡胶树叶片、胶乳和花组织中表达,在叶片不同发育时期,其表达量变化不明显。乙烯利处理只是轻微下调HbPDK的表达量,但割胶处理却能显著下调HbPDK在新开割树胶乳中的表达,HbPDK的表达量下降了近5倍。结果说明HbPDK与割胶促进胶乳产量的增加呈明显的负相关,可以通过调控乙酰辅酶A的生成而影响橡胶树产量。pET32a原核表达载体的Trx标签,促进了HbPDK在大肠杆菌中的可溶性表达,通过镍柱亲和层析,获得了纯度在90%以上的重组蛋白。 展开更多

关键词 巴西橡胶树 丙酮酸脱氢酶激酶

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糖皮质激素和胰岛素对人肝癌细胞株丙酮酸脱氢酶激酶4在转录水平上的调节 被引量：3

10

作者 王喆 袁禧先 +1 位作者 赵璐 王淑秋 《中国糖尿病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第10期790-792,共3页

目的利用人肝癌细胞株(HepG2)探讨糖皮质激素和胰岛素对丙酮酸脱氢酶激酶4(PDK-4)在转录水平的相应作用。方法首先通过标准的分子生物学技术制备PDK-4的5‘启动子基因,而后利用荧光酶素方法在HePG2细胞株中,通过时间依赖探讨糖皮质激素... 目的利用人肝癌细胞株(HepG2)探讨糖皮质激素和胰岛素对丙酮酸脱氢酶激酶4(PDK-4)在转录水平的相应作用。方法首先通过标准的分子生物学技术制备PDK-4的5‘启动子基因,而后利用荧光酶素方法在HePG2细胞株中,通过时间依赖探讨糖皮质激素和胰岛素对PDK-4在转录水平上表达的影响。结果人工合成的糖皮质激素地塞米松能有效的增加PDK-4基因在转录水平表达。相反,胰岛素单独使用作用很小,但可明显降低糖皮质激素的正面促进作用。结论糖皮质激素抑制丙酮酸脱氢酶复合物(PDC)的作用至少部分上是通过诱导PDK-4的表达而使丙酮酸向草酰乙酸转化(糖异生途径)。通过对抗糖皮质激素诱导的PDK-4的表达,胰岛素能够起到相反的作用。研究开发PDK-4的拮抗剂可对难治性血糖异常问题及脂代谢异常疾病的治疗开辟一条新的途径。 展开更多

关键词 丙酮酸脱氢酶复合体 丙酮酸脱氢酶激酶4 糖皮质激素 胰岛素

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丙酮酸脱氢酶激酶4在结肠癌组织中的表达及临床意义 被引量：4

11

作者 陈艳荣 彭媛 +2 位作者 欧娟娟 张月 梁后杰 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第11期1144-1149,共6页

目的检测丙酮酸脱氢酶激酶4(pyruvate dehydrogenase kinase 4,PDK4)在结肠癌组织及癌旁黏膜组织中的表达情况,初步探讨其临床意义。方法应用组织芯片技术结合免疫组织化学染色方法,检测本院收治的172例结肠癌患者术后组织标本及86例癌... 目的检测丙酮酸脱氢酶激酶4(pyruvate dehydrogenase kinase 4,PDK4)在结肠癌组织及癌旁黏膜组织中的表达情况,初步探讨其临床意义。方法应用组织芯片技术结合免疫组织化学染色方法,检测本院收治的172例结肠癌患者术后组织标本及86例癌旁肠黏膜组织中PDK4蛋白的表达,对结果及临床病理学参数进行统计学分析。结果 PDK4在172例结肠癌组织中高表达率显著高于86例癌旁肠黏膜组织(57.0%vs 26.7%,P<0.01),PDK4蛋白表达高低与结肠癌的分化程度、临床分期、淋巴结转移、预后等密切相关(P<0.05),且PDK4高表达组患者的生存时间显著低于低表达组患者(P<0.01)。在临床分期低的结肠癌患者中,PDK高表达者预后较差(P<0.01);而在临床分期高的结肠癌患者中,PDK表达高低预后差异无统计学意义。结论 PDK4蛋白在结肠癌组织中表达高于癌旁肠黏膜组织,其可能参与结肠癌的发生、发展。 展开更多

关键词 丙酮酸脱氢酶激酶4 结肠癌 组织芯片技术 免疫组织化学

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丙酮酸脱氢酶激酶4在膀胱癌化疗耐药中的作用 被引量：3

12

作者 肖德 《检验医学与临床》 CAS 2020年第3期344-346,共3页

目的探讨丙酮酸脱氢酶激酶4(PKD4)在膀胱癌化疗耐药中的作用。方法通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测膀胱癌耐药细胞253J/DOX细胞株及人膀胱癌253J细胞系中PKD4的表达差异;通过siRNA转染降低253J/DOX细胞中PKD4的表达,噻唑蓝(MTT)法检... 目的探讨丙酮酸脱氢酶激酶4(PKD4)在膀胱癌化疗耐药中的作用。方法通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测膀胱癌耐药细胞253J/DOX细胞株及人膀胱癌253J细胞系中PKD4的表达差异;通过siRNA转染降低253J/DOX细胞中PKD4的表达,噻唑蓝(MTT)法检测细胞半抑制浓度(IC50)的变化,流式细胞仪检测细胞凋亡率的变化,蛋白质印迹法(Western blot)检测细胞抗凋亡蛋白(Bcl-2蛋白)表达的变化情况。结果 qRT-PCR结果显示,PKD4在253J/DOX膀胱癌耐药细胞表达明显高于人膀胱癌253J细胞系,差异有统计学意义(P<0.05);MTT结果显示,相对于阴性对照组,干扰PKD4的253J/DOX细胞株的IC50明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);凋亡检测结果显示,在相同剂量化疗药物作用下,干扰PKD4后253J/DOX细胞凋亡率明显高于阴性对照组,差异有统计学意义(P<0.05);Western blot结果显示,干扰PKD4表达可明显降低Bcl-2蛋白表达,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 PKD4在膀胱癌化疗耐药细胞表达中明显升高,干扰PKD4表达可明显影响膀胱癌耐药,可考虑将PKD4作为治疗膀胱癌化疗耐药的重要分子靶标。 展开更多

关键词 丙酮酸脱氢酶激酶4 膀胱癌 化疗 耐药 细胞凋亡

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缺失突变型HBx蛋白介导PDK2在肝细胞肝癌中的差异表达及机制 被引量：2

13

作者 张晶 毕利泉 +3 位作者 曹瑞雪 姜贝贝 张自成 刘晓红 《山东医药》 CAS 2021年第13期5-8,共4页

目的探讨肝细胞肝癌(HCC)中自然缺失突变型乙型肝炎病毒X(HBx)蛋白介导的丙酮酸脱氢酶激酶2(PDK2)的差异表达情况以及可能参与调控长链非编码RNA(lncRNA)的机制。方法将Huh7细胞随机分为空载体pcDNA3.1组和HBx-128w组,分别转染pcDNA3.1... 目的探讨肝细胞肝癌(HCC)中自然缺失突变型乙型肝炎病毒X(HBx)蛋白介导的丙酮酸脱氢酶激酶2(PDK2)的差异表达情况以及可能参与调控长链非编码RNA(lncRNA)的机制。方法将Huh7细胞随机分为空载体pcDNA3.1组和HBx-128w组,分别转染pcDNA3.1和pc DNA3.1-HBx-128w。采用Western blotting法检测HBx蛋白的表达。使用lncRNA芯片对两组稳转细胞进行检测,明确pc DNA3.1-HBx-128w转染的Huh7细胞的m RNA表达谱和lncRNA表达谱,筛选相关差异表达基因,利用RT-qPCR方法在稳转细胞中进行验证。利用生物信息学预测可能参与调控的lncRNA,并利用RT-q PCR方法在稳转细胞中进行验证。结果PDK2在HBx-128w组Huh7细胞中呈上调表达,Fold Change为3.219。HBx-128w组Huh7细胞中PDK2的浓度比pcDNA3.1组升高(P<0.05),两组间差异倍数为3.591。HBx-128w组中的lncRNA ENST0000511361表达量较pc DNA3.1组升高(P<0.05),两组间差异倍数为3.742。结论自然缺失突变型HBx-128w转染的Huh7细胞中,PDK2呈上调表达;LncRNA ENST0000511361可能参与HCC发展过程中PDK2表达的调控。 展开更多

关键词 肝细胞肝癌 乙型肝炎病毒X蛋白 丙酮酸脱氢酶激酶2

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姜黄素调控子宫内膜癌细胞糖酵解过程的机制 被引量：2

14

作者 金纬纬 林一禾 +2 位作者 赵小迎 庄晓苹 蔡平生 《温州医科大学学报》 CAS 2019年第12期878-884,共7页

目的:探究姜黄素靶向子宫内膜癌细胞糖酵解过程的调控机制,探索常规化疗药物联合姜黄素靶向杀伤子宫内膜癌细胞的作用效果。方法:培养子宫内膜癌Ishikawa细胞,利用能量代谢检测Seahorse、乳酸及丙酮酸水平,验证子宫内膜癌细胞糖酵解及... 目的:探究姜黄素靶向子宫内膜癌细胞糖酵解过程的调控机制,探索常规化疗药物联合姜黄素靶向杀伤子宫内膜癌细胞的作用效果。方法:培养子宫内膜癌Ishikawa细胞,利用能量代谢检测Seahorse、乳酸及丙酮酸水平,验证子宫内膜癌细胞糖酵解及氧化磷酸化水平;通过qPCR检测了糖酵解相关基因在姜黄素处理后子宫内膜癌细胞及正常子宫内膜癌细胞中表达情况,筛选姜黄素潜在的靶向调控位点;为了验证姜黄素通过丙酮酸脱氢酶激酶2(PDK2)调控子宫内膜癌细胞能量代谢过程,利用Seahorse及丙酮酸水平检测试实验,检测PDK2敲除后子宫内膜癌细胞能量代谢过程变化;小鼠体内皮下成瘤实验,探究姜黄素联合5-FU杀伤子宫内膜癌细胞的治疗效果。结果:姜黄素作用于子宫内膜癌细胞可显著抑制子宫内膜癌细胞糖酵解途径,而氧化磷酸化水平并未发生显著改变;姜黄素可显著下调PDK2的表达,调控子宫内膜癌糖酵解过程,而在子宫内膜癌细胞中敲除PDK2的表达,可显著抑制子宫内膜癌细胞的糖酵解途径,诱导子宫内膜细胞增殖抑制,因此姜黄素作用于PDK2调控子宫内膜癌糖酵解过程,从而达到杀伤肿瘤细胞的目的;5-FU联合姜黄素联合用药,可显著提高5-FU杀伤肿瘤细胞能力,抑制肿瘤细胞生长,5-FU联合姜黄素可显著提高子宫内膜癌细胞对化疗药物的敏感性。结论:姜黄素通过PDK2调控子宫内膜癌细胞糖酵解过程,从而抑制子宫内膜癌细胞增殖过程,增加子宫内膜癌细胞对5-FU的敏感性。 展开更多

关键词 子宫内膜癌 糖酵解 姜黄素 丙酮酸脱氢酶激酶2 5-氟尿嘧啶

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非诺贝特对2型糖尿病大鼠骨骼肌丙酮酸脱氢酶激酶表达的影响

15

作者 袁戈恒 王薇 +1 位作者 郭晓蕙 高妍 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2007年第2期313-315,共3页

目的:动态观察2型糖尿病进展过程中骨骼肌丙酮酸脱氢酶激酶(PDK4)和丙酮酸脱氢酶1α亚单位(E1α)水平的变化和非诺贝特的干预作用。方法:4周龄自发性2型糖尿病动物模型雄性OLETF大鼠20只随机分为治疗组和未治组,每组10只,另设正常LETO大... 目的:动态观察2型糖尿病进展过程中骨骼肌丙酮酸脱氢酶激酶(PDK4)和丙酮酸脱氢酶1α亚单位(E1α)水平的变化和非诺贝特的干预作用。方法:4周龄自发性2型糖尿病动物模型雄性OLETF大鼠20只随机分为治疗组和未治组,每组10只,另设正常LETO大鼠10只为对照。治疗组每d灌胃非诺贝特20mg/kg,未治组和对照组每d灌胃等量蒸馏水。分别于第8周、17周和30周龄称体质量,行标准葡萄糖耐量试验(OGTT),测定空腹血糖和胰岛素、2h血糖、甘油三酯和胆固醇。17周龄时每组随机抽取4只动物杀检,至30周龄全部杀检,取下肢骨骼肌,Western blot测定骨骼肌PDK4和E1α的表达。结果:8周龄时3组生化指标差异无统计学意义(P>0.05)。随鼠龄的增加,未治组2h血糖、PDK4和E1α的表达高于同期对照组;与未治组比较,治疗组上述指标改善不明显(P>0.05)。结论:胰岛素抵抗大鼠骨骼肌PDK4和E1α的表达随病程增加持续增强,这可能与胰岛素在骨骼肌的作用下降有关。 展开更多

关键词 2型糖尿病 丙酮酸脱氢酶激酶 丙酮酸脱氢酶1α亚单位 非诺贝特

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牦牛PDK1基因克隆及生物信息学分析

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作者 毛德才 赵洪文 +3 位作者 陈莉敏 安添午 李华德 罗晓林 《草学》 2023年第5期70-75,共6页

为分析牦牛PDK1基因的分子结构及理化特征,本研究通过RT-PCR扩增获得牦牛PDK1 CDS片段并进行克隆、测序和生物信息学初步分析,结果显示:牦牛PDK1基因CDS核苷酸大小为1137bp,编码氨基酸序列378个,具有较高保守性,其核苷酸序列与普通牛、... 为分析牦牛PDK1基因的分子结构及理化特征,本研究通过RT-PCR扩增获得牦牛PDK1 CDS片段并进行克隆、测序和生物信息学初步分析,结果显示:牦牛PDK1基因CDS核苷酸大小为1137bp,编码氨基酸序列378个,具有较高保守性,其核苷酸序列与普通牛、人、野猪、大羚羊、绵羊、大熊猫、骆驼、长臂猿、大猩猩和山羊PDK1的核苷酸和氨基酸序列一致性分别高于9226%和9630%。生物信息学分析提示,牦牛PDK1基因编码蛋白属亲水蛋白,主要分布在细胞质和细胞核,其理论等电点769,分子量4333 KD,具有潜在磷酸化位点31个,也具有潜在N-糖基化、O-糖基化和甘露糖基化修饰位点。牦牛PDK1含BCDHK_Adom3和HATPase-PDK样保守区域,二级结构由α-螺旋、无规则卷曲和β-转角组成。本研究为进一步研究牦牛PDK1功能提供参考。 展开更多

关键词 牦牛 丙酮酸脱氢酶激酶 PDK1 生物信息

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miR-103a-3p过表达靶向负调控PDK4抑制胶质瘤生长及侵袭 被引量：1

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作者 郭放 万学锋 +2 位作者 刘献志 杨强 李太平 《中国临床神经外科杂志》 2021年第6期442-448,共7页

目的探讨miR-103a-3p过表达对胶质瘤C6细胞恶性生物学行为的影响及对裸鼠移植瘤生长的影响。方法体外培养鼠源性C6胶质瘤细胞,转染miR-103a-3p mimics质粒过表达miR-103a-3p,转染miR-103a-3p mimics+pcDNA-PDK4质粒分析PDK4过表达对miR-... 目的探讨miR-103a-3p过表达对胶质瘤C6细胞恶性生物学行为的影响及对裸鼠移植瘤生长的影响。方法体外培养鼠源性C6胶质瘤细胞,转染miR-103a-3p mimics质粒过表达miR-103a-3p,转染miR-103a-3p mimics+pcDNA-PDK4质粒分析PDK4过表达对miR-103a-3p过表达的影响;EDU法检测细胞增殖活性;qRT-PCR检测miR-103a-3p、PDK4 mRNA表达水平;流式细胞仪检测细胞凋亡率;Transwell实验检测细胞侵袭能力;免疫印迹法检测E-cadherin、N-cadherin、vimentin蛋白表达水平。取40只裸鼠,其中20只皮下注射未转染质粒的C6细胞、20只皮下注射转染miR-103a-3p mimics质粒的C6细胞构建移植瘤模型,分析miR-103a-3p mimics过表达对移植瘤生长的影响。结果生物信息学及双荧光素酶试验证实PDK4是miR103a-3p的靶点。过表达miR-103a-3p明显降低C6细胞PDK4、Ki67、PCNA、N-cadherin、vimentin表达水平(P<0.05),明显抑制C6细胞增殖活性、侵袭能力(P<0.05),明显增加C6细胞E-cadherin表达水平、细胞凋亡率(P<0.05)。过表达PDK4明显抑制过表达miR-103a-3p对C6胶质瘤细胞的作用(P<0.05)。过表达miR-103a-3p明显抑制裸鼠移植瘤生长(P<0.05),抑制肿瘤组织PDK4、Ki67、vimentin表达(P<0.05)。结论过表达miR-103a-3p通过靶向抑制PDK4表达,一方面抑制胶质瘤细胞增殖、促进胶质瘤细胞凋亡,从而抑制胶质瘤生长;另一方抑制胶质瘤上皮-间质转化过程,从而抑制胶质瘤细胞侵袭。 展开更多

关键词 胶质瘤 微小核糖核酸(miRNA) miR-103a-3p 丙酮酸脱氢酶激酶4 细胞增殖 上皮-间质转化

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丙酮酸脱氢酶激酶4在胃癌中的表达水平及预后价值

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作者 庄燕燕 《医学理论与实践》 2022年第6期1024-1026,共3页

目的:基于大数据分析胃癌中丙酮酸脱氢酶激酶4(PDK4)的表达水平及其预后价值。方法:下载TGCA数据库中375例胃癌组织和45例癌旁组织中的mRNA表达矩阵数据并采用Kaplan Meier plotter数据库中的Gastric cancer模块检索PDK4基因(205960_at)... 目的:基于大数据分析胃癌中丙酮酸脱氢酶激酶4(PDK4)的表达水平及其预后价值。方法:下载TGCA数据库中375例胃癌组织和45例癌旁组织中的mRNA表达矩阵数据并采用Kaplan Meier plotter数据库中的Gastric cancer模块检索PDK4基因(205960_at),通过线上分析工具比较胃癌组织和癌旁组织中PDK4的表达情况,并探索不同PDK4表达的生存差别,分析PDK4的预后价值。结果:癌旁组织PDK4中位表达水平为4211(2897~6245);而胃癌组织PDK4中位表达水平为6777(2799~9374),差异具有统计学意义(P<0.001)。PDK4基因低表达组患者中位OS为53.43个月,而PDK4基因高表达组OS为27.8个月;风险比HR=1.46,95%CI 1.18~1.79,差异具有统计学意义(P=0.00036)。PDK4基因低表达组患者中位PFS为30.00个月,高表达组为17.3个月;风险比HR=1.37,95%CI(1.06~1.75),差异具有统计学意义(P=0.014)。结论:PDK4基因是重要的促癌基因,其表达水平与胃癌的预后存在相关性,PDK4高表达提示胃癌预后不良,总生存时间和无进展生存时间明显缩短。 展开更多

关键词 胃癌 丙酮酸脱氢酶激酶4 Kaplan Meier plotter数据库 预后分析

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丙酮酸脱氢酶活性调控在线粒体代谢与生长平衡中的作用 被引量：6

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作者 漆正堂 丁树哲 贺杰 《生命的化学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期307-310,共4页

丙酮酸脱氢酶多酶复合体(PDC)催化丙酮酸生成乙酰辅酶A(acetyl-CoA)的反应是线粒体代谢与生长的调控枢纽。丙酮酸脱氢酶激酶(PDK)/丙酮酸脱氢酶磷酸酶(PDP)对丙酮酸脱氢酶(PDH)的磷酸化/脱磷酸化作用以及丙酮酸/乙酰辅酶A对PDH底物产物... 丙酮酸脱氢酶多酶复合体(PDC)催化丙酮酸生成乙酰辅酶A(acetyl-CoA)的反应是线粒体代谢与生长的调控枢纽。丙酮酸脱氢酶激酶(PDK)/丙酮酸脱氢酶磷酸酶(PDP)对丙酮酸脱氢酶(PDH)的磷酸化/脱磷酸化作用以及丙酮酸/乙酰辅酶A对PDH底物产物水平的调控是线粒体适应不同生理环境的代谢调节方式,而调控PDK基因转录的上游信号恰好也是线粒体生长或生物发生的调控机制。过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)/过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子-1(PGC-1)信号通路可能是线粒体代谢与生长在基因转录水平的共同调控通路。线粒体代谢与生长经共同通路调节可维持线粒体功能与结构之间的平衡。 展开更多

关键词 丙酮酸脱氢酶 丙酮酸脱氢酶激酶4 线粒体 过氧化物酶体增殖物激活受体 过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子-1

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良方温经汤对寒凝血瘀证大鼠子宫及卵巢糖酵解关键酶表达的影响 被引量：4

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作者 果金玉 邢易 +4 位作者 刘鹏 王迪 成秀梅 王鑫国 任艳青 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第12期3215-3223,共9页

探讨寒凝血瘀证与糖酵解的关系,观察良方温经汤干预对寒凝血瘀证大鼠子宫及卵巢组织糖酵解关键酶表达的影响。采用冰水浴法制备大鼠寒凝血瘀证候模型,于造模结束后进行证候量化评分,并依据评分结果随机分为模型组,良方温经汤低、中、高... 探讨寒凝血瘀证与糖酵解的关系,观察良方温经汤干预对寒凝血瘀证大鼠子宫及卵巢组织糖酵解关键酶表达的影响。采用冰水浴法制备大鼠寒凝血瘀证候模型,于造模结束后进行证候量化评分,并依据评分结果随机分为模型组,良方温经汤低、中、高剂量组(4.7、9.4、18.8 g·kg^(-1)·d^(-1)),每组10只,另设空白组10只。连续灌胃给药4周后,再次进行证候量化评分;采用激光散斑血流成像技术检测各组大鼠耳廓及子宫微循环变化;苏木精-伊红(hematoxylin-eosin, HE)染色观察各组大鼠子宫及卵巢组织病理形态;采用实时定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction, RT-qPCR)及蛋白质印迹法(Western blot)检测各组大鼠子宫及卵巢组织丙酮酸脱氢酶激酶1(pyruvate dehydrogenase kinase 1,PDK1)、己糖激酶2(hexokinase 2,HK2)、乳酸脱氢酶A(lactate dehydrogenase A,LDHA)mRNA与蛋白表达情况。模型组大鼠出现蜷缩少动、舌下脉络增粗、耳廓及子宫微循环血流灌注量降低等寒凝血瘀证候表现,HE染色观察到大鼠子宫内膜变薄,上皮细胞排列混乱,卵巢中卵泡数量减少;与模型组相比,治疗组大鼠寒凝血瘀证候明显缓解,表现为舌质变红、爪甲肿胀减少、尾端未见瘀血,耳部及子宫微循环血流灌注量显著增加(P<0.05或P<0.01),尤以良方温经汤中、高剂量组大鼠改善寒凝血瘀证候最为明显,子宫可见排列整齐的柱状上皮细胞,卵巢中较模型组卵泡数量增多,多见成熟卵泡。与空白组相比,模型组大鼠卵巢及子宫组织中PDK1、HK2、LDHA mRNA与蛋白表达水平显著升高(P<0.05或P<0.01)。与模型组相比,良方温经汤中、高剂量组大鼠卵巢及子宫组织中PDK1、HK2、LDHA mRNA与蛋白表达水平显著降低(P<0.05或P<0.01);良方温经汤低剂量组大鼠子宫及卵巢组织中PDK1、HK2、LDHA mRNA的表达,子宫组织中HK2、LDHA蛋白的表达以及卵巢组织中HK2、PDK1� 展开更多

关键词 寒凝血瘀证 良方温经汤 糖酵解 丙酮酸脱氢酶激酶1(PDK1) 己糖激酶2(HK2) 乳酸脱氢酶A(LDHA)

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