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生化检验中标本溶血对结果的影响及对策 被引量:6
1
作者 黄远虹 陈鸿恩 《中国医药指南》 2013年第28期151-152,共2页
目的分析和研究生化检验中标本溶血对结果的影响及对策。方法我们选取30例正常人的血液,将其不溶血与溶血血清中的血钾、三酰甘油、总胆固醇、葡萄糖、尿酸、肌酐、尿素氮、乳酸脱氢酶、白蛋白、总蛋白、直接胆红素、总胆红素、天冬氨... 目的分析和研究生化检验中标本溶血对结果的影响及对策。方法我们选取30例正常人的血液,将其不溶血与溶血血清中的血钾、三酰甘油、总胆固醇、葡萄糖、尿酸、肌酐、尿素氮、乳酸脱氢酶、白蛋白、总蛋白、直接胆红素、总胆红素、天冬氨酸转氨酶、丙氨酸转氨酶等项指标进行对比。结果溶血血清中血钾、乳酸脱氢酶、总蛋白、总胆红素、天冬氨酸转氨酶、丙氨酸转氨酶等检测值高于正常血清的检测值(P<0.05),具有统计学意义。溶血血清中的葡萄糖、尿酸等检测值明显低于正常血清的检测值(P<0.05),具有统计学意义。直接胆红素、白蛋白、尿素氮、肌酐、总胆固醇、三酰甘油等项指标的检测值在溶血与不溶血血清中没有明显差异(P>0.05),无统计学意义。结论溶血会引起某些生化检测指标的假性升高,增加检验结果的差错率,在临床中应尽量减少或避免标本的溶血,提高生化检验的可靠性与准确性。 展开更多
关键词 溶血 溶血 生化检测指标 预防措施
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一株不溶血金黄色葡萄球菌检出分析 被引量:2
2
作者 邓永宏 《职业卫生与病伤》 2014年第5期365-366,共2页
目的对不典型金黄色葡萄球菌的鉴定进行分析探讨。方法按照食品微生物学检验部分(GB4789.10-2010)对样品进行检测。结果检出的不典型金黄色葡萄球菌在血平板上菌落特征不明显,而在Baird-Parker平板上明显。结论血平板和Baird-Parker平... 目的对不典型金黄色葡萄球菌的鉴定进行分析探讨。方法按照食品微生物学检验部分(GB4789.10-2010)对样品进行检测。结果检出的不典型金黄色葡萄球菌在血平板上菌落特征不明显,而在Baird-Parker平板上明显。结论血平板和Baird-Parker平板在鉴定金黄色葡萄球菌中有一定的互补作用。 展开更多
关键词 金黄色葡萄球菌 溶血 血平板 Baird-Parker平板
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溶血及不溶血标本检测肝功能结果对比分析 被引量:1
3
作者 叶淦康 邹建铭 苏小华 《华夏医学》 CAS 2016年第5期51-53,共3页
目的:分析溶血对肝功能检测的影响结果。方法:选择2014年5月至2015年5月60例健康受检者作为研究对象,检测其溶血及未溶血标本肝功能各项指标,比较分析溶血及不溶血标本检测肝功能的结果。结果:未溶血标本ALP、BDLL、γ-GT水平明显高于... 目的:分析溶血对肝功能检测的影响结果。方法:选择2014年5月至2015年5月60例健康受检者作为研究对象,检测其溶血及未溶血标本肝功能各项指标,比较分析溶血及不溶血标本检测肝功能的结果。结果:未溶血标本ALP、BDLL、γ-GT水平明显高于溶血标本水平,二者差异有统计学意义(P<0.05)。未溶血标本TP、ALB、TBIL、AST、ALT检测结果显著低于溶血标本检测结果,二者差异有统计学意义(P<0.05)。结论:肝功能检测时标本溶血会影响检验结果的准确性。 展开更多
关键词 溶血 溶血 肝功能
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溶血标本对心肌酶类检验结果的准确性分析
4
作者 石俊平 《中国实用医药》 2015年第23期59-60,共2页
目的分析溶血标本对心肌酶类检验结果准确性的影响。方法 108例3~5岁儿童进行血液标本的检验。所有受试者的血液样本随机分为研究组与对照组,各54例。对照组为不溶血标本,研究组为溶血标本,分析两组标本心肌酶类的检验结果。结果研究组... 目的分析溶血标本对心肌酶类检验结果准确性的影响。方法 108例3~5岁儿童进行血液标本的检验。所有受试者的血液样本随机分为研究组与对照组,各54例。对照组为不溶血标本,研究组为溶血标本,分析两组标本心肌酶类的检验结果。结果研究组标本天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LD)、ɑ-羟丁酸脱氢酶(α-HBDH)检验结果明显高于对照组,比较差异有统计学意义(P〈0.05)。结论标本溶血对心肌酶类检验结果的准确性有较大影响,因此在标本的采集、运输过程中避免标本溶血对保证检验结果的准确性有着重要的研究价值。 展开更多
关键词 心肌酶 溶血 溶血 准确性
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12例急性自身免疫性溶血性贫血患者体外溶血试验配血与输血研究 被引量:15
5
作者 原敏 唐聪海 +5 位作者 吴阿阳 杨惠聪 甘玮玮 张添新 黄燕雪 徐卫平 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期1716-1720,共5页
本研究采用体外溶血试验配血方法,为微柱凝胶抗人球蛋白法配血困难的急性自身免疫性溶血性贫血(AIHA)患者筛查配血相容的红细胞。对照组选择26例AIHA患者,采用微柱凝胶抗人球蛋白法,确定配血结果凝集强度最弱的同型供血者红细胞输注。... 本研究采用体外溶血试验配血方法,为微柱凝胶抗人球蛋白法配血困难的急性自身免疫性溶血性贫血(AIHA)患者筛查配血相容的红细胞。对照组选择26例AIHA患者,采用微柱凝胶抗人球蛋白法,确定配血结果凝集强度最弱的同型供血者红细胞输注。实验组为12例微柱凝胶抗人球蛋白法配血困难的急性AIHA患者,采用体外溶血试验配血法,选取配血结果出现不溶血的同型供血者红细胞输注。结果表明,体外溶血试验法输血组与微柱凝胶抗人球蛋白法配血组输血效果相比较,差异有显著性意义(P<0.01)。实验组患者平均每次输注去白细胞红细胞悬液2.26单位,输血后患者血红蛋白、网织红细胞及总胆红素等指标变化与输血前相比较,差异有显著性意义(P<0.01)。结论:在微柱凝胶抗人球法配血困难时,采取体外溶血试配血可以顺利为AIHA患者筛查到相容红细胞。 展开更多
关键词 体外溶血试验配血 凝集溶血红细胞 急性自身免疫性溶血性贫血
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体外溶血试验配血有效避免再次发生急性溶血性输血反应研究 被引量:11
6
作者 唐聪海 张添新 +2 位作者 杨惠聪 张志坚 原敏 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期1194-1198,共5页
目的:为常规配血结果相容但发生急性溶血性输血反应患者,筛查合适的红细胞输注,避免出现溶血性输血反应。方法:采用体外溶血试验为患者筛选不溶血的供血者红细胞输注。结果:采用体外溶血试验配血方法从15袋血液中筛获不溶血红细胞3 U,... 目的:为常规配血结果相容但发生急性溶血性输血反应患者,筛查合适的红细胞输注,避免出现溶血性输血反应。方法:采用体外溶血试验为患者筛选不溶血的供血者红细胞输注。结果:采用体外溶血试验配血方法从15袋血液中筛获不溶血红细胞3 U,给患者输血后效果好,无再次发生溶血性输血反应。结论:当常规方法配血结果相容而输血后发生溶血性输血反应时,可用体外溶血试验配血法再次筛查不溶血红细胞供患者输注。 展开更多
关键词 体外溶血实验 伪相容 溶血性输血反应 溶血红细胞
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体外溶血试验配血救治急性溶血性贫血危象产妇的临床应用 被引量:8
7
作者 原敏 唐聪海 +7 位作者 甘玮玮 吴阿阳 杨惠聪 张添新 黄燕雪 邱陆阵 陈宏浦 林凤丽 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期1094-1098,共5页
本研究旨在建立体外溶血试验配血方法,指导急性溶血性贫血产妇输血的救治治疗。在体外将患者血浆中所有抗体全部致敏供者红细胞并加入补体,经6.5 h 38℃孵育,观察是否出现溶血现象,不溶血的供血者的血液可以安全输注给受者。结果表明:... 本研究旨在建立体外溶血试验配血方法,指导急性溶血性贫血产妇输血的救治治疗。在体外将患者血浆中所有抗体全部致敏供者红细胞并加入补体,经6.5 h 38℃孵育,观察是否出现溶血现象,不溶血的供血者的血液可以安全输注给受者。结果表明:患急性溶血病产妇配血困难时采用体外溶血试验方法筛查到相容供者,给予安全输注去白细胞的红细胞悬液6个单位,无不良反应,输血后患者血红蛋白、总胆红素、间接胆红质、网织红细胞、D-二聚体等指标迅速改善,临床输血治疗获得良好效果。结论:常规交叉配血无法准确判断配血结果是否相容时,采用体外溶血试验能筛查到凝集-不溶血红细胞,输血效果好,血红蛋白提升快,无不良反应。 展开更多
关键词 体外溶血试验配血 凝集溶血红细胞 自身免疫性溶血性贫血
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输血救治非霍奇金淋巴瘤急性溶血性贫血危象患者配血的研究 被引量:1
8
作者 唐聪海 原敏 +4 位作者 张添新 黄燕雪 林小晶 林艺璇 甘玮玮 《临床血液学杂志(输血与检验)》 CAS 2015年第5期867-870,共4页
目的:输血救治非霍奇金淋巴瘤急性溶血性贫血危象患者,卡式微柱抗人球法配血输血无效时采用体外溶血试验配血为非霍奇金淋巴瘤急性溶血性贫血危象患者筛查相容血液。方法:卡式微柱抗人球法配血困难,采用体外溶血试验配血,筛选卡式微柱... 目的:输血救治非霍奇金淋巴瘤急性溶血性贫血危象患者,卡式微柱抗人球法配血输血无效时采用体外溶血试验配血为非霍奇金淋巴瘤急性溶血性贫血危象患者筛查相容血液。方法:卡式微柱抗人球法配血困难,采用体外溶血试验配血,筛选卡式微柱抗人球配血结果凝集但补体试验不溶血红细胞11.5单位再次输注。结果:体外溶血试验配血法共筛查36袋血液,为患者筛查6袋(共11.5单位)凝集-不溶血去白细胞红细胞悬液。结论:患者输注11.5单位凝集不溶血去白细胞后临床表现输血安全、有效,无不良反应,输血后血红蛋白上升快,结果稳定。 展开更多
关键词 凝集-溶血红细胞 体外溶血试验配血 溶血性贫血危象 非霍奇金淋巴瘤
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副溶血弧菌LAMP检测方法的建立 被引量:71
9
作者 徐芊 孙晓红 +1 位作者 赵勇 潘迎捷 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第12期66-72,共7页
副溶血弧菌(Vibrioparahaemolyticus)是一种能引起食源性疾病的重要病原菌。首次将一种新颖的核酸扩增技术-环介导等温扩增技术(loop-mediatedisothermalamplification,LAMP)应用于副溶血弧菌的快速检测。针对副溶血弧菌不耐热溶血毒素... 副溶血弧菌(Vibrioparahaemolyticus)是一种能引起食源性疾病的重要病原菌。首次将一种新颖的核酸扩增技术-环介导等温扩增技术(loop-mediatedisothermalamplification,LAMP)应用于副溶血弧菌的快速检测。针对副溶血弧菌不耐热溶血毒素基因(tlh)设计4条特异性引物(两条内引物和两条外引物)进行LAMP扩增,对扩增反应进行优化,最佳反应时间为60min,反应温度为60℃。对12种细菌共28株菌进行LAMP扩增,仅14株副溶血弧菌得到阳性扩增结果,证明引物具有很高的特异性。副溶血弧菌基因组DNA和纯培养物的检测灵敏度分别约为90fg和24cfu/ml。对模拟食品样品进行直接检测,检测限为89cfu/g。结果表明,该方法检测副溶血弧菌特异性强、灵敏度高,并且操作简便、检测成本低,1小时即可完成,有望发展成为快速检测副溶血弧菌的有效手段。 展开更多
关键词 溶血弧菌 环介导等温扩增技术(LAMP) 耐热溶血毒素基因(tlh) 检测
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副溶血弧菌的溶血毒素研究现况 被引量:20
10
作者 李志峰 戴迎春 《解放军预防医学杂志》 CAS 北大核心 2003年第1期73-75,共3页
副溶血弧菌可引起食物中毒、反应性关节炎和心脏疾病 ,其致病因子是该菌产生的多种溶血毒素 ,主要有不耐热溶血毒素、耐热直接溶血毒素、相对耐热直接溶血毒素。
关键词 溶血弧菌 耐热溶血毒素 耐热直接溶血毒素 相对耐热直接熔血毒素
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副溶血性弧菌所致食物中毒的研究进展 被引量:17
11
作者 李庆山 《中国卫生检验杂志》 CAS 2009年第2期461-463,共3页
关键词 溶血性弧菌 食物中毒 耐热溶血素(TLH) 耐热直接溶血素(TDH) 耐热直接相关溶血素(TRH)
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双重PCR检测携带有tl和tdh基因的副溶血弧菌毒力菌株 被引量:14
12
作者 吴彩云 蔡俊鹏 +4 位作者 杨汝德 陈清 罗立新 吴后波 俞守义 《水产科学》 CAS 北大核心 2004年第5期5-9,共5页
在常规PCR技术的基础上优化条件 ,建立并完善双重PCR技术 ,并通过检测阳性对照和待检样品 ,进一步确定其检测的可行性。结果表明在常规PCR方法中为阳性的样品 ,包括阳性对照以及待检样品 ,在双重PCR方法中也呈现阳性 ,为阴性的样品在本... 在常规PCR技术的基础上优化条件 ,建立并完善双重PCR技术 ,并通过检测阳性对照和待检样品 ,进一步确定其检测的可行性。结果表明在常规PCR方法中为阳性的样品 ,包括阳性对照以及待检样品 ,在双重PCR方法中也呈现阳性 ,为阴性的样品在本方法中则也呈现阴性 ;能在血平板中出现溶血圈的在本法中也被印证含有tdh基因。由此证实本方法确实能对tl和tdh两种基因同时进行检测 ,成功地证明了同时检测tl和tdh两种基因的双重PCR方法的可行性。该法不但具有常规PCR的优点 ,而且还能节省耗材和时间 。 展开更多
关键词 双重PCR 溶血弧菌 耐热溶血 水产食品 毒力 菌株
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抗副溶血弧菌TLH蛋白多克隆抗体的制备及其ELISA双抗体夹心检测法的研究 被引量:11
13
作者 杜玉萍 陈清 +1 位作者 柯雪梅 俞守义 《华南预防医学》 2007年第1期19-21,26,共4页
目的分别制备抗副溶血弧菌及其不耐热溶血毒素(thermolabile hemolysin,TLH)的多克隆抗体,建立检测副溶血弧菌TLH的酶联免疫吸附试验(ELISA)双抗体夹心法。方法以副溶血弧菌及其TLH分别免疫健康雄性新西兰大白兔和雌性BALB/C小鼠,制备... 目的分别制备抗副溶血弧菌及其不耐热溶血毒素(thermolabile hemolysin,TLH)的多克隆抗体,建立检测副溶血弧菌TLH的酶联免疫吸附试验(ELISA)双抗体夹心法。方法以副溶血弧菌及其TLH分别免疫健康雄性新西兰大白兔和雌性BALB/C小鼠,制备兔抗副溶血弧菌多克隆抗体及小鼠抗TLH多克隆抗体,以间接ELISA法检测两种抗体效价,并以棋盘法筛选两种多克隆抗体用于夹心检测TLH的效价。结果兔抗副溶血弧菌多克隆抗体效价达1∶6400,鼠抗TLH多克隆抗体效价为1∶102 400,经筛选确定以1∶800稀释的兔抗副溶血弧菌多克隆抗体包被酶标板,与1∶1600稀释的鼠抗TLH抗体建立了ELISA双抗体夹心法。结论兔抗副溶血弧菌多克隆抗体可与TLH呈特异性反应,以此建立的双抗体夹心法检测副溶血弧菌TLH可获较满意结果,此实验可为进一步建立简便、快速的副溶血弧菌检测方法奠定基础。 展开更多
关键词 溶血弧菌 耐热溶血毒素 多克隆抗体 酶联免疫吸附测定
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荧光聚合酶链反应检测副溶血弧菌TLH与TDH 被引量:9
14
作者 陈丽 张红河 曹海芬 《检验医学》 CAS 北大核心 2007年第4期450-450,454,共2页
关键词 聚合酶链反应 溶血弧菌 耐热溶血毒素 耐热溶血毒素
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应用多重实时荧光PCR方法检测副溶血性弧菌及其毒力基因 被引量:7
15
作者 林雪 陈泽辉 +1 位作者 翁琴云 张建梅 《中国卫生检验杂志》 CAS 2015年第6期870-872,共3页
目的应用多重实时荧光PCR方法检测113株食物中毒副溶血性弧菌分离株多种毒力基因携带情况。方法用水煮法提取菌株DNA后,利用四重实时荧光PCR方法对DNA同时进行4种基因的检测。结果所有的菌株均携带tlh基因,96株菌株(84.96%)携带tdh基... 目的应用多重实时荧光PCR方法检测113株食物中毒副溶血性弧菌分离株多种毒力基因携带情况。方法用水煮法提取菌株DNA后,利用四重实时荧光PCR方法对DNA同时进行4种基因的检测。结果所有的菌株均携带tlh基因,96株菌株(84.96%)携带tdh基因,9株菌株(7.96%)携带trh基因及62株菌株(54.87%)携带orf8基因的菌株同时tdh基因检测为阳性,无同时携带trh基因和orf8基因的菌株。trh、tdh基因和orf8基因阳性的菌株分布在O1-O4血清群。结论本市大部分食物中毒菌株携带除tlh基因外的1种或1种以上的毒力基因,一半以上的菌株为大流行株;四重实时荧光PCR方法可以同时鉴定和检测副溶血性弧菌及毒力基因,建议作为食源性暴发事件的常规检测方法,获得更快速、准确、完整的结果。 展开更多
关键词 荧光定量聚合酶链反应 溶血性弧菌 食物中毒 耐热直接溶血毒素基因 耐热直接溶血毒素基因 耐热直接溶血相关毒素基因 开放性读码框8
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副溶血性弧菌不耐热溶血素的生物信息学分析与分子动力学模拟
16
作者 张德福 于振兴 +4 位作者 张明 吕欣然 张永勤 张国清 励建荣 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2024年第12期251-257,I0009-I0012,共11页
副溶血性弧菌是一种革兰氏阴性人畜共患致病菌,可引发人类胃肠炎等食源性疾病。副溶血性弧菌具有多种毒力因子,热不稳定溶血素(thermolabile hemolysin,TLH)即是其中之一。该研究对副溶血性弧菌的tlh基因进行了克隆及测序,对tlh基因编码... 副溶血性弧菌是一种革兰氏阴性人畜共患致病菌,可引发人类胃肠炎等食源性疾病。副溶血性弧菌具有多种毒力因子,热不稳定溶血素(thermolabile hemolysin,TLH)即是其中之一。该研究对副溶血性弧菌的tlh基因进行了克隆及测序,对tlh基因编码的TLH蛋白进行了生物信息学分析及结构和功能预测。结果表明,TLH蛋白由418个氨基酸组成,预测分子质量为47.36 kDa。在TLH蛋白中确定了几个保守的结构域和基序,包括SGNH水解酶结构域和GDSL基序;对TLH蛋白的三维结构进行了同源建模及验证,在此基础上通过分子动力学模拟分析其稳定性、与4-硝基苯基月桂酸酯(p-nitrophenylaurate,PNPL)的相互作用能力及结合底物对结构紧密度和残基灵活性的影响,揭示了催化三联体Ser153-His390-Asp393周边是一个重要的药物靶点活性口袋,具有高度保守的残基序列,并在底物结合后表现出残基灵活性差异。该研究分析了副溶血性弧菌TLH蛋白的性质和结构,可以为保障水产品的安全性、提高水产品原料安全评价水平提供理论支持。 展开更多
关键词 基因克隆 溶血性弧菌 耐热溶血素(tlh) 生物信息学分析 分子动力学模拟
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双重PCR检测副溶血性弧菌的tlh和tdh基因方法建立与初步应用 被引量:5
17
作者 岳友宏 苏良 《实用预防医学》 CAS 2012年第9期1413-1415,共3页
目的建立同时检测副溶血性弧菌的tlh和tdh基因的双重聚合酶链式反应(PCR)法。方法根据副溶血性弧菌的tlh、tdh基因序列设计引物,进行PCR扩增及电泳检测。同时优化反应体系,测定稳定性、重复性、特异性及灵敏度。结果本实验设计的引物能... 目的建立同时检测副溶血性弧菌的tlh和tdh基因的双重聚合酶链式反应(PCR)法。方法根据副溶血性弧菌的tlh、tdh基因序列设计引物,进行PCR扩增及电泳检测。同时优化反应体系,测定稳定性、重复性、特异性及灵敏度。结果本实验设计的引物能特异性地扩增副溶血性弧菌的450、269 bp的片段,而对其它种类的菌物无特异性扩增,结果表明该方法特异性好,双重PCR检测灵敏度为100 cfu/ml。并进行了肛门拭子样品的检测。结论初步建立能在8 h内快速、灵敏、特异地检出副溶血性弧菌毒力菌株的双重PCR技术。 展开更多
关键词 双重PCR 溶血性弧菌 耐热溶血毒素基因 耐热直接血毒素基因
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海盐县副溶血性弧菌血清分型和毒力基因携带状况分析 被引量:3
18
作者 孙明华 周晓红 +2 位作者 徐佩华 张孝艳 徐静妤 《预防医学》 2017年第10期1030-1032,共3页
目的了解海盐县副溶血性弧菌的优势血清型及毒力基因携带状况。方法收集2015—2016年海盐县腹泻和食物中毒患者(人源株)、食物中毒调查样品(食源株)和海产品(海产株)中分离的96株副溶血性弧菌株,根据GB/T 4789.7—2013《食品微生物检验... 目的了解海盐县副溶血性弧菌的优势血清型及毒力基因携带状况。方法收集2015—2016年海盐县腹泻和食物中毒患者(人源株)、食物中毒调查样品(食源株)和海产品(海产株)中分离的96株副溶血性弧菌株,根据GB/T 4789.7—2013《食品微生物检验副溶血性弧菌检验》进行血清分型试验,并采用荧光定量PCR检测耐热直接溶血素基因(tdh)、耐热直接溶血素相关基因(trh)和不耐热直接溶血素基因(tlh)。结果 96株菌株的血清型以O3∶K6和O4∶K8为主,分别占35.42%(34株)和33.33%(32株)。人源株中检出的O3∶K6和O4∶K8型合计占人源株菌株数的87.76%,食源株中检出的占76.67%;海产株中未检出O3∶K6和O4∶K8型。96株菌株tlh基因均阳性,阳性率为100.00%;58株tdh基因阳性,阳性率为60.42%;1株trh基因阳性,阳性率为1.04%。人源株的毒力基因携带率为93.88%,高于食源株的43.33%(P<0.05);海产株中均未检出tdh和trh基因。O4∶K8型菌株毒力基因携带率为87.50%,O3∶K6型菌株毒力基因携带率为76.47%;O3∶K6和O4∶K8型菌株的毒力基因携带率合计为81.82%,高于其他血清型菌株的16.67%(P<0.05)。结论海盐县2015—2016年副溶血性弧菌的优势血清型是O3∶K6和O4∶K8,血清型与毒力基因携带有一定程度关联,O4∶K8血清型毒力基因携带率最高,其次为O3∶K6血清型。 展开更多
关键词 溶血性弧菌 耐热直接溶血素基因 耐热直接溶血素基因 耐热直接溶血素相关基因
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不完全溶血表型金黄色葡萄球菌溶血素及毒力等相关基因的研究 被引量:2
19
作者 郑毅 谢小芳 +7 位作者 杜鸿 张海方 朱雪明 王敏 杨欢 李爱青 姜晔 周惠琴 《中华临床感染病杂志》 2016年第3期236-242,共7页
目的:对不完全溶血表型的金黄色葡萄球菌(金葡菌)的溶血素及毒力基因进行分析,研究该类金葡菌的生物学特点。方法连续收集2013年至2014年苏州大学附属第二医院住院患者各类样本分离的不完全溶血表型金葡菌50株,选取同期住院患者样... 目的:对不完全溶血表型的金黄色葡萄球菌(金葡菌)的溶血素及毒力基因进行分析,研究该类金葡菌的生物学特点。方法连续收集2013年至2014年苏州大学附属第二医院住院患者各类样本分离的不完全溶血表型金葡菌50株,选取同期住院患者样本分离得到的完全溶血表型金葡菌作为对照,接种于四种不同商品化绵羊血琼脂平板培养,比较溶血表型。采用实时荧光定量PCR 技术分析标准菌株、完全和不完全溶血金葡菌四种溶血素基因(hla、hlb、hlc 和 hld)mRNA 的表达,采用2-ΔΔCt法计算其相对表达量,使用 t 检验比较各菌株溶血素基因 mRNA 相对表达量的差异。采用免疫印迹技术分析α溶血素的表达。应用微量肉汤稀释法检测不完全溶血表型金葡菌的耐药特性;运用 PCR 技术检测 mecA、pvl 和 tst 基因的携带情况。结果50株不完全溶血金葡菌在不同商品化血琼脂平板上均出现可稳定遗传的不完全溶血现象。以标准菌株四种溶血素 mRNA 表达量为1,不完全溶血表型菌株α、β、γ、δ溶血素 hla、hlb、hlc 和 hld mRNA 的相对表达量分别为0.02、7.51、0.06和0.12,二者相比差异具有统计学意义(t =8.46,-56.40,8.12和7.61,P 值均<0.05),且α溶血素的表达量降低。药敏结果显示,50株不完全溶血表型菌株均为耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA),仅3株传代后使替考拉宁和利奈唑胺的最低抑菌浓度发生改变,但均未影响药敏结果的判断。 mecA、pvl 和 tst 基因在不完全溶血表型金葡菌中均呈阳性。结论不完全溶血表型金葡菌是一类β溶血素高表达而α、γ、δ溶血素表达量下降的 MRSA,该类金葡菌携带毒力基因 pvl 和 tst,提示其潜在的毒力较强,应引起临床重视。 展开更多
关键词 金黄色葡萄球菌 完全溶血 溶血 耐药 毒力
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融合表达的副溶血弧菌不耐热性溶血毒素包涵体复性的研究 被引量:1
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作者 李志峰 聂军 +2 位作者 戴迎春 陈清 俞守义 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2004年第9期995-997,共3页
目的构建融合表达载体,获得具有生物活性的副溶血弧菌不耐热性溶血毒素。方法克隆tlh基因,构建表达载体pET32a+/tlh,融合表达副溶血弧菌不耐热性溶血毒素,用8 mol/L的尿素溶解包涵体,亲和层析纯化目的蛋白,采取逐步透析、降低蛋白浓度... 目的构建融合表达载体,获得具有生物活性的副溶血弧菌不耐热性溶血毒素。方法克隆tlh基因,构建表达载体pET32a+/tlh,融合表达副溶血弧菌不耐热性溶血毒素,用8 mol/L的尿素溶解包涵体,亲和层析纯化目的蛋白,采取逐步透析、降低蛋白浓度、加入氧化还原剂等复性方法。结果复性蛋白具有溶血活性及免疫原性。结论通过克隆tlh基因,构建融合表达载体pET32a+-tlh,采取纯化、复性方法,获得具有融血活性及免疫原性的副溶血弧菌不耐热性溶血毒素。 展开更多
关键词 溶血弧菌 耐热性溶血毒素 包涵体 复性 溶血活性
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