猪繁殖-呼吸综合征病毒上海株的分离鉴定 被引量：10

1

作者 严亚贤 孙建和 +2 位作者 王恒安 陆雅君 刘永德 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 2000年第3期161-163,共3页

从上海地区 5个发病猪场的病料中 ,分离到 3株致Marc_145细胞病变的病毒 :SH1、SH2 和SH3,理化特性研究表明 ,3株分离毒均对氯仿、乙醚、甲醛、热 (5 6℃ )、酸 (pH6以下 )、碱 (pH8以上 )敏感。负染可见病毒以大小不等的具囊膜的球形... 从上海地区 5个发病猪场的病料中 ,分离到 3株致Marc_145细胞病变的病毒 :SH1、SH2 和SH3,理化特性研究表明 ,3株分离毒均对氯仿、乙醚、甲醛、热 (5 6℃ )、酸 (pH6以下 )、碱 (pH8以上 )敏感。负染可见病毒以大小不等的具囊膜的球形粒子为主 ,囊膜上有纤突 ,直径为 6 0～ 10 0nm ;超薄切片可见病毒粒子分散在细胞浆内 ,直径为 45～ 80nm。间接免疫荧光试验表明 ,3株分离毒均与PRRSV高免血清呈强阳性反应 ,而与HCV、PPV、PRV、TGEV高免血清的反应均呈阴性。综上可见 。 展开更多

关键词 猪繁殖-呼吸综合征病毒 分离 鉴定 上海株

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巨型艾美耳球虫(Eimeria maxima)地理株研究 Ⅱ.11株巨型艾美耳球虫的致病性分析 被引量：8

2

作者 陶建平 李文超 +2 位作者 辛玲 戴亚斌 沈永林 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期19-21,共3页

分别用 0 .1× 10 4、1× 10 4、10× 10 4个 /只孢子化卵囊的剂量感染黄羽肉公雏 ,以临床症状、肉眼病变、平均增重、病变记分和死亡率为判定指标 ,对 11株 E.maxima的致病性进行了分析。结果表明 :各虫株引起的临床症状... 分别用 0 .1× 10 4、1× 10 4、10× 10 4个 /只孢子化卵囊的剂量感染黄羽肉公雏 ,以临床症状、肉眼病变、平均增重、病变记分和死亡率为判定指标 ,对 11株 E.maxima的致病性进行了分析。结果表明 :各虫株引起的临床症状和各病死鸡的肉眼病变基本相似。各感染组的增重 (0 .1× 10 4组例外 )与对照组相比均有显著差异 (P<0 .0 5 )。在感染 10× 10 4个 /只的剂量时 ,上海株增重最少 ,苏州株和龙岩株增重最多 ;扬州株的病变记分最大 ,苏州株和龙岩株的最小 ,相比有显著差异 (P<0 .0 5 ) ;扬州株、连云港株、福州株、广州株和美国株引起鸡死亡 ,死亡率分别为 2 0 %、10 %、10 %、10 %和10 %。结论 :11个虫株均有致病性 ,扬州株和上海株的致病力较强 。 展开更多

关键词 增重 巨型艾美耳球虫 上海株 致病性 致病力 地理株 肉眼 感染 眼病变 死亡率

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鹅副粘病毒上海株的分子鉴定 被引量：9

3

作者 单松华 邹键 +3 位作者 姚龙涛 胡永强 何水林 龚祖埙 《上海农业学报》 CSCD 2002年第4期70-73,共4页

对新近分离的鹅副粘病毒SF0 2株采用RT PCR方法 ,扩增部分F基因进行测序 ,其裂解位点的序列为112 R R Q K R F117,与新城疫病毒强毒株的特征相符。通过对其F基因与我国大陆新城疫强毒F4 8E9株、疫苗毒Lasota株比较 ,发现该毒株的F基因... 对新近分离的鹅副粘病毒SF0 2株采用RT PCR方法 ,扩增部分F基因进行测序 ,其裂解位点的序列为112 R R Q K R F117,与新城疫病毒强毒株的特征相符。通过对其F基因与我国大陆新城疫强毒F4 8E9株、疫苗毒Lasota株比较 ,发现该毒株的F基因已发生了较大的变异 ,而与1999年在我国台湾省流行的新城疫病毒基因Ⅶ型有很高的同源性。 展开更多

关键词 上海株 分子鉴定 鹅副粘病毒 新城疫病毒 F基因 序列分析 RT-PCR

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伪狂犬病毒上海株糖蛋白G (gG)基因的克隆及序列分析 被引量：7

4

作者 黄伟坚 姜焱 +3 位作者 陈德胜 芦银华 张雪莲 陈溥言 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期107-110,共4页

应用PCR方法从PRVSH (上海株 )病毒培养物扩增了gG基因 ,克隆入 pcDNA3质粒 ,并进行了序列测定。结果表明 ,扩增的 gG基因片段长 1719bp ,包含一个 14 91bp的开放阅读框 (ORF) ,在起始密码子上游有TATAAAA盒 ,在终止密码子下游有AATAAA... 应用PCR方法从PRVSH (上海株 )病毒培养物扩增了gG基因 ,克隆入 pcDNA3质粒 ,并进行了序列测定。结果表明 ,扩增的 gG基因片段长 1719bp ,包含一个 14 91bp的开放阅读框 (ORF) ,在起始密码子上游有TATAAAA盒 ,在终止密码子下游有AATAAA的 poly (A)尾 ,编码由 4 96个氨基酸组成的蛋白质。与Rice株相应的gG片段相比 ,核苷酸序列同源性达 97 1%。但推导的氨基酸序列同源性仅有 87 6 % ,主要是在编码区内插入和缺失核苷酸 ,出现了突变和移码 ,导致氨基酸序列同源性降低。gG具有膜蛋白的结构特点。 展开更多

关键词 伪狂犬病毒 上海株 糖蛋白G 序列分析 gG基因 PCR扩增 核苷酸序列 氨基酸序列 基因克隆

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含GFP-Lac Z基因的伪狂犬病病毒上海株缺失株的构建 被引量：3

5

作者 姜焱 张常印 +1 位作者 黄伟坚 陈溥言 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期120-122,共3页

在伪狂犬病病毒 (PRV)上海株gI和gE基因克隆鉴定的基础上 ,用BamHⅠ +BstpⅠ去掉gE基因的 5′端 36 3bp ,在缺失位置插入绿色荧光蛋白 (GFP)和LacZ基因 ,构建含双报告基因的PRV SH转移载体pgEI GFPZ。将pgEI GFPZ转染PRV SH的BHK 2 1细... 在伪狂犬病病毒 (PRV)上海株gI和gE基因克隆鉴定的基础上 ,用BamHⅠ +BstpⅠ去掉gE基因的 5′端 36 3bp ,在缺失位置插入绿色荧光蛋白 (GFP)和LacZ基因 ,构建含双报告基因的PRV SH转移载体pgEI GFPZ。将pgEI GFPZ转染PRV SH的BHK 2 1细胞 ,待出现 80 %病变后收获病毒 。 展开更多

关键词 伪狂犬病病毒 上海株 GFP-Lac Z基因缺失株 蚀斑法 绿色荧光蛋白 基因表达盒 疫苗

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鳖嗜水气单胞菌甘肃株和上海株的生物学特性比较 被引量：2

6

作者 金岭梅 郭树林 +3 位作者 周杰 顾惠明 王爱华 曹郁生 《甘肃农业大学学报》 CAS CSCD 1998年第4期362-365,共4页

通过对甘肃灵台县和上海市奉贤县水产养殖场患病鳖病原菌的分离、培养、鉴定，两地菌株均为嗜水气单胞菌。经过对该菌形态学、革兰氏染色、21项生理生化特性比较，以及两菌株毒力比较和动物感染试验，表明甘肃菌株（G－97－7）和上海菌... 通过对甘肃灵台县和上海市奉贤县水产养殖场患病鳖病原菌的分离、培养、鉴定，两地菌株均为嗜水气单胞菌。经过对该菌形态学、革兰氏染色、21项生理生化特性比较，以及两菌株毒力比较和动物感染试验，表明甘肃菌株（G－97－7）和上海菌株（S－96－10）是引起鳖白点病（疖疮）、穿孔病（鳖甲溃烂）和出血等细菌性疾病的原发性致病菌。该病菌广泛地存在于自然界水体中。 展开更多

关键词 嗜水气单胞菌 甘肃株 上海株 生物学特性 鳖

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伪狂犬病病毒上海株的gI基因的克隆和序列分析 被引量：1

7

作者 姜焱 侯玉峰 +3 位作者 陈德胜 黄伟坚 范伟兴 陈溥言 《动物医学进展》 CSCD 2002年第2期63-65,共3页

参考 Genebank发表的伪狂犬病病毒( Pseudorabies Virus,PRV)的 g I糖蛋白基因序列 ,自行设计合成一对引物 ,对 PRV上海株( PRV-SH)进行 PCR扩增 ,产物经琼脂糖电泳分析 ,呈现一条约 960 bp的条带 ,将其克隆入p GEM-T-easy载体中 ,并进... 参考 Genebank发表的伪狂犬病病毒( Pseudorabies Virus,PRV)的 g I糖蛋白基因序列 ,自行设计合成一对引物 ,对 PRV上海株( PRV-SH)进行 PCR扩增 ,产物经琼脂糖电泳分析 ,呈现一条约 960 bp的条带 ,将其克隆入p GEM-T-easy载体中 ,并进行序列测定 ,与PRV Rice株 g I基因比较发现 ,核苷酸的同源性为 94.7% ,氨基酸的同源性为 91 .3 % ,证实为g 展开更多

关键词 伪狂犬病病毒 GI基因 序列分析 上海株 基因克隆

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鳖致病性嗜水气单胞菌甘肃株和上海株对抗菌药物的敏感性比较 被引量：1

8

作者 王爱华 顾惠明 +2 位作者 周杰 金岭梅 郭树林 《甘肃农业大学学报》 CAS CSCD 1999年第1期53-57,共5页

要通过痢特灵等１８种药物纸片对嗜水气单胞菌甘肃株和上海株的测试，以及两菌株对氧哌嗪青霉素、新霉素等７种药物敏感性和两菌株间差异显著性测定，得出１８种抗菌药物对两菌株敏感性的不同反应，对甘肃和上海菌株均呈高度敏感（＋＋... 要通过痢特灵等１８种药物纸片对嗜水气单胞菌甘肃株和上海株的测试，以及两菌株对氧哌嗪青霉素、新霉素等７种药物敏感性和两菌株间差异显著性测定，得出１８种抗菌药物对两菌株敏感性的不同反应，对甘肃和上海菌株均呈高度敏感（＋＋＋）的药物有氧哌嗪青霉素、新霉素、庆大霉素（此３种为首选抑菌药物）、妥布霉素、卡那霉素和链霉素等６种；均不敏感（－）的有氨苄青霉素、磺胺和青霉素３种；对两菌株表现不同敏感性的有痢特灵、丁胺卡那等９种。 展开更多

关键词 嗜水气单胞菌 甘肃株 上海株 抗菌药物 鳖

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肝癌高发区广西隆安县乙型肝炎病毒株全基因序列分析 被引量：1

9

作者 葛宪民 方钟燎 +1 位作者 李丹亚 赵连三 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期272-276,共5页

目的　探讨肝癌高发区广西隆安县乙型肝炎病毒 (HBV)株的全基因序列是否存在地域特殊性。方法　用套式PCR(nPCR)扩增该县HBV无症状携带者血清HBV全基因 ,用克隆测序法测序并做同源性对比。结果　本病毒株共 32 15个碱基 ,基因型为C ,血... 目的　探讨肝癌高发区广西隆安县乙型肝炎病毒 (HBV)株的全基因序列是否存在地域特殊性。方法　用套式PCR(nPCR)扩增该县HBV无症状携带者血清HBV全基因 ,用克隆测序法测序并做同源性对比。结果　本病毒株共 32 15个碱基 ,基因型为C ,血清型为adw。其P基因区有 4 0处发生碱基点突变 ,导致 11个氨基酸改变 ;S基因区的前S1、前S2和S基因分别有 11、2和 3个碱基点突变 ,分别导致 3、1、1氨基酸改变 ,未发现“a”区突变 ;X基因区共有 6个碱基点突变 ,导致 4个氨基酸改变 ,其中出现能影响e抗原表达的双突变 (nt 176 2A→T、176 4G→A) ;未发现前C区基因突变 ,C基因有 13个碱基发生突变 ,导致 2个氨基酸改变。本病毒株与越南北部病毒株高于同为C基因型的上海株、北京株、西藏株。结论　未发现肝癌高发区的本例HBV基因C型的隆安株 ,基因虽有肝癌高发性 ,但无地域特殊性。 展开更多

关键词 肝癌 高发区 改变 乙型肝炎病毒 点突变 HBV C基因 病毒株 氨基酸 上海株

原文传递

伪狂犬病病毒上海株EP0基因的序列分析及其表达载体的构建

10

作者 姜焱 张常印 《畜牧与兽医》 北大核心 2003年第8期8-10,共3页

以伪狂犬病病毒上海株 (PRV SH)细胞感染物为模板 ,PCR扩增出 1 2 3kb的EP0基因完整编码区片段 ,将该基因片段克隆到pGEM T easy中 ,经过双脱氧末端终止法序列测定 ,并同国内的PRV Ea株进行同源比较 ,发现PRV SH株EP0基因存在多处突变... 以伪狂犬病病毒上海株 (PRV SH)细胞感染物为模板 ,PCR扩增出 1 2 3kb的EP0基因完整编码区片段 ,将该基因片段克隆到pGEM T easy中 ,经过双脱氧末端终止法序列测定 ,并同国内的PRV Ea株进行同源比较 ,发现PRV SH株EP0基因存在多处突变和一处插入。进一步将该片段插入到原核表达载体 pET32a (+)的His Tag下游 ,构建了的原核表达质粒 pETEP0 ,为今后深入研究该基因的表达及其功能奠定了基础。 展开更多

关键词 伪狂犬病病毒 上海株 EP0基因 序列分析 原核表达 表达载体

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伪狂犬病病毒上海株gE和gI基因的克隆及缺失转移载体的构建

11

作者 姜焱 侯玉峰 +1 位作者 陈德胜 陈溥言 《中国病毒学》 CSCD 2002年第2期149-152,共4页

根据已发表的伪狂犬病病毒 (PseudorabiesVirus,PRV)的 gI和 gE 基因序列 ,设计两对引物用PCR方法扩增出PRV SH gI和 gE 基因 ,将其克隆入 pUC18载体中 ,获得了缺失部分gI基因的转移载体质粒 ,命名为 pgEI。

关键词 GE基因 基因克隆 动物病毒 伪狂犬病病毒 上海株 GI基因 缺失转移载体 构建

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我国生产用卡介菌的传代稳定性 被引量：6

12

作者 赵爱华 乔来艳 +2 位作者 贾淑珍 寇丽杰 王国治 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2009年第11期1102-1104,1112,共4页

目的研究我国生产用卡介菌上海株在传代过程中分子遗传学特性的稳定性。方法应用多重PCR法,对我国生产用卡介菌上海株工作种子批及其不同代次菌的各缺失区、插入序列IS6110及基因座SenX3-RenX3串联重复序列拷贝数进行检测。结果我国生... 目的研究我国生产用卡介菌上海株在传代过程中分子遗传学特性的稳定性。方法应用多重PCR法,对我国生产用卡介菌上海株工作种子批及其不同代次菌的各缺失区、插入序列IS6110及基因座SenX3-RenX3串联重复序列拷贝数进行检测。结果我国生产用卡介菌上海株的工作种子批及其第6、9、12代菌均缺失RD1、RD2,未缺失RD8、RD14、RD16、nRD18及RDDenmark/Glaxo;含有1个IS6110插入序列和3个SenX3-RenX3基因座串联重复序列。结论我国生产用卡介菌上海株在传12代以内,其分子遗传学特性是稳定的。 展开更多

关键词 卡介菌上海株 遗传学特性 传代 稳定性

原文传递

伪狂犬病病毒上海株(PRV-SH)gE^-/gI^-/GFP^+缺失株的构建 被引量：2

13

作者 姜焱 侯玉峰 陈溥言 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期15-20,共6页

在构建了含伪狂犬病病毒 (PseudorabiesVirus,PRV)上海株gI基因和gE基因克隆鉴定的基础上 ,采用酶切的方法构建了载体pgEI。然后用限制性内切酶BamHI和BstpI缺失掉gE基因 5’端 363bp,同时把绿色荧光蛋白 (GFP)基因表达盒插入到缺失部... 在构建了含伪狂犬病病毒 (PseudorabiesVirus,PRV)上海株gI基因和gE基因克隆鉴定的基础上 ,采用酶切的方法构建了载体pgEI。然后用限制性内切酶BamHI和BstpI缺失掉gE基因 5’端 363bp,同时把绿色荧光蛋白 (GFP)基因表达盒插入到缺失部分 ,并在下游引入一个多克隆位点 ,构建了缺失转移载体pgEI GFP。用DOTAP转染试剂盒将pgEI GFP转染了感染PRV SH的BHK 2 1细胞 ,待出现 80 %病变后收获病毒 ,并以蚀斑法得到纯化的缺失了gE gI重组病毒株。小鼠试验证实了缺失株的毒力有所下降。 展开更多

关键词 伪狂犬病病毒上海株 PRV-SH gE^-/gI^-/GFP^+缺失株 构建 转移载体质粒 绿色荧光蛋白(GFP)表达盒

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一步法扩增IBDV上海株全长基因组cDNA 被引量：2

14

作者 孙建和 陆苹 +1 位作者 赵渝 李晖 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期194-197,共4页

为了研究鸡传染性法氏囊病病毒 (IBDV)上海株的全部核苷酸序列 ,应用蛋白酶K消化、割胶纯化获得了高纯度的dsRNA ,应用随机引物合成了cDNA的第一链。参照基因库中相关IBDV毒株的基因序列 ,设计合成了两对引物 ,一步扩增出IBDV上海株全... 为了研究鸡传染性法氏囊病病毒 (IBDV)上海株的全部核苷酸序列 ,应用蛋白酶K消化、割胶纯化获得了高纯度的dsRNA ,应用随机引物合成了cDNA的第一链。参照基因库中相关IBDV毒株的基因序列 ,设计合成了两对引物 ,一步扩增出IBDV上海株全长基因组cDNA的A片段和B片段。为了验证获得的A片段和B片段的正确性 ,以扩增出的A片段为模板 ,成功扩增出IBDV的VP2 基因 ,并应用T载体进行了克隆和测序 ,测序结果显示 ,其与国内外数株IBDV毒株的同源性很高 ,表明本文建立的扩增IBDV全长基因组cDNA的一步法正确。 展开更多

关键词 鸡 传染性法氏囊病病毒 全长基因组 CDNA VP2基因 基因克隆 一步法扩增 IBDVD上海株

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我国破解H7N9病毒感染人奥秘

15

《生物学教学》 2014年第3期79-79,共1页

据光明网2013年9月7日消息，中科院高福课题组在美国《科学》杂志在线发表论文，阐述了在H7N9禽流感病毒感染人的跨宿主传播机制研究上取得的新突破。课题组研究了最早报道的两个毒株，“安徽株”和“上海株”，发现“安徽株”既能结合... 据光明网2013年9月7日消息，中科院高福课题组在美国《科学》杂志在线发表论文，阐述了在H7N9禽流感病毒感染人的跨宿主传播机制研究上取得的新突破。课题组研究了最早报道的两个毒株，“安徽株”和“上海株”，发现“安徽株”既能结合禽源受体，又能结合人源受体，而“上海株”却偏好性地结合禽源受体。这充分解释了“安徽株”由于获得人源受体的结合能力，使其具备了在人群中普遍流行的可能性。 展开更多

关键词 病毒感染 破解 《科学》杂志 传播机制 结合能力 课题组 上海株 受体

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猪繁殖-呼吸综合征病毒上海分离株的病毒特性研究 被引量：3

16

作者 严亚贤 孙建和 +2 位作者 王恒安 刘永德 华修国 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期90-93,共4页

对猪繁殖 呼吸综合征病毒 (PRRSV)上海分离株 (SH1)的理化特性和结构蛋白进行研究。结果表明 ,SH1分离株能致Marc 145细胞典型病变 ,TCID50 为 10 5 9mL-1,对氯仿和乙醚、酸 (pH5 5以下 )、碱 (pH8以上 )、热 (水浴 5 6℃ 10min以上、... 对猪繁殖 呼吸综合征病毒 (PRRSV)上海分离株 (SH1)的理化特性和结构蛋白进行研究。结果表明 ,SH1分离株能致Marc 145细胞典型病变 ,TCID50 为 10 5 9mL-1,对氯仿和乙醚、酸 (pH5 5以下 )、碱 (pH8以上 )、热 (水浴 5 6℃ 10min以上、 37℃ 2 4h以上、 2 8℃ 48h以上 )均敏感。病毒负染可见以具囊膜的球形为主 ,囊膜上有纤突 ,大小为 60～85nm。超薄切片可见病毒存在于细胞浆中。SH1分离株的病毒培养液经差速离心和非线性蔗糖密度梯度纯化 ,SDS PAGE显示病毒结构蛋白的相对分子质量为 2 40 0 0 ,195 0 0 ,16 0 0 0。免疫转印可见 展开更多

关键词 猪繁殖-呼吸综合征病毒 理化特性 纯化 SDS-PAGE 免疫转印 上海分离株

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上海D2株卡介苗的动物皮肤反应试验

17

作者 马明清 江涛 《生物制品资料选编》 1994年第17期10-12,共3页

关键词 上海D2株 免疫性 结核菌苗 接种 鉴定 结核病

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上海D2株冻干皮内注射卡介苗试制

18

作者 马明清 江涛 《生物制品资料选编》 1992年第16期19-22,共4页

关键词 上海D2株 质量控制 结核菌苗 制备

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