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题名抗A型肉毒毒素人源三结构域抗体的重组设计与表达
被引量：1
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作者
王慧
荫俊
史晶
孟露露
李佩真
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机构
军事医学科学院微生物流行病研究所
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出处
《微生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第2期223-225,共3页
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基金
国家"973项目"(2 0 0 2CB5 13 2 0 5 )~~
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文摘
以获得的抗A型肉毒毒素人源单链抗体ScFvB17为模板 ,PCR扩增抗体ScFv基因的重链可变区 (VH)和轻链可变区 (Vκ) ,以重链恒定区 1(CH1) 5′端 12个氨基酸的序列作为连接肽 ,构建成三结构域抗体分子 :VH_连接肽_Vκ(VH Vκ)。重组VH Vκ抗体分子在大肠杆菌中得到高效表达 ,其表达量占菌体总蛋白质的 34%以上。表达的蛋白质在菌内形成包含体 ,采用镍柱金属鏊合层析法对该包含体进行纯化 ,得到了纯度高达 95 %的VH Vκ。ELISA等实验结果显示 ,重组设计并制备的三结构域抗体蛋白VH Vκ不但可以特异识别毒素抗原 ,具有与原母本单链抗体ScFv相同的抗原特异性 ,而且具有了更高的相对亲和力和稳定性。
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关键词
A型肉毒毒素
三结构域抗体
表达
中和活性
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Keywords
Botulinum neurotoxin serotype A, Three-domain antibody, Expression, Affinity and stability
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分类号
R392
[医药卫生—免疫学]
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