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ATP清除剂三磷酸腺苷双磷酸酶对实验性矽肺的干预作用 被引量:6
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作者 苏程程 向国安 +4 位作者 马永强 周欣 彭守春 魏路清 姬文婕 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期792-797,共6页
目的:观察三磷酸腺苷双磷酸酶(apyrase,Apy)对实验性矽肺小鼠肺纤维化的干预作用及可能机制。方法:160只雄性C57BL/6小鼠,随机分为对照组、矽肺组、Apy组及溶剂组,采用经口咽吸入法给予Si O2悬浊液(50 mg/kg)建立小鼠实验性矽肺模型,对... 目的:观察三磷酸腺苷双磷酸酶(apyrase,Apy)对实验性矽肺小鼠肺纤维化的干预作用及可能机制。方法:160只雄性C57BL/6小鼠,随机分为对照组、矽肺组、Apy组及溶剂组,采用经口咽吸入法给予Si O2悬浊液(50 mg/kg)建立小鼠实验性矽肺模型,对照组给予等量生理盐水。Apy组在造模的同时及造模后4 h采用经口咽吸入法给予Apy(40 mg/kg),溶剂组给予等体积的无菌生理盐水。分别于术后3 h、7 d、14 d和28 d处死小鼠,计算各组小鼠肺指数,采用生物发光法检测小鼠肺组织的ATP含量,采用HE染色和苦味酸-天狼星红染色观察肺组织的病理学变化,采用real-time PCR法检测各组肺组织中Ⅰ型胶原(ColⅠ)、Ⅲ型胶原(ColⅢ)和转化生长因子β1(TGF-β1)的mRNA表达水平,采用ELISA法测定肺泡灌洗液TGF-β1的蛋白水平。结果:与对照组相比,模型组和溶剂对照组小鼠的肺指数和胶原含量明显升高,证明矽肺模型制备成功。Apy组与溶剂组相比,肺组织的ATP含量下降,肺组织炎症表现明显减轻,炎症评分显著下降;同时肺指数、胶原容积分数及ColⅠ和ColⅢ的mRNA表达水平均显著下降。Apy可以明显下调肺组织中TGF-β1的mRNA表达水平和肺泡灌洗液中TGF-β1蛋白表达水平。结论:Apy可以明显减轻实验性矽肺小鼠肺组织的炎症反应和纤维化,该作用可能与Apy减少肺组织ATP的浓度、下调TGF-β1的表达有关。 展开更多
关键词 矽肺 三磷酸腺苷磷酸酶 转化生长因子Β1
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集成微流体驱动泵的微流控微珠阵列芯片用于基因突变检测的研究 被引量:4
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作者 张何 傅昕 朱振军 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2013年第4期473-480,共8页
建立了一种基于微泵集成微流控微珠阵列芯片及三磷酸腺苷双磷酸酶(Apyrase)介导的等位基因特异性延伸的基因突变检测方法。将微流控芯片、引物修饰微珠阵列及基于毛细和蒸发作用的微流体驱动泵集成构建检测芯片,待测目标序列流过装配的... 建立了一种基于微泵集成微流控微珠阵列芯片及三磷酸腺苷双磷酸酶(Apyrase)介导的等位基因特异性延伸的基因突变检测方法。将微流控芯片、引物修饰微珠阵列及基于毛细和蒸发作用的微流体驱动泵集成构建检测芯片,待测目标序列流过装配的微球阵列并与微球表面延伸引物杂交,在Apyrase和去除外切酶活性的Klenow DNA聚合酶协同作用下,引物3'末端碱基与目标序列包含的基因突变检测位点匹配则能够发生延伸,并将生物素化的dCTP掺入到引物的延伸序列中并固定在微球表面,链霉亲和素修饰量子点能与微球表面引物延伸序列中的生物素结合并提供荧光信号,而引物3'末端与目标序列存在单碱基不匹配则不能发生延伸。结果表明:采用这种单碱基识别技术,微泵驱动的芯片内可以检测0.2 pmol/L目标序列(信背比>3),液压驱动的芯片内能识别0.5 pmol/L目标序列,而芯片外检测只能识别0.1 nmol/L目标序列,微泵集成芯片在检测基因突变时其灵敏度较芯片外基因突变分析提高了500倍,并在0.5~30 pmol/L目标序列浓度范围内待测序列浓度与检测信号呈良好的线性关系。测定了一个人基因组样本中多药耐药蛋白基因1(MDR1)的两个多态性位点C3435T及G2677T,结果显示该样本具有3435CT及2677TT的基因型组合,此结果与DNA测序结果一致。本方法用于基因突变分析,具有良好的特异性、灵敏性及稳定性。 展开更多
关键词 微泵 微流控微珠阵列 三磷酸腺苷磷酸酶 基因突变 量子点
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蚊唾液蛋白的研究进展 被引量:4
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作者 武卫华 叶彬 《中国寄生虫病防治杂志》 CSCD 2003年第3期183-185,共3页
关键词 唾液蛋白 吸血昆虫 过乳化物 唾液过敏原 三磷酸腺苷磷酸酶
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E4orf4蛋白诱导肿瘤细胞凋亡的研究与应用 被引量:1
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作者 周宇 陈虹 黄秉仁 《中国医药生物技术》 CSCD 2007年第1期51-53,共3页
  腺病毒早期基因编码产物在病毒感染宿主细胞后,广泛参与对宿主细胞周期的调控,以利于病毒自身的复制及释放.……
关键词 蛋白 PP E4orf4 肿瘤细胞 细胞凋亡 调节亚基 高尔基体 高尔基复合体 凋亡信号 蛋白磷酸酶 三磷酸腺苷磷酸酶
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探讨应力作用下Apyrase调控拟南芥根系生长发育规律的重要意义
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作者 闫杰 艾鑫 +1 位作者 刘洁 周勇 《大学科普》 2022年第4期81-83,共3页
三磷酸腺苷双磷酸酶(Apyrase)不仅能水解能量物质ATP,而且能控制植物细胞外ATP浓度从而参与一系列信号转导过程,该酶对植物生长发育有重要的调控作用,另一方面植物根的生长发育经受介质应力和渗透压力调控。基于实验室长期植物生物力学... 三磷酸腺苷双磷酸酶(Apyrase)不仅能水解能量物质ATP,而且能控制植物细胞外ATP浓度从而参与一系列信号转导过程,该酶对植物生长发育有重要的调控作用,另一方面植物根的生长发育经受介质应力和渗透压力调控。基于实验室长期植物生物力学的研究积累,结合力学、细胞及分子生物学方法,建立可控应力及渗透压交互作用加载模型,以拟南芥APY1-7 knockout,APY1-7 over expression,APY:GUS,APY:GFP等突变体为研究资源,分析植物根系形态、结构的时空变化规律,以及Apyrase、胞外ATP、细胞骨架等参数与应力之间的变化规律,探讨Apyrase调控的ATP信号及下游信号转导在植物根系生长发育中的作用机制,并建立相应的力发育模型。开展应力作用下Apyrase调控拟南芥根系生长发育规律的研究将进一步揭示植物根系生长发育的调控因素及其信号转导的机制,其研究将对农业增产、生态保护、植物能源等方面具有重要现实意义。 展开更多
关键词 根系发育 介质应力 渗透势 三磷酸腺苷磷酸酶 ATP
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成人血小板微颗粒绝对计数方法的建立
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作者 沈文红 赵小娟 +6 位作者 李慧娟 沈文香 杨海燕 苏雁华 白霞 余自强 阮长耿 《苏州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2010年第2期313-315,346,共4页
目的建立成人血浆血小板微颗粒(PMPs)绝对计数方法。方法应用流式细胞仪检测P-选择素表达的阳性血小板百分数,血栓素B2(TXB2)酶联免疫测定试剂盒检测血浆中TXB2含量,流式细胞仪检测3种常用抗凝剂来源或标本冻存后的血小板微颗粒浓度。... 目的建立成人血浆血小板微颗粒(PMPs)绝对计数方法。方法应用流式细胞仪检测P-选择素表达的阳性血小板百分数,血栓素B2(TXB2)酶联免疫测定试剂盒检测血浆中TXB2含量,流式细胞仪检测3种常用抗凝剂来源或标本冻存后的血小板微颗粒浓度。结果前列腺素E1(PGE1)对血小板活化的抑制作用呈现剂量依赖性,三磷酸腺苷双磷酸酶(Apyrase)对血小板P-选择素表达的影响不明显,PGE1和Apyrase对抑制血小板活化有协同作用;乙二胺四乙酸二钾(EDTA-K2)抗凝来源的血浆PMPs的浓度较枸橼酸钠和肝素抗凝来源PMPs的浓度均低(均P<0.01);标本是否为冻存液以及加否二甲基亚砜冻存液对检测无血小板血浆(PFP)中PMPs浓度没有影响(P>0.05)。结论体外检测PMPs时,宜选用EDTA-K2抗凝管,并且抗凝管中加入抑制血小板活化的抑制剂PGE1和Apyrase,终浓度分别为3.0×10-7mol/L和0.5U/ml,低温离心得到PFP,PFP可以直接冻存也可立即检测PMPs。 展开更多
关键词 成人 血小板微颗粒 前列腺素E1 三磷酸腺苷磷酸酶 抗凝剂
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