酵母双杂交系统的改进与研究进展 被引量：5

1

作者 张莉 黄倢 《海洋湖沼通报》 CSCD 北大核心 2006年第1期108-116,共9页

酵母双杂交系统是一种新兴的体内研究蛋白质之间相互作用以及筛选cDNA文库的技术手段,自建立以来得到了不断的改进与发展。在此基础上又相继出现了单杂交、三杂交、反向双杂交以及SOS富集系统等多种衍生系统,它们在功能基因组学、蛋白... 酵母双杂交系统是一种新兴的体内研究蛋白质之间相互作用以及筛选cDNA文库的技术手段,自建立以来得到了不断的改进与发展。在此基础上又相继出现了单杂交、三杂交、反向双杂交以及SOS富集系统等多种衍生系统,它们在功能基因组学、蛋白质组学以及药物开发研究中发挥了重要作用。本文拟就双杂交系统的原理、改进、发展及应用做一综述。 展开更多

关键词 酵母双杂交系统 单杂交系统 三杂交系统 反向双杂交系统 SOS富集系统

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酵母双杂交技术的发展 被引量：4

2

作者 朱静仪 《中山大学研究生学刊（自然科学与医学版）》 2002年第2期44-52,共9页

自酵母双杂交系统创建以来,已经成为研究蛋白质相互作用的重要手段,被广泛用于各个生物学研究领域,揭示了大量未知蛋白质之间的相互作用。近来,在经典的酵母双杂交系统基础上,针对其局限性,相继提出许多新的研究方法,如:双(多)筛选法,S... 自酵母双杂交系统创建以来,已经成为研究蛋白质相互作用的重要手段,被广泛用于各个生物学研究领域,揭示了大量未知蛋白质之间的相互作用。近来,在经典的酵母双杂交系统基础上,针对其局限性,相继提出许多新的研究方法,如:双(多)筛选法,SOS 富集系统,哺乳动物细胞双杂交系统,三杂交系统,单杂交系统,逆向双杂交系统,等等。本文将对上述方法进行详细叙述。酵母双杂交及其衍生系统已经成功地运用于蛋白质之间,蛋白质与 DNA、RNA、配体之间的相互作用的研究。 展开更多

关键词 酵母双杂交技术 酵母双杂交系统 单杂交系统 逆向双杂交系统 三杂交系统 蛋白质 相互作用

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酵母双杂交系统及发展

3

作者 毛健民 李季平 《周口师范高等专科学校学报》 2002年第2期63-66,共4页

酵母双杂交系统是一种用来在体内研究蛋白质之间相互作用的一个非常有效的手段 ,并且已经得到了广泛的应用 ,它包括双杂交、反向双杂交和三杂交系统等 .

关键词 酵母 双杂交系统 发展 反向双杂交系统 三杂交系统 蛋白质

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酵母杂交系统的改进与研究进展

4

作者 康益龙 叶颖江 +1 位作者 陈丽 王杉 《生物学通报》 2007年第7期1-3,共3页

蛋白-蛋白相互作用在细胞生命活动中起着关键的作用,后基因组时代主要是研究蛋白的功能,通过研究蛋白的相互作用及其图谱的构建来了解蛋白的功能。研究蛋白-蛋白相互作用的方法很多,酵母杂交是最常用的检测体内蛋白-蛋白相互作用的敏感... 蛋白-蛋白相互作用在细胞生命活动中起着关键的作用,后基因组时代主要是研究蛋白的功能,通过研究蛋白的相互作用及其图谱的构建来了解蛋白的功能。研究蛋白-蛋白相互作用的方法很多,酵母杂交是最常用的检测体内蛋白-蛋白相互作用的敏感系统。随着人们对该系统的广泛应用,这一系统得到了不断的完善及改进,并广泛应用于蛋白-蛋白、蛋白质-RNA、蛋白质-DNA以及其他的小分子间相互作用的研究。拟就酵母杂交系统的原理、改进、发展及应用做一综述。 展开更多

关键词 蛋白-蛋白相互作用 酵母双杂交系统 三杂交系统 反式双杂交系统

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双杂交系统的改进及其应用

5

作者 刘薇斌 梁峰 常团结 《商丘师范学院学报》 CAS 2001年第4期91-96,共6页

自从Field和Song1989年初步建立了酵母双杂交系统以来 ,双杂交技术特别是酵母双杂交技术得到了长足的发展 ,衍生出了单杂交系统、三杂交系统、双诱饵系统等一系列相关的技术 ,使其真正成为分子生物学研究中广泛应用的技术手段 .这些技... 自从Field和Song1989年初步建立了酵母双杂交系统以来 ,双杂交技术特别是酵母双杂交技术得到了长足的发展 ,衍生出了单杂交系统、三杂交系统、双诱饵系统等一系列相关的技术 ,使其真正成为分子生物学研究中广泛应用的技术手段 .这些技术的应用有力地推动了蛋白质与蛋白质、蛋白质与小分子多肽、蛋白质与DNA分子间相互作用的研究 .特别是在后基因组时代 ,对生命活动中蛋白质相互作用的网络信息研究 ,双杂交系统将发挥更重要的作用 . 展开更多

关键词 酵母双杂交系统 单杂交系统 三杂交系统 双诱饵系统 蛋白质相互作用 分子生物学

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酵母三杂交系统研究进展

6

作者 杜建芳 徐东刚 王嘉玺 《医学研究通讯》 2005年第12期62-64,共3页

许多生物过程是通过大分子如蛋白-蛋白,核酸-蛋白的相互作用来实现的,对这些大分子间的相互作用的研究有助于揭示生命过程的分子作用机制.酵母双杂交系统是研究蛋白间相互作用的有用工具,随着该系统的广泛应用,在此基础上发展了三杂交系... 许多生物过程是通过大分子如蛋白-蛋白,核酸-蛋白的相互作用来实现的,对这些大分子间的相互作用的研究有助于揭示生命过程的分子作用机制.酵母双杂交系统是研究蛋白间相互作用的有用工具,随着该系统的广泛应用,在此基础上发展了三杂交系统,研究包括三种成分在内的更为复杂的大分子相互作用,为蛋白-蛋白、RNA-蛋白和小分子-蛋白相互作用的研究提供了新的手段. 展开更多

关键词 酵母双杂交系统 系统研究 蛋白相互作用 分子作用机制 生命过程 大分子 分子间 小分子 三杂交系统

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发展中的酵母杂交体系

7

作者 张树民 陈英碚 《生命科学》 CSCD 2000年第1期34-35,共2页

酵母杂交体系包括双杂交、反向双杂交和三杂交等体系。双杂交作为一种新兴的体内研究蛋白质之间相互作用的方法；已经得到了广泛的应用。而反向双杂交和三杂交系统是在双杂交基础上发展起来的两种新技术。反向双杂交除了筛选突变株，以... 酵母杂交体系包括双杂交、反向双杂交和三杂交等体系。双杂交作为一种新兴的体内研究蛋白质之间相互作用的方法；已经得到了广泛的应用。而反向双杂交和三杂交系统是在双杂交基础上发展起来的两种新技术。反向双杂交除了筛选突变株，以获取蛋白质结合的信息外，还能发现可导致已知蛋白质间特异相互作用发生解离的肽类或其他小分子物质，进一步分析蛋白质间作用位点、调控。三杂交系统则在蛋白质与小分子配基之间以及多种蛋白质之间相互作用中具有重要的应用价值。 展开更多

关键词 反向双杂交系统 三杂交系统 蛋白质相互作用

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酵母双杂交系统的应用及发展前景

8

作者 华绍炳 于乃绚 《中国海洋大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 2000年第z1期-,共12页

酵母双杂交系统有利于检测蛋白质与蛋白质、蛋白质与DNA 、蛋白质与RNA和蛋白质与小分子之间的相互作用，因而对分子调控体系的研究起巨大的反 作用。文中系叙述了基于Ga14系统的双杂交技术的应用及其局限性，还介绍了单杂交系统、 双... 酵母双杂交系统有利于检测蛋白质与蛋白质、蛋白质与DNA 、蛋白质与RNA和蛋白质与小分子之间的相互作用，因而对分子调控体系的研究起巨大的反 作用。文中系叙述了基于Ga14系统的双杂交技术的应用及其局限性，还介绍了单杂交系统、 双杂交系统、三杂交系统以及Sos恢复系统(SRS)。与其它领域一样，酵母双杂交系统将会在 海洋分子生物学研究中取得成功。 展开更多

关键词 酵母 单杂交系统 双杂交系统 三杂交系统 SOS 恢 复系统(SRS)

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酵母双杂交系统的研究进展 被引量：7

9

作者 吴娟 钱凯 杨泽峰 《安庆师范学院学报（自然科学版）》 2005年第2期59-63,共5页

酵母双杂交系统自创建以来,已成为研究蛋白质相互作用的重要手段,揭示了大量未知蛋白质之间的相互作用。随着该系统的广泛应用,近年来又发展了三杂交系统、单杂交系统、逆向双杂交系统、SOS富集系统等。酵母双杂交及其衍生系统已经成功... 酵母双杂交系统自创建以来,已成为研究蛋白质相互作用的重要手段,揭示了大量未知蛋白质之间的相互作用。随着该系统的广泛应用,近年来又发展了三杂交系统、单杂交系统、逆向双杂交系统、SOS富集系统等。酵母双杂交及其衍生系统已经成功地运用于蛋白质之间,蛋白质与DNA、RNA、配体之间相互作用的研究。 展开更多

关键词 酵母双杂交系统 蛋白质间相互作用 三杂交系统、AD DNA—BD

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酵母三杂交系统的原理和应用 被引量：2

10

作者 彭丹妮 黄静 吴自荣 《生命科学》 CSCD 2007年第4期461-464,共4页

酵母双杂交系统自出现以来,广泛用于研究蛋白质之间的相互作用,它是一种具有高灵敏度的研究蛋白质之间关系的技术。在酵母双杂交系统基础上发展的酵母三杂交系统将应用范围扩展到蛋白质-蛋白质、蛋白质-RNA、蛋白质-小分子化合物等更广... 酵母双杂交系统自出现以来,广泛用于研究蛋白质之间的相互作用,它是一种具有高灵敏度的研究蛋白质之间关系的技术。在酵母双杂交系统基础上发展的酵母三杂交系统将应用范围扩展到蛋白质-蛋白质、蛋白质-RNA、蛋白质-小分子化合物等更广阔的研究领域。本文着重介绍酵母三杂交系统的原理、应用及局限性。 展开更多

关键词 酵母三杂交系统 蛋白质-蛋白质相互作用 蛋白质-RNA相互作用 蛋白质-小分子化合物相互作用

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克隆颜色鉴定结合5-氟乳清酸负筛提高三杂交系统筛库效率 被引量：1

11

作者 何元政 包雷 刘定干 《科学通报》 EI CAS CSCD 北大核心 2000年第21期2293-2296,共4页

酵母三杂交系统是新近发展起来的一个分析RNA结合蛋白的有力工具, 然而在利用该系统筛库过程中, 常会遇到大量假阳性克隆. 将克隆颜色鉴定与5-氟乳清酸负性筛选相结合, 运用到酵母三杂交系统的筛库过程中, 极大地提高了筛库的效率和对... 酵母三杂交系统是新近发展起来的一个分析RNA结合蛋白的有力工具, 然而在利用该系统筛库过程中, 常会遇到大量假阳性克隆. 将克隆颜色鉴定与5-氟乳清酸负性筛选相结合, 运用到酵母三杂交系统的筛库过程中, 极大地提高了筛库的效率和对假阳性克隆的鉴别, 并已实现了对重要的RNA结合蛋白的筛选. 这一改进将大大方便该系统在分析RNA与蛋白的相互作用中的运用. 展开更多

关键词 克隆颜色鉴定 酵母三杂交系统 RNA结合蛋白

原文传递

G_β,G_(βγ)与腺苷酸环化酶Ⅱ在酵母双杂交和三杂交系统中的相互作用 被引量：1

12

作者 李旌军 鲁宁 黄秉仁 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期115-118,共4页

目的 探讨 G蛋白β和γ亚基在 G_(βγ)与效应器相互作用中的地位 ,特别是γ亚基在此相互关系中的作用。方法 利用酵母双杂交和自行构建的酵母三杂交系统分别研究 G_(β 1)和 G_(β 1)γ 2与腺苷酸环化酶Ⅱ (ACⅡ )的相互作用。 结果 ... 目的 探讨 G蛋白β和γ亚基在 G_(βγ)与效应器相互作用中的地位 ,特别是γ亚基在此相互关系中的作用。方法 利用酵母双杂交和自行构建的酵母三杂交系统分别研究 G_(β 1)和 G_(β 1)γ 2与腺苷酸环化酶Ⅱ (ACⅡ )的相互作用。 结果 发现酵母三杂交系统中 AD-β 1，γ 2和 BD-ACⅡ间的相互作用明显强于双杂交系统中 AD-β 1和 BD-ACⅡ的相互作用。对 BD-ACⅡ Q和 AD-β 1在酵母双杂交系统和三杂交系统中的表达进行免疫印迹杂交分析 ,发现其表达水平与β-半乳糖苷酶活力大小无关 ,即酵母三杂交系统和双杂交系统中相互作用的显著差别不是由 BD-ACⅡ Q和 AD-β 1蛋白表达水平的差异所造成。结论 β亚基对维持 G_(βγ)与 ACⅡ的相互作用十分重要 ,而γ亚基的存在显著增强了β亚基与 ACⅡ的相互作用 ,对维持 G_(βγ)与 ACⅡ的高亲和性很重要。 展开更多

关键词 Gβγ 腺苷酸环化酶Ⅱ 酵母三杂交系统 酵母双杂交系统

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从放线菌发酵液中高通量筛选端粒酶抑制剂 被引量：2

13

作者 张慧敏 曹莹 +5 位作者 王卫国 李波兰 沈会芳 林壁润 庞建新 吴曙光 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期40-43,共4页

目的从2000多株放线菌发酵液中高通量筛选特异性端粒酶抑制剂。方法经对持有的3种端粒酶抑制剂筛选模型即3株酵母菌PCR验证后,将其接种于含3-AT、组氨酸缺乏的酵母培养液,然后分别调整其菌液浓度和筛选样品剂量,以备高通量筛选。将酵母... 目的从2000多株放线菌发酵液中高通量筛选特异性端粒酶抑制剂。方法经对持有的3种端粒酶抑制剂筛选模型即3株酵母菌PCR验证后,将其接种于含3-AT、组氨酸缺乏的酵母培养液,然后分别调整其菌液浓度和筛选样品剂量,以备高通量筛选。将酵母菌液移于96孔板,加入待测样品,振摇培养并定时经多功能微孔板分析仪进行定量分析,选取抑菌率大于0.45的样品进行复筛。结果经验证所持有的3种端粒酶抑制剂筛选模型均可用于下一步的筛选,并选取酵母菌液OD595nm 0.04做为起始筛选浓度,选取放线菌发酵液剂量为5ml,通过对放线菌发酵液进行初筛和复筛,发现了14株放线菌发酵液的抑菌效率超过0.45。结论该研究首次高通量筛选端粒酶抑制剂,方法简便快捷,筛选结果稳定可靠,并筛选到14株放线菌发酵液可能具有抗肿瘤活性,为进一步研究和开发抗肿瘤新药奠定基础。 展开更多

关键词 放线菌发酵液 高通量筛选 端粒酶抑制剂 酵母三杂交系统 96孔板 抗肿瘤活性

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酵母三杂交系统:一种在真核细胞水平研究RNA-蛋白质相互作用的有效方法

14

作者 林建宏(综述) 邹柯(综述) 沈岩(审阅) 《医学分子生物学杂志》 CAS CSCD 2005年第3期181-184,共4页

RNA-蛋白质之间的相互作用是真核细胞RNA在细胞内执行其功能的基础,这种相互作用在基因表达的多个水平上均发挥着重要的调控作用。要研究RNA对基因表达的调控就必须对RNA-蛋白质之间相互作用的方式进行研究。本文介绍的酵母三杂交系统(y... RNA-蛋白质之间的相互作用是真核细胞RNA在细胞内执行其功能的基础,这种相互作用在基因表达的多个水平上均发挥着重要的调控作用。要研究RNA对基因表达的调控就必须对RNA-蛋白质之间相互作用的方式进行研究。本文介绍的酵母三杂交系统(yeast three-hybrid system)是一种近年来在酵母双杂交系统的基础上发展而来的,可用于鉴定先前未知的,在自然界中存在且具有生物学意义的RNA-蛋白质相互作用的实验方法。该方法提供了一个在真核细胞内研究RNA-蛋白质相互作用的技术平台。它可以根据酵母细胞所表现出的简单表型及易于辨别的酶反应,对体内复杂环境中发生的RNA-蛋白质的相互作用进行遗传学分析。 展开更多

关键词 酵母三杂交系统 RNA-蛋白质相互作用

原文传递

酵母三杂交系统的应用研究进展

15

作者 张浩 王全立 毛秉智 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1999年第6期551-553,共3页

介绍了酵母三杂交系统的原理、应用、前景和存在的不足． 在酵母双杂交基础上发展起来的酵母三杂交系统， 将应用范围扩大到研究蛋白质蛋白质、蛋白质ＲＮＡ、蛋白质小分子药物间的相互作用．

关键词 酵母三杂交系统 蛋白质 相互作用 应用 原理 RNA

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酵母三杂交系统的研究进展

16

作者 闵凌峰 何淑雅 《医学综述》 2006年第7期392-394,共3页

蛋白质与RNA分子之间的相互作用为生命活动的重要基础。由于蛋白质和RNA分子结合方式的复杂性,局限了蛋白质和RNA相互作用的研究。随着酵母三杂交系统的出现,蛋白质-RNA相互作用的研究也将步入一个新的时期。本文着重介绍了酵母三杂交... 蛋白质与RNA分子之间的相互作用为生命活动的重要基础。由于蛋白质和RNA分子结合方式的复杂性,局限了蛋白质和RNA相互作用的研究。随着酵母三杂交系统的出现,蛋白质-RNA相互作用的研究也将步入一个新的时期。本文着重介绍了酵母三杂交系统的原理、应用、局限性及其改进,假阳性结果的对策,并展望了该系统进一步的发展。 展开更多

关键词 酵母三杂交系统 蛋白质-RNA相互作用 进展

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酵母三杂交系统的应用研究进展

17

作者 田志坚 张学文 《生物技术通讯》 CAS 2005年第2期207-209,共3页

1996年,酵母三杂交技术被研究应用于筛选RNA结合蛋白。本文介绍了酵母三杂交系统的原理、应用、前景和存在的不足及局限,并分析其原因,总结了在过去8年中利用此方法所取得的成就。在酵母双杂交基础上发展起来的酵母三杂交系统,其应用范... 1996年,酵母三杂交技术被研究应用于筛选RNA结合蛋白。本文介绍了酵母三杂交系统的原理、应用、前景和存在的不足及局限,并分析其原因,总结了在过去8年中利用此方法所取得的成就。在酵母双杂交基础上发展起来的酵母三杂交系统,其应用范围已扩大到蛋白质-蛋白质、蛋白质-RNA、蛋白质-小分子药物间的相互作用等更加广泛的研究领域。 展开更多

关键词 酵母三杂交系统 酵母四杂交系统 蛋白质 RNA 小分子药物 相互作用

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