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题名弓形虫PCR检测方法的建立及初步应用
被引量：11
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作者
王胜昌
谢建云
邵伟娟
高诚
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机构
上海市实验动物质量监督检验站
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出处
《上海实验动物科学》
2003年第1期15-17,20,34,共5页
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基金
上海市科技发展基金资助项目 ( 0 0 49190 71)
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文摘
根据弓形虫 P30基因序列设计二对引物分别进行了 PCR一次扩增和套式扩增 ,结果这两对引物在一次扩增和套式扩增中分别出现预期的扩增片段 91 4bp、5 2 2 bp和 5 2 2 bp;套式扩增出现的条带比一次扩增出现的条带亮度明显增强。提示套式扩增比一次扩增具有更高的敏感性。用外引物进行扩增后 ,最低可以检测到 1 pg的弓形虫 DNA。说明所建立的反应体系具有高度的敏感性。用内引物对人工感染弓形虫的 ICR小鼠血液、组织进行弓形虫 DNA的检测 ,结果均扩增出 5 2 2 bp的扩增带。根据 B1基因序列设计的引物进行 PCR一次扩增和半套式扩增。结果均出现预期的扩增片段 61 9bp、362 bp和 362 bp;用半套式扩增检测感染弓形虫的 ICR小鼠血液、组织时可扩增出5 2 2 bp的扩增带 ,半套式扩增比一次扩增更敏感。
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关键词
检测方法
弓形虫
一次pcr
套式pcr
半套式pcr
ICR小鼠
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Keywords
Toxoplasma gondii
Single-step pcr
NT-pcr
One-Tube Hemi-Nested pcr
ICR mice
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分类号
R346
[医药卫生—基础医学]
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题名双倍PCR技术简介
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作者
黄银君
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出处
《畜牧兽医科技信息》
1995年第9期3-3,共1页
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文摘
双倍PCR（Double PCR）是在普通PCR基础上发展起来的一种PCR技术。该技术用成套的引物进行两次PCR,从而进一步增抓了模板DNA的产量。其过程是:第一次PCR用两个外源性引物进行20—25个周期循环,然后,少量的第一次PCR产物转移到新的含有两个内源性引物的扩增管中,再进行第二次PCR,20—25个周期循环双倍PCR约有10<sup>11</sup>—10<sup>12</sup>倍扩增能力,比普通PCR（扩增能力约为10<sup>6</sup>）更加敏感。以伪狂犬病病毒为例。
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关键词
pcr技术
伪狂犬病病毒
周期循环
普通pcr
模板DNA
pcr产物
外源性
二次pcr
病毒粒子
一次pcr
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分类号
S854.4
[农业科学—临床兽医学]
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题名一次荧光定量PCR方法检测三种病原体
被引量：3
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作者
刘蕊
纪凤祥
杨晓云
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机构
天津市人民医院检验科
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出处
《天津医药》
CAS
北大核心
2004年第8期502-503,共2页
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关键词
一次荧光定量pcr方法
检测
病原体
奈瑟淋球菌
解脲支原体
沙眼衣原体
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分类号
R446.5
[医药卫生—诊断学]
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