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犬Ⅰ型腺病毒Ⅸ蛋白的生物信息学分析 被引量：1
1
作者 王鹏 廉士珍 +7 位作者 刘晓颖 胡博 邓效禹 张蕾 吕爽 王洪海 闫喜军 朱言柱 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2021年第18期65-68,73,150,151,共7页
为了探究犬Ⅰ型腺病毒(CAdV-1)Ⅸ蛋白的理化性质、空间结构与抗原位点,试验以中国农业科学院特产研究所宠物生物制品研发团队实验室分离毒株的Ⅸ蛋白氨基酸序列为研究对象,采用生物信息学方法,利用ProtParam tool、NetPhos 3.1 Server、... 为了探究犬Ⅰ型腺病毒(CAdV-1)Ⅸ蛋白的理化性质、空间结构与抗原位点,试验以中国农业科学院特产研究所宠物生物制品研发团队实验室分离毒株的Ⅸ蛋白氨基酸序列为研究对象,采用生物信息学方法,利用ProtParam tool、NetPhos 3.1 Server、TMHMM、PSIPRED、SOPMA、Phyre 2和IEDB等在线网站对Ⅸ蛋白的理化性质、磷酸化位点、糖基化位点、跨膜区、信号肽、二级结构、三级结构、抗原决定簇和B细胞抗原决定簇进行预测。结果表明:Ⅸ蛋白含有71个氨基酸,平均吸水系数为-0.399,等电点为9.86。α-螺旋、延伸链、β-转角和无规则卷曲分别占16.90%、35.21%、9.85%和38.03%。Ⅸ蛋白不存在跨膜区和信号肽,存在2个潜在蛋白质抗原决定簇、5个蛋白质磷酸化位点,潜在B细胞抗原决定簇为18~31位。说明本试验初步预测分析得到CAdV-1Ⅸ蛋白的理化性质和抗原决定簇,可为CAdV-1Ⅸ蛋白的分离、提纯提供参考依据,同时为进一步研制基于Ⅸ蛋白的亚单位疫苗提供前期基础。 展开更多
关键词 犬Ⅰ型腺病毒 ⅸ蛋白 生物信息学 B细胞 蛋白质空间结构 抗原决定簇
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建立基于miniSOG标签的光镜-电镜关联方法观察腺病毒Ⅸ蛋白的亚细胞定位 被引量：2
2
作者 邹小辉 邵博 +3 位作者 王敏 屈建国 鲁茁壮 洪涛 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 2017年第1期8-12,共5页
目的 建立光镜-电镜关联方法观察腺病毒蛋白Ⅸ的细胞内定位.方法 miniSOG是新发现的能够被荧光显微镜和电子显微镜解析的蛋白标签.通过PCR方法克隆腺病毒结构蛋白Ⅸ与miniSOG的融合基因ⅨSOG,将其构建至真核表达载体,转染细胞;通过荧光... 目的 建立光镜-电镜关联方法观察腺病毒蛋白Ⅸ的细胞内定位.方法 miniSOG是新发现的能够被荧光显微镜和电子显微镜解析的蛋白标签.通过PCR方法克隆腺病毒结构蛋白Ⅸ与miniSOG的融合基因ⅨSOG,将其构建至真核表达载体,转染细胞;通过荧光显微镜确定ⅨSOG蛋白表达的细胞,之后对转染细胞进行原位固定、光氧化、制备超薄切片,用电镜观察细胞内ⅨSOG融合蛋白的表达及分布情况.结果 在蓝光激发下,miniSOG能够发射绿色荧光.定位选择光氧化形成嗜锇颗粒的ⅨSOG表达细胞进行电镜观察,结果显示Ⅸ蛋白在细胞核内多个区域形成点状聚集或包涵体.结论 建立了依赖miniSOG标签的的光镜-电镜关联方法,该方法可用于病毒蛋白细胞内定位研究. 展开更多
关键词 MiniSOG ⅸ蛋白 光氧化 光镜.电镜关联技术
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重组Ⅸ蛋白检测犬传染性肝炎病毒抗体间接ELISA方法的建立
3
作者 张洋 许澄 +3 位作者 刘燕玲 刘殿峰 任文陟 袁宝 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2010年第36期20724-20726,共3页
[目的]建立用重组蛋白Ⅸ检测犬传染性肝炎病毒抗体的间接ELISA方法。[方法]分别设置不同抗原包被浓度、包被条件、封闭液等,比较ELISA反应效果。[结果]最佳抗原包被浓度为5.0μg/ml;最佳包被条件为,37℃包被1 h、4℃过夜;最佳封闭液为5%... [目的]建立用重组蛋白Ⅸ检测犬传染性肝炎病毒抗体的间接ELISA方法。[方法]分别设置不同抗原包被浓度、包被条件、封闭液等,比较ELISA反应效果。[结果]最佳抗原包被浓度为5.0μg/ml;最佳包被条件为,37℃包被1 h、4℃过夜;最佳封闭液为5%BSA;HRP-羊抗犬IgG的最佳工作浓度为1∶1 600。[结论]建立了检测犬传染性肝炎病毒抗体的间接ELISA方法。 展开更多
关键词 犬传染性肝炎病毒 ⅸ蛋白 间接ELISA
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Yes相关蛋白及碳酸酐酶Ⅸ蛋白的表达与鼻咽癌发生发展的关系 被引量：1
4
作者 岳杨 郑露 +1 位作者 雍丹 许海 《实用临床医药杂志》 CAS 2021年第6期8-12,共5页
目的探讨鼻咽癌组织中Yes相关蛋白(YAP)、碳酸酐酶Ⅸ蛋白的表达与肿瘤发生发展的关系。方法选取鼻咽癌组织标本80例为鼻咽癌组,鼻咽黏膜慢性炎症组织80例为对照组,采用免疫组化染色检测2组标本中YAP蛋白、碳酸酐酶Ⅸ蛋白表达情况,并分... 目的探讨鼻咽癌组织中Yes相关蛋白(YAP)、碳酸酐酶Ⅸ蛋白的表达与肿瘤发生发展的关系。方法选取鼻咽癌组织标本80例为鼻咽癌组,鼻咽黏膜慢性炎症组织80例为对照组,采用免疫组化染色检测2组标本中YAP蛋白、碳酸酐酶Ⅸ蛋白表达情况,并分析不同年龄、性别及病理学特征的鼻咽癌组织中YAP蛋白、碳酸酐酶Ⅸ蛋白表达差异。结果鼻咽癌组标本中YAP蛋白、碳酸酐酶Ⅸ蛋白阳性表达率分别为76.25%、58.75%,高于对照组的36.25%、20.00%,差异有统计学意义(P<0.05)。在未分化及病理学分期Ⅲ、Ⅳ期的鼻咽癌组织中,YAP蛋白阳性表达率高于分化型及病理学分期Ⅰ、Ⅱ期的鼻咽癌组织,差异有统计学意义(P<0.05)。在不同年龄、性别、病灶最大径、是否发生淋巴结转移、病理学分化程度、病理学分期的鼻咽癌组织中,碳酸酐酶Ⅸ蛋白阳性表达率差异均无统计学意义(P>0.05)。结论鼻咽癌组织中YAP蛋白、碳酸酐酶Ⅸ蛋白表达显著上调,其中YAP蛋白表达与肿瘤的发生发展关系密切。 展开更多
关键词 鼻咽癌 Yes相关蛋白 碳酸酐酶ⅸ蛋白 病理学分期
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成肌细胞介导的hF Ⅸ蛋白在小鼠体内的持续表达
5
作者 王宏伟 杨晓青 +3 位作者 包云 卢大儒 邱信芳 薛京伦 《中华血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1997年第9期471-473,共3页
目的：以小鼠C2C12成肌细胞为对象开展血友病乙基因治疗研究。方法：首先将构建好的带有MCK增强手和hCMV启动子的反转录病毒载体G1NaMCⅨ转染PA317细胞，并用其上情感染C2C12细胞，所得克隆细胞在离体分别进行了Southern、Northern、Wes... 目的：以小鼠C2C12成肌细胞为对象开展血友病乙基因治疗研究。方法：首先将构建好的带有MCK增强手和hCMV启动子的反转录病毒载体G1NaMCⅨ转染PA317细胞，并用其上情感染C2C12细胞，所得克隆细胞在离体分别进行了Southern、Northern、Western鉴定。进一步用带有hFⅨcDNA的C2C12细胞进行C3H小鼠活体表达研究。结果：hFⅨ活体表达量与细胞注射数量、细胞离体表达量呈正相关，使用免疫抑制剂可提高hFⅨ活体表达量并延长表达时间；较长时间间隔后进行重复注射亦可延长hFⅨ表达时间。结论：同种异体成肌细胞存在免疫排斥现象，较长时间间隔重复注射可提高移植细胞存活率，从而有助于实现成肌细胞介导的血友病乙基因治疗。 展开更多
关键词 成肌细胞 人因子ⅸ蛋白 基因治疗 血友病乙
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双抗体夹心ELISA法测定人凝血因子IX蛋白 被引量：8
6
作者 戴一凡 刘坚 +1 位作者 邱信芳 薛京伦 《复旦学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 1990年第4期413-417,共5页
用双抗体夹心ELISA法测定人凝血因子IX蛋白。在转入了外源人凝血因子IX基因的CHO细胞和HSF细胞的培养液中均测得一定量的IX因子蛋白,其量相当于正常人血浆IX因子蛋白的0.89%～3.81%,而对照细胞均为阴性结果。对一例血友病B患者(IX:C<... 用双抗体夹心ELISA法测定人凝血因子IX蛋白。在转入了外源人凝血因子IX基因的CHO细胞和HSF细胞的培养液中均测得一定量的IX因子蛋白,其量相当于正常人血浆IX因子蛋白的0.89%～3.81%,而对照细胞均为阴性结果。对一例血友病B患者(IX:C<0.1%)的分析结果表明,其血浆中含有的IX因子蛋白量相当于正常人的52.3%,因而将此病例归属于血友病B^R型。本法灵敏度高、特异性强、重复性好,可与一期法相互补充,应用于临床血友病B的诊断、分类、家系分析及携带者的检出。 展开更多
关键词 血友病B 凝血因子 ⅸ因子蛋白
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