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兔源性Ⅱ型prM多抗对Ⅰ型登革病毒无增强活性的中和作用 被引量：4
1
作者 王淼 阳帆 +6 位作者 黄达娜 黄亚兰 吴春利 王超 白芳 黄柏诗 张仁利 《中国热带医学》 CAS 2017年第1期32-35,共4页
目的从Ⅰ型登革病毒(dengue virus,DENV)感染患者血清中分离病毒,并探究Ⅱ型登革病毒prM多抗对该病毒体外感染细胞的影响。方法用C6/36细胞分离并扩大培养Ⅰ型登革患者血清中的登革病毒,根据细胞病变收取病毒,空斑实验测定病毒滴度。免... 目的从Ⅰ型登革病毒(dengue virus,DENV)感染患者血清中分离病毒,并探究Ⅱ型登革病毒prM多抗对该病毒体外感染细胞的影响。方法用C6/36细胞分离并扩大培养Ⅰ型登革患者血清中的登革病毒,根据细胞病变收取病毒,空斑实验测定病毒滴度。免疫荧光、流式细胞术及qRT-PCR检测病毒对细胞的感染,空斑减少中和实验和抗体依赖增强感染实验测定Ⅱ型登革病毒prM抗体对病毒的中和及增强活性。结果分离扩大培养了一株Ⅰ型登革病毒,滴度达到8×10~7pfu/m L。登革病毒可以在K562细胞复制增值,ana-1细胞可以主动吞噬病毒但病毒在此细胞内不复制。0.1、1μg/m L的多抗与病毒孵育后感染BHK细胞产生的空斑数与未加入抗体的空斑数相比,差异有统计学意义(P<0.001)。另外,prM多抗并没有增加登革病毒对K562细胞的感染。结论成功扩大培养DENVⅠ毒株,体外实验结果证明兔源性prM多抗是一种无增强活性的中和型抗体。 展开更多
关键词 ⅰ型登革病毒 分离培养 兔源性prM多抗 中和作用
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2014—2019年东莞市Ⅰ型登革病毒E基因进化特征分析
2
作者 张莉萍 方昌勇 +3 位作者 张巧利 陈仲威 黄勇 李艳芬 《华南预防医学》 2023年第5期563-567,共5页
目的了解东莞市2014—2019年登革热流行情况和血清型Ⅰ型登革病毒(DENV-1)基因型及E基因特征。方法收集2014—2019年东莞市各镇街医院上送的经临床诊断为疑似登革热病例血清样本共962份,其中的729份样本应用酶联免疫吸附试验(ELISA)进... 目的了解东莞市2014—2019年登革热流行情况和血清型Ⅰ型登革病毒(DENV-1)基因型及E基因特征。方法收集2014—2019年东莞市各镇街医院上送的经临床诊断为疑似登革热病例血清样本共962份,其中的729份样本应用酶联免疫吸附试验(ELISA)进行登革IgM抗体检测,全部962份血清样本采用实时荧光PCR进行检测,核酸阳性样本中的血清型Ⅰ型样本用细胞培养方法进行病毒分离鉴定,并对其E基因序列进行测序及系统进化树分析。结果2014—2019年东莞市登革热7—11月为流行期,9—10月为发病高峰。检出IgM抗体阳性样本261份,阳性率35.90%。962份急性期血清中登革病毒核酸阳性362份,阳性率37.6%,其中DENV-1阳性311份,占85.9%。分离获得35株DENV-1毒株,E基因序列比对和系统进化分析显示,35株DENV-1分离株间核苷酸相似度为89.8%~100.0%,分属基因Ⅰ型、Ⅱ型和Ⅴ型,分别为29、1和5株。所有35株分离株与广州、浙江等地及越南、菲律宾、印度等东南亚国家当年或往年流行株同源性较高。结论2014—2019年东莞市流行的DENV-1优势型别为基因Ⅰ型。流行方式可能为广州等周边城市及东南亚国家输入病例引起的本地暴发流行。须警惕基因Ⅴ型DENV-1输入引起登革热暴发流行。 展开更多
关键词 ⅰ型登革病毒 酶联免疫吸附试验 E基因 相似度 进化分析
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Ⅰ型登革病毒感染前后血管内皮细胞长链非编码RNA表达谱分析 被引量：2
3
作者 郑宝嘉 江振友 +4 位作者 司露露 郭前方 江丽芳 周俊梅 王辉 《中山大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期228-236,共9页
【目的】运用高通量测序技术检测Ι型登革病毒(DENV-1)感染人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)后长链非编码RNA(lncRNA)的差异表达,分析以探讨导致血管内皮细胞功能改变或受损的可能分子机制。【方法】DENV-1感染人脐静脉内皮细胞24 h后,分别... 【目的】运用高通量测序技术检测Ι型登革病毒(DENV-1)感染人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)后长链非编码RNA(lncRNA)的差异表达,分析以探讨导致血管内皮细胞功能改变或受损的可能分子机制。【方法】DENV-1感染人脐静脉内皮细胞24 h后,分别提取对照组和病毒感染组的RNA样本进行测序,筛选差异表达的lncRNA,进行GO和KEGG富集分析,构建共表达网络图。【结果】共筛查到2 623个显著差异表达的lncRNA,其中1 441个为表达上调,1 182个为表达下调。发现表达差异lncRNA及其预测靶基因主要富集于影响抗原提呈、干扰素合成、细胞凋亡、细胞粘附等生物过程。【结论】DENV-1感染HUVEC后,lncRNA表达谱发生明显变化,与登革出血热/登革休克综合征的发生发展密切相关。 展开更多
关键词 ⅰ型登革病毒 人脐静脉血管内皮细胞 长链非编码RNA
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2012年-2014年珠海市流行的Ⅰ型登革病毒分子溯源分析 被引量：1
4
作者 林毅雄 魏泉德 +3 位作者 张丽荣 沈韧 黄辉涛 周兰兰 《中国卫生检验杂志》 CAS 2017年第1期91-93,100,共4页
目的对2012年-2014年珠海市流行的Ⅰ型登革病毒(DV)进行包膜蛋白基因序列测定,分析病毒可能的来源。方法采集2012年-2014年珠海登革热流行期间登革热疑似和临床诊断病例的急性期血清696份,采用荧光RT-PCR检测登革病毒核酸,选取46份DVⅠ... 目的对2012年-2014年珠海市流行的Ⅰ型登革病毒(DV)进行包膜蛋白基因序列测定,分析病毒可能的来源。方法采集2012年-2014年珠海登革热流行期间登革热疑似和临床诊断病例的急性期血清696份,采用荧光RT-PCR检测登革病毒核酸,选取46份DVⅠ型核酸阳性标本,用荧光RT-PCR扩增包膜蛋白基因并进行测序分型。结果荧光RT-PCR检测DV通用型核酸阳性为152例,阳性率为21.84%(152/696),其中DVⅠ型阳性为148例;选取的46份标本全部成功分型。DVⅠ型碱基同源性为89.34%~99.77%,其同源性与2014年中国广州地区、2013年中国中山地区和2011年印度的DVⅠ型流行株接近。结论 2012年-2014年珠海市DV流行主要以Ⅰ型为主,流行方式属于周边地市或东南亚国家输入性病例引起的本地暴发。 展开更多
关键词 ⅰ型登革病毒 包膜蛋白基因 分子溯源分析
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东莞市2014—2017年Ⅰ型登革病毒流行情况及E基因序列分析 被引量：4
5
作者 陈仲威 张莉萍 +3 位作者 方昌勇 黄勇 李艳芬 张欣 《中国热带医学》 CAS 2018年第10期1016-1020,共5页
目的研究2014—2017年东莞市Ⅰ型登革病毒(DENV-1)流行情况,分析其可能的地域来源及基因特征。方法采用实时荧光PCR方法对2014—2017年东莞市疾病预防控制中心收到的登革热疫情样本进行核酸检测分型,阳性标本进行病毒分离及鉴定,扩增并... 目的研究2014—2017年东莞市Ⅰ型登革病毒(DENV-1)流行情况,分析其可能的地域来源及基因特征。方法采用实时荧光PCR方法对2014—2017年东莞市疾病预防控制中心收到的登革热疫情样本进行核酸检测分型,阳性标本进行病毒分离及鉴定,扩增并测定部分分离株E基因序列,共得到8株DENV-1及其E基因序列,与Genebank中选取的世界各地DENV-1流行株及原型株进行参考对比,用DNASTAR软件进行核苷酸、氨基酸序列分析和同源性比较,用Mega4.0.2软件进行分子分型和系统进化树构建。结果 665份标本中DENV阳性251份,其中DENV-1阳性占90.0%。以9月、10月为发病高峰期,占86.7%;男女比例为0.92∶1,20～<70岁年龄组发病例数最多,占75.1%;DENV-1阳性本地病例以虎门、麻涌、南城、厚街和莞城五个镇街最多,占76.4%。序列比对显示,8株DENV-1的E基因序列核苷酸同源性为90.2%～99.6%,氨基酸同源性为96.4%～100.0%,与选取的近年世界各地流行株的核苷酸与氨基酸同源性分别为89.2%～100.0%和90.2%～100.0%。系统进化树分析显示,2014—2017年东莞8株DENV-1分离株与我国广州、深圳及新加坡、马来西亚等东南亚国家当年或往年DENV-1流行株同源性较高,分属基因Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ型,但以基因Ⅰ、Ⅴ型为主。所有8株分离株与原型株进化距离较远。结论 2014—2017年东莞市登革病毒流行以DENV-1为主,流行基因亚型主要为基因Ⅰ型和基因Ⅴ型,流行方式为广深等周边地市及新加坡、马来西亚等东南亚各国输入病例引起的本地暴发流行。 展开更多
关键词 ⅰ型登革病毒(DENV-1) E基因 基因亚型 序列同源性 进化分析
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广东省东莞市2017—2018年登革病毒E基因进化分析 被引量：5
6
作者 陈仲威 张莉萍 +2 位作者 方昌勇 黄勇 李艳芬 《中国热带医学》 CAS 2019年第10期963-971,共9页
目的测定广东省东莞市2017—2018年Ⅰ~Ⅳ型登革病毒(DENV-1~DENV-4)的E基因序列,分析其系统进化情况及流行基因亚型,从分子水平探讨病毒来源。方法收集东莞市2017—2018年140例可疑登革热患者急性期血清,用实时荧光PCR方法检测病毒核酸... 目的测定广东省东莞市2017—2018年Ⅰ~Ⅳ型登革病毒(DENV-1~DENV-4)的E基因序列,分析其系统进化情况及流行基因亚型,从分子水平探讨病毒来源。方法收集东莞市2017—2018年140例可疑登革热患者急性期血清,用实时荧光PCR方法检测病毒核酸,阳性血清用C6/36细胞分离培养登革病毒,测定分离株E基因序列,绘制系统进化树,结合流行病学资料进行分子流行病学分析。结果140份急性期血清中DENV核酸阳性54份,阳性率38.6%,DENV-1阳性占53.7%。分离得到17株毒株。序列比对和系统进化分析显示,10株DENV-1分离株间核苷酸同源性为90.0%~99.9%,氨基酸同源性为96.6%~99.8%,分属基因Ⅰ型和基因Ⅴ型。7株基因Ⅰ型分离株与泰国2015年、缅甸2015年、中山2015年及越南2016年流行株核苷酸同源性较高(99.3%~99.9%),其中2018年本地株D2018078与2017年输入株D2017008核苷酸同源性达99.8%;3株基因Ⅴ型分离株与印度2014年、2017年株及新加坡2014年流行株核苷酸同源性较高(97.7%~99.1%)。4株DENV-2分离株间核苷酸同源性为91.0%~98.6%,推导氨基酸同源性为97.6%~99.8%,分属混合型和亚洲Ⅰ型,2株混合型分离株与马来西亚2014年、台湾2015年流行株核苷酸同源性较高(99.6%~99.7%);2株亚洲Ⅰ型分离株分别与越南2015年、泰国2011年流行株核苷酸同源性较高(99.3%~99.5%)。2株DENV-3分离株间核苷酸同源性为98.4%,氨基酸同源性为99.4%,均属基因Ⅰ型,与缅甸2017年、马来西亚2015年流行株核苷酸同源性较高(99.3%~99.7%)。1株DENV-4分离株与越南2013、2016年流行株同源性较高(99.3%~99.5%),属基因Ⅰ型。结论2017—2018年东莞市登革热的病原体主要为DENV-1,其次是DENV-2,各至少有2种基因亚型同时在流行;DENV-3和DENV-4各至少有1种基因亚型在流行。流行方式主要为南亚和东南亚国家及我国中山、台湾等地输入病例引起的本地暴发流行,存在输入引起本地感染的风险。 展开更多
关键词 ⅰ~Ⅳ型登革病毒(DENV-1~DENV-4) E基因 基因亚型 序列同源性 进化分析
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