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驴CSN3基因序列分析 被引量:2
1
作者 陈建兴 陈海伟 +2 位作者 毕晓丹 王银朝 雷战 《赤峰学院学报(自然科学版)》 2014年第14期11-13,共3页
家驴具有很大的市场开发潜力和价值.本研究通过生物信息学技术分析了家驴CSN3基因的序列特征,为家驴向肉用或乳用方向选育初步提供一定的分子依据.经分析研究发现家驴CSN3基因共包含五个外显子和四个内含子.初始转录物的前81nt为5'... 家驴具有很大的市场开发潜力和价值.本研究通过生物信息学技术分析了家驴CSN3基因的序列特征,为家驴向肉用或乳用方向选育初步提供一定的分子依据.经分析研究发现家驴CSN3基因共包含五个外显子和四个内含子.初始转录物的前81nt为5'UTR区,后205nt为3'UTR区,中间的549nt为CDS区.整个CDS区翻译出182个氨基酸构成的多肽.家驴的κ酪蛋白中的氨基酸以脯氨酸所占的比例最高(14.286%),其次为缬氨酸(10.989%),最低的为半胱氨酸、色氨酸和甘氨酸(所占比例都为0.5495%).各物种κ酪蛋白氨基酸序列间每个位点氨基酸替代数的平均值的大小能够较好反映物种间亲缘关系的远近.κ酪蛋白氨基酸序列能够很好地反映物种之间的亲缘关系,适合用于系统发育分析. 展开更多
关键词 CSN3基因 κ酪蛋白 序列分析
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与脐带间充质干细胞共培养促进奶牛乳腺上皮细胞乳蛋白合成及其机制 被引量:1
2
作者 赵艳坤 邵伟 +2 位作者 雒诚龙 武开乐 余雄 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期185-189,共5页
目的研究脐带间充质干细胞(UCMSC)调节奶牛乳腺上皮细胞(BMEC)乳蛋白合成的可能作用机制。方法利用TranswellTM小室将UCMSC和BMEC进行双层共培养,BMEC单纯培养为对照组,胰岛素样生长因子1受体(IGF-1R)抑制剂AG1024处理细胞,ELISA检测上... 目的研究脐带间充质干细胞(UCMSC)调节奶牛乳腺上皮细胞(BMEC)乳蛋白合成的可能作用机制。方法利用TranswellTM小室将UCMSC和BMEC进行双层共培养,BMEC单纯培养为对照组,胰岛素样生长因子1受体(IGF-1R)抑制剂AG1024处理细胞,ELISA检测上清IGF-1和β酪蛋白(CSN2)、κ酪蛋白(CSN3)含量变化,实时定量PCR检测Janus激酶2/信号转导子与转录激活子5(JAK2/STAT5)信号通路相关基因的相对表达丰度;再用JAK2信号通路阻断剂AG490孵育细胞,实时定量PCR检测CSN2、CSN3 mRNA的相对表达丰度。结果与UCMSC共培养后,BMEC的CSN2、CSN3合成量和CSN2、CSN3、JAK2、STAT5、E74样ETS转录因子5(ELF5)mRNA相对表达丰度均显著高于单纯培养的BMEC;AG1024处理后,显著降低BMEC的CSN2、CSN3合成量,显著降低CSN2、CSN3、JAK2、STAT5、ELF5 mRNA的相对表达丰度;给予AG490阻断后,显著降低CSN2、CSN3 mRNA相对表达丰度;在AG1024基础上,加入AG490后显著降低CSN2、CSN3 mRNA相对表达丰度。结论UCMSC能够通过IGF-1介导JAK2/STAT5信号通路,上调BMEC乳蛋白合成关键基因mRNA的表达丰度,促进其乳蛋白的合成。 展开更多
关键词 脐带间充质干细胞(UCMSC) 牛乳腺上皮细胞(BMEC) 共培养 蛋白 β酪蛋白(CSN2) κ酪蛋白(CSN3)
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牛κ酪蛋白基因变异及其与奶用性状的关系
3
作者 祁宏 苗永旺 《中国牛业科学》 2010年第4期51-55,共5页
文章综述了牛κ酪蛋白基因变异特征及其对生产性状的影响,并且对目前存在问题进行了讨论和展望。
关键词 κ酪蛋白 变异体 多态性 生产性状
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西藏牦牛、荷斯坦牛三个功能基因部分序列多态性的比较研究 被引量:3
4
作者 陈桂芳 谢庄 +2 位作者 强巴央宗 李齐发 土登 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期128-131,共4页
利用聚合酶链式反应 单链构象多态性 (PCR SSCP)技术和聚合酶链式反应 限制性内切酶片段长度多态性(PCR RFLP)技术 ,测定了西藏牦牛和荷斯坦牛催乳素基因、β 乳球蛋白基因和κ 酪蛋白基因三个功能基因部分序列多态性。结果显示 :西... 利用聚合酶链式反应 单链构象多态性 (PCR SSCP)技术和聚合酶链式反应 限制性内切酶片段长度多态性(PCR RFLP)技术 ,测定了西藏牦牛和荷斯坦牛催乳素基因、β 乳球蛋白基因和κ 酪蛋白基因三个功能基因部分序列多态性。结果显示 :西藏牦牛和荷斯坦牛在催乳素基因和κ 酪蛋白基因位点上存在多态性 ,而在 β 乳球蛋白基因位点均未发现D等位基因。 展开更多
关键词 西藏牦牛 荷斯坦牛 催乳素 Β-乳球蛋白 κ-酪蛋白 PCR-SSCP PCR-RFLP
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中国荷斯坦奶牛κ-酪蛋白基因第四外显子多态性与产奶性状的关联分析 被引量:15
5
作者 鞠志花 李秋玲 +5 位作者 王洪梅 李建斌 安利国 杨桂文 仲跻峰 王长法 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期1312-1318,共7页
以544头中国荷斯坦奶牛为研究对象,以κ-酪蛋白基因为产奶性状的候选基因,扩增779bp的片段,结合测序结果采用PCR-RFLP方法来检测κ-酪蛋白基因3个位点的多态性。结果在exon4的第10891bp、10927bp和10988bp处分别发生了T/C、C/A错义突变... 以544头中国荷斯坦奶牛为研究对象,以κ-酪蛋白基因为产奶性状的候选基因,扩增779bp的片段,结合测序结果采用PCR-RFLP方法来检测κ-酪蛋白基因3个位点的多态性。结果在exon4的第10891bp、10927bp和10988bp处分别发生了T/C、C/A错义突变和G/A同义突变,据此分别选择了TaqⅠ、HindⅢ、PstⅠ等3种限制性内切酶检测了其多态性。发现3个位点的A、B等位基因在群体中都有分布,且处于低度多态;A和B等位基因的频率分别为86.03%和13.97%;AA,AB和BB基因型频率分别为73.71%,24.63%和1.66%;χ2适合性检验表明,该群体在这3个位点的突变达到Hardy-Weinberg平衡状态(P>0.05);BB和AB基因型个体乳脂率显著高于AA基因型个体(P<0.05),AB基因型个体脂蛋白比显著高于AA基因型个体(P<0.05),但不同基因型对产奶量和乳蛋白率没有显著影响;3个位点的酶切多态性在所研究群体中是紧密连锁的。说明在中国荷斯坦奶牛群体中,κ-酪蛋白B等位基因可作为改良奶牛乳脂率性状的分子遗传标记。 展开更多
关键词 荷斯坦奶牛 κ-酪蛋白基因 多态性 PCR-RFLP 产奶性状
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精氨酸水平对奶牛乳腺上皮细胞体外生长及κ-酪蛋白基因表达的影响 被引量:13
6
作者 徐柏林 王梦芝 +4 位作者 张兴夫 哈斯 王春艳 敖长金 王洪荣 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期852-858,共7页
本试验旨在研究培养基中添加不同浓度的精氨酸(Arg)对乳腺上皮细胞体外增殖及κ-酪蛋白(CSN3)基因表达的影响。选用中国荷斯坦奶牛乳腺上皮细胞进行体外培养,以无Arg的培养基(0.00 mg/L)为对照(0组),试验培养基分别添加69.50(0.25组)、1... 本试验旨在研究培养基中添加不同浓度的精氨酸(Arg)对乳腺上皮细胞体外增殖及κ-酪蛋白(CSN3)基因表达的影响。选用中国荷斯坦奶牛乳腺上皮细胞进行体外培养,以无Arg的培养基(0.00 mg/L)为对照(0组),试验培养基分别添加69.50(0.25组)、139.00(0.50组)、278.00(1.00组)、556.00(2.00组)、1 112.00(4.00组)和2 224.00 mg/L(8.00组)的精氨酸。结果表明:Arg能促进乳腺上皮细胞的增殖,24 h时,0.25~4.00组与0组相比均差异显著(P<0.05),8.00组与0组相比差异不显著(P>0.05);48和72 h时,各试验组与0组相比均差异显著(P<0.05)。Arg能促进CSN3基因的表达,各试验组与0组相比均差异显著(P<0.05),当Arg浓度为556.00 mg/L时,CSN3基因表达量最高。结果提示,Arg对乳腺上皮细胞增殖及CSN3基因表达均具有明显的促进作用,且在Arg浓度为69.50~1 112.00 mg/L时促细胞增殖效果较佳,在Arg浓度为556.00 mg/L时促CSN3基因表达作用最强。 展开更多
关键词 乳腺上皮细胞 精氨酸 细胞增殖 κ-酪蛋白基因 基因表达
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氢化可的松对奶牛乳腺上皮细胞酪蛋白合成的影响 被引量:9
7
作者 田青 王洪荣 王梦芝 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第10期1663-1670,共8页
旨在研究培养基中添加不同浓度的氢化可的松对奶牛乳腺上皮细胞生长、κ-酪蛋白(CSN3)和糖皮质激素受体(NR3C1)基因表达及其κ-酪蛋白和总酪蛋白相对含量的影响。选用中国荷斯坦奶牛的乳腺上皮细胞进行体外培养,在以无血清无激素的生长... 旨在研究培养基中添加不同浓度的氢化可的松对奶牛乳腺上皮细胞生长、κ-酪蛋白(CSN3)和糖皮质激素受体(NR3C1)基因表达及其κ-酪蛋白和总酪蛋白相对含量的影响。选用中国荷斯坦奶牛的乳腺上皮细胞进行体外培养,在以无血清无激素的生长培养基为对照的基础上,分别添加氢化可的松1、10、100和1 000ng·mL-1,测定CSN3和NR3C1基因表达量以及κ-酪蛋白和总酪蛋白相对含量的变化。结果表明:1)培养时间<20h,1~1 000ng·mL-1氢化可的松对健康奶牛乳腺上皮细胞增殖的影响差异不显著(P>0.05),但1 000ng·mL-1组细胞增殖较慢;培养时间>20h,1 000ng·mL-1的氢化可的松显著抑制了奶牛乳腺上皮细胞的增殖(P<0.05)。2)1~100ng·mL-1的氢化可的松对健康奶牛乳腺上皮细胞CSN3、NR3C1基因表达具有显著地促进作用(P<0.05),其中1~10ng·mL-1的氢化可的松能够显著增加奶牛乳腺上皮细胞κ-酪蛋白和总酪蛋白的相对含量(P<0.05)。3)氢化可的松的促进乳蛋白合成作用具有一定的剂量依赖关系,小剂量的氢化可的松(1ng·mL-1)有利于奶牛乳腺上皮细胞乳蛋白的合成,随着添加剂量的增加,尤其是大于1 000ng·mL-1,它的促乳蛋白合成作用逐渐减弱,甚至抑制了奶牛乳腺细胞的增长进而抑制乳腺乳蛋白的合成。结果提示,随着氢化可的松浓度的增加,CSN3和NR3C1基因的表达量及CSN3和总酪蛋白相对含量均呈下降的趋势,其中以1ng·mL-1的添加效果最好。 展开更多
关键词 氢化可的松 糖皮质激素受体 κ-酪蛋白 酪蛋白 奶牛乳腺上皮细胞 基因表达 细胞增殖
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亮氨酸对κ-酪蛋白合成的影响及相关信号通路的研究 被引量:9
8
作者 庞学燕 季昀 +1 位作者 田青 王洪荣 《中国畜牧杂志》 CAS 北大核心 2013年第9期38-41,共4页
本研究旨在探讨其他氨基酸缺乏条件下补充亮氨酸对奶牛乳腺上皮细胞κ-酪蛋白基因表达和蛋白合成以及细胞增殖的影响,并从mRNA水平探究mTOR信号通路介导的蛋白质合成的重要性。处理组1在对照组(稀释100倍的培养基)的基础上补充亮氨酸,... 本研究旨在探讨其他氨基酸缺乏条件下补充亮氨酸对奶牛乳腺上皮细胞κ-酪蛋白基因表达和蛋白合成以及细胞增殖的影响,并从mRNA水平探究mTOR信号通路介导的蛋白质合成的重要性。处理组1在对照组(稀释100倍的培养基)的基础上补充亮氨酸,处理组2在处理组1的基础上添加mTOR信号通路上游抑制剂,分别采用RT-qPCR技术和ELISA法测定基因的相对表达量和蛋白合成量,CCK-8法测定细胞增殖。结果表明:亮氨酸显著促进了κ-酪蛋白基因表达和蛋白合成(P<0.05),而添加抑制剂极显著降低了这种作用(P<0.01);各处理对蛋白质合成信号通路相关基因mTOR、S6K1、4EBP1、eIF4E、eEF2相对表达量均有一定影响;抑制剂能显著抑制细胞增殖(P<0.05)。结果提示,补充亮氨酸能显著促进κ-酪蛋白的合成,这可能与mTOR信号通路介导蛋白质合成有关,此外,mTOR信号通路也可调控奶牛乳腺上皮细胞的增殖。 展开更多
关键词 乳腺上皮细胞 CSN3 κ-酪蛋白 MTOR 细胞增殖 奶牛
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漏芦对奶山羊乳腺上皮细胞酪蛋白合成相关基因表达的影响 被引量:4
9
作者 刘莉莉 杨炳友 《河南农业科学》 北大核心 2020年第4期160-166,共7页
为探讨漏芦对泌乳动物乳腺酪蛋白合成的调节机制,利用细胞活力分析仪检测漏芦乙醇提取物(25、50、100、200、400、600、800μg/mL)对奶山羊乳腺上皮细胞活力和增殖能力的影响,并选择不抑制细胞生长增殖的乙醇提取物剂量,研究其对奶山羊... 为探讨漏芦对泌乳动物乳腺酪蛋白合成的调节机制,利用细胞活力分析仪检测漏芦乙醇提取物(25、50、100、200、400、600、800μg/mL)对奶山羊乳腺上皮细胞活力和增殖能力的影响,并选择不抑制细胞生长增殖的乙醇提取物剂量,研究其对奶山羊乳腺上皮细胞酪蛋白合成相关基因mRNA表达的影响;采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术检测乳腺上皮细胞αs1-酪蛋白(CSN1S1)、αs2-酪蛋白(CSN1S2)、β-酪蛋白(CSN2)、κ-酪蛋白(CSN3)、信号转导与转录激活因子5(STAT5)、蛋白质酪氨酸激酶2(JAK2)、哺乳动物雷帕霉素蛋白(mTOR)、真核细胞翻译启动因子4E结合蛋白1(4EBP1)及核糖体蛋白S6激酶1(S6K1)基因的mRNA表达水平。结果表明,较高剂量(200~800μg/mL)的漏芦乙醇提取物明显抑制了奶山羊乳腺上皮细胞的活力和增殖能力(P<0.05),故后续试验添加25、50、100μg/mL的漏芦乙醇提取物处理乳腺上皮细胞;漏芦乙醇提取物可明显上调细胞酪蛋白基因CSN1S1、CSN1S2、CSN2、CSN3及酪蛋白合成相关基因STAT5、JAK2、mTOR、S6K1的mRNA表达水平(P<0.05),但显著下调了4EBP1基因的mRNA表达水平(P<0.05)。由此可见,漏芦乙醇提取物能通过调节奶山羊乳腺上皮细胞酪蛋白合成相关基因的表达,进而促进乳腺细胞酪蛋白的合成。 展开更多
关键词 漏芦 奶山羊 乳腺上皮细胞 αs1-酪蛋白 αs2-酪蛋白 Β-酪蛋白 κ-酪蛋白 基因表达
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κ-酪蛋白基因及其功能研究进展 被引量:7
10
作者 鞠志花 杨桂文 +1 位作者 王长法 安利国 《中国畜牧兽医》 CAS 2008年第10期58-60,共3页
κ-酪蛋白(kappa-casein,-κCN)是牛乳中的一种重要的蛋白质。作者简要介绍了κ-酪蛋白基因的结构、遗传多态性与产奶性状的关系及其编码蛋白质的生物学功能等方面的研究进展。
关键词 κ-酪蛋白 遗传多态性 生物学功能
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亮氨酸水平对奶牛乳腺上皮细胞增殖及κ-酪蛋白合成相关基因表达的影响 被引量:7
11
作者 代文婷 李爱军 +1 位作者 郑楠 王加启 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期1559-1566,共8页
本试验旨在研究添加不同水平亮氨酸对乳腺上皮细胞体外增殖及κ-酪蛋白(CSN3)合成相关基因表达的影响。选用中国荷斯坦奶牛乳腺上皮细胞进行体外培养,以不含有亮氨酸的培养基为对照组(0×组),试验组培养基分别添加0.112 5(0.25×... 本试验旨在研究添加不同水平亮氨酸对乳腺上皮细胞体外增殖及κ-酪蛋白(CSN3)合成相关基因表达的影响。选用中国荷斯坦奶牛乳腺上皮细胞进行体外培养,以不含有亮氨酸的培养基为对照组(0×组),试验组培养基分别添加0.112 5(0.25×组)、0.225 0(0.5×组)、0.450 0(1×组)、0.900 0(2×组)、1.800 0(4×组)、3.600 0(8×组)、7.200 0(16×组)、14.400 0 mmol/L(32×组)的亮氨酸。试验采用噻唑蓝(MTT)比色法检测奶牛乳腺上皮细胞增殖;运用实时定量PCR检测CSN3合成相关基因相对表达量。结果表明:亮氨酸能够提高乳腺上皮细胞的相对增殖率。24和48 h时,除0.25×组外,其余各组与对照组相比细胞均差异均显著(P<0.05);72 h时,各组与对照组相比差异均显著(P<0.05);其中2×组的促增殖作用都达到最强。亮氨酸能够促进哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(m TOR)、核糖体蛋白S6激酶1(S6K1)、蛋白质酪氨酸激酶2(JAK2)、转录激活因子5(STAT5)和CSN3基因的表达,抑制真核细胞翻译启动因子4E结合蛋白1(4EBP1)基因的表达,其中2×组对m TOR、S6K1、JAK2、STAT5和CSN3基因的上调表达最强,而对4EBP1基因的下调表达最强。总之,添加亮氨酸能够促进奶牛乳腺上皮细胞增殖和CSN3合成相关基因(除4EBP1)表达,亮氨酸水平为0.900 0 mmol/L时,其促进作用均达到最大。 展开更多
关键词 亮氨酸 细胞增殖 κ-酪蛋白 基因表达
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天祝白牦牛α_(S1)-酪蛋白基因和κ-酪蛋白基因的PCR-RFLP研究 被引量:5
12
作者 白文林 郑玉才 +2 位作者 尹荣焕 罗光彬 朱建勇 《湖北农业科学》 北大核心 2005年第3期15-17,共3页
利用PCR—RFLP技术熏检测了天祝白牦牛αS1-酪蛋白(αS1-casein,αS1-CN)基因和κ-酪蛋白(κ-casein,κ-CN)基因部分序列的遗传多态性熏结果表明:天祝白牦牛群体αS1-CN基因表现单态,κ-CN基因存在遗传多态性。κ-CN基因PCR-RFLP位点等... 利用PCR—RFLP技术熏检测了天祝白牦牛αS1-酪蛋白(αS1-casein,αS1-CN)基因和κ-酪蛋白(κ-casein,κ-CN)基因部分序列的遗传多态性熏结果表明:天祝白牦牛群体αS1-CN基因表现单态,κ-CN基因存在遗传多态性。κ-CN基因PCR-RFLP位点等位基因A和B的基因频率分别为0.0745和0.9255。κ-CN基因PCR-RFLP位点的基因型分布符合Hardy-Weinberg平衡定理(P>0.05)。天祝白牦牛群体内平均基因一致度、基因多样度和有效等位基因数分别为0.9311、0.0689和1.0739。 展开更多
关键词 天祝白牦牛 αS1-广酪蛋白基因 κ-酪蛋白基因 PCR—RFLP
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中国荷斯坦牛κ-酪蛋白基因第4和第5外显子多态性与泌乳性状的关联分析 被引量:7
13
作者 鞠志花 王洪梅 +6 位作者 李秋玲 黄金明 李建斌 安利国 杨桂文 仲跻峰 王长法 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第9期3279-3287,共9页
【目的】研究中国荷斯坦牛κ-酪蛋白基因第4和第5外显子多态性与泌乳性状的关联性,为培育高乳蛋白及高乳脂率奶牛提供参考依据。【方法】采用DNA测序、PCR-RFLP和CRS-PCR技术,对544头中国荷斯坦牛κ-酪蛋白基因的外显子4和5序列进行研究... 【目的】研究中国荷斯坦牛κ-酪蛋白基因第4和第5外显子多态性与泌乳性状的关联性,为培育高乳蛋白及高乳脂率奶牛提供参考依据。【方法】采用DNA测序、PCR-RFLP和CRS-PCR技术,对544头中国荷斯坦牛κ-酪蛋白基因的外显子4和5序列进行研究,通过SHEsis软件和PHASE软件进行配对连锁不平衡分析和单倍型分析。【结果】发现6个新的SNPs,包括外显子5上A12907G、G12950A、C12989T、A13028G、T12980C共5个SNP位点,证实前4个位点紧密连锁;外显子4上A10996T共1个SNP位点。单位点基因型与泌乳性状关联分析表明,A10996T突变位点的TT和AT基因型个体乳脂率显著高于AA基因型个体(P<0.05);T12980C突变位点的TC和CC基因型个体乳脂率、乳蛋白率分别极显著(P<0.01)、显著(P<0.05)高于TT基因型个体;紧密连锁的4个突变位点的DE基因型个体乳脂率极显著高于DD基因型个体(P<0.01)。与泌乳性状的关联分析表明,共构建出7种单倍型,发现16种单倍型组合;其中H6H6单倍型组合个体乳脂率最高,H1H4次之;H1H4单倍型组合个体乳蛋白率最高;H5H6单倍型组合个体乳蛋白率及乳脂率最低。【结论】H1H4单倍型组合在乳蛋白率和乳脂率方面为有利单倍型组合,可作为选择高乳蛋白高乳脂率牛群的分子标记。 展开更多
关键词 中国荷斯坦牛 κ-酪蛋白基因 多态性 泌乳性状 单倍型
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酪蛋白三种组分的酶解特性研究 被引量:4
14
作者 苏银杰 王金水 高芸芳 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2013年第19期61-65,共5页
酪蛋白由3种成分组成,即αs-酪蛋白,β-酪蛋白,κ-酪蛋白。本文对酪蛋白的三种组分进行分离,用SDSPAGE电泳进行检测,得到相对纯度分别为89.50%、96.51%、90.99%。酪蛋白三种组分用胰蛋白酶进行酶解,对酶解物的水解度和粒度分布进行测定... 酪蛋白由3种成分组成,即αs-酪蛋白,β-酪蛋白,κ-酪蛋白。本文对酪蛋白的三种组分进行分离,用SDSPAGE电泳进行检测,得到相对纯度分别为89.50%、96.51%、90.99%。酪蛋白三种组分用胰蛋白酶进行酶解,对酶解物的水解度和粒度分布进行测定,酶解物的粒度分布用激光粒度分析仪测定。得到的结论是:在三种组分的酶解物中,αs-酪蛋白酶解物的水解度最高,随着酶解时间的延长,αs-酪蛋白酶解物中的粒径越来越小。β-酪蛋白酶解物在前12h水解度增加最少,β-酪蛋白酶解物在前6h粒度变化也不明显。κ-酪蛋白酶解物的水解度以线性形势增加,且κ-酪蛋白酶解10min内,粒径变化明显。 展开更多
关键词 αs-酪蛋白 Β-酪蛋白 κ-酪蛋白 水解度 粒度分布
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液相色谱法测定超高温灭菌乳中蛋白含量 被引量:2
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作者 兰丽 张彩霞 +10 位作者 高万东 余志宝 徐红 唐振鑫 范敏 杨明阳 田加美 张雪娇 张晶 贺晓鸣 郭素芳 《乳业科学与技术》 2022年第2期18-23,共6页
建立一种超高温(ultra high temperature,UHT)灭菌乳中α-酪蛋白、β-酪蛋白、κ-酪蛋白、α-乳白蛋白及β-乳球蛋白含量的液相色谱检测方法。采用含双[三(羟甲基)氨基甲烷]、盐酸胍、柠檬酸钠、二硫苏糖醇等的缓冲液及试剂使蛋白溶解变... 建立一种超高温(ultra high temperature,UHT)灭菌乳中α-酪蛋白、β-酪蛋白、κ-酪蛋白、α-乳白蛋白及β-乳球蛋白含量的液相色谱检测方法。采用含双[三(羟甲基)氨基甲烷]、盐酸胍、柠檬酸钠、二硫苏糖醇等的缓冲液及试剂使蛋白溶解变性,运用液相色谱仪紫外检测器进行检测,外标法定量。结果表明:各蛋白标准曲线线性良好,相关系数在0.995以上,加标回收率为95.2%~105.0%,检出限为0.01~0.02 g/100 mL,相对标准偏差为0.78%~2.70%。该方法具有分离效果好、重复性好、操作简便的特点,适用于UHT灭菌乳中α-酪蛋白、β-酪蛋白、κ-酪蛋白、α-乳白蛋白及β-乳球蛋白的定量分析。 展开更多
关键词 超高温灭菌乳 α-酪蛋白 Β-酪蛋白 κ-酪蛋白 Α-乳白蛋白 β-乳球蛋白 蛋白含量 液相色谱法
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亚油酸对奶牛乳腺上皮细胞乳脂肪和乳蛋白合成相关基因表达的影响 被引量:4
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作者 李大彪 李红磊 +4 位作者 邢媛媛 于永强 王卫云 陈玲 李平 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2016年第3期257-264,共8页
该文主要研究了添加不同浓度的亚油酸(顺-9,顺-12-十八碳二烯酸)(0、20、40、80、120μmol/L)对奶牛乳腺上皮细胞(bovine mammary epithelial cells,BMECs)乳脂和乳蛋白合成相关基因表达的影响。通过MTT法检测细胞活力,利用甘油... 该文主要研究了添加不同浓度的亚油酸(顺-9,顺-12-十八碳二烯酸)(0、20、40、80、120μmol/L)对奶牛乳腺上皮细胞(bovine mammary epithelial cells,BMECs)乳脂和乳蛋白合成相关基因表达的影响。通过MTT法检测细胞活力,利用甘油三酯试剂盒检测BMECs内甘油三酯(triglyceride,TAG)的合成量,实时荧光定量PCR检测乳脂和乳蛋白合成相关基因的表达。结果表明:(1)添加20μmol/L的亚油酸能促进BMECs的增殖,120μmol/L的亚油酸组BMECs的相对增殖率显著低于对照组(P〈0.05);(2)40μmol/L和80μmol/L亚油酸添加组BMECs中TAG的合成量显著高于对照组(P〈0.05);(3)添加20μmol/L亚油酸显著上调αs1-酪蛋白(casein alpha s1 identifiers symbols,CSN1S1)和κ-酪蛋白(κ-casein,CSN3)基因的表达,而80μmol/L和120μmol/L亚油酸显著下调CSN1S1和CSN3基因的表达(P〈0.05);(4)120μmol/L亚油酸上调了真核启始4E结合蛋白-1(eukaryotic initiation factor 4E-binding-protein-1,4EBP1)基因的表达,下调了核糖体蛋白S6激酶-1(ribosomal protein S6 kinase-1,RPS6K1)基因的表达(P〈0.05);(5)添加20~120μmol/L亚油酸显著下调脂肪酸合酶(fatty acid synthase,FASN)、硬脂酰辅酶A去饱和酶(stearoyl-Co A desaturase,SCD)、脂肪酸结合蛋白-3(fatty acid-binding protein-3,FABP3)的基因表达(P〈0.05);(6)20μmol/L亚油酸添加组过氧化物酶体增殖物激活受体(peroxisome proliferator-activated receptorγ,PPARG)基因表达量显著高于对照组,而120μmol/L亚油酸组PPARG、固醇调节元件结合因子-1(sterol regulatory element binding factor-1,SREBF1)的表达量显著低于对照组(P〈0.05)。综上所述,20~40μmol/L的亚油酸对BMECs乳脂肪和乳蛋白合成有较好的促进效果。 展开更多
关键词 奶牛乳腺上皮细胞 细胞活力 αs1-酪蛋白 κ-酪蛋白 甘油三酯 乳脂合成相关基因
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天祝白牦牛三个功能基因部分序列的PCR-RFLP研究 被引量:4
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作者 白文林 郑玉才 +3 位作者 尹荣焕 朱建勇 颜卉 罗光彬 《江苏农业科学》 CSCD 北大核心 2005年第4期84-86,共3页
采用PCR-RFLP技术,检测了天祝白牦牛αS1-酪蛋白(αS1-casein,αS1-CN)基因、κ-酪蛋白(κ-casein,κ-CN)基因和生长激素(growthhormone,GH)基因部分序列的遗传多态性。结果表明,天祝白牦牛群体中αS1-CN基因PCR-RFLP位点呈单态;κ-CN... 采用PCR-RFLP技术,检测了天祝白牦牛αS1-酪蛋白(αS1-casein,αS1-CN)基因、κ-酪蛋白(κ-casein,κ-CN)基因和生长激素(growthhormone,GH)基因部分序列的遗传多态性。结果表明,天祝白牦牛群体中αS1-CN基因PCR-RFLP位点呈单态;κ-CN基因和GH基因两个PCR-RFLP位点均呈多态性。κ-CN基因PCR-RFLP位点等位基因A和B的基因频率分别为0.0745和0.9255,GH基因PCR-RFLP位点等位基因A和B的基因频率分别为0.1277和0.8723;该3个位点平均基因一致度和基因多样度分别为0.8798和0.1202。 展开更多
关键词 天祝白牦牛 αS1-酪蛋白基因 κ-酪蛋白基因 生长激素基因 多态性
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辣木凝乳酶水解酪蛋白位点及其酪蛋白磷酸肽、酪蛋白糖巨肽 被引量:2
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作者 施娅楠 张家艳 黄艾祥 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2021年第10期104-110,共7页
基于十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳,液相色谱-串联质谱法研究辣木凝乳酶对酪蛋白的酶切位点和水解特性,并分析该凝乳酶水解产生的酪蛋白糖巨肽和酪蛋白磷酸肽。结果表明,辣木凝乳酶酶切κ-酪蛋白的Arg 93-His 94位点导致凝乳,区别... 基于十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳,液相色谱-串联质谱法研究辣木凝乳酶对酪蛋白的酶切位点和水解特性,并分析该凝乳酶水解产生的酪蛋白糖巨肽和酪蛋白磷酸肽。结果表明,辣木凝乳酶酶切κ-酪蛋白的Arg 93-His 94位点导致凝乳,区别于其他已报道的凝乳酶,具有明显特异性。酶作用下κ-酪蛋白的米氏常数K_(m)=0.49 mg/mL,最大反应速率V_(m)=45.2 U/min,有效促进酪蛋白胶束的聚集和凝乳。该酶对α-、β-、κ-酪蛋白产生不同程度的水解,对α-酪蛋白的水解速度最快,说明其适用于软质奶酪的加工。以酪蛋白为底物,通过钡-乙醇沉淀法得到酪蛋白磷酸肽(casein phosphopeptides,CPPs),产率为15.87%,得到的CPPs可以使钙沉淀推迟23 min,有利于钙离子被肠道有效吸收。以水牛乳为底物时,乳凝固后析出的乳清中含酪蛋白糖巨肽6.61 mg/mL,糖基化程度477.527μg/mg。研究为新型植物凝乳酶的研发,及其在奶酪、酪蛋白活性肽等产品的应用提供科学依据。 展开更多
关键词 辣木凝乳酶 酶切位点 κ-酪蛋白 酪蛋白磷酸肽 酪蛋白糖巨肽
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荷斯坦牛κ-酪蛋白基因分型KASP检测方法的建立与应用
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作者 赵凤 刘林 +6 位作者 杨宇泽 吕小青 麻柱 赵春颖 路永强 张建聪 邹杨 《中国奶牛》 2023年第7期49-52,共4页
为筛选κ-酪蛋白优势基因型,本研究设计4个SNP位点,利用基因组检测已知CSN3基因型的13头牛,采集抗凝血,提取基因组DNA,采用竞争性等位基因特异性聚合酶链式反应(Kompetitive Allele Specific PCR,KASP)对样本进行分型,CSN3基因有AA、BB... 为筛选κ-酪蛋白优势基因型,本研究设计4个SNP位点,利用基因组检测已知CSN3基因型的13头牛,采集抗凝血,提取基因组DNA,采用竞争性等位基因特异性聚合酶链式反应(Kompetitive Allele Specific PCR,KASP)对样本进行分型,CSN3基因有AA、BB、EE、AB、AE、BE六种基因型。本研究实现了对北京地区213头荷斯坦种公牛及1003头母牛中CSN3三种常见变异体的全面筛选,从育种角度出发,基于κ-酪蛋白不同基因型与奶酪生产的产量和质量相关性,利用分子检测方法筛选与优良性状的优势基因型,发掘荷斯坦牛特色优质种质资源,为牧场选择合适的荷斯坦牛,提高乳蛋白率,从种源解决相关领域的技术瓶颈。 展开更多
关键词 荷斯坦牛 κ-酪蛋白 基因分型 检测方法
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κ-酪蛋白多态性对水牛乳酪蛋白体外消化性及消化产物生物活性的影响 被引量:4
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作者 黄子珍 黄丽 +3 位作者 杨攀 曾庆坤 李玲 王雨欣 《饲料研究》 CAS 北大核心 2020年第12期1-6,共6页
为研究κ-酪蛋白(κ-casein,κ-CN)多态性对水牛乳酪蛋白消化特性的影响,以水牛乳κ-CN多态性为依据,对不同κ-CN亚型的水牛乳酪蛋白进行体外模拟胃肠消化,采用聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和邻苯二甲醛(OPA)水解度法分析其在消化过程... 为研究κ-酪蛋白(κ-casein,κ-CN)多态性对水牛乳酪蛋白消化特性的影响,以水牛乳κ-CN多态性为依据,对不同κ-CN亚型的水牛乳酪蛋白进行体外模拟胃肠消化,采用聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和邻苯二甲醛(OPA)水解度法分析其在消化过程中的情况,测定消化产物的抗氧化活性和血管紧张素转化酶(ACE)抑制活性。结果表明:水牛乳κ-CN存在AA、BB、AB、AC 4种亚型,不同κ-CN亚型的水牛乳酪蛋白的体外消化性存在差异,AB型酪蛋白消化水解最快,其次为BB型,AB型与AC型消化速度相近;不同κ-CN亚型的水牛乳酪蛋白消化产物具有一定的抗氧化性和ACE抑制活性。各κ-CN亚型的酪蛋白消化产物对ABTS自由基清除能力差别不大;BB、AA、AB型的亚铁螯合力相当,高于AC型;羟基自由基清除能力最高的是AC型;AA、AC型对ACE抑制活性高于AB、BB型。 展开更多
关键词 水牛乳 κ-酪蛋白 多态性 体外消化性 生物活性
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