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基于β-catenin/Lef1相互作用为靶标的新型抗肿瘤药物高通量筛选模型的建立
被引量：
8
1
作者
陈云雨
牛夏忆
+1 位作者
李妍
刘晓平
《生物工程学报》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第4期707-717,共11页
旨在以β-catenin/Lef1相互作用为靶标,建立基于ELISA原理的适用于靶向β-catenin/Lef1相互作用小分子抑制剂筛选的高通量筛选模型。利用DNA重组技术,将构建的β-catenin-pET-30a(+)重组质粒转化大肠杆菌Escherichia coli Rosetta (DE3)...
旨在以β-catenin/Lef1相互作用为靶标,建立基于ELISA原理的适用于靶向β-catenin/Lef1相互作用小分子抑制剂筛选的高通量筛选模型。利用DNA重组技术,将构建的β-catenin-pET-30a(+)重组质粒转化大肠杆菌Escherichia coli Rosetta (DE3),经诱导培养后进行β-catenin原核表达。采用亲和层析方法分离纯化β-catenin后,以GSTPulldown实验进行生物学活性鉴定。利用ELISA原理建立β-catenin/GST-Lef1结合的分子模型,通过优选GST-Lef1最佳包被浓度和β-catenin最佳反应浓度,建立适用于靶向β-catenin/Lef1相互作用小分子抑制剂筛选的高通量筛选模型。SDS-PAGE和Western blotting实验证实β-catenin的原核表达。GST Pulldown实验证实纯化的β-catenin具有良好的生物学活性。通过对基于ELISA原理建立的β-catenin/GST-Lef1结合的分子模型优化,选用10μg/mL GST-Lef1和6μg/mLβ-catenin建立ELISA高通量筛选模型,其Z?因子为0.76。本研究成功建立了基于ELISA原理的β-catenin/GST-Lef1结合的分子模型,为靶向β-catenin/Lef1相互作用小分子抑制剂的高通量筛选奠定了基础。
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关键词
Wnt抑制剂
β
-
catenin
β
-
catenin
/
lef
1相互作用
酶联免疫吸附实验
高通量筛选
原文传递
靶向β-catenin/TCF4相互作用抑制剂在肿瘤分子治疗中的研究进展
被引量：
2
2
作者
付正豪
闫干干
+2 位作者
戚海燕
刘晓平
陈云雨
《药学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第5期1238-1245,共8页
经典Wnt信号通路的异常活化与恶性肿瘤的发生与发展密切相关,β-catenin/TCF4 (T-cell factor 4)相互作用作为Wnt信号通路中的"分子开关",促进了肿瘤的转移与复发,被认为是广谱高选择性抗肿瘤药物开发的理想靶标之一。目前, P...
经典Wnt信号通路的异常活化与恶性肿瘤的发生与发展密切相关,β-catenin/TCF4 (T-cell factor 4)相互作用作为Wnt信号通路中的"分子开关",促进了肿瘤的转移与复发,被认为是广谱高选择性抗肿瘤药物开发的理想靶标之一。目前, PKF222-815、iCRT3/5/14、LF3和血根碱等靶向β-catenin/TCF4相互作用的抑制剂已在结直肠癌和肝癌等肿瘤的实验治疗中展现出良好的应用前景。本文将对β-catenin分子结构、生物学功能及β-catenin/TCF4相互作用抑制剂的研究进展进行综述和展望,以期为新型高选择性Wnt抑制剂的筛选与发现提供有益的借鉴和参考。
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关键词
Wnt抑制剂
β
-
catenin
/TCF4相互作用
β
-
catenin
/
lef
1相互作用
蛋白质-蛋白质相互作用
抗肿瘤作用
原文传递
题名
基于β-catenin/Lef1相互作用为靶标的新型抗肿瘤药物高通量筛选模型的建立
被引量：
8
1
作者
陈云雨
牛夏忆
李妍
刘晓平
机构
皖南医学院药学院新药筛选与评价中心
中国科学院长春应用化学研究所化学生物学实验室
中国医学科学院-北京协和医学院医药生物技术研究所国家新药(微生物)筛选中心
出处
《生物工程学报》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第4期707-717,共11页
基金
国家自然科学基金(No.81703546)
安徽省自然科学基金(No.1808085QH265)
+2 种基金
吉林省科技发展计划(No.20160520045JH)
皖南医学院博士科研启动基金(No.RCQD201617)
皖南医学院大学生科研资助金(No.WK2018S54)资助~~
文摘
旨在以β-catenin/Lef1相互作用为靶标,建立基于ELISA原理的适用于靶向β-catenin/Lef1相互作用小分子抑制剂筛选的高通量筛选模型。利用DNA重组技术,将构建的β-catenin-pET-30a(+)重组质粒转化大肠杆菌Escherichia coli Rosetta (DE3),经诱导培养后进行β-catenin原核表达。采用亲和层析方法分离纯化β-catenin后,以GSTPulldown实验进行生物学活性鉴定。利用ELISA原理建立β-catenin/GST-Lef1结合的分子模型,通过优选GST-Lef1最佳包被浓度和β-catenin最佳反应浓度,建立适用于靶向β-catenin/Lef1相互作用小分子抑制剂筛选的高通量筛选模型。SDS-PAGE和Western blotting实验证实β-catenin的原核表达。GST Pulldown实验证实纯化的β-catenin具有良好的生物学活性。通过对基于ELISA原理建立的β-catenin/GST-Lef1结合的分子模型优化,选用10μg/mL GST-Lef1和6μg/mLβ-catenin建立ELISA高通量筛选模型,其Z?因子为0.76。本研究成功建立了基于ELISA原理的β-catenin/GST-Lef1结合的分子模型,为靶向β-catenin/Lef1相互作用小分子抑制剂的高通量筛选奠定了基础。
关键词
Wnt抑制剂
β
-
catenin
β
-
catenin
/
lef
1相互作用
酶联免疫吸附实验
高通量筛选
Keywords
Wnt
inhibitors
β
-
catenin
β
-
catenin
/
lef
1
interaction
ELISA
high
throughput
screening
分类号
R91 [医药卫生—药学]
原文传递
题名
靶向β-catenin/TCF4相互作用抑制剂在肿瘤分子治疗中的研究进展
被引量：
2
2
作者
付正豪
闫干干
戚海燕
刘晓平
陈云雨
机构
皖南医学院药物筛选与评价研究所
出处
《药学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第5期1238-1245,共8页
基金
国家自然科学基金资助项目(81703546)
安徽省自然科学基金资助项目(1808085QH265)
安徽省高校自然科学研究重大项目(KJ2019ZD30)。
文摘
经典Wnt信号通路的异常活化与恶性肿瘤的发生与发展密切相关,β-catenin/TCF4 (T-cell factor 4)相互作用作为Wnt信号通路中的"分子开关",促进了肿瘤的转移与复发,被认为是广谱高选择性抗肿瘤药物开发的理想靶标之一。目前, PKF222-815、iCRT3/5/14、LF3和血根碱等靶向β-catenin/TCF4相互作用的抑制剂已在结直肠癌和肝癌等肿瘤的实验治疗中展现出良好的应用前景。本文将对β-catenin分子结构、生物学功能及β-catenin/TCF4相互作用抑制剂的研究进展进行综述和展望,以期为新型高选择性Wnt抑制剂的筛选与发现提供有益的借鉴和参考。
关键词
Wnt抑制剂
β
-
catenin
/TCF4相互作用
β
-
catenin
/
lef
1相互作用
蛋白质-蛋白质相互作用
抗肿瘤作用
Keywords
Wnt
inhibitor
β
-
catenin
/TCF4
interaction
β
-
catenin
/
lef
1
interaction
protein-protein
interaction
anticancer
activity
分类号
R966 [医药卫生—药理学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
基于β-catenin/Lef1相互作用为靶标的新型抗肿瘤药物高通量筛选模型的建立
陈云雨
牛夏忆
李妍
刘晓平
《生物工程学报》
CAS
CSCD
北大核心
2019
8
原文传递
2
靶向β-catenin/TCF4相互作用抑制剂在肿瘤分子治疗中的研究进展
付正豪
闫干干
戚海燕
刘晓平
陈云雨
《药学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2021
2
原文传递
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