期刊文献+
共找到10篇文章
< 1 >
每页显示 20 50 100
昆虫糖基水解酶20家族β-N-乙酰己糖胺酶研究进展 被引量:6
1
作者 屈明博 刘田 +2 位作者 陈磊 陈琦 杨青 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期1303-1312,共10页
糖基水解酶20家族β-N-乙酰己糖胺酶是N-乙酰己糖胺代谢过程中一个重要的酶,其可将位于非还原端以β糖苷键连接的N-乙酰己糖胺从寡糖及糖复合物中水解下来。昆虫糖基水解酶20家族β-N-乙酰已糖胺酶参与昆虫多个生理过程,包括表皮几丁质... 糖基水解酶20家族β-N-乙酰己糖胺酶是N-乙酰己糖胺代谢过程中一个重要的酶,其可将位于非还原端以β糖苷键连接的N-乙酰己糖胺从寡糖及糖复合物中水解下来。昆虫糖基水解酶20家族β-N-乙酰已糖胺酶参与昆虫多个生理过程,包括表皮几丁质水解、蛋白质N糖基化修饰、糖复合物水解及精卵识别,因此可能成为生态农药设计的潜在靶标,受到国内外学者的普遍关注。根据昆虫20家族β-N-乙酰己糖胺酶的进化关系和生理功能,可以将其分为4个亚家族,分别为Hex1、Hex2、Hex3和Hex4。Hex1主要在昆虫蜕皮时期的表皮中表达,RNA干扰该基因能够导致昆虫在发育过程中不能正常蜕皮而死亡。通过酶学性质研究发现,Hex1能够专一性水解以β1-4糖苷键连接的几丁质寡糖底物,而不能水解以其他形式连接的底物,是专一性的参与几丁质水解的β-N-乙酰己糖胺酶。目前获得的唯一一个昆虫β-N-乙酰己糖胺酶的晶体结构来自于亚洲玉米螟的OfHex1,其参与底物结合的"+1"位点存在一个特殊的三明治结构,使得Hex1对几丁质寡糖具有高度的选择性和水解活性。Hex2在双翅目昆虫中并不存在,与人类的β-N-乙酰己糖胺酶具有高度的相似性,RNA干扰该基因的表达能够导致幼虫化蛹时异常,成虫翅、附肢、触角等异常。通过酶学性质研究表明,Hex2能够水解释放几丁质寡糖,糖复合物等底物中的β-N-乙酰己糖胺,具有广泛的底物谱。Hex2的功能可能与人类Hex酶的功能类似,参与糖复合物的水解。Hex3是目前研究较少的一类β-N-乙酰己糖胺酶,RNA干扰该基因的表达能够导致幼虫蜕皮过程异常。Hex3存在于昆虫蜕皮液中,与Hex1存在相互作用,可能形成二聚体。通过酶学性质研究表明,Hex3能够水解几丁质寡糖底物,但活性较弱,说明其可能参与几丁质的水解。此外,Hex3、Hex1和Hex4被发现存在于双翅目昆虫精子的表面,可能 展开更多
关键词 β-n-乙酰己糖胺酶 几丁质 糖基化修饰 晶体结构 农药靶标
下载PDF
Distribution of Chitinolytic Enzymes in the Organs and cDNA Cloning of Chitinase Isozymes from the Stomach of Two Species of Fish, Chub Mackerel (<i>Scomber japonicus</i>) and Silver Croaker (<i>Pennahia argentata</i>) 被引量:5
2
作者 Hiromi Kakizaki Mana Ikeda +1 位作者 Hideto Fukushima Masahiro Matsumiya 《Open Journal of Marine Science》 2015年第4期398-411,共14页
Chitinolytic activities were measured in two fish species having different feeding habits, chub mackerel (Scomber japonicus) and silver croaker (Pennahia argentata). Chitinase (an endo-type chitinolytic enzyme) activi... Chitinolytic activities were measured in two fish species having different feeding habits, chub mackerel (Scomber japonicus) and silver croaker (Pennahia argentata). Chitinase (an endo-type chitinolytic enzyme) activity was measured using pNP-(GlcNAc)n (n = 2, 3) as substrates;its level was significantly high in the stomachs of both species, as well as in the gills, intestine, pyloric appendage, testis, and liver of chub mackerel and in the spleen, kidney, pyloric appendage, ovaries, heart, and liver of silver croaker. β-N-Acetylhexosaminidase (an exo-type chitinolytic enzyme) activity was measured using pNP-(GlcNAc) as a substrate;it was detected at high levels in many parts apart from the digestive tracts of both species. The optimum pH for chitinase activity was 3.0 - 5.0 in the stomachs of both species, 4.0 in the liver of chub mackerel, and 4.0 and 8.0 in the kidney of silver croaker. Full-length cDNAs encoding two chitinase isozymes were obtained from the stomachs of the two fish species: SjChi-1 (1604 bp) and SjChi-2 (1512 bp) from chub mackerel and PaChi-1 (1630 bp) and PaChi-2 (1606 bp) from silver croaker. Expression analysis of these genes in the organs of the two species revealed strong expression of SjChi-1 in the stomach of chub mackerel and that of PaChi-1 andPaChi-2 in the stomach of silver croaker. The difference in the expression pattern of these genes is likely attributed to the difference in the feeding habits of the two fish species. Our results suggested the presence of novel chitinases in the two species. 展开更多
关键词 Chitinolytic Enzyme CHITInASE β-n-acetylhexosaminidase Distribution Phylogenetic Tree Analysis
下载PDF
溜曲霉β-N-乙酰氨基己糖苷酶的纯化与性质 被引量:4
3
作者 陶勇 严自正 +2 位作者 孙晋武 程秀兰 张树政 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 1990年第4期259-266,共8页
溜曲霉(Aspergillus tamarii)S215除去菌体的培养液经硫酸铵及聚乙二醇分级沉淀、Se-phadex G-25脱盐、DEAE-Sephadex A-25离子交换柱层析及羟基磷灰石吸附柱层析等步骤,得到了凝胶电泳均一的样品,纯化了170倍左右,得率24.7%。在纯化过... 溜曲霉(Aspergillus tamarii)S215除去菌体的培养液经硫酸铵及聚乙二醇分级沉淀、Se-phadex G-25脱盐、DEAE-Sephadex A-25离子交换柱层析及羟基磷灰石吸附柱层析等步骤,得到了凝胶电泳均一的样品,纯化了170倍左右,得率24.7%。在纯化过程中,β-GlcNAcase 和β-GalNAcase 活力始终不能分开,其活力比保持在2.5左右。用浓度梯度 PAGE 测定分子量为140000,用 SDS-PAGE 测定亚基分子量为72000。用 PAGIEF 测定等电点为4.2。β-GlcNAcase 反应最适 pH 为5.5—6.5,β-GalNAcase 为5.0—6.0。在 pH5.5—8.3范围内稳定。两者反应最适温度为60℃,在50℃保温8h,β-GlcNAcase 剩余活力为52.7%,GalNAcase 为44.9%;62℃10min,两酶活力仅剩1%。MB^(2+)和 Fe^(2+)件对酶活力微有激活作用,Hg^(2+)强烈抑制酶活力;Ag^+、CB^(2+)、Pb^(2+)、Cd^(2+)及 Zn^(2+)对酶活力有一定抑制作用。测定了氨基酸组成,天门冬氨酸和谷氨酸(包括酰胺)含有24.2%,三种碱性氨基酸占14.9%,而甲硫氨酸仅有0.6%左右。 展开更多
关键词 溜曲霉 β-HexnAcase
下载PDF
海洋细菌假交替单胞菌DL-6来源β-N-乙酰己糖胺酶异源表达及酶学表征 被引量:1
4
作者 刘向歌 赵子琪 +3 位作者 吴家葳 于爽 迟乃玉 王晓辉 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2024年第16期68-76,共9页
从海洋细菌假交替单胞菌(Pseudoalteromonas sp.)DL-6中克隆β-N-乙酰己糖胺酶基因(PsHex),扩增至pET-28a(+),并成功在大肠杆菌BL21(DE3)中异源表达,经镍-次氮基三乙酸亲和层析纯化得到纯蛋白。结果表明:PsHex编码876个氨基酸,分子质量... 从海洋细菌假交替单胞菌(Pseudoalteromonas sp.)DL-6中克隆β-N-乙酰己糖胺酶基因(PsHex),扩增至pET-28a(+),并成功在大肠杆菌BL21(DE3)中异源表达,经镍-次氮基三乙酸亲和层析纯化得到纯蛋白。结果表明:PsHex编码876个氨基酸,分子质量约99.46 kDa,理论等电点5.65,序列对比分析表明,Ps Hex属于糖苷水解酶GH20家族;Ps Hex蛋白最适温度30℃,最适pH 8.5,比活力11.30 U/mg,且在20℃、pH 7.5时稳定性最高;重组蛋白可降解琼脂、葡聚糖、可溶性淀粉、卡拉胶等多种底物;Na^(+)、Mg^(2+)、Fe^(3+)、K^(+)、Ca^(2+)、二硫苏糖醇、吐温-80、乙二胺四乙酸、β-巯基乙醇对酶有激活作用;Ps Hex以对硝基苯基-β-D-乙酰氨基葡萄糖苷为底物的米氏常数(K_(m))为2.523 mol/L、转化效率(K_(cat))为79.035 min^(-1)、最大反应速率(v_(max))为2.081 U/mg、K_(cat)/K_(m)=31.326。该研究为酶法降解几丁质产生N-乙酰葡萄糖胺的生产应用提供了理论参考。 展开更多
关键词 β-n-乙酰己糖胺酶 假交替单胞菌 表达与纯化 酶学性质
下载PDF
β-N-乙酰氨基己糖苷酶产生菌的筛选与产酶条件 被引量:4
5
作者 严自正 陶勇 +2 位作者 程秀兰 孙晋武 张树政 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 1990年第2期122-128,共7页
筛选了真菌、细菌和放线菌共1121株,其中有β-HexNAcase 活力的有237株,在所筛选菌中只要有β-GlcNAcase 活力,也就有β-GalNAcsse 活力,但两酶比值(β-GlcNAcsse/β-Gal-NAcsse)不同。所筛选出的溜曲霉(Asg.tamarii)S215为由土壤中分离... 筛选了真菌、细菌和放线菌共1121株,其中有β-HexNAcase 活力的有237株,在所筛选菌中只要有β-GlcNAcase 活力,也就有β-GalNAcsse 活力,但两酶比值(β-GlcNAcsse/β-Gal-NAcsse)不同。所筛选出的溜曲霉(Asg.tamarii)S215为由土壤中分离的,其产酶最适条件为5%麸皮液体培养基,28—30℃振荡培养5—6天,补充碳源如纤维二糖、葡萄糖胺、半乳糖胺或者补充氮源(NH_4)_2SO_4及 NH_4NO_3可以稍稍提高酶活。在溜曲霉的培养液中除β-GlcNAcase 及β-GslNAcase 外,还有α-半乳糖苷酶、β-半乳糖苷酶、β-葡萄糖苷酶、β-岩藻糖苷酶及α-甘露糖苷酶。 展开更多
关键词 己糖苷酶 产酶菌 筛选 产酶条件
下载PDF
简并引物法克隆保加利亚乳杆菌β-N-乙酰氨基己糖苷酶基因 被引量:3
6
作者 崔文明 刘鹭 +3 位作者 张书文 逄晓阳 李红娟 吕加平 《食品科学技术学报》 CAS 2013年第1期33-37,共5页
β-N-乙酰氨基己糖苷酶(β-Hexcase)在细菌、植物和动物中广泛存在,具有典型的外切酶活性并可以催化切除β-N-乙酰氨基己糖的非还原性氨基己糖残基,在细菌细胞分裂中具有重要作用.选取与保加利亚乳杆菌LJJ亲缘关系近的菌种的β-N-乙酰... β-N-乙酰氨基己糖苷酶(β-Hexcase)在细菌、植物和动物中广泛存在,具有典型的外切酶活性并可以催化切除β-N-乙酰氨基己糖的非还原性氨基己糖残基,在细菌细胞分裂中具有重要作用.选取与保加利亚乳杆菌LJJ亲缘关系近的菌种的β-N-乙酰氨基己糖苷酶蛋白序列,利用ICO-DEHOP和CODEHOP在线简并引物设计软件设计β-Hexcase简并引物,选取Hex1-f和Hex1-r引物对,以LJJ基因组DNA为模板经PCR扩增得到614 bp产物.PCR产物连接pGEM-T质粒载体后克隆至大肠杆菌DH5α中,筛选阳性克隆提取质粒进行测序.测序结果显示产物长度为614 bp,该DNA序列经blastx比对发现与其他已知β-Hexcase基因具有相似性,表明所克隆的序列即为LJJβ-Hexcase的基因片段.β-N-乙酰氨基己糖苷酶基因的获得为进一步研究β-N-乙酰氨基己糖苷酶与保加利亚乳杆菌自溶的关系奠定了基础. 展开更多
关键词 保加利亚乳杆 n-乙酰氨基己糖苷酶 简并引物
下载PDF
β-N-乙酰氨基己糖苷酶及其合成寡糖的研究进展 被引量:2
7
作者 陈晓迪 王凤山 肖敏 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第8期1189-1205,共17页
β-N-乙酰氨基己糖苷酶(EC.3.2.1.52)是一类重要的糖苷水解酶,在自然界中催化简单的β-N-乙酰氨基己糖苷或复杂的寡糖链、多糖链中末端N-乙酰己糖苷键的水解,在微生物、植物和动物中广泛分布,具有重要的生物学功能。某些种类的β-N-乙... β-N-乙酰氨基己糖苷酶(EC.3.2.1.52)是一类重要的糖苷水解酶,在自然界中催化简单的β-N-乙酰氨基己糖苷或复杂的寡糖链、多糖链中末端N-乙酰己糖苷键的水解,在微生物、植物和动物中广泛分布,具有重要的生物学功能。某些种类的β-N-乙酰氨基己糖苷酶在一定的人为条件下水解β-N-乙酰氨基己糖苷键的同时还具有转糖基作用,能将β-N-乙酰氨基己糖基转移到不同的羟基化合物上,合成β-N-乙酰氨基己糖苷化合物,在糖链合成上具有应用的潜力。本文综述了β-N-乙酰氨基己糖苷酶的结构和催化机制、酶的生物学功能以及酶在β-N-乙酰氨基己糖苷化合物合成中的应用,以促进β-N-乙酰氨基己糖苷酶的进一步研究和开发应用。 展开更多
关键词 β-n-乙酰氨基己糖苷酶 催化机制 生物学功能 转糖基作用 寡糖合成
原文传递
马氏珠母贝(Pinctada fucata martensii)PmHEX基因的分子克隆及表达分析
8
作者 范闪闪 郑哲 +4 位作者 焦钰 黄荣莲 王庆恒 邓岳文 杜晓东 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期2339-2349,共11页
β-N-乙酰-己糖胺酶(beta-N-acetylhexosaminidase/beta-Hexosaminidase,HEX)是一种糖苷水解酶,在几丁质降解、N-糖基化修饰、糖复合物代谢等过程发挥重要作用。为了探究PmHEX在马氏珠母贝贝壳形成中的作用,本研究利用RACE技术克隆获... β-N-乙酰-己糖胺酶(beta-N-acetylhexosaminidase/beta-Hexosaminidase,HEX)是一种糖苷水解酶,在几丁质降解、N-糖基化修饰、糖复合物代谢等过程发挥重要作用。为了探究PmHEX在马氏珠母贝贝壳形成中的作用,本研究利用RACE技术克隆获得马氏珠母贝PmHEX(Pinctada fucata martensii HEX,PmHEX)cDNA全长序列并通过qRT-PCR检测其在不同组织的表达模式。结果表明,PmHEX序列全长3 812 bp,其中5'UTR为22 bp,3'UTR为364 bp,开放阅读框(ORF)为3 426 bp,编码1 141个氨基酸;预测其相对分子量为125.92 kD,理论等电点为9.06;SMART软件分析PmHEX蛋白质序列,发现它具有典型的GH20和GH20b结构域和一个碳水化合物结合结构域;多序列比对显示PmHEX与其它物种的HEX具有较高的保守性,与珠母贝HEX序列相似度高达54%;q RT-PCR表达分析显示PmHEX在外套膜各区表达量较高,且在边缘区的表达量显著高于其他组织。综上所述,PmHEX可能参与马氏珠母贝贝壳的形成过程。 展开更多
关键词 马氏珠母贝 β-n-乙酰-己糖胺酶 克隆 表达分析
原文传递
马氏珠母贝(Pinctada fucata martensii)PmHEXL基因的分子特征与表达分析
9
作者 范闪闪 郑哲 +2 位作者 焦钰 黄荣莲 杜晓东 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期489-497,共9页
几丁质作为有机框架主要成分参与贝壳的形成。β-N-乙酰-己糖胺酶(Beta-hexosaminidase/Beta-N-acetylhexosaminidase, HEX)属于糖苷水解酶家族20,在几丁质水解过程发挥重要作用。为了探究Pm HEXL在马氏珠母贝贝壳形成中的作用,本研究利... 几丁质作为有机框架主要成分参与贝壳的形成。β-N-乙酰-己糖胺酶(Beta-hexosaminidase/Beta-N-acetylhexosaminidase, HEX)属于糖苷水解酶家族20,在几丁质水解过程发挥重要作用。为了探究Pm HEXL在马氏珠母贝贝壳形成中的作用,本研究利用RACE技术克隆获得Pm HEXL基因c DNA全长序列并检测其在不同组织的表达模式。研究显示,Pm HEXL基因序列全长2 760 bp,其中5'UTR为167 bp,3'UTR为268 bp,开放阅读框(ORF)为2 325 bp,编码774个氨基酸;预测其相对分子量为89.59 kD,理论等电点为5.93;SMART软件分析PmHEXL蛋白质序列,发现它具有典型的GH20、GH20b结构域和CHB-HEX结构域;多序列比对结果显示Pm HEXL与其它物种的HEX具有较高的保守性;qPCR表达分析显示Pm HEXL在外套膜套膜区表达量最高,边缘区次之。综上所述,Pm HEXL可能参与马氏珠母贝贝壳的形成过程。 展开更多
关键词 马氏珠母贝 β-n-乙酰-己糖胺酶 分子特征 表达分析
原文传递
溜曲霉β-N-乙酰氨基己糖苷酶的催化特性
10
作者 陶勇 严自正 张树政 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 1992年第6期405-411,共7页
巳纯化的溜曲霉β-N-乙酰氨基己糖苷酶(表现出β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶和β-N-乙酰氨基半乳糖苷酶活力)水解对硝基酚-N-乙酰氨基葡萄糖苷和对硝基酚-N-乙酰氨基半乳糖苷,其 K_m 值分别为0.44和2.0mmol/L。V_(max)值分别为740.0和476.5μ... 巳纯化的溜曲霉β-N-乙酰氨基己糖苷酶(表现出β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶和β-N-乙酰氨基半乳糖苷酶活力)水解对硝基酚-N-乙酰氨基葡萄糖苷和对硝基酚-N-乙酰氨基半乳糖苷,其 K_m 值分别为0.44和2.0mmol/L。V_(max)值分别为740.0和476.5μmol·min^(-1)·mg^(-1)。氨基葡萄糖、氨基半乳糖、GlcNAc 及 GalNAc 均为这两个酶的竞争性抑制剂,对β-GlcNAcase的 K_1 值分别为34.9、62.5、16.9及38.2mmol/L,而对β-GalNAcase 的 K_1值分别为24.1、75.0、50.0及131.8mmol/L。将 pNPGlcNAc 和 pNPGalNAc 等量混合为底物,其酶活力小于单独以 pNPGlcNAc 为底物的活力,大于以 pNPGalNAc 为底物的活力。两种底物以不同摩尔分数混合测活结果,用 Lineweaver-Burk 双倒数法作图,均为直线,求出表观 V′_(max),将各个 V′_(max) 对摩尔分数 f(从 f=0至 f=1)作图,没有出现最大值。由抑制作用及混合底物竞争动力学说明β-GlcNAcase 和β-GalNAcase 同存在于一个蛋白质,并共用一个活力部位。 展开更多
关键词 溜曲霉 糖苷酶
下载PDF
上一页 1 下一页 到第
使用帮助 返回顶部