朱红膏毒性靶器官及安全用药范围研究 被引量：16

1

作者 董建勋 王乐平 +6 位作者 李建荣 罗玲 贺蓉 彭博 徐启华 高杰 路艳丽 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期1293-1295,1449,共3页

目的:研究含汞中药外用制剂朱红膏的毒性靶器官和安全用药范围。方法:将200只大鼠随机分5组:朱红膏高、中、低剂量组,基质组(凡士林)及皮肤破损组。采用刀片刮伤造成大鼠皮肤破损,连续给药4周,分别于给药2周、4周,给药4周停药2周、4周,... 目的:研究含汞中药外用制剂朱红膏的毒性靶器官和安全用药范围。方法:将200只大鼠随机分5组:朱红膏高、中、低剂量组,基质组(凡士林)及皮肤破损组。采用刀片刮伤造成大鼠皮肤破损,连续给药4周,分别于给药2周、4周,给药4周停药2周、4周,检测大鼠尿汞含量、尿NAG活性、观察肾组织形态。结果:与皮肤破损组比较,高、低剂量组尿汞含量均显著升高(P<0.01),基质组及朱红膏各组NAG活性均未见显著差异。低剂量给药各时期未见明显肾组织病理损伤。中剂量给药2周,肾脏出现轻度病理改变;给药4周病变有加重趋势,停药后病变有减轻趋势,但与2周比较,均未见显著差异。结论:朱红膏反复给药可引起肾小管损伤,9.52mg生药/kg为相对安全剂量。 展开更多

关键词 朱红膏 靶器官 汞 β-n-乙酰氨基葡萄糖苷酶

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阴道炎五联检对妇科病筛查的临床应用研究 被引量：14

2

作者 吴国友 洪晓平 +1 位作者 马小红 朱杰 《中国卫生检验杂志》 CAS 2011年第4期952-954,共3页

目的:探讨白带五联检在妇科病筛查中的临床应用价值。方法:应用白带五联检试剂对804例门诊女性患者阴道分泌物进行过氧化氢、白细胞酯酶、唾液酸苷酶、脯氨酸氨基肽酶、乙酰氨基葡萄糖苷酶5项指标及pH联合检测,通过涂片镜检法检测乳酸... 目的:探讨白带五联检在妇科病筛查中的临床应用价值。方法:应用白带五联检试剂对804例门诊女性患者阴道分泌物进行过氧化氢、白细胞酯酶、唾液酸苷酶、脯氨酸氨基肽酶、乙酰氨基葡萄糖苷酶5项指标及pH联合检测,通过涂片镜检法检测乳酸杆菌、白细胞、细菌性阴道病(bacterial vaginosis,BV)、滴虫、念珠菌,并通过革兰氏染色进行确认。结果:白带五联检法与革兰氏染色镜检法相比,乳酸杆菌、白细胞、BV检验、滴虫、念珠菌检测结果的符合率分别为99.8%、89.0%、99.6%、98.0%、89.5%。结论:白带五联检操作简便、结果客观,是阴道炎的诊断及分型的可行依据,对妇科病筛查具有较好的应用价值。 展开更多

关键词 阴道炎五联检 白细胞酯酶 唾液酸苷酶 脯氨酸氨基肽酶 乙酰氨基葡萄糖苷酶

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五联检检测3988例阴道分泌物结果分析 被引量：11

3

作者 饶荣 冯申亮 《中国微生态学杂志》 CAS CSCD 2011年第2期173-174,共2页

目的探讨过氧化氢浓度、唾液酸酶、白细胞酯酶、脯氨酸氨基肽酶和乙酰氨基葡萄糖苷酶检测对阴道微生态的改变所致妇科疾病的诊断意义。方法对妇科门诊3 988例阴道分泌物进行五联检检测及Am sel法的检测。结果五联检法检测3 988例阴道分... 目的探讨过氧化氢浓度、唾液酸酶、白细胞酯酶、脯氨酸氨基肽酶和乙酰氨基葡萄糖苷酶检测对阴道微生态的改变所致妇科疾病的诊断意义。方法对妇科门诊3 988例阴道分泌物进行五联检检测及Am sel法的检测。结果五联检法检测3 988例阴道分泌物的结果阳性率：细菌性阴道病（BV）为30.1%,念珠菌为40.1%,滴虫为21.7%,Am sel法检测BV阳性率为28.8%。清洁度（Ⅰ~Ⅱ）组与清洁度（Ⅲ~Ⅳ）组比较H2O2、pH、唾液酸酶和脯氨酸氨基肽酶等检测结果差异均有统计学意义（P〈0.01）。结论五联检结合清洁度等项目检测可以互补或取代旧指标,应用于临床。 展开更多

关键词 阴道分泌物 过氧化氢浓度 唾液酸酶 白细胞酯酶 脯氨酸氨基肽酶 乙酰氨基葡萄糖苷酶

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尿液胱抑素C与β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶联合检测对肾小管损伤的诊断价值 被引量：9

4

作者 张知 舒峤 廖跃华 《国际检验医学杂志》 CAS 2014年第22期3053-3054,共2页

目的探讨尿液中胱抑素C(CysC)和β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶(NAG)联合检测在肾小管损伤中的价值。方法收集130例肾小管损伤患者(病例组)和100例健康人(健康对照组)的尿液标本,分别检测其CysC浓度和NAG活性。结果联合检测CysC和NAG对肾小管... 目的探讨尿液中胱抑素C(CysC)和β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶(NAG)联合检测在肾小管损伤中的价值。方法收集130例肾小管损伤患者(病例组)和100例健康人(健康对照组)的尿液标本,分别检测其CysC浓度和NAG活性。结果联合检测CysC和NAG对肾小管损伤的辅助诊断敏感度为85.4%,特异度为89.6%,阳性预测值为82.1%。干预治疗前后比较,病例组患者尿液CysC浓度和NAG活性水平差异均有统计学意义(P<0.05)。结论尿液CysC和NAG联合检测对肾小管损伤的诊断和疗效监测价值显著。 展开更多

关键词 胱抑素C β-n-乙酰氨基葡萄糖苷酶 肾小管损伤 尿

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阴道炎多联检测在妇科阴道疾病诊断中的临床应用 被引量：7

5

作者 唐子平 《中国卫生检验杂志》 CAS 2011年第5期1224-1225,共2页

目的:探讨阴道炎多联检测在妇科阴道疾病的诊断中的临床应用。方法:对1516例阴道分泌物进行多联检测(pH值、过氧化氢浓度、白细胞脂酶、唾液酸苷酶、脯氨酸氨基肽酶、N-乙酰氨基葡萄糖苷酶)和用Amsel方法检测,并对其中正常阴道组、霉菌... 目的:探讨阴道炎多联检测在妇科阴道疾病的诊断中的临床应用。方法:对1516例阴道分泌物进行多联检测(pH值、过氧化氢浓度、白细胞脂酶、唾液酸苷酶、脯氨酸氨基肽酶、N-乙酰氨基葡萄糖苷酶)和用Amsel方法检测,并对其中正常阴道组、霉菌性阴道炎、滴虫性阴道炎和BV组进行对照比较。结果:根据临床表现和多联检测,BV的发病率高达27.2%,滴虫性阴道炎占12.5%,霉菌性阴道炎占9.0%。结论:利用多项目联合检测法检测阴道分泌物,能快速、简单、客观而有效的对阴道疾病进行辅助诊断。 展开更多

关键词 阴道炎 BV 滴虫 霉菌 唾液酸苷酶 脯氨酸氨基肽酶 n-乙酰氨基葡萄糖苷酶

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尿微量白蛋白、α_1-微球蛋白、NAG检测对糖尿病肾病早期诊断的探讨 被引量：7

6

作者 孙延生 庄严 贺松 《交通医学》 2008年第1期42-42,44,共2页

糖尿病肾病是糖尿病常见而难治的微血管并发症，不仅损害肾小球，同时也损害肾小管，最终导致肾功能衰竭。该病起病隐匿，早期常无临床表现，一旦出现症状尚缺少有效治疗，因此早期诊断及治疗对改善预后十分重要。

关键词 糖尿病肾病 微量白蛋白 Α1-微球蛋白 乙酰氨基葡萄糖苷酶

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Clostridium paraputrificum M-21β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶的表达、纯化与性质 被引量：1

7

作者 李华钟 王树英 +1 位作者 森本兼司 大宫邦雄 《无锡轻工大学学报（食品与生物技术）》 CSCD 北大核心 2003年第3期41-45,52,共6页

以ClostridiumparaputrificumM21染色体DNA为模板,经PCR扩增获得编码β N 乙酰氨基葡萄糖苷酶的基因nag3A,与质粒pQE30T所构建的表达质粒pNAG3A在EscherichiacoliM15中表达良好.从重组E.coliM15中纯化得到的Nag3A以4 MU GlcNAc为底物时... 以ClostridiumparaputrificumM21染色体DNA为模板,经PCR扩增获得编码β N 乙酰氨基葡萄糖苷酶的基因nag3A,与质粒pQE30T所构建的表达质粒pNAG3A在EscherichiacoliM15中表达良好.从重组E.coliM15中纯化得到的Nag3A以4 MU GlcNAc为底物时,最适作用温度和最适作用pH分别为50℃和7.0;在30℃以下和pH6～9之间该酶活性稳定.对4 MU GlcNAc的Km和Vmax分别为7.9μmol和21.8μmol/(min·mg).Nag3A可以水解几丁寡糖和几丁质,作用方式是从非还原端逐一水解β 1,4 D N 乙酰氨基葡萄糖苷键,产生N 乙酰氨基葡萄糖,对几丁二糖具有较高的水解活性. 展开更多

关键词 β-n-乙酰氨基葡萄糖苷酶 基因表达 纯化 几丁质酶 产酶基因 酶学性质

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病原菌激发子对毛白杨愈伤组织酶活性的诱导作用 被引量：1

8

作者 周自云 胡景江 +1 位作者 王俊明 曹支敏 《西北林学院学报》 CSCD 北大核心 2004年第2期25-27,共3页

以杨树溃疡病病原菌提取物制备的2种激发子对毛白杨愈伤组织进行诱导,结果表明,苯丙氨酸解氨酶(PAL)、几丁质酶和β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶均能被有效诱导,几丁质酶和β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶活性在诱导处理后4h出现最高峰,而PAL活性则在... 以杨树溃疡病病原菌提取物制备的2种激发子对毛白杨愈伤组织进行诱导,结果表明,苯丙氨酸解氨酶(PAL)、几丁质酶和β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶均能被有效诱导,几丁质酶和β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶活性在诱导处理后4h出现最高峰,而PAL活性则在48h出现峰值。2种激发子诱导效果对比,经部分酸解的激发子诱导作用更强。 展开更多

关键词 毛白杨 激发子 苯丙氨酸解氨酶 几丁质酶 β-n-乙酰氨基葡萄糖苷酶

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解淀粉芽孢杆菌β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶基因的克隆表达及其酶学表征 被引量：4

9

作者 陈宝莉 秦臻 赵黎明 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2020年第8期123-129,共7页

从解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens YX-01)中克隆得到一个新型β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶基因(BaNagase),并成功在大肠杆菌中异源表达。BaNagase编码616个氨基酸,与B.subtilis来源的β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶(AIY91451.1)氨基... 从解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens YX-01)中克隆得到一个新型β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶基因(BaNagase),并成功在大肠杆菌中异源表达。BaNagase编码616个氨基酸,与B.subtilis来源的β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶(AIY91451.1)氨基酸序列相似性最高,为76.97%。通过对比分析,BaNagase属于糖苷水解酶3家族。纯化获得的BaNagase比活力为16.42 U/mg,最适温度65℃,最适pH 6.0,且在低于55℃条件下能保持高于70%的酶活力。BaNagase展现出高的热稳定性和严格的底物特异性,为其高效制备N-乙酰氨基葡萄糖提供了理论支持。 展开更多

关键词 β-n-乙酰氨基葡萄糖苷酶 解淀粉芽孢杆菌 克隆 酶学性质 糖苷水解酶3家族

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凝结芽孢杆菌耐热β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶在大肠杆菌的分泌表达及其在制备Glc NAc中的应用 被引量：3

10

作者 李丛娜 姜顺 +3 位作者 杜超 周玉玲 蒋思婧 张桂敏 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期218-227,共10页

β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶体,可作用于几丁质或壳聚糖等天然底物,从末端水解产生N-乙酰-β-D氨基葡萄糖(GlcNAc)单体,其在医药和农业领域有较广泛的用途。文中克隆了耐热菌凝结芽孢杆菌Bacillus coagulans DMS1的β-N-乙酰氨基葡萄糖苷... β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶体,可作用于几丁质或壳聚糖等天然底物,从末端水解产生N-乙酰-β-D氨基葡萄糖(GlcNAc)单体,其在医药和农业领域有较广泛的用途。文中克隆了耐热菌凝结芽孢杆菌Bacillus coagulans DMS1的β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶基因(BcNagZ),并成功在大肠杆菌Escherichia coli BL21(DE3)进行了分泌表达,蛋白表达量达到0.76 mg/mL。纯化后的BcNagZ分子量为61.3 kDa,测得的比活力为5.918 U/mg;进一步对该酶进行表征,结果显示酶的最适反应pH为5.5,最适反应温度为75℃,在65℃处理30 min后还有85%的残余酶活力,表明该酶具有良好的热稳定性。该酶的米氏常数Km为0.23 mmol/L,Vmax为0.0431 mmol/(L·min)。重组BcNagZ可以水解胶体几丁质得到微量的GlcNAc,可以将二糖水解为单糖;偶联已报道的外切几丁质酶AMcase,可以有效地将胶体几丁质水解为GlcNAc,得率达到86.93%。 展开更多

关键词 β-n-乙酰氨基葡萄糖苷酶 分泌表达 重组酶酶学性质 n-乙酰氨基葡萄糖

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维氏气单胞菌B565β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶的表达、纯化及酶学性质 被引量：4

11

作者 刘阳 杨雅麟 +2 位作者 张宇婷 冉超 周志刚 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期38-44,共7页

以维氏气单胞菌B565基因组DNA为模板,扩增得到β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶nag565基因,构建nag565-p ET28a表达载体,在大肠杆菌BL21（DE3）中进行诱导表达。经过分析与预测,nag565氨基酸序列与其他气单胞菌属相似,NAG565蛋白序列分析预测其... 以维氏气单胞菌B565基因组DNA为模板,扩增得到β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶nag565基因,构建nag565-p ET28a表达载体,在大肠杆菌BL21（DE3）中进行诱导表达。经过分析与预测,nag565氨基酸序列与其他气单胞菌属相似,NAG565蛋白序列分析预测其含有一个信号肽、一个碳水化合物结合结构域、两个糖苷水解酶20家族催化结构域和一个β-氨基葡萄糖苷酶C端结构域。通过NiNTA纯化获得的NAG565纯蛋白比活为7328U/mg,并对其酶学性质进行了初步研究,NAG565在p H7.0保持最高活性,并且在p H5.0-9.0范围内稳定,最适温度为37℃,0-30℃对其酶活无明显影响,并对多种金属离子和蛋白酶具有良好抗性,符合水产动物的养殖环境条件（养殖温度20-30℃,多数养殖鱼胃肠道p H值呈中性并含有蛋白酶）,为其在水产养殖等领域的应用提供了理论基础。 展开更多

关键词 维氏气单胞菌 β-n-乙酰氨基葡萄糖苷酶 表达 酶学性质

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一种来源于兼性嗜碱菌Bacillus pseudofirmus 703的β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶 被引量：2

12

作者 姜顺 郝少华 +4 位作者 向腊 宋俐 周玉玲 蒋思婧 张桂敏 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期69-80,共12页

N-乙酰氨基葡萄糖苷酶作用于肽聚糖或几丁质,从其非还原末端水解产生β-D-N-乙酰氨基葡萄糖单体,该酶在细胞壁代谢过程中起重要作用,在医药和生物技术领域也有广泛的应用。【目的】克隆表达来源于兼性嗜碱菌Bacillus pseudofirmus 703的... N-乙酰氨基葡萄糖苷酶作用于肽聚糖或几丁质,从其非还原末端水解产生β-D-N-乙酰氨基葡萄糖单体,该酶在细胞壁代谢过程中起重要作用,在医药和生物技术领域也有广泛的应用。【目的】克隆表达来源于兼性嗜碱菌Bacillus pseudofirmus 703的β-N-乙酰葡糖胺糖苷酶NagZ703,为获得乙酰氨基葡萄糖单体奠定基础。【方法】以B.pseudofirmus703基因组DNA为模板,克隆得到了β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶基因NagZ703,通过构建pET28a-nagZ703表达载体,在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达NagZ703,利用镍柱纯化得到NagZ703纯蛋白,并对其酶学和生化性质进行分析。【结果】NagZ703与其同源蛋白多序列比对分析结果表明,NagZ703属于糖苷水解酶3家族(GH3),由2个结构域构成,催化活性中心由位于N端结构域的Arg232-His234-Arg318组成,和研究最多的Bacillussubtilis168来源的BsNagZ氨基酸的序列相似性为37%。酶学性质分析表明,以对硝基酚-β-乙酰氨基葡萄糖苷(pNP-β-GlcNAc)为底物,NagZ703的最适反应温度和pH分别为60°C和pH 6.5,比酶活为10.79 U/mg,其Km和Vmax分别为0.276 mmol/L和0.612 mmol/(mg·min)。该酶具有较好的稳定性,在50°C处理30 min,或在pH 6.0–10.5条件下,4°C保存12 h后,仍保留80%以上的酶活力。EDTA不影响该酶的活性,推测其为非金属依赖酶,且Hg2+可完全抑制酶活性。【结论】本研究将兼性嗜碱菌Bacillus pseudofirmus 703来源的β-N-乙酰葡糖胺糖苷酶NagZ703在大肠杆菌中成功表达和纯化,并分析了其酶学性质;NagZ703的最适pH为6.5,没有表现出耐盐嗜碱的特征;NagZ703能水解胶体几丁质产生GlcNAc,为酶解生产GlcNAc提供了一条可行的思路。 展开更多

关键词 β-n-乙酰氨基葡萄糖苷酶 多序列比对 异源表达 酶学性质分析 乙酰氨基葡萄糖

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O-糖基化在口腔鳞状细胞癌发生发展中的作用初探 被引量：1

13

作者 李怡宁 陈思远 胡济安 《口腔生物医学》 2015年第4期172-177,共6页

目的:通过口腔鳞癌组织和细胞学的研究,初步探讨O-糖基化和口腔鳞状细胞癌关系。方法:对30例口腔鳞状细胞癌和10例正常口腔黏膜组织,采用免疫组织化学SP法检测O位N-乙酰葡萄糖胺(O-linked N-acetylglucosamine,O-GlcNAc)、N-乙酰氨基葡... 目的:通过口腔鳞癌组织和细胞学的研究,初步探讨O-糖基化和口腔鳞状细胞癌关系。方法:对30例口腔鳞状细胞癌和10例正常口腔黏膜组织,采用免疫组织化学SP法检测O位N-乙酰葡萄糖胺(O-linked N-acetylglucosamine,O-GlcNAc)、N-乙酰氨基葡萄糖转移酶(O-Glc NAc transferase,OGT)和N-乙酰氨基葡萄糖苷酶(O-Glc NAcase,OGA)的表达,用免疫荧光、Western blotting检测在糖基化增强剂(transglycosylation,TG)和糖基化抑制剂(deoxynorleucine,DON)作用下舌鳞状细胞癌TCA8113细胞的增殖。结果:O-Glc NAc和OGT在正常口腔黏膜组织和口腔鳞癌组织中存在表达显著性差异(P<0.05),并且随着肿瘤恶性程度的增高,呈现表达升高的趋势。OGA的表达和O-Glc NAc、OGT均不同,从正常到鳞癌中表达呈增高趋势,但在不同分化鳞癌组内表达差异不明显。TG可促进TCA8113的增殖和O-Glc NAc、OGT的表达,DON可抑制TCA8113的增殖和O-Glc NAc、OGT的表达。结论:O-糖基化在口腔鳞状细胞癌中表达增高,在舌鳞癌细胞系中活化,抑制剂DON可抑制肿瘤细胞增殖。 展开更多

关键词 O位n-乙酰葡萄糖胺 n-乙酰氨基葡萄糖转移酶 n-乙酰氨基葡萄糖苷酶 口腔鳞状细胞癌 糖基化增强剂 糖基化抑制剂

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蒙药孟根乌苏(水银)-18味丸对大鼠肾汞蓄积及肾早期损伤的影响 被引量：2

14

作者 佟海英 范盎然 +4 位作者 于雪 张月 乌吉斯古冷 李婧 呼日乐巴根 《中医学报》 CAS 2017年第1期71-77,共7页

目的:观察孟根乌苏(水银)-18味丸对大鼠肾汞蓄积及肾早期损伤指标的影响。方法:将Wistar雄性大鼠,根据体质量随机分为正常对照组,孟根乌苏(水银)-18味丸低剂量组[0.29 g·(kg·d)^(-1)]、中剂量组[1.47 g·(kg·d)^(-1)... 目的:观察孟根乌苏(水银)-18味丸对大鼠肾汞蓄积及肾早期损伤指标的影响。方法:将Wistar雄性大鼠,根据体质量随机分为正常对照组,孟根乌苏(水银)-18味丸低剂量组[0.29 g·(kg·d)^(-1)]、中剂量组[1.47 g·(kg·d)^(-1)]、高剂量组[(2.9 g·(kg·d)^(-1)],孟根乌苏(水银)炮制品低剂量组[0.033 g·(kg·d)^(-1)],硫化汞组[17.39 mg·(kg·d)^(-1)]、氯化汞组[4.06 mg·(kg·d)-1],氯化亚汞组[7.06 mg·(kg·d)^(-1)],共8组,每组10只。各组大鼠适应1周后,灌胃给药15 d后分别计算肾脏指数,检测大鼠血清尿素、肌酐,肾组织形态学变化,用电感耦合等离子体发射光谱仪(ICP-OES)和电感耦合等离子体质谱仪(ICP-MS)测肾汞蓄积量;并于实验第7天和第15天,收集24 h尿液,用尿液分析仪检测尿蛋白和pH值,酶联免疫吸附法(Elisa)检测尿液β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶(n-acetyl-β-glucosaminidase,NAG)、尿视黄醇结合蛋白(retinol binding protein,RBP)、β2-微球蛋白(β2-microglobulin,β2-MG)、肾损伤因子-1(kidney injury factor,KIM-1)含量。结果:大鼠连续给药15 d后,与正常对照组和孟根乌苏炮制品低剂量组比较,氯化汞组、氯化亚汞组大鼠肾脏指数显著升高(P<0.01);各组大鼠血清肌酐和尿素含量无显著差异(P>0.05)。肾脏病理检查结果表明,孟根乌苏-18味丸低剂量组,即临床常用剂量组大鼠肾脏出现了一定的病理损伤,表现为肾小球轻度肥大,肾小管上皮中度肿胀变性;孟根乌苏-18味丸中剂量组和高剂量组肾脏也出现了一定损伤,硫化汞、氯化汞、氯化亚汞组大鼠肾病理变化更显著。与正常对照组和孟根乌苏炮制品低剂量组比较,氯化汞组和氯化亚汞组大鼠肾汞蓄积量显著升高(P<0.01);给药7d和15 d后,孟根乌苏-18味丸各剂量组尿蛋白和尿液NAG、β2-MG、RBP和KIM-1含量无显著差异(P>0.05);给药7 d后,氯化汞组尿蛋白有升高趋势,尿液β2-MG含量显著升高(P<0.01),给药15 d时,尿蛋� 展开更多

关键词 孟根乌苏(水银)-18味丸 汞蓄积 肾早期损伤 β-n-乙酰氨基葡萄糖苷酶 尿视黄醇结合蛋白 β2-微球蛋白 肾损伤因子-1 大鼠

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N-乙酰氨基葡萄糖苷酶的异源表达及甘油糖苷的酶法合成

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作者 高坤鹏 毛相朝 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第10期87-95,共9页

从杆菌状链霉菌中克隆了一个N-乙酰氨基葡萄糖苷酶(N-acetyl-glucosaminidase,NAGase)的编码基因sbnag2550,并将其在大肠杆菌BL21(DE3)中进行了异源表达。利用镍离子亲和层析得到纯酶后对SbNag2550的酶学性质进行了研究。该酶的最适温度... 从杆菌状链霉菌中克隆了一个N-乙酰氨基葡萄糖苷酶(N-acetyl-glucosaminidase,NAGase)的编码基因sbnag2550,并将其在大肠杆菌BL21(DE3)中进行了异源表达。利用镍离子亲和层析得到纯酶后对SbNag2550的酶学性质进行了研究。该酶的最适温度为50℃,在45~60℃均表现出90%以上的酶活力。SbNag2550还表现出优良的热稳定性,在55℃孵育60 h仍能保留将近90%的酶活力。利用SbNag2550催化N-乙酰氨基葡萄糖(N-acetyl-glucosamine,NAG)和甘油发生逆水解反应,合成了甘油-N-乙酰氨基葡萄糖苷(glyceryl N-acetyl-glucosamine,GNAG)。在最适条件下,反应24 h时转化率达到28.20%,反应72 h时转化率为34.82%。本研究中首次通过酶法合成了GNAG,为其功能研究和应用开发奠定了基础。 展开更多

关键词 n-乙酰氨基葡萄糖苷酶 异源表达 酶学性质 逆水解反应 甘油-n-乙酰氨基葡萄糖苷

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猪链球菌2型05ZYH33菌株具有N-乙酰氨基葡萄糖苷酶活性蛋白的鉴定及功能研究 被引量：2

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作者 陈平 刘冉 +5 位作者 黄萌萌 朱金鲁 谢芳 倪宏波 刘思国 张跃灵 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期462-467,共6页

为了研究猪链球菌2型(SS2)05ZYH33菌株是否具有N-乙酰氨基葡萄糖苷酶(NAG)及同工酶,本研究通过同源蛋白比对,发现05ZYH33菌株表面蛋白SSU050630 C端Ss GH20结构域与肺炎链球菌(S.pneumoniae)的NAG Str H的GH20-1结构域具有60%的同源性;... 为了研究猪链球菌2型(SS2)05ZYH33菌株是否具有N-乙酰氨基葡萄糖苷酶(NAG)及同工酶,本研究通过同源蛋白比对,发现05ZYH33菌株表面蛋白SSU050630 C端Ss GH20结构域与肺炎链球菌(S.pneumoniae)的NAG Str H的GH20-1结构域具有60%的同源性;经基因克隆、蛋白表达及纯化后的酶活性分析表明Ss GH20具有NAG活性,且其活力为371 U/mg蛋白;其最适反应温度为50℃、最适p H为5.5;其Km值为0.69。通过构建SS2 ssu050630基因缺失株及全菌酶活性测定,显示SS2 05ZYH33菌株具有NAG活性,而ssu050630基因缺失后的菌株则失去了NAG活性,表明SSU050630是SS2 05ZYH33菌株唯一具有NAG活性的蛋白。本研究为进一步探究Ss GH20在SS2致病中的作用及SS2逃避宿主免疫反应的机制奠定了基础。 展开更多

关键词 猪链球菌2型 n-乙酰氨基葡萄糖苷酶 SSU05_0630 基因缺失 同工酶

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乙酰氨基葡萄糖苷酶检测阴道分泌物对滴虫及念珠菌感染的筛查意义 被引量：2

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作者 陈同伟 《浙江临床医学》 2015年第3期465-466,共2页

目的探讨阴道分泌物乙酰氨基葡萄糖苷酶（NAG）检测对于滴虫及念珠菌感染的筛查意义。方法分别用阴道五联检试剂和显微镜镜检对506例女性的阴道分泌物进行酸碱度（pH）、乙酰氨基葡萄糖苷酶（NAG）、念珠菌及滴虫进行检测并与临床症状... 目的探讨阴道分泌物乙酰氨基葡萄糖苷酶（NAG）检测对于滴虫及念珠菌感染的筛查意义。方法分别用阴道五联检试剂和显微镜镜检对506例女性的阴道分泌物进行酸碱度（pH）、乙酰氨基葡萄糖苷酶（NAG）、念珠菌及滴虫进行检测并与临床症状结合诊断。结果显微镜镜检213个标本找到念珠菌，75个标本中找到滴虫；其中6个标本中既有念珠菌又有滴虫。NAG阳性同时pH≤4．6的标本233个，其209个标本镜检找到念珠菌；NAG阳性同时pH≥4．8的标本82个，其中72个标本镜检找到滴虫。结论NAG和pH的联合检测可用于阴道分泌物念珠菌，滴虫的筛查。 展开更多

关键词 酸碱度 乙酰氨基葡萄糖苷酶 念珠菌 滴虫 筛查

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茶叶提取物对N-乙酰氨基葡萄糖苷酶活性的调控 被引量：2

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作者 谢晓兰 吕凤娇 庄晓丹 《江苏农业科学》 北大核心 2013年第3期277-279,共3页

采用乙醇浸提法提取绿茶中的有效物质,紫外光谱特征显示,提取物主成分为二氢黄酮类物质;绿茶提取物对N-乙酰氨基葡萄糖苷酶活性具有显著的抑制作用;绿茶提取物对NAGase的作用属可逆的竞争型抑制,抑制常数KI为0.16 mg/mL。

关键词 绿茶 n-乙酰氨基葡萄糖苷酶 活力调控 抑制机理

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Dispersin B:一种可用于生物被膜防治的糖苷水解酶

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作者 刘泽文 谢浩 +5 位作者 王琳 颜礼娜 刘念 郭君慧 YANG Ying 袁成清 《生命的化学》 CAS CSCD 2018年第5期695-701,共7页

β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶(dispersin B, DspB)是一种活性高、稳定性强的糖苷水解酶,其相对分子质量为40 000。DspB由361个氨基酸残基组成,具有8个β/a结构域,折叠后形成TIM桶状结构。其中,β4结构域存在高度保守的位点Asp183和Glu184。... β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶(dispersin B, DspB)是一种活性高、稳定性强的糖苷水解酶,其相对分子质量为40 000。DspB由361个氨基酸残基组成,具有8个β/a结构域,折叠后形成TIM桶状结构。其中,β4结构域存在高度保守的位点Asp183和Glu184。作为糖苷水解酶家族20(glycoside hydrolase family 20, GH20)成员,DspB不像其他β-己糖胺酶那样具有多个功能域,DspB只有单一的功能域,且具有独特的底物专一性、底物结合与释放特性。由于DspB能够水解细菌生物被膜基质中的聚β-(1,6)-N-乙酰葡萄糖胺(poly-β-1,6-N-acetyl-D-glucosamine, PNAG),使生物被膜发生解聚而变成游离状态,增加抗生素疗效,因此有望用于细菌引起的植入医疗器械感染的治疗。现分别从DspB所在GH20家族成员概况、DspB的结构和DspB的功能与应用三个方面对相关的最新研究进展进行分析与总结。 展开更多

关键词 β-n-乙酰氨基葡萄糖苷酶 生物被膜 聚β-(1 6)-n-乙酰葡萄糖胺 细菌耐药 糖苷水解酶家族20

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黄芩苷对凡纳滨对虾N-乙酰氨基葡萄糖苷酶的作用机制 被引量：1

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作者 谢晓兰 高平章 +2 位作者 董昀佳 马欣悦 李美灵 《贵州农业科学》 CAS 北大核心 2013年第9期125-128,共4页

为有效防控对虾的疾病,选择更合适有效的药物并了解药物的作用机制,采用荧光光谱法考察了黄芩苷对凡纳滨对虾N-乙酰氨基葡萄糖苷酶(NAGase)构象的影响及两者的相互作用机制。结果表明:黄芩苷与NAGase作用的荧光猝灭类型是静态猝灭,在17... 为有效防控对虾的疾病,选择更合适有效的药物并了解药物的作用机制,采用荧光光谱法考察了黄芩苷对凡纳滨对虾N-乙酰氨基葡萄糖苷酶(NAGase)构象的影响及两者的相互作用机制。结果表明:黄芩苷与NAGase作用的荧光猝灭类型是静态猝灭,在17℃和37℃温度下,两者的结合常数KA分别是9.909×103L/mol和6.882×103L/mol,结合位点数分别是1.485和1.547,即黄芩苷与NAGase结合位点数约等于1.5;通过热力学定律判定,黄芩苷对NAGase的作用力类型为静电作用力。同步荧光测定表明,NAGase的酪氨酸残基最大发射峰位没有明显变化,而色氨酸残基发生了明显的红移,说明黄芩苷的作用使NAGase中色氨酸所处的环境发生变化,即NAGase的构象发生了变化。表明,黄芩苷可通过与NAGase相互作用达到调节凡纳滨对虾的周期性蜕壳及疾病防御的作用。 展开更多

关键词 黄芩苷 凡纳滨对虾 n-乙酰氨基葡萄糖苷酶 荧光法 作用机制

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