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用启动子融合GUS的方法分析OsUgp1基因的表达模式 被引量：2
1
作者 苏珍霞 欧广亮 +1 位作者 李奕恒 穆虹 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期57-61,共5页
克隆水稻尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶基因（OsUgp1）的启动子,并与大肠杆菌β-葡萄糖苷酸酶（β-glucu-ron idase,GUS）报告基因连接后转化水稻,采用GUS组织化学染色检测启动子驱动GUS基因在水稻转化植株中的表达情况,发现在水稻的根、... 克隆水稻尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶基因（OsUgp1）的启动子,并与大肠杆菌β-葡萄糖苷酸酶（β-glucu-ron idase,GUS）报告基因连接后转化水稻,采用GUS组织化学染色检测启动子驱动GUS基因在水稻转化植株中的表达情况,发现在水稻的根、茎、叶、内外稃、子房、柱头等组织,以及减数分裂时期的花药及不同发育时期的胚乳和胚中均有表达.通过与水稻中另一同源基因（OsUgp2）的启动子GUS融合基因在种子发育过程的表达进行比较,发现两者有明显的差异：OsUgp1基因在开花后5-20 d的胚乳和胚中表达量都比较高,而OsUgp2基因几乎不表达.进一步通过对OsUgp1基因和OsUgp2基因启动子区有关胚乳特异表达相关顺式调控元件在数量和分布位置上的差异分析,探讨了该2个同源基因在种子发育中趋异表达可能的分子机制. 展开更多
关键词 尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶 启动子 β-葡萄糖苷酸酶(gus)
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水稻RSSG58的进化分析及其拟南芥同源基因ATG58的组织表达模式
2
作者 于东明 李筱雨 +4 位作者 孙申领 孙炎锋 王伟 吕东 苗琛 《安徽农业科学》 CAS 2017年第10期126-128,183,共4页
[目的]查找水稻RSSG58在拟南芥中的同源基因并观察其组织表达模式。[方法]利用相关基因信息学网站构建水稻RSSG58的基因进化树,构建其同源基因ATG58::GUS定位载体转入拟南芥,观察分析ATG58的组织表达模式。[结果]进化树和序列对比发现AT... [目的]查找水稻RSSG58在拟南芥中的同源基因并观察其组织表达模式。[方法]利用相关基因信息学网站构建水稻RSSG58的基因进化树,构建其同源基因ATG58::GUS定位载体转入拟南芥,观察分析ATG58的组织表达模式。[结果]进化树和序列对比发现ATG58与RSSG58具有较高的序列相似性,GUS定位遗传材料显示ATG58在多种组织都有表达,在生长发育早期的根、子叶、下胚轴、胚芽表达量相对较高,在生殖发育阶段的花苞和花药内优势表达,ATG58与RSSG58具有相似的GUS定位组织表达模式。[结论]ATG58是水稻RSSG58的同源基因,二者组织表达模式一致,这些结果为深入研究拟南芥ATG58和水稻RSSG58在雄配子发育过程中的作用及机制提供了基础资料。 展开更多
关键词 水稻 RSSG58 ATG58 β-葡萄糖苷酸酶(gus) 组织表达 进化树分析
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粉红粘帚菌的ATMT体系构建及定殖甘草条件优化 被引量：1
3
作者 史启今 王潇晗 +2 位作者 任广喜 姜丹 刘春生 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期126-133,共8页
目的:建立并优化根癌农杆菌介导的甘草内生真菌粉红粘帚菌的遗传转化体系,优选粉红粘帚菌定殖甘草的条件,为生物菌肥的开发及优质甘草的育种奠定基础。方法:分别从乙酰丁香酮浓度、共培养时间和受体真菌分生孢子浓度3个方面对根癌农杆... 目的:建立并优化根癌农杆菌介导的甘草内生真菌粉红粘帚菌的遗传转化体系,优选粉红粘帚菌定殖甘草的条件,为生物菌肥的开发及优质甘草的育种奠定基础。方法:分别从乙酰丁香酮浓度、共培养时间和受体真菌分生孢子浓度3个方面对根癌农杆菌介导的遗传转化(ATMT)条件进行优化并优选转化子。采用正交试验,以共培养温度、共培养时间和孢子浓度为考察因素,定殖率为指标,优化粉红粘帚菌定殖甘草的条件。结果:粉红粘帚菌最适转化条件为共培养时间60 h、孢子浓度1×10^(7) cfu·mL^(-1)、乙酰丁香酮浓度150μmol·L^(-1),此条件下的转化效率为每1×10^(7)个受体真菌孢子可获得135个转化子。通过标记基因绿色荧光蛋白(GFP)的克隆和β-葡萄糖苷酸酶(GUS)染色结果检测转化的准确性与稳定性。粉红粘帚菌通过浸种法定殖甘草的最佳条件为共培养温度25℃、共培养时间36 h、孢子浓度1×10^(6) cfu·mL^(-1),此条件下定殖率71.11%。结论:本研究成功建立了稳定高效的粉红粘帚菌ATMT体系及其定殖甘草的技术体系,可为甘草生物菌肥的开发奠定基础。 展开更多
关键词 粉红粘帚菌 根癌农杆菌介导的遗传转化(ATMT) 绿色荧光蛋白 β-葡萄糖苷酸酶(gus)染色 甘草 转化子 正交试验
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抗β-葡萄糖苷酸酶(β-GUS)兔单克隆抗体的制备和鉴定 被引量：1
4
作者 沈金儿 倪庚 郑晓冬 《中国食品学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2012年第11期148-153,共6页
通过免疫兔子、细胞融合、筛选杂交瘤细胞、构建重组载体、抗体纯化等步骤,成功制备出抗β-葡萄糖苷酸酶(β-GUS)兔单克隆抗体。运用间接ELISA法测定该兔单克隆抗体的相关特性,结果表明该兔单克隆抗体的效价为64000左右,亲和常数为2.13&... 通过免疫兔子、细胞融合、筛选杂交瘤细胞、构建重组载体、抗体纯化等步骤,成功制备出抗β-葡萄糖苷酸酶(β-GUS)兔单克隆抗体。运用间接ELISA法测定该兔单克隆抗体的相关特性,结果表明该兔单克隆抗体的效价为64000左右,亲和常数为2.13×109L/mol。间接ELISA检测β-GUS蛋白时,其最低检测限为50ng/mL。本次试验为研制定性或定量检测β-GUS蛋白的ELISA试剂盒奠定了基础。 展开更多
关键词 β-葡萄糖苷酸酶(β-gus) 兔单克隆抗体 间接ELISA 免疫
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