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CCK-8对甲基苯丙胺诱导细胞凋亡的抑制作用 被引量:4
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作者 张武华 张明龙 +6 位作者 景伟伟 谢冰 毕海涛 于峰 丛斌 马春玲 文迪 《法医学杂志》 CAS CSCD 2021年第6期796-805,共10页
目的研究八肽胆囊收缩素(cholecystokinin octapeptide,CCK-8)与胆囊收缩素2受体(cholecysto⁃kinin 2 receptor,CCK2R)结合对甲基苯丙胺(methamphetamine,METH)诱导的神经元凋亡的抑制作用,并探讨β-arrestin 2在CCK-8抑制METH诱导神经... 目的研究八肽胆囊收缩素(cholecystokinin octapeptide,CCK-8)与胆囊收缩素2受体(cholecysto⁃kinin 2 receptor,CCK2R)结合对甲基苯丙胺(methamphetamine,METH)诱导的神经元凋亡的抑制作用,并探讨β-arrestin 2在CCK-8抑制METH诱导神经元凋亡中的信号转导机制。方法培养SH-SY5Y细胞和慢病毒转染的HEK293-CCK1R和HEK293-CCK2R细胞,应用干扰小RNA(small interfering RNA,siRNA)敲减β-arrestin 2的表达。采用AnnexinⅤ-FITC/PI染色和流式细胞术检测细胞的凋亡率,Western印迹法检测凋亡相关蛋白的表达。结果1mmol/L、2mmol/L METH可诱导SH-SY5Y细胞凋亡,核碎裂、固缩的细胞数量显著增加,凋亡相关蛋白Bax和活化型胱天蛋白酶3(cleaved caspase-3)表达升高。0.1mmol/L和1mmol/L CCK-8预处理均可逆转METH诱导的SH-SY5Y细胞凋亡,并抑制METH引起的核碎裂、固缩的细胞数量增多以及凋亡相关蛋白的改变。慢病毒转染构建HEK293-CCK1R和HEK293-CCK2R细胞,发现CCK-8对METH诱导HEK293-CCK1R细胞凋亡相关蛋白的变化无明显影响,但可抑制METH诱导的HEK293-CCK2R细胞凋亡相关蛋白表达水平的升高。敲减SH-SY5Y细胞的β-arrestin 2表达后可阻断CCK-8对METH诱导细胞凋亡的抑制作用。结论CCK-8可与CCK2R结合,并通过激活β-arrestin 2信号抑制METH诱导的细胞凋亡。 展开更多
关键词 法医毒理学 细胞凋亡 甲基苯丙胺 八肽胆囊收缩素 神经元 受体 β-动蛋白
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益肾达络饮缓解EAE模型小鼠神经系统炎症的机制研究
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作者 王响 王诗洋 +5 位作者 吴元 丁文婧 谢名宗 何静文 邢天野 尚晓玲 《中国药房》 CAS 北大核心 2023年第11期1326-1331,共6页
目的研究益肾达络饮抑制β-制动蛋白1(β-arrestin1)表达对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)模型小鼠炎症因子、环磷酸腺苷(cAMP)/蛋白激酶A(PKA)/cAMP反应元件结合蛋白(CREB)信号通路的影响,探讨益肾达络饮治疗EAE的机制。方法采用随机... 目的研究益肾达络饮抑制β-制动蛋白1(β-arrestin1)表达对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)模型小鼠炎症因子、环磷酸腺苷(cAMP)/蛋白激酶A(PKA)/cAMP反应元件结合蛋白(CREB)信号通路的影响,探讨益肾达络饮治疗EAE的机制。方法采用随机数字表法将60只小鼠分为正常组、模型组、中药组(益肾达络饮20 g/kg)、阳性对照组(醋酸泼尼松3.9 mg/kg)、β-arrestin1 siRNA腺相关病毒(AAV-β)组、AAV-β+中药组,每组10只。除正常组外,其余各组小鼠均制备EAE模型。AAV-β组、AAV-β+中药组小鼠通过尾静脉注射AAV-β干扰β-arrestin1蛋白的表达。造模第8天开始每天灌胃相应药液/生理盐水1次,连续14 d。检测小鼠神经功能评分,观察小鼠脑和脊髓组织的病理形态学变化,检测小鼠血清中炎症因子[白细胞介素2(IL-2)、IL-23、γ干扰素(IFN-γ)]水平,检测小鼠脑和脊髓组织中β-arrestin1、cAMP、PKA、CREB蛋白表达水平。结果与正常组比较,模型组小鼠神经功能评分、血清中炎症因子水平以及脑、脊髓组织中β-arrestin1蛋白表达水平均显著升高(P<0.05或P<0.01);脑和脊髓组织中PKA、CREB、cAMP蛋白表达水平均显著降低(P<0.05或P<0.01);脑和脊髓组织中大部分神经元可见胞体皱缩深染及炎症细胞聚集现象,且存在不同程度的脱髓鞘改变。与模型组比较,各给药组小鼠神经功能评分、脑和脊髓组织的病理形态学变化及大部分指标(除AAV-β组脑组织中的CREB、cAMP蛋白外)均显著逆转(P<0.05或P<0.01)。与AAV-β组比较,AAV-β+中药组小鼠神经功能评分、血清中IFN-γ水平、脊髓中β-arrestin1蛋白表达水平均显著降低(P<0.05或P<0.01),脑与脊髓组织中PKA、cAMP蛋白表达水平显著升高(P<0.05或P<0.01)。结论益肾达络饮可能是通过抑制中枢神经系统中β-arrestin1的表达,进而激活cAMP/PKA/CREB信号通路,减轻神经系统炎症,最终缓解EAE的症状。 展开更多
关键词 益肾达络饮 实验性自身免疫性脑脊髓炎 β-动蛋白1 蛋白激酶A CAMP反应元件结合蛋白 炎症因子
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β-制动蛋白2在炎性痛小鼠脊髓背角的表达及作用
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作者 刘苑莹 李腊梅 +3 位作者 郭欢 罗层 解柔刚 刘霞 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 2023年第2期165-171,共7页
目的:通过建立不同类型的炎性痛模型,观察β-制动蛋白2(Arrb2)在炎性痛小鼠疼痛发展过程中的作用。方法:在WT小鼠和Arrb2^(-/-)小鼠建立由卡拉胶(carrageenan)诱导急性炎性痛模型和弗氏完全佐剂(CFA)诱导慢性炎性痛模型,通过von Frey纤... 目的:通过建立不同类型的炎性痛模型,观察β-制动蛋白2(Arrb2)在炎性痛小鼠疼痛发展过程中的作用。方法:在WT小鼠和Arrb2^(-/-)小鼠建立由卡拉胶(carrageenan)诱导急性炎性痛模型和弗氏完全佐剂(CFA)诱导慢性炎性痛模型,通过von Frey纤维丝法测定不同时间点的机械缩足反应阈值(PWT);利用Western Blot技术观察Arrb2在急性痛和慢性痛中的表达;在脊髓背角采用鞘内给药的方式,通过von Frey纤维丝法检测小鼠给予μ受体选择性激动剂(DAMGO)后短期和长期的PWT。结果:与WT小鼠相比,Arrb2^(-/-)小鼠在急性痛状态下痛敏恢复程度较慢,而在慢性痛早期表现出显著的抑痛作用。Western Blot结果显示:在急性痛模型下,脊髓背角Arrb2蛋白表达无明显变化,而在慢性痛模型下,Arrb2蛋白表达下降。最后,鞘内注射DAMGO实验表明,在急性痛模型下,敲除Arrb2后鞘内注射DAMGO短期无显著作用,后期可诱发吗啡耐受样痛敏;在慢性痛状态下,敲除Arrb2后鞘内注射DAMGO则在短期和长期均表现出镇痛作用的显著增强。结论:Arrb2在不同类型的炎性痛中表达和作用均有所不同。 展开更多
关键词 β-动蛋白2 卡拉胶 弗式完全佐剂 μ受体选择性激 Arrb2^(-/-)小鼠
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