涎腺疾病

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《中国医学文摘（口腔医学）》 2008年第1期30-32,共3页

涎腺肿瘤中hTERTmRNA表达的研究；PCNA在db／db自发性糖尿病小鼠颌下腺的表达；Genistein对涎腺腺样囊性癌细胞生长及Survivin表达的影响；力学刺激对人腺样囊性癌高低转移细胞株中E-cad／cat复合体的影响；DNA

关键词 涎腺疾病 涎腺腺样囊性癌细胞 hTERTmRNA表达 SURVIVIN表达 GENISTEIN 低转移细胞株 β启动子 糖尿病小鼠

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MTS1基因β启动子转录活性研究

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作者 冯文莉 刘兴 +1 位作者 涂植光 黄宗干 《中华血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第7期344-346,共3页

目的　研究MTS1基因 β启动子在急性T淋巴细胞白血病细胞株中的转录激活情况 ,鉴定 β启动子转录活性的功能片段区。方法　用DNA重组方法 ,构建MTS1基因 β启动子 3′端转录起始点相同 ,而 5′端序列不同的 7种pGL3重组质粒。用脂质体... 目的　研究MTS1基因 β启动子在急性T淋巴细胞白血病细胞株中的转录激活情况 ,鉴定 β启动子转录活性的功能片段区。方法　用DNA重组方法 ,构建MTS1基因 β启动子 3′端转录起始点相同 ,而 5′端序列不同的 7种pGL3重组质粒。用脂质体介导的基因瞬时转染法 ,将构建的重组质粒分别转染MTS1基因双等位缺失的Jurkat细胞株 ,检测pGL3重组质粒中荧光素酶报告基因的表达 ,观察 β启动子在Jurkat细胞中的激活情况及其基础转录活性片段区。 结果　成功构建了MTS1基因 β启动子 7种不同片段的重组质粒 ,它们在Jurkat细胞中均有转录活性 ,其中 0 .38kbSacⅡ SacⅠ酶切片段是MTS1基因 β启动子转录活性的基础片段。 结论　MTS1β启动子可在Jurkat细胞中被激活。 展开更多

关键词 MTS1基因 β启动子 基因表达 急性T淋巴细胞白血病 发病机制

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人IFN-β启动子基因报告质粒的构建及SARS-CoV3a和7a蛋白对IFN-β诱生作用的初步研究 被引量：1

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作者 徐春娥 付玲 +6 位作者 侯丽华 翁少洁 来大志 李健民 于婷 于长明 陈薇 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第12期6-10,共5页

3a蛋白和7a蛋白是SARS-CoV的非结构蛋白,分别主要由SARS基因组中ORF3a和ORF7a所编码。在体内和体外感染病毒的细胞中均发现了有3a蛋白的表达。首先将pGL3-Control载体进行了改构,除去了SV40启动子基因,获得了pGL3-Enhancer载体,将获得的... 3a蛋白和7a蛋白是SARS-CoV的非结构蛋白,分别主要由SARS基因组中ORF3a和ORF7a所编码。在体内和体外感染病毒的细胞中均发现了有3a蛋白的表达。首先将pGL3-Control载体进行了改构,除去了SV40启动子基因,获得了pGL3-Enhancer载体,将获得的IFN-β启动子基因连入载体中,构建了带有人IFN-β启动子基因的荧光素酶报告质粒IP-21,并且通过实验证明所构建的质粒在干扰素的诱导剂NDV的作用下能够表达荧光素酶活性,照度计检测荧光素酶活性增强,从而验证了所构建的重组质粒的有效性。为了观察SARS-CoV非结构蛋白3a和7a对干扰素诱生途径的影响,将IP-21瞬转入稳定表达有3a和7a蛋白的CHO细胞,通过荧光素酶的信号强弱对3a和7a的作用进行分析,结果表明SARS-CoV的3a和7a蛋白能够刺激荧光素酶的表达,即在体外的细胞实验中,3a和7a能有效地激活IFN-β的启动子部分。此结果对进一步研究3a和7a的功能以及对SARS-CoV的致病机制的进一步研究有一定意义。 展开更多

关键词 SARS-COV 3a蛋白7a蛋白 IFN-β启动子 荧光素酶报告系统

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鸭IFN-β启动子双荧光素酶报告基因系统的构建及活性检测 被引量：1

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作者 高全新 刘云霞 +2 位作者 程玉强 严亚贤 孙建和 《上海农业学报》 CSCD 2018年第3期66-71,共6页

通过PCR方法扩增获得6个不同长度的鸭IFN-β启动子DNA片段,并连接至萤火虫荧光素酶报告质粒p GL3.0,构建包含6个鸭IFN-β启动子的报告质粒。分别将构建的报告质粒与内参报告质粒p RL-TK转染至DEF细胞,检测报告质粒在不同刺激下的荧光素... 通过PCR方法扩增获得6个不同长度的鸭IFN-β启动子DNA片段,并连接至萤火虫荧光素酶报告质粒p GL3.0,构建包含6个鸭IFN-β启动子的报告质粒。分别将构建的报告质粒与内参报告质粒p RL-TK转染至DEF细胞,检测报告质粒在不同刺激下的荧光素酶活性。结果表明:包含鸭IFN-β启动子全长的报告质粒p GL-IFN-β-1593能够有效地被相应刺激物激活;截短研究表明,包含390 bp鸭IFN-β启动子的报告质粒p GL-IFN-β-453的荧光素酶活性与全长基本一致,且一定程度上可降低冗余碱基的不良影响,因此选取该质粒用于鸭IFN-β启动子活性检测。本研究建立的基于荧光素酶双报告基因系统的鸭IFN-β启动子活性检测方法,为后续鸭IFN-β通路研究提供了检测工具。 展开更多

关键词 鸭 IFN-β启动子 双荧光素酶报告基因

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SIRT1抑制细菌脂多糖耐受THP-1细胞中IL-1βmRNA的转录 被引量：1

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作者 陈小萍 李明慧 +3 位作者 从美丽 康雁君 郭文平 张永振 《中华流行病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期613-616,共4页

目的研究细菌脂多糖（LPS）耐受的THP-1细胞中沉默信息调节因子1（SIRTl）对IL-1β转录的调节作用。方法使用LPS耐受的人单核细胞THP-1模型，染色体免疫沉淀和real-timePCR定量研究IL-1β启动子区SIRT1结合情况和组蛋白H3lys9／H4lysl6... 目的研究细菌脂多糖（LPS）耐受的THP-1细胞中沉默信息调节因子1（SIRTl）对IL-1β转录的调节作用。方法使用LPS耐受的人单核细胞THP-1模型，染色体免疫沉淀和real-timePCR定量研究IL-1β启动子区SIRT1结合情况和组蛋白H3lys9／H4lysl6的乙酰化情况。结果在LPS耐受的THP～1细胞中，SIRT1对IL-1β启动子区的结合增加约5倍左右（P〈0．05），同时伴随着组蛋白H3lys9／H4lysl6乙酰化的低水平状态（与正常细胞相比P〈0．05）。SIRT1沉默使IL-1β的转录恢复到正常细胞的68％（P〈0．05），同时伴随着组蛋白H3lys9／H4lysl6乙酰化的增加（P〈0．05）。然而，正常细胞和耐受细胞p65lys310乙酰化水平无明显差异。结论SIRT1抑制LPS耐受的THP—1细胞中IL-1βmRNA的转录，其作用与p65lys310乙酰化无关，但是与IL-1β启动子区乙酰化有关。 展开更多

关键词 沉默信息调节因子1 IL-1β启动子 组蛋白乙酰化

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银杏叶总黄酮对缺氧条件下大鼠星型胶质细胞活力、细胞凋亡率及IPS-1/TRAF6信号通路的影响 被引量：2

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作者 武华 安建华 +1 位作者 杜慧杰 李晓东 《中国药师》 CAS 2020年第9期1720-1724,共5页

目的:探讨银杏叶总黄酮对缺氧条件下大鼠星型胶质细胞活力、细胞凋亡率及干扰素β启动子刺激因子1(IPS-1)/肿瘤坏死因子TNF受体相关因子6(TRAF6)信号通路的影响。方法:设立大鼠星型胶质细胞对照组(培养环境为20%O2、5%CO2、75%N2)、缺氧... 目的:探讨银杏叶总黄酮对缺氧条件下大鼠星型胶质细胞活力、细胞凋亡率及干扰素β启动子刺激因子1(IPS-1)/肿瘤坏死因子TNF受体相关因子6(TRAF6)信号通路的影响。方法:设立大鼠星型胶质细胞对照组(培养环境为20%O2、5%CO2、75%N2)、缺氧组(培养环境为1%O2、5%CO2、94%N2)、银杏叶总黄酮低、中、高剂量组(终浓度100,200,400μg·ml^-1)。培养结束后,测定各组细胞活力、凋亡水平、细胞周期、IPS-1、TRAF6 mRNA和蛋白水平。结果:与对照组比较,缺氧组光密度(OD)值、存活率水平显著降低(P<0.05),凋亡率、G1期水平、IPS-1、TRAF6 mRNA和蛋白水平显著升高(P<0.05);与缺氧组比较,银杏叶总黄酮各剂量组OD值、存活率水平显著升高(P<0.05),凋亡率、G1期水平、IPS-1、TRAF6 mRNA和蛋白水平显著降低(P<0.05);且各指标变化与银杏叶总黄酮浓度呈正相关(P<0.05)。结论:银杏叶总黄酮能提高缺氧条件下大鼠星型胶质细胞活力、抑制其凋亡;其机制与银杏叶总黄酮抑制星型胶质细胞IPS-1、TRAF6 mRNA和蛋白表达水平有关。 展开更多

关键词 银杏叶总黄酮 缺氧 星型胶质细胞 干扰素β启动子刺激因子1/肿瘤坏死因子TNF受体相关因子6信号通路

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急性冠脉综合征发病易感性与IL-1β启动子区基因多态性的关系

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作者 陈鑫 陈侃 《北华大学学报（自然科学版）》 CAS 2022年第2期204-208,共5页

目的探讨急性冠脉综合征发病易感性与白细胞介素-1β(IL-1β)启动子区-1470基因多态性的关系.方法选取90例急性冠脉综合征患者为研究组,根据病变类型分为不稳定型心绞痛组46例,心肌梗死组44例;冠脉造影检查正常者45例为对照组.应用全自... 目的探讨急性冠脉综合征发病易感性与白细胞介素-1β(IL-1β)启动子区-1470基因多态性的关系.方法选取90例急性冠脉综合征患者为研究组,根据病变类型分为不稳定型心绞痛组46例,心肌梗死组44例;冠脉造影检查正常者45例为对照组.应用全自动生化分析仪检测患者血清空腹血糖和血脂指标,酶联免疫吸附法检测IL-1β浓度,分离外周血标本中的基因组DNA,PCR扩增后采用双脱氧测序法检测IL-1β启动子区-1470基因多态性.结果研究组患者吸烟率、合并高血压和糖尿病比例及空腹血糖、甘油三酯、总胆固醇、低密度脂蛋白水平均明显高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05).研究组患者中IL-1β启动子区-1470 TT基因型的比例明显低于对照组,CC基因型的比例明显高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.01);研究组患者中T等位基因频率明显低于对照组,C等位基因频率明显高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.01).非条件Logistic回归分析显示:与对照组比较,IL-1β启动子区-1470 CC基因型携带者患急性冠脉综合征、不稳定型心绞痛、心肌梗死的风险分别高出TT基因型携带者的3.35倍(OR=3.350,95%CI=1.270~7.090,P<0.001)、3.14倍(OR=3.140,95%CI=1.090~7.370,P<0.001)、3.58倍(OR=3.580,95%CI=1.310~7.840,P<0.001);C等位基因携带者患急性冠脉综合征、不稳定型心绞痛、心肌梗死的风险分别高出T等位基因携带者的1.74倍(OR=1.740,95%CI=1.150~3.230,P=0.040)、1.68倍(OR=1.680,95%CI=1.050~2.980,P=0.080)、1.79倍(OR=1.790,95%CI=1.130~3.410,P=0.003).研究组IL-1β启动子区-1470基因型为TT、TC、CC的患者血清可溶性IL-1β浓度均明显高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.01);研究组、对照组中TC基因型、CC基因型与TT基因型比较差异均无统计学意义(P>0.05).结论急性冠脉综合征发病易感性与IL-1β启动子区-1470基因多态性密切相关,IL-1β启动子区-1470 CC基因型和携带C等位基 展开更多

关键词 急性冠脉综合征 易感性 IL-1β启动子区 基因多态性

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鸭IFN-β启动子区域IRF1结合位点荧光素酶报告质粒的构建与活性检测

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作者 张蓉蓉 王红琳 +5 位作者 卢琴 张腾飞 温国元 罗青平 汪最 邵华斌 《湖北农业科学》 2019年第S02期433-435,共3页

构建并鉴定鸭Ⅰ型干扰素β(IFN-β)基因启动区域的IRF1结合位点荧光素酶报告基因载体,并进行转录活性分析。通过PCR方法从鸭脾脏cDNA中克隆得到鸭干扰素启动子区域IRF1结合位点,通过连接转化亚克隆至含萤火虫荧光素酶报告基因pGL4.2-ba... 构建并鉴定鸭Ⅰ型干扰素β(IFN-β)基因启动区域的IRF1结合位点荧光素酶报告基因载体,并进行转录活性分析。通过PCR方法从鸭脾脏cDNA中克隆得到鸭干扰素启动子区域IRF1结合位点,通过连接转化亚克隆至含萤火虫荧光素酶报告基因pGL4.2-basic载体上,构建得到4个重复鸭源IRF1结合位点的荧光素酶报告基因载体4×IRF1-luc;用JetPEITM转染试剂将构建的报告基因转染至鸭胚成纤维细胞系DEF,在poly(I∶C)的刺激下,荧光素酶活性显著增加。 展开更多

关键词 鸭干扰素β启动子区域 IRF1 荧光素酶报告质粒 poly(I∶C)

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IPS-1 SNP在调控HBV感染后干扰素应答机制的研究

9

作者 刘柯慧 汤伟亮 +6 位作者 项晓刚 赖荣陶 李凤棣 赵钢德 吴海清 谢青 王晖 《肝脏》 2014年第9期664-668,共5页

目的探讨干扰素β启动子刺激因子1(IPS-1)不同单核苷酸多态性(SNP)基因型对HBV感染后干扰素应答作用机制。方法利用IPS-1野生型和rs17857295、rs7262903、rs7269320三种SNP基因型慢病毒表达载体,转染目的细胞HepG2、HepG2.2.15细胞,qPC... 目的探讨干扰素β启动子刺激因子1(IPS-1)不同单核苷酸多态性(SNP)基因型对HBV感染后干扰素应答作用机制。方法利用IPS-1野生型和rs17857295、rs7262903、rs7269320三种SNP基因型慢病毒表达载体,转染目的细胞HepG2、HepG2.2.15细胞,qPCR检测HBV感染和IPS-1不同SNP基因型对目的基因表达情况的影响,检测细胞转染后IFN-βmRNA表达水平,探讨IPS-1不同SNP基因型对HBV感染后细胞干扰素应答的机制。结果 IPS-1rs17857295和rs7262903两种SNP基因型转染HepG2.2.15细胞后,IPS-1基因表达水平显著低于野生型转染组(451.77比712.53,498.71比712.53,P<0.01);但IFN-βmRNA表达水平显著高于野生型转染组(分别为5.33比0.98和3.59比0.98,P<0.01);rs7269320 SNP基因型过表达后,IPS-1基因表达水平显著低于野生型转染组(290.63比712.53,P<0.01),但IFN-βmRNA表达水平无明显变化(0.74比0.98)。另外,rs17859295基因型分别转染HepG2和HepG2.2.15细胞后,后者IFN-βmRNA表达水平显著高于前者(5.33比2.25,P<0.01)。结论 IPS-1 rs17857295和rs7262903两种SNP基因型HBV感染者,尤其rs17857295 SNP基因型,清除病毒的能力可能强于野生型的感染者;而IPS-1野生型和rs7269320 SNP基因型HBV感染者可能更易形成病毒感染的慢性化。 展开更多

关键词 干扰素β启动子刺激因子-1 单核苷酸多态性 乙型肝炎病毒 基因定点突变 慢病毒

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DT40细胞sIgMλ轻链基因敲除载体的构建

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作者 游雷鸣 罗俊 +4 位作者 王爱萍 张改平 卜丹 郭亚男 祈艳华 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2009年第3期1-6,共6页

从鸡B淋巴DT40细胞系中克隆-βactin启动子,替换pCDNA3.1(+)载体中的SV40启动子,构建-βactin启动子驱动的Neomycin抗性基因表达框。将克隆的sIgMλ轻链基因两侧各约2 kb的序列插入到抗性表达框的两侧作为同源臂。PCR、酶切以及测序结... 从鸡B淋巴DT40细胞系中克隆-βactin启动子,替换pCDNA3.1(+)载体中的SV40启动子,构建-βactin启动子驱动的Neomycin抗性基因表达框。将克隆的sIgMλ轻链基因两侧各约2 kb的序列插入到抗性表达框的两侧作为同源臂。PCR、酶切以及测序结果表明成功构建了靶向sIgMλ轻链基因的置换型打靶载体pCDNA-act-neo-HR。为建立sIgMλ轻链基因敲除的DT40细胞模型,探究sIgMλ轻链在IBDV感染DT40细胞过程中的作用奠定了基础。 展开更多

关键词 sIgMλ轻链 -βactin启动子 基因敲除 同源重组

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泥鳅β-actin启动子介导的革胡子鲶GH重组基因的构建及启动活性研究

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作者 金铁根 李相赫 +3 位作者 陈阳 薛松磊 徐琪 陈国宏 《水产学杂志》 CAS 2014年第6期1-7,共7页

为获得快速生长的泥鳅(Misgurnus anguillicaudatus),研究了泥鳅β-actin基因启动子介导的革胡子鲶(Clarias gariepinus)生长激素(growth hormone,GH)重组基因。采用PCR和RT-PCR技术克隆泥鳅β-actin基因近端启动子、3′-UTR及革胡子鲶G... 为获得快速生长的泥鳅(Misgurnus anguillicaudatus),研究了泥鳅β-actin基因启动子介导的革胡子鲶(Clarias gariepinus)生长激素(growth hormone,GH)重组基因。采用PCR和RT-PCR技术克隆泥鳅β-actin基因近端启动子、3′-UTR及革胡子鲶GH基因编码区,构建一个长为2 418bp的GH重组基因DPRK。首先,构建了以增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因作为报告基因的重组表达载体p AF(pβ-actin promoter-EGFP),然后转染DF1真核细胞,同时经酶切线性化后显微注射到斑马鱼(Danio rerio)和泥鳅的受精卵中,以评价泥鳅β-actin启动子的启动活性。其次,将重组基因DPRK显微注射到泥鳅受精卵中。结果显示:泥鳅β-actin启动子能在DF1细胞、斑马鱼和泥鳅的受精卵中启动绿色荧光蛋白的表达;泥鳅的荧光表达率(78.44%)显著高于斑马鱼(29.62%);泥鳅受精卵显微注射DPRK 20d后,在m RNA水平检测到GH基因的表达。这表明泥鳅β-actin基因近端启动子具有显著的启动活性,且重组基因DPRK能在泥鳅体内表达,为下一步泥鳅的基因工程育种奠定了理论基础。 展开更多

关键词 泥鳅 β-actin启动子 革胡子鲶鱼GH基因 显微注射

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表达载体pCAGGS显著增强禽流感DNA疫苗的免疫保护效果 被引量：29

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作者 姜永萍 张洪波 +5 位作者 步志高 李呈军 赵有淑 王秀荣 于康震 陈化兰 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期825-830,共6页

目的将A/Goose/GuangDong/1/96(H5N1)[GD/1/96(H5N1)]的HA基因插入鸡β-actin启动子高效真核表达载体pCAGGS,构建了DNA疫苗质粒pCAGGHA5,以提高H5亚型禽流感DNA疫苗的表达水平和免疫保护效果。方法将pCAGGHA5和表达GD/1/96(H5N1)HA基因... 目的将A/Goose/GuangDong/1/96(H5N1)[GD/1/96(H5N1)]的HA基因插入鸡β-actin启动子高效真核表达载体pCAGGS,构建了DNA疫苗质粒pCAGGHA5,以提高H5亚型禽流感DNA疫苗的表达水平和免疫保护效果。方法将pCAGGHA5和表达GD/1/96(H5N1)HA基因的质粒pCIHA5通过间接免疫荧光法和Western-blot分析检测转染293T细胞后瞬时表达的HA抗原蛋白,随之将pCAGGHA5及pCIHA5分别以100μg和10μg剂量一次免疫3周龄SPF鸡,4周后用100LD50的HPAIVGD/1/96(H5N1)鼻腔途径进行攻击。结果间接免疫荧光法和Western-blot分析表明2种表达质粒均可正确表达H5亚型HA抗原蛋白,载体pCAGGS表达水平显著高于载体pCI;免疫SPF鸡后,100μgpCAGGHA5可形成5/5的免疫保护,100μgpCIHA5可形成2/4的免疫保护,10μgpCAGGHA5可形成对免疫鸡5/5的免疫保护,而10μgpCIHA5则基本不能形成免疫保护,pCAGGHA5诱导的HI抗体水平远远高于pCIHA5。结论鸡β-actin启动子表达载体pCAGGS可显著提高HA基因体外表达水平和H5亚型禽流感DNA疫苗诱导的保护性抗体免疫反应水平,增强免疫保护效果。 展开更多

关键词 禽流感 H5亚型 鸡β-actin启动子 DNA疫苗 免疫保护

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启动子Pcpcβ提高鱼腥藻7120中hGM-CSF基因表达效率的研究 被引量：6

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作者 魏兰珍 谭玮 王全喜 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期37-42,共6页

利用聚球藻7002中编码藻蓝蛋白基因(cpcβ)的启动子(Pcpcβ),替代穿梭表达载体pDC-GM中的启动子PpsbA,启动外源人粒巨噬细胞集落刺激因子(hGM-CSF)基因在鱼腥藻7120中的表达。蛋白免疫印迹证实,在含Pcpcβ启动子的cGM藻株中,hGM-CSF基... 利用聚球藻7002中编码藻蓝蛋白基因(cpcβ)的启动子(Pcpcβ),替代穿梭表达载体pDC-GM中的启动子PpsbA,启动外源人粒巨噬细胞集落刺激因子(hGM-CSF)基因在鱼腥藻7120中的表达。蛋白免疫印迹证实,在含Pcpcβ启动子的cGM藻株中,hGM-CSF基因的表达水平比原先构建的含PpsbA启动子的GM藻株中提高了90%,且该基因的高效表达对宿主细胞的生长未产生明显影响。结果表明,对于在蓝藻中表达hGM-CSF基因而言,Pcpcβ启动子可能是较适宜的强启动子之一。 展开更多

关键词 cpcβ基因启动子 人粒巨噬细胞集落刺激因子 鱼腥藻7120

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纤维蛋白原β链启动子区域-455单核甘酸多态性与胃癌的相关性 被引量：3

14

作者 严芝强 杨芳 +3 位作者 王黔 王海斌 谢海涛 于扬 《贵阳医学院学报》 CAS 2014年第3期328-332,共5页

目的：探讨纤维蛋白原（Fg）基因β链启动子区域-455 G/A与胃癌发生的相关性.方法：100例胃癌患者为观察组,与观察组年龄匹配的健康体检者100例为对照组,采集两组受检者外周静脉血,用氯仿-异丙醇法提取DNA,应用聚合酶链反应-限制性片段... 目的：探讨纤维蛋白原（Fg）基因β链启动子区域-455 G/A与胃癌发生的相关性.方法：100例胃癌患者为观察组,与观察组年龄匹配的健康体检者100例为对照组,采集两组受检者外周静脉血,用氯仿-异丙醇法提取DNA,应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）和HindⅢ限制性内切酶、分别检测Fgβ-455G/A位点基因型.结果：（1）对照组Fgβ-455位点等位基因G和A的频率分别为0.745、0.255,基因型分布符合Hardy-Weinberg平衡定律;（2）胃癌组Fgβ-455位点GG、GA、AA基因型频率分别为69％、29％和2％,对照组分别为57％、35％和8％,两组比较P＞0.05;Fgβ-455-G、A等位基因频率在胃癌组与对照组分别为0.835、0.745和0.165、0.255,两组比较P＜0.05;（3）突变纯合子AA型与胃癌的发病有关联（OR=0.842,95％ CI=0.362～9.323,P=0.034）,显著降低胃癌的发病风险.结论：Fgβ-455G/A位点基因多态性可能与胃癌发病有关,A等位基因可能对胃癌发病是保护性基因. 展开更多

关键词 癌 胃 纤维蛋白原 β链启动子区域-455 多态性 单核甘酸

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多梳蛋白Nspc1对微管基因Tubulin βⅢ启动子活性的影响 被引量：1

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作者 李辉 樊嵘 +2 位作者 正午 孙奕 龚燕华 《武警后勤学院学报（医学版）》 CAS 2015年第4期253-256,共4页

【目的】克隆TubulinβIII基因的启动子,插入荧光素酶报告基因载体中并检测多梳蛋白Nspc1对其活性的影响。【方法】提取小鼠畸胎瘤细胞系P19的DNA,PCR扩增TubulinβIII近端启动子片段,构建2个不同长度的p GL3basic-TubulinβIII荧光素... 【目的】克隆TubulinβIII基因的启动子,插入荧光素酶报告基因载体中并检测多梳蛋白Nspc1对其活性的影响。【方法】提取小鼠畸胎瘤细胞系P19的DNA,PCR扩增TubulinβIII近端启动子片段,构建2个不同长度的p GL3basic-TubulinβIII荧光素酶报告基因载体,双酶切及测序确定所扩增的DNA序列,将重组的报告基因载体与转录调控因子多梳蛋白Nspc1瞬时共转染小鼠畸胎瘤细胞系P19细胞,使用双荧光素酶报告基因检测系统检测Nspc1对TubulinβIII启动子活性的影响。【结果】鉴定结果表明构建的TubulinβIII启动子序列正确,P19细胞中双荧光素酶活性实验表明构建的报告基因具有启动子活性,并对转录调控因子Nspc1有应答。【结论】成功构建了TubulinβIII荧光素酶报告基因载体,为进一步在多能干细胞分化模型中研究多梳蛋白Nspc1对TubulinβIII基因的表达调控机制奠定了重要基础。 展开更多

关键词 多梳蛋白 TubulinβIII启动子 荧光素酶报告基因 转录活性

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团头鲂β-actin启动子在家蚕中活性分析 被引量：1

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作者 郭学双 周阳 +2 位作者 贡成良 曹广力 薛仁宇 《江苏蚕业》 2010年第2期1-5,共5页

利用双式荧光报告基因检测团头鲂β-actin启动子在家蚕BmN细胞和在家蚕体内的活性。通过脂质体介导法将转基因载体pigA3GFPAβdsRed和辅助质粒(1∶3)混合均匀后转染BmN细胞,48h后,可以检测到同时发绿色荧光和红色荧光的家蚕细胞,表明来... 利用双式荧光报告基因检测团头鲂β-actin启动子在家蚕BmN细胞和在家蚕体内的活性。通过脂质体介导法将转基因载体pigA3GFPAβdsRed和辅助质粒(1∶3)混合均匀后转染BmN细胞,48h后,可以检测到同时发绿色荧光和红色荧光的家蚕细胞,表明来自团头鲂的β-actin启动子在家蚕BmN细胞具有活性,能驱动DsRed基因在家蚕BmN细胞中表达。以gfp、dsred的特异引物,可从pigA3GFPAβdsRed转化家蚕BmN细胞基因组内扩增出gfp、dsred相应大小的片段,提示外源基因已经插入到细胞基因组中。随着转化细胞的传代,绿色荧光稳定存在,而红色荧光会逐渐减弱直至检测不到,暗示β-actin启动子在家蚕细胞中容易受到家蚕BmN细胞因子的影响而活性减弱。将转基因载体pigA3GFPAβdsRed和辅助质粒(1∶3)利用精子介导法导入家蚕受精卵,7天后,在部分受精卵中可观察到绿色荧光和红色荧光,进一步证明了β-actin启动子在家蚕体内具有活性。结果显示,含双式荧光报告基因的转基因载体为鉴定β-actin启动子等外源启动子在家蚕中的活性提供了快捷准确的鉴定方法。 展开更多

关键词 团头鲂β-actin启动子 PIGGYBAC转座子 转基因 家蚕 精子介导法

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