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重组腺病毒缺氧诱导因子-1α体外靶向性转染大鼠缺氧脑微血管内皮细胞的研究 被引量：4
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作者 晋明璐 陶陶 +4 位作者 邹哲华 徐坚 古丽玲 付钰 梅建 《中华老年医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期587-590,共4页
目的探讨重组腺病毒缺氧诱导因子-1α(AdHIF-α1)在大鼠缺氧脑微血管内皮细胞(BMEC)中的转染情况,为AdHIF-1α治疗缺氧的BMEC提供理论基础。方法建立大鼠BMEC的体外分离培养及鉴定,并用含100μmol/L二氯化钴(CoCl2)的维持培养液培养,制... 目的探讨重组腺病毒缺氧诱导因子-1α(AdHIF-α1)在大鼠缺氧脑微血管内皮细胞(BMEC)中的转染情况,为AdHIF-1α治疗缺氧的BMEC提供理论基础。方法建立大鼠BMEC的体外分离培养及鉴定,并用含100μmol/L二氯化钴(CoCl2)的维持培养液培养,制成BMEC缺氧模型;然后将AdHIF-1α转染入缺氧的BMEC中,在荧光显微镜下观察荧光蛋白的转染情况。结果AdHIF-lα转染入缺氧的BMEC后,分别在12 h、24 h、48 h、72 h于荧光显微镜下观察AdHIF-lα的转染情况,结果显示,12 h开始出现少许荧光,光密度值(A值)0.13±0.01;24 h荧光表达有所增强,A值0.46±0.03;48 h荧光表达最明显,A值0.97±0.05;72 h可见荧光减弱,A值0.38±0.02;不同时间点比较差异有统计学意义,两两比较结果显示,相邻时间点A值比较差异均有统计学意义(q=25.88、40.00、46.28,均P<0.01)。结论重组腺病毒缺氧诱导因子-1α能成功转染至缺氧的BMEC。 展开更多
关键词 腺病毒科 缺氧诱导因子1 α亚基 内皮细胞 转染
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右美托咪定对内毒素致小鼠巨噬细胞凋亡时HIF-1α表达的影响 被引量：3
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作者 毛幸 陈红光 +4 位作者 闫梦莹 冯竞成 王国林 谢克亮 于泳浩 《中华麻醉学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第12期1505-1508,共4页
目的评价右美托咪定对内毒素致小鼠巨噬细胞凋亡时缺氧诱导因子-1(HIF-1α)表达的影响。方法体外培养小鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞,将细胞接种于6孔板或96孔板,待融合度为60%~70%时,采用随机数字表法分为4组(n=16):对照组(Con组)、右美... 目的评价右美托咪定对内毒素致小鼠巨噬细胞凋亡时缺氧诱导因子-1(HIF-1α)表达的影响。方法体外培养小鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞,将细胞接种于6孔板或96孔板,待融合度为60%~70%时,采用随机数字表法分为4组(n=16):对照组(Con组)、右美托咪定组(Dex组)、脂多糖组(LPS组)和LPS+右美托咪定组(LPS+Dex组)。Con组加入PBS缓冲液;Dex组加入1μmol/L右美托咪定;LPS组和LPS+Dex组均给予1μg/ml的LPS;LPS+Dex组于加入LPS后立即给予1μmol/L右美托咪定,各组孵育24h。采用TUNEL法测定细胞凋亡率,采用JC-1法测定线粒体膜电位水平,采用荧光酶标仪法测定ROS含量,采用酶标仪法测定ATP含量,采用Westernblot法测定HIF-1α、细胞色素c(Cytc)、caspase-9和cleavedcaspase-3的表达水平。结果与Con组相比,LPS组巨噬细胞凋亡率和ROS含量升高,ATP含量和线粒体膜电位水平降低,HIF-1α、Cytc、caspase-9和cleavedcaspase-3表达上调(P<0.05),Dex组上述指标差异无统计学意义(P>0.05);与LPS组相比,LPS+Dex组巨噬细胞凋亡率和ROS含量降低,ATP含量和线粒体膜电位水平升高,HIF-1α表达上调,Cytc、caspase-9和cleavedcaspase-3表达下调(P<0.05)。结论右美托咪定可减轻内毒素致巨噬细胞氧化应激损伤,改善线粒体功能,抑制线粒体途径凋亡,其机制可能与上调HIF-1α表达有关。 展开更多
关键词 右美托咪咙 内毒素类 巨噬细胞 线粒体 细胞凋亡 缺氧诱导因子 1a亚基
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