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比格犬α7干扰素成熟肽基因的原核表达及表达产物活性的分析
被引量：
1
1
作者
潘福星
朱梅胜
+5 位作者
冯培祥
王冬冬
范丹丹
齐娟
王祖荣
尹燕博
《中国兽医科学》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第3期298-302,共5页
从比格犬的脾中提取基因组DNA,采用RT-PCR方法扩增比格犬α7干扰素成熟肽基因。将纯化的PCR产物克隆至pMD19-T载体,转化入感受态细胞DH5α中,PCR检测及测序鉴定结果表明,克隆的目的基因为比格犬α7干扰素成熟肽,与GenBank中登录的犬干...
从比格犬的脾中提取基因组DNA,采用RT-PCR方法扩增比格犬α7干扰素成熟肽基因。将纯化的PCR产物克隆至pMD19-T载体,转化入感受态细胞DH5α中,PCR检测及测序鉴定结果表明,克隆的目的基因为比格犬α7干扰素成熟肽,与GenBank中登录的犬干扰素序列(NM001006654)的同源性达到100%。在此基础上构建重组原核表达质粒pET-32a-CaIFN-α7,并转化至表达宿主BL21(DE3)中。该工程菌在37℃经IPTG诱导后进行SDS-PAGE电泳,结果在分子质量约38.4ku处出现了目的蛋白条带,表达产物主要以包涵体形式存在。经Bandscan软件分析,表达产物约占菌体总蛋白的48.5%。用Protein Refolding Kit对包涵体进行纯化复性,重组CaIFN-α7在犬肾细胞(MDCK)上具有较高的抗病毒活性。
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关键词
比格犬
α
7
干扰素
成熟
肽
基因
克隆
原核表达
抗病毒活性
原文传递
题名
比格犬α7干扰素成熟肽基因的原核表达及表达产物活性的分析
被引量：
1
1
作者
潘福星
朱梅胜
冯培祥
王冬冬
范丹丹
齐娟
王祖荣
尹燕博
机构
青岛农业大学动物科技学院
青岛澳兰百特生物工程有限公司
青岛博隆实验动物有限公司
出处
《中国兽医科学》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第3期298-302,共5页
基金
"十二五"农村领域国家科技计划项目(2012AA101303)
文摘
从比格犬的脾中提取基因组DNA,采用RT-PCR方法扩增比格犬α7干扰素成熟肽基因。将纯化的PCR产物克隆至pMD19-T载体,转化入感受态细胞DH5α中,PCR检测及测序鉴定结果表明,克隆的目的基因为比格犬α7干扰素成熟肽,与GenBank中登录的犬干扰素序列(NM001006654)的同源性达到100%。在此基础上构建重组原核表达质粒pET-32a-CaIFN-α7,并转化至表达宿主BL21(DE3)中。该工程菌在37℃经IPTG诱导后进行SDS-PAGE电泳,结果在分子质量约38.4ku处出现了目的蛋白条带,表达产物主要以包涵体形式存在。经Bandscan软件分析,表达产物约占菌体总蛋白的48.5%。用Protein Refolding Kit对包涵体进行纯化复性,重组CaIFN-α7在犬肾细胞(MDCK)上具有较高的抗病毒活性。
关键词
比格犬
α
7
干扰素
成熟
肽
基因
克隆
原核表达
抗病毒活性
Keywords
Beagle
mature peptide of IFN-
α
7
gene
cloning
prokaryotic expression
antiviral activity
分类号
S852.42 [农业科学—基础兽医学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
比格犬α7干扰素成熟肽基因的原核表达及表达产物活性的分析
潘福星
朱梅胜
冯培祥
王冬冬
范丹丹
齐娟
王祖荣
尹燕博
《中国兽医科学》
CAS
CSCD
北大核心
2014
1
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