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琼胶酶及其综合应用的研究概况 被引量：27
1
作者 刘江涛 蔡俊鹏 吴冰 《现代食品科技》 EI CAS 2005年第1期177-179,共3页
琼胶酶是一组能降解琼胶多糖的酶,主要有α-琼胶酶、β-琼胶酶两种类型,降解产物在很多方面有独特的活性,除此以外,琼胶酶在分子生物学方面也多有应用,本文从琼胶酶的种类及作用机理、来源、分子生物学研究状况以及应用等方面概述了琼... 琼胶酶是一组能降解琼胶多糖的酶,主要有α-琼胶酶、β-琼胶酶两种类型,降解产物在很多方面有独特的活性,除此以外,琼胶酶在分子生物学方面也多有应用,本文从琼胶酶的种类及作用机理、来源、分子生物学研究状况以及应用等方面概述了琼胶酶的研究进展。 展开更多
关键词 琼胶酶 α-琼胶酶 Β-琼胶酶 分子生物学
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α-琼胶酶OUC-GaJJ96的异源表达及酶学性质 被引量：5
2
作者 金佳 江承程 毛相朝 《食品科学技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期47-54,共8页
α-琼胶酶在功能性琼胶寡糖的酶法制备中发挥着重要作用,目前有关α-琼胶酶的研究较少。克隆表达了来自溶藻性吉尔维菌(Gilvimarinus agarilyticus)的α-琼胶酶,命名为OUC-GaJJ96,并对其酶学性质及水解产物进行研究。该酶属于糖苷水解... α-琼胶酶在功能性琼胶寡糖的酶法制备中发挥着重要作用,目前有关α-琼胶酶的研究较少。克隆表达了来自溶藻性吉尔维菌(Gilvimarinus agarilyticus)的α-琼胶酶,命名为OUC-GaJJ96,并对其酶学性质及水解产物进行研究。该酶属于糖苷水解酶96家族,基因全长为3759 bp,编码1252个氨基酸,N端含有26个氨基酸编码的信号肽,蛋白分子质量约为180 kDa。酶学性质研究显示:OUC-GaJJ96最适反应温度和最适反应pH值分别为30℃和7.0(Tris-HCl缓冲液),比酶活力为2.68 U/mg。通过高效液相色谱和电喷雾离子源质谱对OUC-GaJJ96的水解产物进行分析,结果表明:该酶水解产物是琼二糖、琼四糖和琼六糖,其中琼四糖是主要产物,OUC-GaJJ96可用于制备具有生物活性的琼胶寡糖。 展开更多
关键词 α-琼胶酶 琼胶寡糖 异源表达 酶学性质 水解分析
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利用Site-Finding PCR克隆琼胶酶基因 被引量：4
3
作者 刘丹 邢培川 +1 位作者 于文功 路新枝 《现代生物医学进展》 CAS 2013年第1期5-10,共6页
目的:新型琼胶酶基因的筛选。方法:根据α-琼胶酶基因序列的同源性,设计了兼并引物,利用兼并PCR对所筛选到的琼胶酶产生菌株进行筛选,阳性菌株进行16s rDNA序列测定并构建了进化树。利用染色体步移技术Site-finding PCR获得目的基因的... 目的:新型琼胶酶基因的筛选。方法:根据α-琼胶酶基因序列的同源性,设计了兼并引物,利用兼并PCR对所筛选到的琼胶酶产生菌株进行筛选,阳性菌株进行16s rDNA序列测定并构建了进化树。利用染色体步移技术Site-finding PCR获得目的基因的上下游序列,经过拼接获得全长的目的基因序列,并利用Blast对其进行分析。将目的基因插入pET 24a(+)载体,转化大肠杆菌BL21(DE3),利用平板水解圈初步鉴定了重组酶的性质,并利用DNS法检测了重组酶发酵上清液的酶活。结果:获得了一株疑似α-琼胶酶产生菌株,16s rDNA序列鉴定显示为Thalassomonas sp.,命名为Thalassomonas sp.LD5。获得了一个新的基因,命名为agaD。agaD开放阅读框长4401 bp,编码1466个氨基酸,理论分子量为158.8kDa。序列分析表明,agaD编码的蛋白AgaD与已有的两种α-琼胶酶的相似性分别为89%和77%。重组AgaD经诱导后可以直接降解琼胶平板产生水解圈,其发酵上清液酶活为0.2 U.ml-1,说明该蛋白为琼胶酶。结论:采用分子克隆技术分离出新的琼胶酶基因,该基因的发现为活性寡糖的制备提供了新的工具。 展开更多
关键词 α-琼胶酶 单胞菌Thalassomonas SiteFinding PCR 兼并PCR
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