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SDS-PAGE电泳测定乳清蛋白方法的研究 被引量：25
1
作者 张杉 陈敏 李慧 《食品科技》 CAS 北大核心 2008年第1期215-219,共5页
实验建立扫描定量测定乳清蛋白中α-乳白蛋白和β-乳球蛋白含量的SDS-PAGE电泳分析方法。外标法定量,α-乳白蛋白和β-乳球蛋白两种组分线性范围分别为0.25～1.75μg和0.16～1.44μg,线性关系良好,相关系数分别为0.9940和0.9912。加标... 实验建立扫描定量测定乳清蛋白中α-乳白蛋白和β-乳球蛋白含量的SDS-PAGE电泳分析方法。外标法定量,α-乳白蛋白和β-乳球蛋白两种组分线性范围分别为0.25～1.75μg和0.16～1.44μg,线性关系良好,相关系数分别为0.9940和0.9912。加标回收率分别为88.6%～86.3%,RSD分别为3.8%～4.2%。对乳清粉和奶粉的分析结果表明,SDS-PAGE电泳分析方法是一种简易、快速、准确测定α-乳白蛋白和β-乳球蛋白含量的方法。 展开更多
关键词 SDS-PAGE Α-乳白蛋白 β-乳球蛋白 乳清蛋白
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热处理对牛乳成分的变化影响及热损标识物的选择 被引量：27
2
作者 韩荣伟 王加启 郑楠 《中国食物与营养》 2011年第7期22-29,共8页
牛乳是一种成分组成十分复杂的高级营养食品,热处理是乳品工业中不可或少的一个环节,通过杀灭微生物可以延长货架期或改变性状。但乳的加热处理会改变乳成分的物理化学状态,促使乳中一些热敏物质发生变化,尤其是乳蛋白(免疫球蛋白、酶... 牛乳是一种成分组成十分复杂的高级营养食品,热处理是乳品工业中不可或少的一个环节,通过杀灭微生物可以延长货架期或改变性状。但乳的加热处理会改变乳成分的物理化学状态,促使乳中一些热敏物质发生变化,尤其是乳蛋白(免疫球蛋白、酶、乳清蛋白)发生变性,造成牛乳营养成分损失,甚至产生可能有害的新物质。本文对牛乳热处理过程中发生的成分变化以及热损标识物的选择作了详细综述。 展开更多
关键词 牛乳 热处理 美拉德反应 糠氨酸 乳果糖 β-乳球蛋白 FAST指数
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牛乳过敏原β-乳球蛋白间接竞争ELISA检测方法的建立 被引量：23
3
作者 布冠好 郑喆 +1 位作者 郑海 罗永康 《中国农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期71-76,共6页
检测牛乳中的主要过敏原β-乳球蛋白,利用β-乳球蛋白纯品免疫新西兰白兔,制得兔抗牛β-乳球蛋白的多克隆抗体,以β-乳球蛋白包被抗原、自制抗体为一抗、辣根过氧化物酶标记的羊抗兔IgG为二抗、四甲基联苯胺（TMB）为底物,建立了牛乳中... 检测牛乳中的主要过敏原β-乳球蛋白,利用β-乳球蛋白纯品免疫新西兰白兔,制得兔抗牛β-乳球蛋白的多克隆抗体,以β-乳球蛋白包被抗原、自制抗体为一抗、辣根过氧化物酶标记的羊抗兔IgG为二抗、四甲基联苯胺（TMB）为底物,建立了牛乳中β-乳球蛋白的间接竞争酶联免疫检测法（ELISA）。确定了包被抗原质量浓度为0.5μg/mL,一抗最佳稀释度为1∶6 400,酶标二抗稀释度为1∶10 000。结果达到批内误差3.87%,批间误差6.51%;检测的线性范围为0.05～1.00μg/mL,标准曲线回归方程y=-1.930 2x-0.124 1,相关系数为0.994 5,说明所建立的方法灵敏度高,具有良好的准确性和重复性。 展开更多
关键词 牛乳 β-乳球蛋白 过敏原 多克隆抗体 间接竞争ELISA 检测
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牛乳中活性蛋白生物学功能研究进展 被引量：24
4
作者 包晓宇 陈美霞 +1 位作者 王加启 郑楠 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2017年第19期315-324,共10页
牛乳以及牛初乳被认为是天然活性成分最重要的来源,具有很高的营养价值。牛乳中活性蛋白的多功能特性已经得到广泛的表征,其生物学特性越来越受关注。酪蛋白和乳清蛋白是牛乳中两个主要的蛋白组,其完整的分子结构及众多的生物活性肽在... 牛乳以及牛初乳被认为是天然活性成分最重要的来源,具有很高的营养价值。牛乳中活性蛋白的多功能特性已经得到广泛的表征,其生物学特性越来越受关注。酪蛋白和乳清蛋白是牛乳中两个主要的蛋白组,其完整的分子结构及众多的生物活性肽在幼龄动物及人体内发挥着不同的生理功能。本文对牛乳中主要活性蛋白的生物学功能进行了综述。 展开更多
关键词 活性乳蛋白 乳铁蛋白 Α-乳白蛋白 β-乳球蛋白 生物学功能
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牛奶β-乳球蛋白研究进展 被引量：19
5
作者 兰欣怡 王加启 +2 位作者 卜登攀 彭华 张彬 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2009年第6期109-112,共4页
β-乳球蛋白是牛奶中主要乳清蛋白的成分。作者对目前国内外有关β-乳球蛋白的研究进行了综述,主要包括牛奶中β-乳球蛋白的组成与结构、生理功能,热加工对β-乳球蛋白变性的影响及β-乳球蛋白的应用等内容。
关键词 牛奶 β-乳球蛋白 热处理
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牛乳过敏原β-乳球蛋白检测方法的研究进展 被引量：21
6
作者 何圣发 陈红兵 +4 位作者 龙彩云 邹丽君 胡恭华 熊亮 高艳芳 《食品安全质量检测学报》 CAS 2019年第7期1763-1769,共7页
目的食物过敏已成为全球性的食品安全问题,欧美等发达国家均要求对食品中的过敏原成分进行标识,其中就包括作为八大过敏性食物之一的牛乳及其乳制品。β-乳球蛋白是牛乳中的主要过敏原,约占乳清蛋白的50%,牛乳总蛋白的10%,并且约有82%... 目的食物过敏已成为全球性的食品安全问题,欧美等发达国家均要求对食品中的过敏原成分进行标识,其中就包括作为八大过敏性食物之一的牛乳及其乳制品。β-乳球蛋白是牛乳中的主要过敏原,约占乳清蛋白的50%,牛乳总蛋白的10%,并且约有82%的牛乳过敏患者对β-乳球蛋白过敏,因此其可以作为检测食品中是否含牛乳蛋白的一个有效的标志物。建立灵敏、可靠的β-乳球蛋白检测方法,对牛乳过敏原标识及保障牛乳过敏人群的安全消费具有重要意义。本文主要综述了牛乳β-乳球蛋白的高效液相色谱法、超高效液相色谱法、液相色谱-质谱联用法、酶联免疫吸附法、免疫层析法、电化学免疫法、蛋白微阵列法、等离子体共振法等色谱学和免疫学检测方法的研究进展,并对未来发展方向作出展望,以期促进牛乳β-乳球蛋白等过敏原检测方法的研究与开发。 展开更多
关键词 牛乳过敏 β-乳球蛋白 检测方法
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热处理对液态乳中乳清蛋白的影响研究进展 被引量：20
7
作者 屈雪寅 郑楠 +4 位作者 李松励 文芳 孟璐 杨晋辉 王加启 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2017年第9期307-313,共7页
牛乳中的乳清蛋白主要包括β-乳球蛋白、α-乳白蛋白、牛血清白蛋白和免疫球蛋白。在牛乳加工过程中,热处理会使乳中乳清蛋白发生变性,影响了乳清蛋白的结构和活性,进而降低了牛乳的营养价值。本文对乳业发达国家液态乳的主要加工方式... 牛乳中的乳清蛋白主要包括β-乳球蛋白、α-乳白蛋白、牛血清白蛋白和免疫球蛋白。在牛乳加工过程中,热处理会使乳中乳清蛋白发生变性,影响了乳清蛋白的结构和活性,进而降低了牛乳的营养价值。本文对乳业发达国家液态乳的主要加工方式以及热处理过程对4种乳清蛋白的影响进行了综述。 展开更多
关键词 乳清蛋白 热处理 β-乳球蛋白 Α-乳白蛋白
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凝胶电泳法(SDS-PAGE)测定乳与乳制品中β-乳球蛋白的含量 被引量：17
8
作者 韩奕奕 黄菲菲 +1 位作者 王建军 吕春 《乳业科学与技术》 2009年第2期74-77,共4页
建立一种快速、准确测定乳与乳制品中β-乳球蛋白含量的SDS-PAGE方法。β-乳球蛋白标准溶液在0.238-7.128mg/L范围内呈线性相关(r=0.99),具有良好的重复性(RSD<10%),液态奶及奶粉的检出限分别为24mg/100mL、240mg/100g。通过对β-乳... 建立一种快速、准确测定乳与乳制品中β-乳球蛋白含量的SDS-PAGE方法。β-乳球蛋白标准溶液在0.238-7.128mg/L范围内呈线性相关(r=0.99),具有良好的重复性(RSD<10%),液态奶及奶粉的检出限分别为24mg/100mL、240mg/100g。通过对β-乳球蛋白的重复性和灵敏度实验,表明SDS-PAGE方法具有操作简单、准确可靠的特点,适用于乳与乳制品中β-乳球蛋白含量的测定。 展开更多
关键词 β-乳球蛋白 凝胶电泳法 乳与乳制品
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水解牛乳蛋白技术及其产物的功能特性 被引量：7
9
作者 许建香 张智武 《中国乳品工业》 CAS 北大核心 2005年第5期40-45,共6页
牛乳含有丰富的蛋白质,是人类食品中重要的营养成份来源。然而与人乳相比,牛乳中酪蛋白含量比例较高,而且牛乳中的αs-酪蛋白(αs-CN)和β-乳球蛋白(β-LG)是人乳中没有的,因此以牛乳直接喂养的婴儿可能会出现消化不良和过敏症状。对牛... 牛乳含有丰富的蛋白质,是人类食品中重要的营养成份来源。然而与人乳相比,牛乳中酪蛋白含量比例较高,而且牛乳中的αs-酪蛋白(αs-CN)和β-乳球蛋白(β-LG)是人乳中没有的,因此以牛乳直接喂养的婴儿可能会出现消化不良和过敏症状。对牛乳蛋白进行水解的研究消除过敏引起了人们极大的关注。牛乳蛋白的水解主要是通过各种酶,此外还有化学水解(如酸水解),物理水解(如加热、高压)等方法。蛋白质水解后易产生苦味,通过控制水解度或包埋等方法可将苦味降低到不易感觉到的水平。本文还描述了牛乳蛋白水解率测定方法、牛乳蛋白水解产物分析技术,水解牛奶蛋白产物的功能特性及在婴儿配方产品及功能食品中的应用前景。 展开更多
关键词 牛乳蛋白 αs-酪蛋白(αs-CN) β-乳球蛋白(β-LG) 水解率 婴儿配方奶
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牛乳中主要过敏原的研究进展 被引量：10
10
作者 罗曾玲 高金燕 陈红兵 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2007年第2期346-350,共5页
依据国内外关于牛乳中过敏原的研究报道,对牛乳中主要过敏原的结构特征、致敏性、表位、过敏原之间的交叉反应等进行了详细的介绍。
关键词 牛乳过敏 β-乳球蛋白 Α-乳白蛋白 酪蛋白
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不同来源乳中α乳白蛋白、β乳球蛋白和乳铁蛋白含量分析 被引量：16
11
作者 田荣荣 白沙沙 +7 位作者 徐佳佳 孔凡华 郑晓玮 顾海华 吕品鑫 赵玥 李东 崔亚娟 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2020年第4期311-315,321,共6页
本研究通过高效液相色谱-质谱联用法(HPLC-MS)对不同种乳中α-乳白蛋白、β-乳球蛋白和乳铁蛋白的含量进行测定和比较。结果显示,不同来源乳中α-乳白蛋白、β-乳球蛋白、乳铁蛋白和总蛋白存在一定差异。羊乳中乳清蛋白平均值为0.385 mg... 本研究通过高效液相色谱-质谱联用法(HPLC-MS)对不同种乳中α-乳白蛋白、β-乳球蛋白和乳铁蛋白的含量进行测定和比较。结果显示,不同来源乳中α-乳白蛋白、β-乳球蛋白、乳铁蛋白和总蛋白存在一定差异。羊乳中乳清蛋白平均值为0.385 mg/100 g,低于牛乳和牦牛乳;羊乳中乳铁蛋白含量最高,均值为4.43 mg/100 g,最大值9.90 mg/100 g,是优质的乳铁蛋白来源;牦牛乳总蛋白含量(均值3.61%),明显高于牛乳(均值3.22%)和羊乳(均值2.89%);牛奶中乳清蛋白量在三类乳中最高。 展开更多
关键词 牛乳 羊乳 牦牛乳 Α-乳白蛋白 β-乳球蛋白 乳铁蛋白 总蛋白
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β-乳球蛋白加压凝胶的生成及其物化特性研究 被引量：12
12
作者 木泰华 孙艳丽 菅野 長右ヱ門 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2005年第8期1652-1657,共6页
研究了在30℃、800MPa压力的作用下,不同加压时间(5～120min)和不同浓度N-乙基马来酰亚胺(NEM,1～10mmol·L-1)对14%(w/v)的β-乳球蛋白(β-Lg)溶液在pH7.20条件下形成凝胶物理化学特性的影响。结果表明,延长加压时间未对凝胶的硬... 研究了在30℃、800MPa压力的作用下,不同加压时间(5～120min)和不同浓度N-乙基马来酰亚胺(NEM,1～10mmol·L-1)对14%(w/v)的β-乳球蛋白(β-Lg)溶液在pH7.20条件下形成凝胶物理化学特性的影响。结果表明,延长加压时间未对凝胶的硬度和破断应力造成影响。凝胶呈现出类似蜂窝状的多孔网状结构。随加压时间延长,蜂窝状多孔的孔径变大,但其网状结构未受到破坏。在加压时间延长的条件下凝胶保持着高持水力,说明在加压过程中,凝胶内部蛋白质和水的相互作用未产生明显变化。随加压时间延长,用Tris-glycine-EDTA缓冲溶液或含有0.5%SDS和8mol·L-1尿素的缓冲液溶解凝胶,发现凝胶中蛋白溶解度降低。SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳图谱显示,在2-巯基乙醇不存在的条件下,除了β-Lg单体以外,还检出二聚物、三聚物、四聚物以及高分子聚合体的染色带。相反,在2-巯基乙醇存在的条件下,只检出了单体。此外,在800MPa条件下添加10mmol·L-1的N-乙基马来酰亚胺未导致凝胶的生成。表明在pH中性范围内,加压β-Lg凝胶,主要是通过SH基的氧化和SH/S-S内部交换反应形成的内部分子间架桥而形成。 展开更多
关键词 高静水压 β-乳球蛋白 N-乙基马来酰亚胺 物化特性 聚丙烯酰胺凝胶 加压过程 特性研究 2-巯基乙醇 马来酰亚胺 蛋白溶解度
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不同类型热处理方式对牛乳品质的影响 被引量：15
13
作者 王象欣 张秋梅 +3 位作者 魏雪冬 姜毓君 徐琳 鄂来明 《中国乳品工业》 CAS 北大核心 2019年第4期20-23,共4页
目前市场上常见牛奶的杀菌方式有超高温瞬间灭菌(UHT)、巴氏杀菌等,这些牛奶的生产工艺不同,热处理强度不同,活性蛋白的变性率也各不相同。本实验通过比较不同方式热处理对牛奶中α-乳白蛋白、β-乳球蛋白和乳铁蛋白含量的影响,得出蒸... 目前市场上常见牛奶的杀菌方式有超高温瞬间灭菌(UHT)、巴氏杀菌等,这些牛奶的生产工艺不同,热处理强度不同,活性蛋白的变性率也各不相同。本实验通过比较不同方式热处理对牛奶中α-乳白蛋白、β-乳球蛋白和乳铁蛋白含量的影响,得出蒸汽浸入式直接杀菌(INF)对α-乳白蛋白、β-乳球蛋白和乳铁蛋白的热损伤程度低于UHT灭菌,与巴氏杀菌相当(P>0.5),冷藏条件下,产品的保质期可达21 d,货架期高于巴氏杀菌牛奶。合适、恰当的热处理工艺,不仅可以杀死致病性微生物,同时又能最大限度地保留牛奶中的天然活性蛋白营养,保证牛奶的品质。 展开更多
关键词 Α-乳白蛋白 β-乳球蛋白 乳铁蛋白 巴氏杀菌 UHT灭菌 蒸汽浸入式直接杀菌
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间接竞争ELISA法检测牛乳中β-乳球蛋白含量的准确性评价 被引量：14
14
作者 袁水林 熊鼎 +2 位作者 陈红兵 高金燕 李欣 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2014年第18期100-104,共5页
研究建立了以β-乳球蛋白标准品为包被抗原、自制抗体为一抗、辣根过氧化物酶标记的羊抗兔IgG:HRP为二抗、邻苯二胺为底物的间接竞争酶联免疫检测法(indirect competitive enzyme-linked immu nosorbent,ELISA)。同时以反相高效液相色... 研究建立了以β-乳球蛋白标准品为包被抗原、自制抗体为一抗、辣根过氧化物酶标记的羊抗兔IgG:HRP为二抗、邻苯二胺为底物的间接竞争酶联免疫检测法(indirect competitive enzyme-linked immu nosorbent,ELISA)。同时以反相高效液相色谱法定量检测相同样品中β-乳球蛋白含量,采用t检验方法来评价间接竞争ELISA的方法定量检测β-乳球蛋白的准确性。t检验方法结果显示:在显著水平α=0.05下,该间接竞争ELISA法检测β-乳球蛋白的测量值较为准确。 展开更多
关键词 牛乳过敏 β-乳球蛋白 间接竞争ELISA法 反相高效液相色谱
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牛乳清β-乳球蛋白过敏原非酶改性技术研究进展 被引量：8
15
作者 王红梅 张永忠 《中国乳品工业》 CAS 北大核心 2007年第6期48-53,共6页
牛乳乳清蛋白质中的β-乳球蛋白(β-Lactoglobulin或β-LG)是婴儿牛乳过敏的主要过敏原。由于酶水解导致隐蔽于分子内部的抗原决定部位裸露,反而增强了其过敏性,并且产生影响风味的苦味肽。热处理、糖基化作用、乳酸发酵和脂肪酸结合等... 牛乳乳清蛋白质中的β-乳球蛋白(β-Lactoglobulin或β-LG)是婴儿牛乳过敏的主要过敏原。由于酶水解导致隐蔽于分子内部的抗原决定部位裸露,反而增强了其过敏性,并且产生影响风味的苦味肽。热处理、糖基化作用、乳酸发酵和脂肪酸结合等非酶改性技术可有效降低乳蛋白的过敏原性。热处理使蛋白质之间生成热诱导性聚合物,降低过敏性。通过糖基化作用产生糖基化终产物,掩盖抗原决定部位。乳酸菌发酵产生干酪素和蛋白酶,水解蛋白脱敏。硬脂酸与β-乳球蛋白结合以不同结合度结合,脱敏效果不同。相对来说,糖基化反应和乳酸发酵法的脱敏效果较好。为使β-乳球蛋白过敏原改性效果更好,可将两种或两种以上改性方法相结合。 展开更多
关键词 β-乳球蛋白 过敏原 非酶改性
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不同乳制品中α-乳白蛋白、β-乳球蛋白和乳铁蛋白的测定 被引量：11
16
作者 张敏 王瑶 +5 位作者 苏运聪 马晓冲 柴艳兵 张耀广 李飞 李兴佳 《乳业科学与技术》 2020年第5期17-21,共5页
建立高效液相色谱-串联质谱法测定牛乳和婴幼儿配方乳粉中α-乳白蛋白、β-乳球蛋白和乳铁蛋白含量的方法。样品中加入超纯水溶解,经过二硫苏糖醇和碘代乙酰胺溶液反应打开二硫键并保护巯基后,加入胰蛋白酶溶液进行酶解,反应结束后用乙... 建立高效液相色谱-串联质谱法测定牛乳和婴幼儿配方乳粉中α-乳白蛋白、β-乳球蛋白和乳铁蛋白含量的方法。样品中加入超纯水溶解,经过二硫苏糖醇和碘代乙酰胺溶液反应打开二硫键并保护巯基后,加入胰蛋白酶溶液进行酶解,反应结束后用乙腈水溶液定容,离心,移取上清液待测,外标法定量。结果表明:α-乳白蛋白、β-乳球蛋白和乳铁蛋白标准曲线在0~100μg/mL范围内线性良好,相关系数均大于0.995;α-乳白蛋白、β-乳球蛋白和乳铁蛋白在生乳中的平均加标回收率为93.5%~117.1%,相对标准偏差为1.4%~6.7%。该方法前处理操作简便,分析速度快,灵敏度高,可用于牛乳和乳粉中α-乳白蛋白、β-乳球蛋白和乳铁蛋白含量测定。 展开更多
关键词 高效液相色谱-串联质谱法 Α-乳白蛋白 β-乳球蛋白 乳铁蛋白 牛乳
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人乳铁蛋白基因克隆及表达载体构建 被引量：9
17
作者 曹阳 李庆伟 +2 位作者 袁晓东 汤敏谦 安利佳 《大连理工大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第6期696-701,共6页
通过 PCR法扩增出 2 366bp的人乳铁蛋白 c DNA、80 0 bp的山羊β -乳球蛋白基因 5′端调控序列 ,经 PCR反应连接后 ,克隆到表达载体 p LNCX中 .测序结果表明 :与 Gene Bank中登录的序列相比 ,所获人乳铁蛋白 c DNA序列的同源性为 99.74 ... 通过 PCR法扩增出 2 366bp的人乳铁蛋白 c DNA、80 0 bp的山羊β -乳球蛋白基因 5′端调控序列 ,经 PCR反应连接后 ,克隆到表达载体 p LNCX中 .测序结果表明 :与 Gene Bank中登录的序列相比 ,所获人乳铁蛋白 c DNA序列的同源性为 99.74 % ,山羊β -乳球蛋白基因 5′端调控序列的同源性为 99.75% .酶切结果证明得到了正确的重组载体 ,可用于乳腺生物反应器的研究 .利用 PCR反应直接克隆目的片段 ,并通过同源序列进行 PCR连接 ,极大提高了克隆的速度和准确性 ,为基因克隆及其表达研究带来了方便 . 展开更多
关键词 基因/乳铁蛋白 β-乳球蛋白 PCR 同源序列连接
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糖基化对β-乳球蛋白致敏性的影响 被引量：10
18
作者 徐雨佳 钟俊桢 +1 位作者 刘成梅 刘伟 《食品与机械》 CSCD 北大核心 2012年第1期82-85,100,共5页
采用湿法用低聚半乳糖(GOS)对β-乳球蛋白(β-LG)进行糖基化修饰,利用间接竞争ELISA法测定复合反应产物过敏原性,研究复合反应过程中β-乳球蛋白与低聚半乳糖的质量比、修饰温度、反应时间及pH值等对其过敏原性的影响。结果表明,以过敏... 采用湿法用低聚半乳糖(GOS)对β-乳球蛋白(β-LG)进行糖基化修饰,利用间接竞争ELISA法测定复合反应产物过敏原性,研究复合反应过程中β-乳球蛋白与低聚半乳糖的质量比、修饰温度、反应时间及pH值等对其过敏原性的影响。结果表明,以过敏性为指标,β-乳球蛋白糖基化反应的最佳反应条件:糖与蛋白的质量比为4∶1、修饰温度55℃、反应时间8h、反应环境pH 7.3。在最佳反应条件下,β-乳球蛋白与低聚半乳糖的复合产物(β-LG-GOS)过敏原性降低最高达66.4%。 展开更多
关键词 β-乳球蛋白 低聚半乳糖 糖基化 ELISA 过敏原性
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牛奶β-乳球蛋白质实时荧光定量PCR检测方法的建立 被引量：10
19
作者 贾敏 张银志 +1 位作者 张亦凡 孙秀兰 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期605-612,共8页
建立一种快速、特异、灵敏的Taqman实时荧光定量PCR（real-time PCR）方法,用于牛奶主要过敏原β-乳球蛋白质的检测。根据Gen Bank登录的牛β-乳球蛋白质的DNA序列设计,合成一对特异性引物和探针。将扩增产物连接到p MD19-T载体上,制备... 建立一种快速、特异、灵敏的Taqman实时荧光定量PCR（real-time PCR）方法,用于牛奶主要过敏原β-乳球蛋白质的检测。根据Gen Bank登录的牛β-乳球蛋白质的DNA序列设计,合成一对特异性引物和探针。将扩增产物连接到p MD19-T载体上,制备质粒标准品并测序鉴定,10倍梯度稀释含有β-乳球蛋白质基因的重组质粒,进行实时荧光定量PCR扩增,绘制标准曲线,检测该方法的特异性、稳定性、灵敏性,同时将建立的方法用于10种市售食品的检测。成功建立了β-乳球蛋白质的实时荧光定量PCR检测方法,标准曲线的Ct值与模板浓度在3.18×103~3.18×107copies范围内线性关系良好,R2值为0.997 8;检测灵敏度高（318 copies/μL）;特异性强,对羊奶、豆浆DNA均无扩增反应;稳定性好,组内、组间的变异系数均在5%以内。对10种食品牛奶过敏原的检测结果与标签相符。表明所建立的实时荧光定量PCR方法可应用于食品中牛奶过敏原β-乳球蛋白质的检测并可推广到其它过敏原的检测。 展开更多
关键词 牛奶过敏原质 β-乳球蛋白质 Taqman实时荧光定量PCR法 检测
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LC-MS/MS法测定牛乳及其制品中β-乳球蛋白的含量 被引量：10
20
作者 袁明美 封聪 +4 位作者 王守云 张巍伟 陈默 姜泓 冯雪松 《化学研究》 CAS 2017年第2期219-223,共5页
建立LC-MS/MS测定牛乳及其制品中β-乳球蛋白含量的方法.从β-乳球蛋白酶解产物中筛选出标签肽,通过多反应检测模式,对牛乳及其制品中的β-乳球蛋白进行定量.结果表明,所建立方法具有灵敏度、准确度高,重现性好,前处理简单的优点,可用... 建立LC-MS/MS测定牛乳及其制品中β-乳球蛋白含量的方法.从β-乳球蛋白酶解产物中筛选出标签肽,通过多反应检测模式,对牛乳及其制品中的β-乳球蛋白进行定量.结果表明,所建立方法具有灵敏度、准确度高,重现性好,前处理简单的优点,可用于牛乳制品中β-乳球蛋白的定量检测. 展开更多
关键词 液相色谱质谱联用 β-乳球蛋白 标签肽 牛乳制品 含量测定
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