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淫羊藿苷对小鼠破骨细胞β-肌动蛋白、抗酒石酸酸性磷酸酶、核因子-κB受体活化因子mRNA表达的影响 被引量：20
1
作者 刘兴炎 吕明波 +2 位作者 葛宝丰 白孟海 陈克明 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第8期996-998,I0003,共4页
目的观察淫羊藿苷对体外培养小鼠破骨细胞β-肌动蛋白、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)、核因子-κB受体活化因子(RANK)mRNA表达的影响。方法用浓度分别为25、30μg/L、1×10^(-8)mol/L的巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)、核因子-κB受体活... 目的观察淫羊藿苷对体外培养小鼠破骨细胞β-肌动蛋白、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)、核因子-κB受体活化因子(RANK)mRNA表达的影响。方法用浓度分别为25、30μg/L、1×10^(-8)mol/L的巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)、核因子-κB受体活化因子配体(RANKL)、1,25(OH)_2VitD3体外诱导培养小鼠骨髓源性破骨细胞,分别加入0、1×10^(-5)mol/L的淫羊藿苷,培养48 h后,抽提总RNA,采用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测破骨细胞中β肌动蛋白、TRAP、RANK mRNA表达的变化。结果与空白对照组比较,1×10^(-5)mol/L的淫羊藿苷可明显下调β-肌动蛋白、RANK mRNA的表达(P值均<0.05),但对TRAP mRNA的表达无明显影响(P>0.05)。结论淫羊藿可以通过下调β-肌动蛋白、RANK基因表达,从而抑制破骨细胞的分化形成及骨吸收。 展开更多
关键词 淫羊藿苷 破骨细胞 β-肌动蛋白 基因表达
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3-磷酸甘油醛脱氢酶、β-肌动蛋白和18SrRNA作为相对定量的内标在牙鲆发育阶段的稳定性比较 被引量：15
2
作者 杨桂梅 鲍宝龙 任大明 《上海水产大学学报》 CSCD 北大核心 2005年第1期84-88,共5页
关键词 3-磷酸甘油醛脱氢酶 β-肌动蛋白 18S RRNA 内标 相对定量RT-PCR 牙鲆
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黄鳝β-肌动蛋白基因的克隆及序列分析 被引量：13
3
作者 李建林 俞菊华 +2 位作者 唐永凯 曹丽萍 吴婷婷 《中国水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期188-191,187,共5页
采用RT-PCR和RACE法,从黄鳝(MonopterusalbusZuieuw)肝脏中分离和克隆黄鳝β-肌动蛋白(actin)基因。该基因cDNA全长1765bp[不包括poly(A)],5'端非翻译区12bp,3'端非翻译区有625bp[不包含poly(A)],阅读框(Openreadingframe,ORF)1... 采用RT-PCR和RACE法,从黄鳝(MonopterusalbusZuieuw)肝脏中分离和克隆黄鳝β-肌动蛋白(actin)基因。该基因cDNA全长1765bp[不包括poly(A)],5'端非翻译区12bp,3'端非翻译区有625bp[不包含poly(A)],阅读框(Openreadingframe,ORF)1128bp,翻译成375个氨基酸,蛋白质分子量41 77kD。将所得序列与各科鱼、蛙、鸡、牛、鼠、人等的β-肌动蛋白基因序列同源性分析显示,核苷酸序列具有68%～95%的相似性,氨基酸序列具有97%～100%相似性,显示该基因在生物进化过程中的保守;系统发育分析表明黄鳝β-肌动蛋白基因与罗非鱼的亲缘关系最近。 展开更多
关键词 黄鳝 β-肌动蛋白 cDNA末端快速扩增法 系统发育关系
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青鱼β-actin基因克隆及其启动子功能的初步检测(英文) 被引量：13
4
作者 冯浩 成嘉 +2 位作者 骆剑 刘少军 刘筠 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2006年第2期133-140,共8页
高保真 PCR 克隆青鱼β-actin 基因开放阅读框和 5′端侧翼序列,DNA 测序结果表明:青鱼β-actin 基因开放阅读框编码一段含 375 个氨基酸的蛋白,与其他物种 actin 家族相比较具有高度保守性。青鱼β-actin 与鲤鱼、草鱼及斑马鱼的同源... 高保真 PCR 克隆青鱼β-actin 基因开放阅读框和 5′端侧翼序列,DNA 测序结果表明:青鱼β-actin 基因开放阅读框编码一段含 375 个氨基酸的蛋白,与其他物种 actin 家族相比较具有高度保守性。青鱼β-actin 与鲤鱼、草鱼及斑马鱼的同源性均为 100%,而与人和 Norway 鼠β-actin 的同源性均为 99.2%,与鸡和 Kenyan 爪蟾β-actin 的同源性分别为 98.9%和98.1%。将青鱼β-actin 基因 5′端启动调控区插入不含启动子的 pEGFP1 载体构建青鱼β-actin 启动子/EGFP 表达载体,与第一次卵裂之前显微注射该重组质粒入泥鳅受精卵,同时也用该重组质粒转染 HeLa 细胞系。观察结果表明:GFP 在 50%的泥鳅胚胎和 2/3 的 HeLa 细胞有所表达。GFP 在泥鳅胚胎的各个部分均有表达,且在某些胚胎中 GFP 的表达遍布全身。因此,以 EGFP 为报告基因证实了青鱼β-actin 基因启动子为一种非特异性表达的启动子。 展开更多
关键词 青鱼 β-肌动蛋白 启动子 显微注射
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缺氧时星形胶质细胞定量mRNA表达的内部参照标准研究 被引量：10
5
作者 徐安定 谭少华 屈洋 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期774-777,共4页
目的 :观察缺氧对脑星形胶质细胞 (AC)守家基因甘油醛 - 3-磷酸 -脱氢酶 (GAPDH)和 β -肌动蛋白 (actin)mRNA表达的影响 ,进一步观察内皮素转换酶 (ECE) - 2mRNA可否作为该条件下的内部参照标准。方法 :从新生小鼠大脑获原代AC培养 ,... 目的 :观察缺氧对脑星形胶质细胞 (AC)守家基因甘油醛 - 3-磷酸 -脱氢酶 (GAPDH)和 β -肌动蛋白 (actin)mRNA表达的影响 ,进一步观察内皮素转换酶 (ECE) - 2mRNA可否作为该条件下的内部参照标准。方法 :从新生小鼠大脑获原代AC培养 ,分别在缺氧和正常氧条件下培养 2 4h ,提取mRNA ,以溴化乙啶染色的 2 8S及 18SrRNA作内部参照 ,用Northernblot杂交技术定量测定GAPDH、β -actin和ECE - 2mRNA水平。 结果 :缺氧 2 4h ,ACGAPDHmRNA的表达显著增加 ,β -actinmRNA表达明显下降 ;缺氧前后ECE - 2的mRNA水平无明显差异。 结论 :在缺氧缺血条件下 ,GAPDH和 β -actin不宜作为AC定量mRNA分析的内部参照标准 ,ECE - 2可作为其替代。 展开更多
关键词 星形细胞 缺氧 基因表达 甘油醛-3-磷酸脱氢酶 β-肌动蛋白 内皮素转换酶-2
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肉雏鸡肝细胞谷胱甘肽过氧化物酶mRNA表达产物的RT-PCR检测 被引量：6
6
作者 胥保华 许梓荣 《中国兽医科技》 CSCD 北大核心 2003年第2期24-26,共3页
细胞谷胱甘肽过氧化物酶 (cGPX)是动物体内一种重要的抗氧化酶。建立了利用RT PCR并以 β 肌动蛋白 (β Actin)为内参照定量分析cGPXmRNA表达的方法。提取肉鸡肝总RNA ,经反转录和PCR扩增 ,PCR产物的电泳条带于VDS摄像系统扫描灰度。寻... 细胞谷胱甘肽过氧化物酶 (cGPX)是动物体内一种重要的抗氧化酶。建立了利用RT PCR并以 β 肌动蛋白 (β Actin)为内参照定量分析cGPXmRNA表达的方法。提取肉鸡肝总RNA ,经反转录和PCR扩增 ,PCR产物的电泳条带于VDS摄像系统扫描灰度。寻求PCR线性扩增范围 ,确定RT PCR的最佳循环次数和模板量。通过计算cGPXPCR产物与 β 肌动蛋白PCR产物的灰度之比 ,即可得出cGPXmRNA的相对含量。 展开更多
关键词 肉雏鸡 肝细胞谷胱甘肽过氧化物酶 RT-PCR 定量分析 cGPX MRNA β-肌动蛋白
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淡色库蚊β-肌动蛋白基因克隆与序列分析 被引量：8
7
作者 胡莺 沈波 +4 位作者 杨明夏 马磊 李秀兰 田海生 朱昌亮 《中国寄生虫病防治杂志》 CSCD 2003年第2期65-68,共4页
目的　获取淡色库蚊 β-肌动蛋白全长基因。　方法　采用 RACE法筛选淡色库蚊溴氰菊酯抗性品系 c DNA表达文库 ,获得 β-肌动蛋白基因的 5′和 3′RACE序列 ,然后通过 T/ A克隆插入 p GEM- T质粒载体 ,经过测序、拼接获取全长序列。用 B... 目的　获取淡色库蚊 β-肌动蛋白全长基因。　方法　采用 RACE法筛选淡色库蚊溴氰菊酯抗性品系 c DNA表达文库 ,获得 β-肌动蛋白基因的 5′和 3′RACE序列 ,然后通过 T/ A克隆插入 p GEM- T质粒载体 ,经过测序、拼接获取全长序列。用 BL ASTp软件将该基因推导的氨基酸序列与蛋白质公共数据库 Swissprot比对、分析。　结果　获得淡色库蚊 β-肌动蛋白基因全长序列 ,总长度为 12 90 bp,开放阅读框为 1132 bp,编码 377个氨基酸 (Gen Bank/ NCBIAY10 0 0 0 5 )。推导的氨基酸序列与公共数据库比对 ,发现与冈比亚按蚊和黑腹果蝇的 β-肌动蛋白的同源性均为 91%。蛋白质的理论分子质量为 4 1.7ku,等电点 (PI)为 5 .4。　结论　获得了淡色库蚊 β-肌动蛋白基因全长序列 ,为蚊虫分子生物学的进一步研究奠定了基础。 展开更多
关键词 淡色库蚊 β-肌动蛋白 克隆 序列分析 cDNA快速末端扩增
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α-平滑肌肌动蛋白和β-肌动蛋白在瘢痕组织中的表达 被引量：8
8
作者 马进 范志宏 《上海第二医科大学学报》 CSCD 2004年第1期5-7,共3页
目的 探讨α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和β-肌动蛋白(β-actin)对增生性瘢痕形成的可能作用。方法 采用荧光定量PCR法检测10例增生性瘢痕和10例正常皮肤组织中α-SMA和β-actin的表达水平。结果 增生性瘢痕组织中α-SMA和β-actin表达水... 目的 探讨α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和β-肌动蛋白(β-actin)对增生性瘢痕形成的可能作用。方法 采用荧光定量PCR法检测10例增生性瘢痕和10例正常皮肤组织中α-SMA和β-actin的表达水平。结果 增生性瘢痕组织中α-SMA和β-actin表达水平均高于正常皮肤组织,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 α-SMA和β-actin在瘢痕增生中起重要作用;由于β-actin在瘢痕组织和正常皮肤中的不恒定性,建议在瘢痕的mRNA定量研究中不作为内参照物。 展开更多
关键词 Α-平滑肌肌动蛋白 β-肌动蛋白 瘢痕组织 表达
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以肌动蛋白为标准化参数在甲状腺乳头状癌中c-fos表达的研究 被引量：5
9
作者 吕枚 方佩华 +4 位作者 何红鹏 郑荣秀 张志友 杨立平 肖茜 《天津医科大学学报》 2002年第1期7-10,共4页
目的 :引入细胞管家基因 (β-actin)作为多重扩增的内参照物以达到资料比较的标准化 ,用于研究c -fos在甲状腺乳头状癌中的表达。方法 :14例甲状腺乳头状癌组织标本 ;21例正常对照包括3例乳头状癌病变旁正常甲状腺组织和18例腺瘤病变旁... 目的 :引入细胞管家基因 (β-actin)作为多重扩增的内参照物以达到资料比较的标准化 ,用于研究c -fos在甲状腺乳头状癌中的表达。方法 :14例甲状腺乳头状癌组织标本 ;21例正常对照包括3例乳头状癌病变旁正常甲状腺组织和18例腺瘤病变旁正常甲状腺组织。采用Trizol法提取总RNA ,逆转录 -聚合酶链反应法 (RT -PCR)获取cDNA ,多重聚合酶链反应 (MultiplePCR)法同时扩增371bp的c -fos和227bp的β-actin。扩增产物行1.5%琼脂糖凝胶电泳 ,用UVP凝胶成像分析系统的GelBase/GelBiot -Pro分析软件获取各标本c-fos和β-actin的密度值 ,计算两者的比值。结果 :正常对照和乳头状癌组c -fos/β-actin比值分别为 (x±s) :0.6845±0.0753和0.5938±0.0969 ,两组存在着显著差异(t=2.954,P<0.01) ;经自身配对t检验 ,3例患者的癌变组织明显低于与此癌病变旁的正常组织(t=9.205 ,P<0.05)。结论 :c -fos在甲状腺乳头状癌组织中的表达明显低于正常对照。 展开更多
关键词 甲状腺乳头状癌 原癌基因C-FOS β-肌动蛋白
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血清G蛋白偶联受体-4、β-肌动蛋白表达对胃癌诊断的价值 被引量：10
10
作者 朱健康 张新 王义霞 《中国临床医生杂志》 2020年第6期695-698,共4页
目的检测胃癌患者血清G蛋白偶联受体-4(leucine rich repeat containing G protein coupled receptor 4,LGR4)、β-肌动蛋白(β-actin)表达水平及其在胃癌分期诊断中的研究价值。方法收集2016年10月至2019年10月在新疆维吾尔自治区喀什... 目的检测胃癌患者血清G蛋白偶联受体-4(leucine rich repeat containing G protein coupled receptor 4,LGR4)、β-肌动蛋白(β-actin)表达水平及其在胃癌分期诊断中的研究价值。方法收集2016年10月至2019年10月在新疆维吾尔自治区喀什地区第二人民医院消化内科收治的胃癌患者517例作为研究组,并根据美国癌症联合会第7版胃癌分期标准,将胃癌患者分为四组:Ⅰ期123例、Ⅱ期121例、Ⅲ期210例、Ⅳ期63例;同时选取358例良性胃病患者作为对照组。采用酶联免疫吸附实验法分别测定血清LGR4、β-actin水平;采用logistic回归分析影响胃癌发生的危险因素;采用受试者工作曲线(receiver operator characteristic curves,ROC)分析血清LGR4、β-actin水平对胃癌的诊断价值。结果各组间性别、年龄、AFP差异无显著性(P>0.05),与对照组比较,胃癌Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期各组患者的铁蛋白水平依次降低(P<0.05),糖类抗原CA724(carbohydrate antigen,CA724)、糖类抗原CA199(carbohydrateantigen,CA199)、癌胚抗原(carcinoembryonicantigen,CEA)、同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)水平、血清LGR4、β-actin水平依次升高(P<0.05);经logistic回归分析显示,血清LGR4、β-actin、水平高均是胃癌发生的独立危险因素(P<0.05);经ROC曲线分析显示,血清LGR4、β-actin诊断胃癌发生的ROC曲线下面积分别为0.865(95%CI:0.840~0.887;P<0.001)与0.862(95%CI:0.838~0.885;P<0.001);血清LGR4、β-actin水平联合诊断胃癌的ROC曲线下面积为0.927(95%CI:0.907~0.943;P<0.001)。结论胃癌患者外周血血清β-actin、LGR4表达均上调,均是引起胃癌发生独立危险因素,因此对预测胃癌发生具有一定临床价值。 展开更多
关键词 胃癌 G蛋白偶联受体-4 β-肌动蛋白 诊断价值
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鲮β-肌动蛋白基因和启动子的克隆及序列特征分析 被引量：6
11
作者 张殿昌 邵艳卿 +1 位作者 苏天凤 江世贵 《中国水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期345-351,共7页
鲮(Cirrhinus molitorella)是华南地区重要的淡水养殖品种之一,但是鲮生长速度慢,且不耐低温,是目前鲮养殖产业所面临的主要问题。作为利用转基因技术培育快速生长鲮新品系研究工作的一部分,本实验利用PCR和一种新的染色体步移方法克隆... 鲮(Cirrhinus molitorella)是华南地区重要的淡水养殖品种之一,但是鲮生长速度慢,且不耐低温,是目前鲮养殖产业所面临的主要问题。作为利用转基因技术培育快速生长鲮新品系研究工作的一部分,本实验利用PCR和一种新的染色体步移方法克隆了鲮β-肌动蛋白(β-actin)基因启动子和全基因组DNA序列。鲮β-actin基因长4 351 bp,由6个外显子和5个内含子组成。鲮β-actin基因启动子区域包含1个TATA盒,1个CCAAT盒,2个CArG调控元件和1个CRE调控元件,并且鲮β-actin基因内含子1中也含有一个CArG调控元件。这些结构特征说明本研究所克隆的鲮β-actin基因序列具有典型的启动子特征。鲮β-actin基因启动子的克隆为转基因鲮表达载体的构建提供了一个重要的调控结构元件。 展开更多
关键词 鲮 β-肌动蛋白 启动子 序列特征 转基因鱼
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温莪术对TGF-β_1诱导的肾小管上皮细胞转分化的影响 被引量：5
12
作者 吴睿轩 胡振奋 +2 位作者 程锦国 黄蔚霞 董飞侠 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第7期972-977,共6页
目的探讨温莪术对转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)诱导的肾小管上皮细胞转分化(epithelial-myofibroblast transdifferentiation,EMT)拮抗作用。方法将体外培养的正常肾小管上皮细胞随机分为6组:正常对照组(C... 目的探讨温莪术对转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)诱导的肾小管上皮细胞转分化(epithelial-myofibroblast transdifferentiation,EMT)拮抗作用。方法将体外培养的正常肾小管上皮细胞随机分为6组:正常对照组(C组)、TGF-β1诱导模型组(T组)、温莪术低浓度组(E1组)、温莪术中浓度组(E2组)、温莪术高浓度组(E3组)、盐酸贝那普利组(Y组),除C组外,各组TGF-β1诱导24h后,温莪术各剂量组及Y组加入药物作用48h。运用倒置显微镜观察细胞形态的改变,细胞免疫荧光法、RT-PCR法及ELISA法检测各组NRK-52E细胞EMT过程中细胞骨架成分β-肌动蛋白(β-actin)的分布,α-平滑肌肌动蛋白(α-smoothmus-cleactin,α-SMA)mRNA、E钙黏蛋白(E-cadherin,E-cad)mRNA表达,纤维粘连蛋白(fibro nectin,FN)浓度。结果 TGF-β1诱导3天后,T组细胞出现肥大、拉长,呈梭形,细胞骨架结构β-actin表达增多(P<0.05),胞浆内出现束状纤维样结构,细胞内α-SMA mRNA表达显著上调(P<0.05),E-cadmRNA表达降低(P<0.05),细胞上清液中FN浓度升高(P<0.05)。与T组比较,E1-3组细胞仅见部分呈成纤维样改变,伴随胞浆内β-actin表达及FN浓度的降低(P<0.05),E2-3组细胞内α-SMA mRNA表达升高(P<0.05),E-cadmRNA表达减少(P<0.05),但E1组E-cad及α-SMA mRNA表达量与之比较,差异无统计学意义(P>0.05)。与E1组比较,E2-3组胞浆内β-actin蛋白表达及FN浓度降低(P<0.05),E3组细胞内E-cadmRNA表达升高伴α-SMA mRNA表达降低(P<0.05)。与Y组比较,E1组细胞浆内β-actin mRNA及细胞上清液中FN浓度均升高(P<0.05),E3组β-actin表达升高(P<0.05),E-cad mRNA表达降低(P<0.05),E1-3α-SMA mRNA表达量则差异无统计学意义(P>0.05)。结论温莪术可抑制TGF-β1诱导的EMT发生,可作为临床治疗慢性肾功能不全的有效药物之一。 展开更多
关键词 温莪术 转化生长因子-β1 肾小管上皮细胞转分化 β-肌动蛋白 Α-平滑肌肌动蛋白 E钙黏蛋白
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黄颡鱼β-肌动蛋白基因的克隆及表达分析 被引量：6
13
作者 宋伟 王晓琳 +4 位作者 严维辉 刘海琴 李国锋 潘建林 赵庆顺 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2008年第3期263-268,共6页
β-肌动蛋白广泛存在于真核生物中,在维持细胞结构、细胞运动和细胞分裂等生理活动中发挥着重要作用。本文运用PCR技术首次克隆了黄颡鱼(Pelteobagrus fulvidraco)的β-肌动蛋白基因,其全长为2124碱基对(bp),由5个外显子和4个内含子组成... β-肌动蛋白广泛存在于真核生物中,在维持细胞结构、细胞运动和细胞分裂等生理活动中发挥着重要作用。本文运用PCR技术首次克隆了黄颡鱼(Pelteobagrus fulvidraco)的β-肌动蛋白基因,其全长为2124碱基对(bp),由5个外显子和4个内含子组成;cDNA长1128 bp,含有完整的开放阅读框,编码375个氨基酸。黄颡鱼β-肌动蛋白与其它鱼类氨基酸的同源性(Identity)大于98.6%,核苷酸同源性大于87.3%。系统进化分析表明,黄颡鱼β-肌动蛋白在进化上高度保守。RT-PCR结果表明,β-肌动蛋白基因在黄颡鱼的脑、鳃、心脏、肠道、肾、肝、红肌、白肌、卵巢、皮肤、胃、精巢共12种组织中都有表达。 展开更多
关键词 黄颡鱼 β-肌动蛋白 基因克隆
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人端粒酶催化亚单位mRNA的实时荧光RT-PCR定量检测 被引量：7
14
作者 郭颖 刘军 +2 位作者 薛采芳 吴静 宋天保 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期618-620,共3页
目的 :建立可定量测定人端粒酶催化亚单位 (hTERT)mRNA的实时荧光反转录PCR方法。方法 :用Trizol 试剂从HepG2细胞中分离总RNA ,然后反转录为cDNA。利用一对基因特异引物和一条TaqManMGB探针 ,以实时荧光PCR定量hTERT的cDNA。同时定... 目的 :建立可定量测定人端粒酶催化亚单位 (hTERT)mRNA的实时荧光反转录PCR方法。方法 :用Trizol 试剂从HepG2细胞中分离总RNA ,然后反转录为cDNA。利用一对基因特异引物和一条TaqManMGB探针 ,以实时荧光PCR定量hTERT的cDNA。同时定量测定人 β 肌动蛋白 (hBA)的mRNA作为内对照。用梯度稀释的克隆的人 β 肌动蛋白基因制作标准曲线。结果 :标准曲线的相关系数为 1.0 0。实时荧光反转录PCR方法的平均变异系数为 7.1%。HepG2细胞hTERTmRNA与hBAmRNA的比值为 (1.3± 0 .3)× 10 -4。结论 :建立了可定量测定人端粒酶催化亚单位 (hTERT)mRNA的实时荧光反转录PCR方法。 展开更多
关键词 RNA 端粒酶催化亚单位 实时荧光PCR 反转录PCR HepG2细胞 定量测定 β-肌动蛋白 BA 稀释 特异引物
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β-肌动蛋白、高迁移率蛋白A2在子宫内膜腺癌组织中的表达及与预后的关系
15
作者 杨立芬 何建清 尹立新 《中国计划生育学杂志》 2024年第4期798-803,共6页
目的:探讨β肌动蛋白(ACTB)、高迁移率蛋白A2(HMGA2)在子宫内膜腺癌组织中的表达及与预后的关系.方法:选择2017年10月-2020年10月河北省唐山市妇幼保健院收治的206例子宫内膜腺癌患者,取手术切除的癌组织和癌旁组织,实时荧光定量聚合酶... 目的:探讨β肌动蛋白(ACTB)、高迁移率蛋白A2(HMGA2)在子宫内膜腺癌组织中的表达及与预后的关系.方法:选择2017年10月-2020年10月河北省唐山市妇幼保健院收治的206例子宫内膜腺癌患者,取手术切除的癌组织和癌旁组织,实时荧光定量聚合酶连反应检测子宫内膜腺癌组织和癌旁组织中ACTB、HMGA2表达,比较不同病理特征子宫内膜腺癌组织的ACTB、HMGA2表达差异,术后定期电话随访至2022年10月,分析ACTB、HMG GA2表达与预后的关系.结果:子宫内膜腺癌组织ACTBmRNA及HMGA2mRNA表达水平分别高于其相应癌旁组织(3.65±1.09比1.12±0.36,P<0.05)及(5.03±1.46比1.65±0.47)差异有统计学意义(P<0.05),TNM分期Ⅲ期、深层浸润、盆腔淋巴结转移患者的子宫内膜癌组织中ACTBmRNA、HMGA2mRNA表达高于TNM分期Ⅰ~Ⅱ期、无盆腔淋巴结转移宫颈癌患者(P<0.05).中位随访48(24~60)个月,随访期间死亡62例,ACTBmRNA、HMG GA2mRNA高表达的子宫内膜腺癌患者总生存率为59.1%、61.3%,低于低表达患者的81.2%、79.0%(P<0.05).统计学分析显示盆腔淋巴结转移、ACTBmRNA高表达、HMGA2mRNA高表达是子宫内膜腺癌患者不良预后的独立危险因素(P<0.05).结论:子宫内膜腺癌组织中ACTBmRNA、HMGA2mRNA表达上调,且与子宫内膜腺癌恶性进展和总生存率低下相关. 展开更多
关键词 子宫内膜腺癌 β-肌动蛋白 高迁移率蛋白A2 预后
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用蛋白质印迹评价GAPDH与β-actin作为Skp2内参蛋白的研究
16
作者 孙浚源 罗微微 +1 位作者 杨金凤 贾静 《中国临床药理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期844-848,共5页
目的确定用蛋白质印迹(WB)技术研究细胞S期激酶相关蛋白2(Skp2)时适宜的内参蛋白。方法选取多种人源肿瘤细胞系,通过瞬时转染shRNA质粒下调细胞内Skp2蛋白水平,用甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)与β-肌动蛋白(β-actin)作为内参蛋白进行WB... 目的确定用蛋白质印迹(WB)技术研究细胞S期激酶相关蛋白2(Skp2)时适宜的内参蛋白。方法选取多种人源肿瘤细胞系,通过瞬时转染shRNA质粒下调细胞内Skp2蛋白水平,用甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)与β-肌动蛋白(β-actin)作为内参蛋白进行WB检测,分析GAPDH、β-actin、Skp2的相对表达水平及相互关系。结果细胞内Skp2相对表达水平发生改变时,对于人非小细胞肺癌细胞H1299(1.32×10^(6)±7.86×10^(4))、人宫颈癌细胞HeLa(6.59×10^(6)±1.79×10^(6))和人肝癌细胞HepG2(3.13×10^(6)±2.87×10^(5))的GAPDH相对表达水平均发生明显变化(均P<0.05)。相关性结果显示:对于人非小细胞肺癌细胞A549(R=0.8258)和H1299(R=0.9062),Skp2与GAPDH相对表达水平均存在一定的相关性(均P<0.05)。结论β-actin更适合作为研究Skp2蛋白WB实验的内参蛋白。 展开更多
关键词 内参蛋白 β-肌动蛋白 甘油醛-3-磷酸脱氢酶 细胞S期激酶相关蛋白2 相对表达水平 蛋白质印迹
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拟穴青蟹β-肌动蛋白基因的克隆与分析 被引量：6
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作者 黄静茹 黄辉洋 +1 位作者 叶海辉 李少菁 《厦门大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期274-279,共6页
β-肌动蛋白广泛存在于真核生物中,在维持细胞结构、细胞运动和细胞分裂等生理活动中发挥着重要作用.运用RACE技术克隆了拟穴青蟹(Scylla paramamosain)β-肌动蛋白基因,并用RT-PCR方法检测该基因在成体各组织中的表达情况.拟穴青蟹β-... β-肌动蛋白广泛存在于真核生物中,在维持细胞结构、细胞运动和细胞分裂等生理活动中发挥着重要作用.运用RACE技术克隆了拟穴青蟹(Scylla paramamosain)β-肌动蛋白基因,并用RT-PCR方法检测该基因在成体各组织中的表达情况.拟穴青蟹β-肌动蛋白cDNA全长1 337bp,5′端非编码区为67bp,3′端非编码区为139bp,开放阅读框1 131bp编码376个氨基酸.拟穴青蟹β-肌动蛋白与其他节肢动物β-肌动蛋白氨基酸序列的相似性高达98%～99%.系统进化树显示拟穴青蟹β-肌动蛋白基因的分子进化地位与其生物学分类地位一致.半定量RT-PCR分析结果表明,β-肌动蛋白基因在拟穴青蟹视神经节、脑神经节、胸神经节、性腺、鳃、心、胃、肌肉、肝胰腺共9个组织器官中的表达基本一致,具有良好的稳定性. 展开更多
关键词 β-肌动蛋白 拟穴青蟹 CDNA末端快速扩增 半定量RT-PCR分析
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慢性神经痛大鼠脊髓缝隙连接蛋白43基因表达变化的实验研究 被引量：5
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作者 许学兵 姚尚龙 +2 位作者 佘守章 许立新 董源洪 《中国疼痛医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期294-297,共4页
目的:研究慢性神经痛大鼠脊髓缝隙连接蛋白43(Connexin43,Cx43)基因表达的变化.方法:18只成年SD大鼠随机分为两组(n=9),分别接受右侧坐骨神经结扎手术(CCI组)和假手术(Sham组).手术前、后观察大鼠疼痛行为学并测定右后肢热刺激抬脚潜伏... 目的:研究慢性神经痛大鼠脊髓缝隙连接蛋白43(Connexin43,Cx43)基因表达的变化.方法:18只成年SD大鼠随机分为两组(n=9),分别接受右侧坐骨神经结扎手术(CCI组)和假手术(Sham组).手术前、后观察大鼠疼痛行为学并测定右后肢热刺激抬脚潜伏期(PWTL)、电刺激抬脚阈值(PWET)的变化,于术后14天取大鼠L4/5右侧脊髓,以β-肌动蛋白(β-actin)为内参照基因,采用RT-PCR半定量分析CCI组和Sham组Cx43表达的差异.结果:CCI组大鼠表现为行走步态异常,与Sham组相比CCI组术后5～14天疼痛阈值明显降低(P＜0.01).Sham组Cx43扩增产物量极少,而CCI组L4/5 Cx43扩增产物量约为Sham组的3倍.结论:慢性神经痛大鼠脊髓Cx43基因表达显著增加,提示脊髓缝隙连接可能在慢性病理性痛过程中发挥重要的作用. 展开更多
关键词 慢性神经病理性疼痛 脊髓 缝隙连接蛋白43 逆转录多聚酶链反应 成年SD大鼠 基因表达变化 慢性神经痛 Cx43表达 实验研 β-肌动蛋白
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大鳞副泥鳅β-肌动蛋白基因的cDNA全长克隆及表达分析 被引量：5
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作者 刘士力 王雨辰 +4 位作者 张德华 张宇飞 练青平 李倩 胡廷尖 《中国农学通报》 CSCD 2013年第35期96-101,共6页
为了克隆分析大鳞副泥鳅β-肌动蛋白基因的cDNA序列,并研究该基因的组织表达规律。采用RT-PCR和RACE法,从大鳞副泥鳅(Paramisgurnus dabryanus)肌肉中分离和克隆大鳞副泥鳅β-肌动蛋白基因。结果表明:大鳞副泥鳅β-肌动蛋白基因全长1710... 为了克隆分析大鳞副泥鳅β-肌动蛋白基因的cDNA序列,并研究该基因的组织表达规律。采用RT-PCR和RACE法,从大鳞副泥鳅(Paramisgurnus dabryanus)肌肉中分离和克隆大鳞副泥鳅β-肌动蛋白基因。结果表明:大鳞副泥鳅β-肌动蛋白基因全长1710 bp,其中5'-UTR长73 bp,3'-UTR长509 bp,编码区长1128 bp,编码375个氨基酸。大鳞副泥鳅β-肌动蛋白与其他鱼类氨基酸的同源性大于98%,核苷酸同源性大于87%;系统进化分析表明:大鳞副泥鳅β-肌动蛋白在进化上高度保守;qRT-PCR结果表明:β-肌动蛋白基因在大鳞副泥鳅的肌肉、心、肝、脾、肠、胃、精巢和卵巢共8种组织中都有表达。研究结果不仅为利用β-肌动蛋白基因作为内参基因分析大鳞副泥鳅的基因表达研究提供了序列依据,而且可为大鳞副泥鳅的分子系统学研究提供序列参考。 展开更多
关键词 大鳞副泥鳅 RACE β-肌动蛋白 CDNA
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氯丙烯对大鼠神经组织中β-肌动蛋白含量的影响 被引量：2
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作者 段化伟 谢克勤 +1 位作者 李岩 张翠丽 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期224-227,共4页
目的　进一步探讨氯丙烯所致中毒性周围神经病的发病机制。方法　Wistar雄性大鼠sc氯丙烯3个月后 ,用Western印迹方法分别测定了氯丙烯亚慢性中毒后大鼠大脑、脊髓、坐骨神经沉淀和上清中骨架蛋白 β 肌动蛋白含量的变化。 结果　①在... 目的　进一步探讨氯丙烯所致中毒性周围神经病的发病机制。方法　Wistar雄性大鼠sc氯丙烯3个月后 ,用Western印迹方法分别测定了氯丙烯亚慢性中毒后大鼠大脑、脊髓、坐骨神经沉淀和上清中骨架蛋白 β 肌动蛋白含量的变化。 结果　①在大脑沉淀中 ,β 肌动蛋白含量在氯丙烯 85 mg·kg- 1组降低 10 % (P >0 .0 5 ) ,170mg·kg- 1组降低 13% (P <0 .0 5 ) ;在大脑上清中 ,β 肌动蛋白含量在 85mg·kg- 1组降低 2 0 % (P <0 .0 1) ,170mg·kg- 1组无明显变化。②在脊髓沉淀中 ,氯丙烯 85mg·kg- 1组 β 肌动蛋白含量降低 13% ,170mg·kg- 1组降低 12 % ,但均无显著性差异 ;上清中无显著变化。③坐骨神经沉淀中 ,在氯丙烯 85和 170mg·kg- 1组分别下降33%和 39% (P <0 .0 1) ;上清中 ,β 肌动蛋白没有显著性变化。结论　首次发现氯丙烯可导致神经组织中β 肌动蛋白含量显著降低 ,β 展开更多
关键词 氯丙烯 β-肌动蛋白 大脑 脊髓 坐骨神经
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