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麂属动物陈旧皮张标本的DNA提取及PCR扩增 被引量：34
1
作者 兰宏 王文 施立明 《Zoological Research》 CAS CSCD 1995年第2期146-152,共7页
本实验用改进的方法从保存于标本馆的动物皮张标本中提取ＤＮＡ，所得ＤＮＡ片段的分子量从１００ｂｎ到１ｋｂ以上。利用线粒体ＤＮＡ细胞色素ｂ通用引物和ＰＣＲ技术，从小麂、印度麂、贡山麂、费氏麂、黑麂ＤＮＡ中扩增出３０７ｂｐ... 本实验用改进的方法从保存于标本馆的动物皮张标本中提取ＤＮＡ，所得ＤＮＡ片段的分子量从１００ｂｎ到１ｋｂ以上。利用线粒体ＤＮＡ细胞色素ｂ通用引物和ＰＣＲ技术，从小麂、印度麂、贡山麂、费氏麂、黑麂ＤＮＡ中扩增出３０７ｂｐ的细胞色素ｂ特异片段（加上两端引物后长度为３６４ｂｐ）。用２８种限制性内切酶对从新鲜血样和从陈旧皮张标本中所得扩增片段进行酶切分析，发现只有４个酶（ＤｒａⅠ、ＸｂａⅠ、ＨａｅⅢ、ＨｐｅⅡ）在这个片段上有切点，其中ＨａｅⅢ和ＨａｐⅡ的识别位点在各种麂中有所不同。 展开更多
关键词 麂 皮张标本 DNA 提取 聚合酶链反应
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模糊PID复合控制算法改进及应用 被引量：35
2
作者 李丽娜 柳洪义 +1 位作者 罗忠 孙一兰 《东北大学学报（自然科学版）》 EI CAS CSCD 北大核心 2009年第2期274-278,共5页
针对常规模糊PID复合控制算法的不足,在分析了其控制特性后,提出了相应的改进算法.采用基于梯形隶属函数的模糊切换算法以及基于变论域和仿人智能思想的量化因子和比例因子的在线自调整算法实现了自适应模糊PID复合控制,并将此改进算法... 针对常规模糊PID复合控制算法的不足,在分析了其控制特性后,提出了相应的改进算法.采用基于梯形隶属函数的模糊切换算法以及基于变论域和仿人智能思想的量化因子和比例因子的在线自调整算法实现了自适应模糊PID复合控制,并将此改进算法用于PCR芯片智能温度控制系统中,使控制系统获得了良好的动态特性和稳态性能、较强的鲁棒性及适应性.实验结果表明,其控制品质远优于常规模糊PID控制和基本模糊控制. 展开更多
关键词 模糊PID复合控制 模糊切换 变论域 仿人智能 量化因子 比例因子 在线自调整 聚合酶链反应
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十字花科蔬菜根肿病菌的PCR检测 被引量：21
3
作者 杨佩文 杨勤忠 +2 位作者 王群 李家瑞 曾莉 《云南农业大学学报》 CAS CSCD 2002年第2期137-139,157,共4页
利用设计合成的 1对根肿病菌 (Plasmodiophorabrassicae)特异性寡聚核苷酸引物 (前引物 :5’GAAGATGCCCACGCCGTCGT3’和后引物 :5’ATCTGTTCAGCAAAGCGTCGA3’) ,对分离自十字花科作物 (白菜、青菜、甘蓝、芥蓝、花椰菜等 )及土壤中的根... 利用设计合成的 1对根肿病菌 (Plasmodiophorabrassicae)特异性寡聚核苷酸引物 (前引物 :5’GAAGATGCCCACGCCGTCGT3’和后引物 :5’ATCTGTTCAGCAAAGCGTCGA3’) ,对分离自十字花科作物 (白菜、青菜、甘蓝、芥蓝、花椰菜等 )及土壤中的根肿病菌全基因组DNA进行PCR(PolymeraseChainReaction)特异性扩增试验。试验结果表明 ,试验设计合成的引物能从十字花科根肿病菌全基因组DNA中扩增到 6 2 9bp长度的分子片段 ,该对引物可用于十字花科蔬菜根肿病的分子鉴定和分子监测 ,为十字花科根肿病的早期准确诊断和病菌检测提供了快速、简便的方法。 展开更多
关键词 十字花科 蔬菜 根肿病菌 pcr检测 菌株 引物
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SSR-PCR反应体系建立与优化的研究概述 被引量：20
4
作者 许玉兰 蔡年辉 +1 位作者 康向阳 段安安 《生物技术》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期73-76,共4页
SSR标记是基于PCR基础上的一种分子标记,其扩增效果直接影响到SSR分析,近年来从不同方面对SSR-PCR反应体系的建立与优化进行了大量的研究。该文简要介绍SSR-PCR扩增反应体系建立的方法,综述SSR-PCR扩增反应的应用及其近展,并对存在的问... SSR标记是基于PCR基础上的一种分子标记,其扩增效果直接影响到SSR分析,近年来从不同方面对SSR-PCR反应体系的建立与优化进行了大量的研究。该文简要介绍SSR-PCR扩增反应体系建立的方法,综述SSR-PCR扩增反应的应用及其近展,并对存在的问题进行探讨,对今后的发展进行展望,以期为从事该方面的研究奠定基础。 展开更多
关键词 SSR pcr 反应体系
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啤酒腐败菌的检测方法 被引量：16
5
作者 朱林江 郑飞云 +1 位作者 李崎 顾国贤 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2007年第1期360-366,共7页
啤酒酿造过程中,啤酒腐败菌的检测一直采用传统的培养基检测。随着啤酒工业的迅猛发展,寻求一种快速、简便的检测方法是必然的要求。目前快速检测方法的研究主要表现在三个方面:(1)ATP生物发光检测方法,该方法已经应用于一些食品行业的... 啤酒酿造过程中,啤酒腐败菌的检测一直采用传统的培养基检测。随着啤酒工业的迅猛发展,寻求一种快速、简便的检测方法是必然的要求。目前快速检测方法的研究主要表现在三个方面:(1)ATP生物发光检测方法,该方法已经应用于一些食品行业的公共卫生检测和微生物质量控制,而在啤酒工业,它适用于清酒和成品啤酒的微生物在线检测,最大优点是快速、简单和高灵敏度。(2)免疫学的检测方法适用于啤酒酿造过程的各个阶段的样品,其专一、简便、易于自动化的特点预示其有较好的发展前景,但需要降低单克隆抗体的制备成本。(3)基于核酸的分子生物学检测方法有PCR及其衍生技术,它们的优点是专一性强,灵敏度高,适于应急生产中出现的突发事件,但缺点是检测费用高,另外不能区分死菌和活菌。 展开更多
关键词 快速检测方法 ATP生物发光 免疫学方法 pcr 啤酒腐败菌
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三七病原根结线虫的分子鉴定 被引量：19
6
作者 冯光泉 董丽英 +6 位作者 陈昱君 尚慧 刘云芝 李家瑞 杨建忠 崔秀明 杨佩文 《西南农业学报》 CSCD 2008年第1期100-102,共3页
利用设计合成的1对北方根结线虫(Meloidogyne hapla)特异性寡聚核苷酸引物Mh-F/Mh-R,以北方根结线虫、南方根结线虫、花生根结线虫和爪哇根结线虫全基因组DNA为对照,对采自云南文山、砚山、马关、蒙自等地区的三七根结线虫全基因组DNA进... 利用设计合成的1对北方根结线虫(Meloidogyne hapla)特异性寡聚核苷酸引物Mh-F/Mh-R,以北方根结线虫、南方根结线虫、花生根结线虫和爪哇根结线虫全基因组DNA为对照,对采自云南文山、砚山、马关、蒙自等地区的三七根结线虫全基因组DNA进行PCR特异性扩增。结果表明,设计合成的引物能从北方根结线虫和供试的4个三七病原根结线虫全基因组DNA中扩增到462bp长度的分子片段,而南方根结线虫、花生根结线虫和爪哇根结线虫的全基因组DNA无扩增产物。表明4个地区的三七病原根结线虫种群均为北方根结线虫,该对引物可用于三七根结线虫的分子鉴定。 展开更多
关键词 三七 根结线虫 pcr(聚合酶链武反应) 鉴定
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亚硝酸细菌研究进展 被引量：12
7
作者 周娟 李君文 郑金来 《环境科学与技术》 CAS CSCD 2001年第z2期8-10,共3页
从硝化细菌的生长特性 ,分类 ,检测 ,亚硝酸细菌氨单加氧酶等方面概要的叙述了国外在硝化细菌方面研究的进展 。
关键词 亚硝酸细菌 变形菌 多聚酶链式反应 氨单加氧酶
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垃圾渗滤液中有机物对其厌氧氨氧化的影响 被引量：17
8
作者 苗蕾 王凯 +3 位作者 王淑莹 李忠明 朱如龙 彭永臻 《东南大学学报（自然科学版）》 EI CAS CSCD 北大核心 2014年第5期999-1004,共6页
为了考察垃圾渗滤液中有机物对其厌氧氨氧化反应的影响,保证晚期垃圾渗滤液的深度脱氮,采用短程硝化SBR联合厌氧氨氧化SBR(ASBR)两级系统处理氨氮为(2 000±100)mg/L、COD为(2 200±200)mg/L的实际晚期垃圾渗滤液进行试验研究.... 为了考察垃圾渗滤液中有机物对其厌氧氨氧化反应的影响,保证晚期垃圾渗滤液的深度脱氮,采用短程硝化SBR联合厌氧氨氧化SBR(ASBR)两级系统处理氨氮为(2 000±100)mg/L、COD为(2 200±200)mg/L的实际晚期垃圾渗滤液进行试验研究.短程硝化SBR运行了100d,亚硝酸盐积累率达到了95%以上.ASBR采用进水逐步加大渗滤液掺入比例的方式进行驯化.实验结果表明,随着掺入比例的增大,进水可降解COD增加到150 mg/L左右时,ASBR的氮负荷速率从1.20 kg/(m3·d)降到了0.28 kg/(m3·d),氮去除速率从1.10 kg/(m3·d)下降到了0.19 kg/(m3·d),表明系统趋于崩溃.当ASBR进水可降解COD再次降低到50 mg/L左右时,系统的厌氧氨氧化菌活性得到了恢复,最大的氮负荷速率和氮去除速率分别达到了1.55和1.20 kg/(m3·d).定量PCR试验表明,当系统的厌氧氨氧化菌活性得到恢复后,厌氧氨氧化菌占全细菌的比例达到了试验期间的最大值1.94%. 展开更多
关键词 垃圾渗滤液 SBR 厌氧氨氧化菌 有机物 pcr
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霸王基因组RAPD优化条件的建立 被引量：12
9
作者 郝瑞文 景建洲 +1 位作者 李振勇 贾敬芬 《中国沙漠》 CSCD 北大核心 2006年第2期286-290,共5页
实验以霸王20d龄无菌籽苗为材料，使用CTAB法提取其基因组DNA，进行RAPD条件优化分析。通过单因子实验分别研究了Mg^2＋浓度、dNTPs浓度、Taq酶的浓度、引物浓度和模板DNA浓度对RAPD反应的影响，即在25μL总反应体系中，Mg^2＋的适宜浓... 实验以霸王20d龄无菌籽苗为材料，使用CTAB法提取其基因组DNA，进行RAPD条件优化分析。通过单因子实验分别研究了Mg^2＋浓度、dNTPs浓度、Taq酶的浓度、引物浓度和模板DNA浓度对RAPD反应的影响，即在25μL总反应体系中，Mg^2＋的适宜浓度为1．5～2．5mmol·L^-1、dNTPs的适宜浓度为0．2～0．3mmol·L^-1、随机引物的浓度以1．2μmol·L^-1为宜、Taq酶的用量以2．0U为佳、模板DNA的最适用量为50ng。本研究的PCR扩增程序为94℃预变性8min，94℃变性1min，37℃退火1min，72℃延伸2min，设40个循环，最后72℃保温6min。 展开更多
关键词 霸王 RAPD pcr 条件优化
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微生物基因组DNA提取方法的比较与改进 被引量：8
10
作者 刘晓侠 林建平 岑沛霖 《嘉兴学院学报》 2007年第3期48-50,共3页
高质量的微生物基因组DNA是基因工程的前提。目前国内外关于微生物基因组DNA提取的方法很多,根据研究对象和目的不同而方法各异。该文就现有方法中应用最为广泛的三种提取微生物基因组DNA的方法进行了比较,并对它们进行一些改进,获得了... 高质量的微生物基因组DNA是基因工程的前提。目前国内外关于微生物基因组DNA提取的方法很多,根据研究对象和目的不同而方法各异。该文就现有方法中应用最为广泛的三种提取微生物基因组DNA的方法进行了比较,并对它们进行一些改进,获得了针对不同细胞壁成分的微生物相应的简便、快速且高质量基因组DNA提取方法,并对提取的DNA进行PCR特异性扩增检测,获得较清晰的谱带[1],为基因克隆表达研究奠定了基础。 展开更多
关键词 微生物 DNA提取 pcr
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石蒜属植物SCoT-PCR反应体系构建及优化 被引量：12
11
作者 姜小凤 高燕会 +1 位作者 童再康 黄春红 《浙江农林大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期444-452,共9页
建立并优化了石蒜属Lycoris植物的目标起始密码子多态性-聚合酶链式反应(SCoT-PCR)反应体系,为研究石蒜属种质资源的遗传多样性、亲缘关系及遗传改良提供新的思路。采用L25(56)正交试验和单因素试验2种方法优化石蒜属植物SCoT-PCR体系... 建立并优化了石蒜属Lycoris植物的目标起始密码子多态性-聚合酶链式反应(SCoT-PCR)反应体系,为研究石蒜属种质资源的遗传多样性、亲缘关系及遗传改良提供新的思路。采用L25(56)正交试验和单因素试验2种方法优化石蒜属植物SCoT-PCR体系。得出石蒜属植物SCoT-PCR最佳反应体系:DNA模板2.0 mg.L-1,引物0.125μmol.L-1,三磷酸碱基脱氧核苷酸(dNTPs)0.2 mmol.L-1,镁离子(Mg2+)3.0 mmol.L-1,Taq DNA聚合酶1.0×16.67nkat。对优化的反应体系进行通用性、稳定性及可靠性检测,结果均能获得丰富、稳定、清晰的DNA谱带。最后可知SCoT新型标记在石蒜属植物中应用效果良好,可为石蒜属植物以后的研究提供基础条件。 展开更多
关键词 植物学 石蒜属 目标起始密码子多态性 pcr反应体系 正交设计 单因素试验
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一种可用于PCR扩增的直接提取土壤细菌DNA的方法 被引量：9
12
作者 马万里 Josquin Tibbits Mark Adams 《土壤通报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期56-58,共3页
本文以澳大利亚桉树林和松树林的土壤为例 ,采用Napp提取液和SDS直接溶解土壤细菌 ,并配合温浴 -玻璃珠震荡、苯酚 -氯仿萃取和异丙醇提取以及纯化DNA等步骤 ,直接从土壤样品中提取了土壤细菌DNA。所得DNA完全适用于酶解和PCR扩增的要... 本文以澳大利亚桉树林和松树林的土壤为例 ,采用Napp提取液和SDS直接溶解土壤细菌 ,并配合温浴 -玻璃珠震荡、苯酚 -氯仿萃取和异丙醇提取以及纯化DNA等步骤 ,直接从土壤样品中提取了土壤细菌DNA。所得DNA完全适用于酶解和PCR扩增的要求。该方法高效简单 ,费用低 。 展开更多
关键词 pcr扩增 直接提取 土壤细菌 DNA 提取方法 土壤微生物
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慢性胃炎患者口腔幽门螺杆菌对胃幽门螺杆菌根除率的影响 被引量：8
13
作者 高静 《泰山医学院学报》 CAS 2010年第4期252-254,共3页
目的明确慢性胃炎患者口腔内幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)对胃幽门螺杆菌根除率的影响。方法选择65例有慢性胃炎症状、并经全口牙周检查有不同程度牙周炎的患者进行胃镜检查,每例均取口腔标本进行Hp检测。对胃Hp感染患者治疗后4... 目的明确慢性胃炎患者口腔内幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)对胃幽门螺杆菌根除率的影响。方法选择65例有慢性胃炎症状、并经全口牙周检查有不同程度牙周炎的患者进行胃镜检查,每例均取口腔标本进行Hp检测。对胃Hp感染患者治疗后4周以及1年后分别复查胃Hp的感染状况,Hp检测采用碳13呼气试验。引物选用尿素酶C基因和CagA基因,PCR检测Hp。结果口腔Hp阳性者龈下菌斑与龈上菌斑中的Hp阳性率比较,P<0.01;慢性胃病Hp的检出率与牙周临床指数相关,牙周袋深度(PD)≥4 mm部位菌斑中Hp检出率显著高于PD<4 mm的部位(P<0.05);口腔Hp阳性患者用药4周后的胃Hp根除率稍低于用药前口腔Hp阴性患者(68.0%vs 69%,P>0.05),用药1年后的胃Hp根除率更是显著低于口腔Hp阴性组(32.0%vs 66%,P<0.05)。结论慢性胃病患者胃Hp的根除率受口腔Hp存在的影响;牙周炎患者口腔Hp阳性者的胃Hp根除率显著低于口腔Hp阴性者根除率。 展开更多
关键词 幽门螺杆菌 牙周炎 牙菌斑 慢性胃炎 pcr
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应用PCR法和LAMP法鉴定牛早期胚胎性别的研究 被引量：8
14
作者 肖海霞 陈静波 +1 位作者 海丽且木 祁志平 《新疆农业大学学报》 CAS 2006年第4期85-88,共4页
通过设计特异性引物,优化Mg2+浓度、退火温度和循环时间等影响PCR的因素,确定了适合现场应用的PCR反应体系;46枚胚胎现场的鉴定率为87%,移植妊娠率为28%,准确率为85%,证明建立的PCR胚胎性别鉴定方法可用于生产。使用LAMP法对126枚常规... 通过设计特异性引物,优化Mg2+浓度、退火温度和循环时间等影响PCR的因素,确定了适合现场应用的PCR反应体系;46枚胚胎现场的鉴定率为87%,移植妊娠率为28%,准确率为85%,证明建立的PCR胚胎性别鉴定方法可用于生产。使用LAMP法对126枚常规胚胎和42枚性控胚胎现场鉴定,鉴定率95%,移植妊娠率33%,准确率88%,结果证明该方法可应用于牛早期胚胎性别鉴定。PCR法和LAMP法所鉴定同一样品的结果一致,说明在控制好实验条件的情况下,根据实际情况可选用这两种方法中的任何一种进行性别鉴定应用。 展开更多
关键词 牛 胚胎 性别鉴定 pcr LAMP
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PCR生物芯片微加工技术的研究 被引量：6
15
作者 何文波 闫卫平 郭吉洪 《仪表技术与传感器》 CSCD 北大核心 2003年第1期10-13,共4页
聚合酶链式反应 (PCR)在生命科学研究及诸多相关领域已经得到了广泛应用。PCR生物芯片是利用微加工技术制作的能够实现PCR扩增反应的微装置。文中给出了基于MEMS技术的PCR生物芯片的微加工技术及加工方法 ,特别对集成在芯片上的加热器... 聚合酶链式反应 (PCR)在生命科学研究及诸多相关领域已经得到了广泛应用。PCR生物芯片是利用微加工技术制作的能够实现PCR扩增反应的微装置。文中给出了基于MEMS技术的PCR生物芯片的微加工技术及加工方法 ,特别对集成在芯片上的加热器及温度传感器的微加工方法进行了重点介绍 ,并对它们的特性进行了分析比较。 展开更多
关键词 微全分析系统 pcr 微加工技术 生物芯片
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复合探针实时荧光PCR技术快速检测海产品中副溶血性弧菌方法的建立 被引量：5
16
作者 闻洁 陆利霞 熊晓辉 《安徽农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期866-870,共5页
副溶血性弧菌是一种食源性致病菌,海产品和其制品海鲜酱油等最容易被副溶血性弧菌污染,而副溶血性弧菌寄生于鲜虾、海鲜酱油等复杂的食品基质中有时却很难被检测出。以快速检测食品中的副溶血性弧菌为目的,针对副溶血性弧菌的tlh基因,... 副溶血性弧菌是一种食源性致病菌,海产品和其制品海鲜酱油等最容易被副溶血性弧菌污染,而副溶血性弧菌寄生于鲜虾、海鲜酱油等复杂的食品基质中有时却很难被检测出。以快速检测食品中的副溶血性弧菌为目的,针对副溶血性弧菌的tlh基因,设计引物和复合探针,采用实时荧光PCR方法检测鲜虾和海鲜酱油中的副溶血性弧菌,得出以下结论,该方法检测副溶血性弧菌具有较强的特异性和灵敏度,当鲜虾(固体)中的样品菌含量为10~3cfu·g^(-1)或海鲜酱油中的样品菌含量为10~3cfu·m L^(-1)时,无需增菌培养,即可快速检出。增菌6~8 h即可检出鲜虾(固体)或海鲜酱油(液体)的1cfu的副溶血性弧菌。 展开更多
关键词 副溶血性弧菌 聚合酶链式反应 复合探针 荧光
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一种适用于批量筛选和鉴定拟南芥突变体的快速DNA提取方法 被引量：5
17
作者 张小明 勾雪娇 +3 位作者 梁鹏 林华明 赵晋洁 胡向阳 《云南大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期909-915,共7页
DNA提取是拟南芥突变体筛选与鉴定中的关键环节.结合拟南芥突变体鉴定特点和DNA提取特点,对传统SDS法进行改良,摸索出一种简易、快速且经济的DNA提取方法,并将其应用到突变体的批量筛选与鉴定中.使用该方法可在常温下利用10 mg左右拟南... DNA提取是拟南芥突变体筛选与鉴定中的关键环节.结合拟南芥突变体鉴定特点和DNA提取特点,对传统SDS法进行改良,摸索出一种简易、快速且经济的DNA提取方法,并将其应用到突变体的批量筛选与鉴定中.使用该方法可在常温下利用10 mg左右拟南芥叶片,以少量试剂,通过简单的研磨、离心、沉降和干燥等步骤便能快速制备用于PCR检测的DNA模板.采用本方法个人提取单个样品DNA仅需15 min左右,每小时可提取48个DNA样品.研究采用该方法提取了一批待鉴定拟南芥突变体的DNA样品,利用三引物法对其进行PCR检测,结果表明DNA样品浓度高,DNA扩增成功率高达100%,且目的条带清晰,说明该方法在拟南芥突变体的筛选和鉴定上是适用且高效的,可广泛应用于实验室突变体库的建立. 展开更多
关键词 拟南芥 DNA提取 SDS抽提法 聚合酶链式反应 突变体鉴定 三引物法
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用PCR检测细胞培养中支原体污染 被引量：4
18
作者 王正森 吴建新 +3 位作者 赵小元 孙宝岭 郭章溉 李敏 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1994年第6期553-556,共4页
细胞培养中支原体污染已经成为严重的问题。为了扩增６种支原体（精氨酸支原体，口腔支原体，人型支原体，猪鼻支原体，发酵支原体及莱氏支原体）核糖体ＲＮＡ操纵子的１６ｓ和２３ｓＤＮＡ间区，设计了三个通用ＰＣＲ引物（Ｆ１，Ｆ２... 细胞培养中支原体污染已经成为严重的问题。为了扩增６种支原体（精氨酸支原体，口腔支原体，人型支原体，猪鼻支原体，发酵支原体及莱氏支原体）核糖体ＲＮＡ操纵子的１６ｓ和２３ｓＤＮＡ间区，设计了三个通用ＰＣＲ引物（Ｆ１，Ｆ２及Ｒ１）．当以６种支原体ＤＮＡ为模板时，引物Ｆ１和Ｒ１产生３４０到４６８ｂｐ的片段，引物Ｆ２和Ｒ１产生１４５到２１１ｂｐ的片段，当用Ｈｅｌａ细胞或Ｅ．ｃｏｌｉＤＮＡ作为模板，用引物Ｆ１和Ｒ１时，在电泳中未观察到特定区带。此法最小能检出８．５ｆｇ精氨酸支原体ＤＮＡ，相当于１３个精氨酸支原体。这说明，当这些支原体污染细胞培养时，能用ＰＣＲ法检测出来。 展开更多
关键词 聚合酶链反应 支原体 污染 细胞培养
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转基因大豆及其深加工产品的PCR检测 被引量：3
19
作者 郑志慧 孙国鹏 李景鹏 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 2007年第3期308-312,共5页
以PCR技术为基础,建立了从大豆及其深加工产品中检测转基因成分的方法。大豆及其深加工产品采用改良的CTAB法进行DNA提取纯化,大豆色拉油DNA则用试剂盒方法进行了提取纯化。对提取的DNA用PCR方法对大豆特异性内源基因lectin进行扩增,设... 以PCR技术为基础,建立了从大豆及其深加工产品中检测转基因成分的方法。大豆及其深加工产品采用改良的CTAB法进行DNA提取纯化,大豆色拉油DNA则用试剂盒方法进行了提取纯化。对提取的DNA用PCR方法对大豆特异性内源基因lectin进行扩增,设计CaMV35启动子和NOS终止子特异性引物对其是否含有转基因成份进行初步的定性PCR筛选,并用抗除草剂基因CP4EPSPS对阳性结果进行确证。实验结果表明,改良的CTAB法对大豆深加工产品的DNA有很好的提取效果,而试剂盒方法对色拉油的DNA有良好的提取效果;PCR检测转基因的方法快速高效,检测结果与标准相符。 展开更多
关键词 转基因大豆 定性检测 改良CTAB法 pcr
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一个α,β地中海贫血复合家系β珠蛋白基因的进一步研究 被引量：4
20
作者 刘敬忠 吴冠芸 王荣新 《生物化学杂志》 CSCD 1990年第4期306-308,共3页
前文~[1]曾报道广西一个α,β地中海贫血复合家系的血红蛋白组成及α珠蛋白基因分析结果,并讨论了各成员可能的β珠蛋白基因结构情况。本文利用先进的PCR即基因扩增技术,结合特异寡核苷酸探针斑点杂交及扩增后直接测定DNA序列的技术,进... 前文~[1]曾报道广西一个α,β地中海贫血复合家系的血红蛋白组成及α珠蛋白基因分析结果,并讨论了各成员可能的β珠蛋白基因结构情况。本文利用先进的PCR即基因扩增技术,结合特异寡核苷酸探针斑点杂交及扩增后直接测定DNA序列的技术,进一步研究并彻底搞请了该家系各成员的β珠蛋白基因结构情况。结果显示:母亲及两个弟弟都是编码子41—42TTCT四个碱基缺失造成框架位移所致β地中海贫血的杂合子。父亲与先证者的β基因均属正常。前三个成员均为α地贫复合β地贫,其α与β珠蛋白链合成的不均衡状态得到改善,贫血症状也明显轻。 展开更多
关键词 地中海贫血 β珠蛋白基因 pcr
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