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黄芩素和LY294002对人肝癌细胞系SMMC-7721细胞增殖和凋亡的影响研究 被引量：4
1
作者 汪枫 喻小兰 +5 位作者 夏纪毅 王晓燕 唐利 曹勇 唐小平 夏国栋 《中国全科医学》 CAS 北大核心 2017年第3期323-330,共8页
目的探讨黄芩素和LY294002对人肝癌细胞系SMMC-7721细胞增殖和凋亡的影响。方法 2015年3月—2016年1月,取人肝癌细胞系SMMC-7721,制备细胞悬液。加入黄芩素(1、2、5、10、20、50、100、200、300μmol/L,分别命名为A1、A2、A3、A4、A5、A... 目的探讨黄芩素和LY294002对人肝癌细胞系SMMC-7721细胞增殖和凋亡的影响。方法 2015年3月—2016年1月,取人肝癌细胞系SMMC-7721,制备细胞悬液。加入黄芩素(1、2、5、10、20、50、100、200、300μmol/L,分别命名为A1、A2、A3、A4、A5、A6、A7、A8、A9组)或LY294002(1、2、5、10、20、30μmol/L,分别命名为B1、B2、B3、B4、B5、B6组),设定空白对照组和二甲基亚砜(DMSO)对照组,采用CCK8试剂盒检测各组细胞增殖水平;采用20μmol/L黄芩素(C1组)单独处理,20μmol/L黄芩素联合10μmol/L LY294002(C2组)处理人肝癌细胞系SMMC-7721,设定空白对照组和DMSO组,采用流式细胞术检测各组细胞周期;采用2、5、10、20μmol/L黄芩素(分别命名为D1、D2、D3、D4组)处理人肝癌细胞系SMMC-7721,设定空白对照组和DMSO组,采用显微摄影检测各组细胞数量;采用20μmol/L黄芩素(E1组)单独处理,20μmol/L黄芩素联合10μmol/L LY294002(E2组)处理人肝癌细胞系SMMC-7721,设定空白对照组和DMSO组,采用流式细胞术检测各组早期凋亡和晚期凋亡情况;采用20μmol/L黄芩素(F1组)、10μmol/L LY294002(F2组)或20μmol/L黄芩素联合10μmol/L LY294002(F3组)处理人肝癌细胞系SMMC-7721,设定空白对照组和DMSO组,采用实时荧光定量PCR(Realtime PCR)法检测细胞外调节蛋白激酶(ERK)1/2、周期素D1(Cyclin D1)、糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(AKT)mRNA表达水平;采用20μmol/L黄芩素(G1组)、10μmol/L LY294002(G2组)或20μmol/L黄芩素联合10μmol/L LY294002(G3组)处理人肝癌细胞系SMMC-7721,设定空白对照组和DMSO组,采用Western blotting法检测磷酸化ERK1/2(P-ERK1/2)、Cyclin D1、磷酸化GSK-3β(P-GSK-3β)、磷酸化AKT(P-AKT)表达水平。结果 A8组、A9组、B6组细胞增殖水平低于空白对照组、DMSO对照组(P<0.05)。C2组G0/G1期、G2/M期细胞比例高于空白对照组、DMSO组,S期细胞比例低于空白对照组、DMSO组(P<0.05)。D4组细胞数量少 展开更多
关键词 肝肿瘤 细胞增殖 细胞凋亡 黄芩素 LY294002 人肝癌细胞系smmc-7721
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不同LET^(12)C^(6+)照射人肝癌细胞SMMC-7721的存活曲线 被引量：1
2
作者 雷苏文 苏旭 +1 位作者 王菊芳 李文建 《中华放射医学与防护杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期83-85,共3页
目的　研究不同传能线密度 (LET)的重离子1 2 C6+对体外培养的人肝癌细胞SMMC 772 1存活的影响 ,以研究人肝癌细胞对不同LET重离子的辐射敏感性。方法　用克隆形成法研究细胞的存活情况。结果　 70keV μm的细胞存活率为 1 0 % (Ds=0 .... 目的　研究不同传能线密度 (LET)的重离子1 2 C6+对体外培养的人肝癌细胞SMMC 772 1存活的影响 ,以研究人肝癌细胞对不同LET重离子的辐射敏感性。方法　用克隆形成法研究细胞的存活情况。结果　 70keV μm的细胞存活率为 1 0 % (Ds=0 .1 )和 1 % (Ds=0 .0 1 )时的吸收剂量分别为 2 94Gy和 5 88Gy ;30keV μm的Ds=0 1 和Ds =0 0 1 分别为 4 0 0Gy和 8 0 0Gy。结论　 70keV μm比 30keV μm对人肝癌细胞SMMC 772 展开更多
关键词 人肝癌细胞 传能线密度 ^12C^6+ 重离子 辐射敏感性
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^(12)C^(6+)离子诱导TNFα基因在SMMC-7721细胞中的表达 被引量：1
3
作者 刘建香 阮健磊 +1 位作者 苏旭 李文建 《中华放射医学与防护杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期224-226,共3页
目的用Polyfect转染试剂将重组质粒pEgr-TNFα转染人肝癌细胞SMMC-7721,研究该重组质粒经12C6+离子作用后在细胞中的表达。方法用ELISA方法检测TNFα的蛋白表达,用RT-PCR方法检测TNFα转录水平的变化。结果转染pEgr-TNFα后在SMMC-7721... 目的用Polyfect转染试剂将重组质粒pEgr-TNFα转染人肝癌细胞SMMC-7721,研究该重组质粒经12C6+离子作用后在细胞中的表达。方法用ELISA方法检测TNFα的蛋白表达,用RT-PCR方法检测TNFα转录水平的变化。结果转染pEgr-TNFα后在SMMC-7721细胞中TNFα的蛋白表达量为2·06ng/ml,2Gy12C6+离子照射后,表达量增高为2·11ng/ml,明显高于未转染组和转染空载体组;RNA转录水平也明显增高,2Gy12C6+离子照射后增高更明显。结论12C6+离子联合重组质粒pEgr-TNFα,在被转染的SMMC-7721细胞中表达量明显增高。 展开更多
关键词 12 C6+离子 人肝癌smmc-7721细胞 TNFΑ表达
原文传递
^(60)Co照射后SMMC-7721细胞线粒体DNA部分D-loop区辐照损伤的初步研究
4
作者 王洁 汪茂荣 王学敏 《医学研究生学报》 CAS 2011年第3期250-255,共6页
目的线粒体DNA(mitochondrial DNA,mtDNA)的变化可能损害氧的利用,导致细胞的氧化和减少能量的产生,从而引起肿瘤细胞的凋亡。文中观察SMMC-7721细胞在接受不同剂量60Coγ射线照射后,线粒体DNA部分D-loop区碱基的损伤规律及特定的断裂... 目的线粒体DNA(mitochondrial DNA,mtDNA)的变化可能损害氧的利用,导致细胞的氧化和减少能量的产生,从而引起肿瘤细胞的凋亡。文中观察SMMC-7721细胞在接受不同剂量60Coγ射线照射后,线粒体DNA部分D-loop区碱基的损伤规律及特定的断裂敏感点。方法根据人线粒体DNA非编码区的基因序列设计相应的引物序列,再通过接头介导PCR(LM-PCR)及基因扫描来检测其断裂程度、位点及规律。结果在接受不同剂量γ射线照射后,通过ligation-media-ted PCR(LM-PCR)和基因扫描检测,发现各剂量都有相同大小的片段,即存在相同的断裂位点,且这些位点并非随机分布,位点的损伤频率也随着剂量的增加而呈现递增趋势。同时,随着剂量的增加还出现了新的断裂位点,且在一定范围内出现了双链断裂。结论线粒体DNAD-loop区在60Co照射后,产生的一系列断裂敏感位点和双链断裂及本身特有的突变位点,可能对SMMC-7721细胞辐射后的细胞凋亡起到重要作用,推测mtDNA很有可能是电离辐射易感的靶点,mtDNA的变化能够作为肿瘤细胞辐照前后损伤的一个重要指标。 展开更多
关键词 线粒体DNAD-loop区 断裂敏感点 双链断裂 Γ射线 辐照 smmc-7721细胞
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黄芩素、LY294002对人肝癌细胞系SMMC-7721细胞增殖及凋亡的影响 被引量：5
5
作者 汪枫 喻小兰 +5 位作者 夏纪毅 王晓燕 唐利 曹勇 唐小平 夏国栋 《山东医药》 CAS 北大核心 2016年第41期1-5,共5页
目的：探讨黄芩素和 PI3K 特异性抑制剂 LY294002对人肝癌细胞系 SMMC-7721细胞增殖及凋亡的影响。方法体外培养 SMMC-7721细胞，20μmol／L DMSO 及0、1、5、10、20μmol／L 黄芩素分别处理 SMMC-7721细胞，显微镜观察细胞数量变化；20... 目的：探讨黄芩素和 PI3K 特异性抑制剂 LY294002对人肝癌细胞系 SMMC-7721细胞增殖及凋亡的影响。方法体外培养 SMMC-7721细胞，20μmol／L DMSO 及0、1、5、10、20μmol／L 黄芩素分别处理 SMMC-7721细胞，显微镜观察细胞数量变化；20μmol／L DMSO 及0、1、2、5、10、20、50、100、200和300μmol／L 黄芩素和0、1、2、5、10、20、30μmol／L 的 LY294002处理 SMMC-7721细胞24 h，CCK8法检测细胞增殖活性。将 SMMC-7721细胞随机分为4组，A 组加入0μmol／L 黄芩素；B 组加20μmol／L DMSO；C 组加20μmol／L 黄芩素；D 组加20μmol／L 黄芩素和10μmol／L LY294002，培养24 h，流式细胞术检测细胞周期并计算细胞凋亡比例、RT-PCR 法和 Western blotting法检测凋亡相关因子 Bcl-2、Bax mRNA 和蛋白表达及 p-AKT 活性。结果 SMMC-7721细胞数量随黄芩素／LY294002浓度增加而显著减少，细胞增殖活性明显降低（P 均＜0．05）。与 A、B 组相比，C、D 组的 G0～G1期细胞比例明显增多（P ＜0．05），S 期细胞比例明显下降，G2／M期细胞变化无统计学意义（P ＞0．05），C、D 组 G0～G1期细胞升高比例、S 期细胞降低比例比较，P ＜均0．05。与 A 组和 B 组相比，C、D 组早期凋亡和晚期凋亡细胞均明显增多（P 均＜0．05），D 组比 C 组早期凋亡和晚期凋亡细胞增多更明显（P ＜0．05）。与 A、B 组相比，C、D 组抑制凋亡因子 Bcl-2 mRNA 水平显著降低（P ＜0．05），凋亡促进因子 Bax mRNA 水平显著增高（P ＜0．05）；D 组 Bcl-2 mR-NA 水平比 C 组降低更明显，而 Bax mRNA 水平比 C 组升高更明显（P 均＜0．05）。与 A、B 组相比，C、D 组凋亡抑制因子 Bcl-2表达量和 AKT 磷酸化水平显著降低（P 均＜0．05），凋亡促进因子 Bax 表达量显著增高（P 均＜0．05），D组凋亡抑制因子 Bcl-2表达量和 AKT 磷酸化水平降低比 C 组更明显（P 均＜0．05），凋亡促进因子 展开更多
关键词 肝癌 黄芩素 磷酸肌醇 3 激酶抑制剂 人肝癌细胞系 smmc-7721 细胞 细胞凋亡
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β-谷甾醇、豆甾醇诱导人肝癌细胞SMMC-7721凋亡 被引量：72
6
作者 李庆勇 姜春菲 +2 位作者 张黎 邱伟 孟祥东 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期1173-1175,共3页
目的研究β-谷甾醇、豆甾醇诱导人肝癌细胞SMMC-7721的凋亡作用。方法 MTT法观察β-谷甾醇、豆甾醇对细胞增殖的抑制作用;激光共聚焦显微镜观察细胞形态变化;用流式细胞仪检测细胞周期、凋亡率、细胞内活性氧ROS、钙离子Ca2+含量、线粒... 目的研究β-谷甾醇、豆甾醇诱导人肝癌细胞SMMC-7721的凋亡作用。方法 MTT法观察β-谷甾醇、豆甾醇对细胞增殖的抑制作用;激光共聚焦显微镜观察细胞形态变化;用流式细胞仪检测细胞周期、凋亡率、细胞内活性氧ROS、钙离子Ca2+含量、线粒体膜电位ΔΨm变化。结果β-谷甾醇、豆甾醇均明显抑制SMMC-7721细胞增殖,使细胞形态发生典型凋亡变化,凋亡率和细胞内Ca2+、ROS的含量均显著增加,线粒体膜电位降低。β-谷甾醇使细胞周期阻滞在G2/M期,而豆甾醇则同时阻滞在S期和G2/M期。结论β-谷甾醇、豆甾醇具有抑制人肝癌细胞SMMC-7721的增殖和诱导细胞凋亡的作用。 展开更多
关键词 Β-谷甾醇 豆甾醇 凋亡 人肝癌细胞smmc-7721
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