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Twist基因在肝细胞肝癌中的表达及意义 被引量：4
1
作者 李常海 陈孝平 +2 位作者 徐宗全 李高鹏 关剑 《中华外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第19期1353-1356,共4页
目的探讨转录因子 Twist 在人肝细胞肝癌、癌旁和肝硬化组织中的表达及其意义。方法利用免疫组化方法检测26例肝细胞肝癌标本(癌和癌旁组织)和10例肝硬化标本中 Twist 的表达情况;利用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和 Western 蛋白印迹方... 目的探讨转录因子 Twist 在人肝细胞肝癌、癌旁和肝硬化组织中的表达及其意义。方法利用免疫组化方法检测26例肝细胞肝癌标本(癌和癌旁组织)和10例肝硬化标本中 Twist 的表达情况;利用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和 Western 蛋白印迹方法检测其中10例标本中的Twist mRNA 和其蛋白的表达情况,分析其临床病理意义。结果免疫组化显示:Twist 蛋白在肝癌、癌旁和肝硬化组织中的阳性率分别为84.6%、19.2%和20.0%,Twist 在肝癌组织中的表达明显强于癌旁或肝硬化组织(P<0.05);大多数癌旁和肝硬化组织无 Twist 表达,癌旁与肝硬化组织相比阳性率无差别(P<0.05)。与癌旁组织相比,Twist mRNA 和其蛋白在肝癌组织中表达明显上调(P<0.05)。结论 Twist 在肝细胞肝癌组织中的过高表达与肝癌的发生发展相关。 展开更多
关键词 twist基因 癌 肝细胞 肝硬化 转录因子
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非小细胞肺癌中Twist通过TGF-β/Smad3信号通路促进EMT的发生 被引量：8
2
作者 崔凯 王武平 +7 位作者 孙盈 赵芳 高贵洲 王晓东 倪云峰 张涛 卢强 李小飞 《陕西医学杂志》 CAS 2016年第11期1462-1465,共4页
目的:探讨非小细胞肺癌(NSCLC)组织转录因子Twist调控TGF-β/Smad3的表达,促进上皮间质转化(EMT)的发生机制。方法:采用免疫组织化学法检测NSCLC组织样本中Twist、TGF-β/Smad3以及EMT中代表性分子E-cadherin和Vimentin蛋白表达,并统计... 目的:探讨非小细胞肺癌(NSCLC)组织转录因子Twist调控TGF-β/Smad3的表达,促进上皮间质转化(EMT)的发生机制。方法:采用免疫组织化学法检测NSCLC组织样本中Twist、TGF-β/Smad3以及EMT中代表性分子E-cadherin和Vimentin蛋白表达,并统计分析二者表达之间的相关性。结果:Twist、Smad3、Vimentin蛋白阳性着色定位于细胞质和细胞核内,Ecadherin蛋白阳性着色定位于细胞膜。Twist、Smad3、E-cadherin、Vimentin蛋白在NSCLC中阳性率分别为72.3%(120/166)、71.1%(118/166)、54.2%(90/166)、69.9%(116/166),显著高于癌旁组织,差异有统计学意义。Twist与Smad3、Smad3与E-cadherin、Vimentin在NSCLC不同分化程度及不同TNM分期均呈显著相关。结论:NSCLC中Twist可能通过TGF-β/Smad3信号通路促进EMT的发生。 展开更多
关键词 肺肿瘤/免疫学 @twist基因 转化生长因子Β SMAD3蛋白 间质细胞 细胞系 转化
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Twist基因在非小细胞肺癌中的研究进展 被引量：8
3
作者 李春雨 曲仪庆 《国际呼吸杂志》 2017年第2期140-144,共5页
Twist作为碱性螺旋一环一螺旋转录因子的家族成员，在胚胎发育过程中通过转录激活或抑制下游靶基因对细胞的迁移和分化发挥重要的调节作用。Twist基因在多种肿瘤中存在高表达，参与多种信号通路及肿瘤上皮间质转化的调控，与肿瘤的发生... Twist作为碱性螺旋一环一螺旋转录因子的家族成员，在胚胎发育过程中通过转录激活或抑制下游靶基因对细胞的迁移和分化发挥重要的调节作用。Twist基因在多种肿瘤中存在高表达，参与多种信号通路及肿瘤上皮间质转化的调控，与肿瘤的发生、侵袭转移、血管生成、凋亡抵抗及肿瘤细胞耐药等密切相关，是多种肿瘤的不良预后因子。本文对Twist基因在非小细胞肺癌发生发展、侵袭转移及肿瘤细胞耐药等方面的研究进展作一综述。 展开更多
关键词 twist基因 非小细胞肺癌 上皮一间质转化 侵袭 转移
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RNAi干扰Twist基因对喉鳞状细胞癌Hep-2细胞株增殖与侵袭力及E-钙黏蛋白甲基化的影响 被引量：6
4
作者 孙志宏 齐莹 《中国耳鼻咽喉颅底外科杂志》 CAS 2016年第6期467-471,共5页
目的探讨RNAi干扰Twist基因对喉鳞状细胞癌Hep-2细胞株增殖、侵袭力及E-钙黏蛋白甲基化的影响。方法培养人喉鳞状细胞癌Hep-2细胞株,分别转染siRNA-Twist(siRNA-Twist组)、阳性对照siRNAGAPDH(阳性对照组)和阴性对照错义链(阴性对照组)... 目的探讨RNAi干扰Twist基因对喉鳞状细胞癌Hep-2细胞株增殖、侵袭力及E-钙黏蛋白甲基化的影响。方法培养人喉鳞状细胞癌Hep-2细胞株,分别转染siRNA-Twist(siRNA-Twist组)、阳性对照siRNAGAPDH(阳性对照组)和阴性对照错义链(阴性对照组),利用实时荧光定量PCR技术检测各转染组细胞中Twist和E-cad基因表达,Western blot法检测各转染组细胞中Twist和E-cad蛋白表达,MTT比色法检测各转染组细胞增殖情况,Transwell小室检测细胞迁移和侵袭能力,甲基化特异性聚合酶链式反应(MSP)检测不同转染组细胞中Ecad甲基化表达。结果 siRNA-Twist组细胞中Twist mRNA和Twist蛋白表达量均低于阳性对照组和阴性对照组,差异均具有统计学意义(P<0.05);siRNA-Twist组细胞中E-cad mRNA和E-cad蛋白表达量均高于阳性对照组和阴性对照组,差异均具有统计学意义(P<0.05);与阳性对照组和阴性对照组相比,siRNA-Twist组细胞转染48 h^96 h时细胞增殖能力明显减弱,差异均具有统计学意义(P<0.05);siRNA-Twist组细胞迁移细胞数和侵袭细胞数均低于阳性对照组和阴性对照组,差异均具有统计学意义(P<0.05);MSP检测结果显示,siRNA-Twist组细胞中E-cad甲基化扩增条带呈弱阳性,表达强度显著低于阳性对照组和阴性对照组,而非甲基化扩增条带呈阳性。结论特异性抑制Twist基因表达可能通过影响E-cad甲基化而上调E-cad表达,从而抑制细胞增殖及侵袭能力,有望为喉鳞状细胞癌基因治疗提供新的靶点。 展开更多
关键词 喉鳞状细胞癌 RNAi干扰 twist基因 侵袭力
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胃癌组织Twist基因的荧光实时定量PCR检测 被引量：4
5
作者 曹笠 《中国现代医生》 2008年第33期20-21,36,共3页
目的探讨Twist基因在人胃癌组织、癌旁组织、胃癌转移灶组织中表达及临床意义。方法应用Trizol法提取总RNA,以总RNA为模板经逆转录合成cDNA,用实时荧光定量PCR的方法检测8例正常胃粘膜,27例胃癌原发灶,19例胃癌转移灶组织中TwistmRNA的... 目的探讨Twist基因在人胃癌组织、癌旁组织、胃癌转移灶组织中表达及临床意义。方法应用Trizol法提取总RNA,以总RNA为模板经逆转录合成cDNA,用实时荧光定量PCR的方法检测8例正常胃粘膜,27例胃癌原发灶,19例胃癌转移灶组织中TwistmRNA的表达情况并分析其与临床病理指标的关系。结果荧光实时定量PCR扩增结果显示,Twist基因在正常胃粘膜组织中表达量很低,而在原发性胃癌组、转移性胃癌组中均有较高的表达,原发性胃癌组织及腹膜转移组织中的表达明显高于正常胃粘膜组织(P<0.05);Twist基因在淋巴转移组织中的表达与原发组中的表达差异显著(P<0.05)。结论Twist基因在胃癌中过度表达可能促进胃癌的发生与发展,并与胃癌转移密切相关,又可能成为预测胃癌转移潜能的分子基础。 展开更多
关键词 胃癌 twist基因 实时荧光定量PCR
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Twist在几种不同肿瘤细胞系中的差异表达 被引量：3
6
作者 刘晓燕 王丽 +1 位作者 何涛 崔维佳 《泸州医学院学报》 2010年第2期128-130,共3页
目的:探讨Twist基因在不同肿瘤细胞系中的表达水平。方法:运用RT-PCR方法检测Twist在人类乳腺癌、结肠癌、肾癌、胃癌、肝癌、正常肝细胞等6种细胞系中mRNA水平上的表达。结果:正常肝细胞系中Twist的相对表达量最低,在不同癌细胞系中,... 目的:探讨Twist基因在不同肿瘤细胞系中的表达水平。方法:运用RT-PCR方法检测Twist在人类乳腺癌、结肠癌、肾癌、胃癌、肝癌、正常肝细胞等6种细胞系中mRNA水平上的表达。结果:正常肝细胞系中Twist的相对表达量最低,在不同癌细胞系中,结肠癌的相对表达量最高,肝癌最低,组间差异具有统计学意义(P<0.01)。结论:Twist在不同肿瘤细胞系中的表达差异性可能为肿瘤发生发展的研究以及肿瘤的诊断与鉴别诊断提供一定线索。 展开更多
关键词 细胞株 肿瘤 twist基因 RT-PCR
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子宫颈上皮内瘤变和子宫颈鳞癌中Twist基因蛋白及Skp2表达 被引量：5
7
作者 何春年 张鸿瑞 +3 位作者 徐翠清 张秀智 赵焕芬 徐明堂 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期468-472,共5页
目的研究Twist和Skp2在子宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)及子宫颈鳞癌(squamous cell carci-noma,SCC)中的表达及其在癌变中的作用。方法 SP法检测Twist和Skp2在CIN和SCC中的表达,并与正常子宫颈鳞状上皮组对... 目的研究Twist和Skp2在子宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)及子宫颈鳞癌(squamous cell carci-noma,SCC)中的表达及其在癌变中的作用。方法 SP法检测Twist和Skp2在CIN和SCC中的表达,并与正常子宫颈鳞状上皮组对照。结果正常组、CIN1级组、CIN 2级组、CIN 3级组及SCC组的Twist和Skp2表达阳性率分别为:0、10%、42.3%、48.3%、52.5%,23.1%、46.5%、73.1%、93.1%和92.5%。Twist和Skp2在正常组与CIN组及SCC组间表达差异有显著性(P<0.005)。CIN1级组与CIN2级组间表达差异有显著性(P<0.005)。结论 Twist和Skp2随着CIN从轻到重至SCC,表达逐渐增强,表明两者在SCC癌变过程中起到协同性作用,共同参与CIN的进展及SCC癌变机制。检测到Twist和Skp2表达增强有助于SCC发生的判断及CIN1级与CIN2级分级的临床病理诊断。 展开更多
关键词 子宫颈鳞状细胞肿瘤 子宫颈上皮内瘤变 twist基因 S期激酶相关蛋白2
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Twist基因诱导SW480细胞上皮间质转化并增强其侵袭能力的研究 被引量：5
8
作者 付蔚华 智亮辉 +2 位作者 张丽永 李卫东 朱理玮 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期2488-2490,共3页
目的观察Twist基因促进人结肠癌细胞株SW480上皮间质转化及对细胞侵袭能力的影响。方法构建Twist真核表达质粒并转染至SW480细胞。检测3组SW480细胞转染前后Twist、上皮钙黏附蛋白（E-cadherin）和波形蛋白（vimentin）的mRNA和蛋白表达... 目的观察Twist基因促进人结肠癌细胞株SW480上皮间质转化及对细胞侵袭能力的影响。方法构建Twist真核表达质粒并转染至SW480细胞。检测3组SW480细胞转染前后Twist、上皮钙黏附蛋白（E-cadherin）和波形蛋白（vimentin）的mRNA和蛋白表达。Transwell小室检测SW480结肠癌细胞的侵袭能力。结果转染Twist基因的SW480细胞TwistmRNA和蛋白表达较未转染组均明显增加（P〈0．01），而E—cadherinmRNA和蛋白表达明显下降（P〈0．01），vimentin的mRNA和蛋白表达明显增加（P〈0．01）。同时转染组SW480细胞侵袭细胞数（91．67±8．37）明显高于转染空质粒组（67．56±6．97）和未转染质粒组（56．67±8．00），差异有统计学意义（P〈0．01）。结论Twist基因通过促进人结肠癌细胞SW480的上皮间质转变而使其具有更强的侵袭能力。 展开更多
关键词 结肠癌 twist基因 上皮间质转化 侵袭
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Twist基因在恶性肿瘤中的研究与进展 被引量：5
9
作者 朱皓皞 于晓红 《实用癌症杂志》 2012年第2期215-217,共3页
研究表明,人类恶性肿瘤的发生发展是细胞调控的癌基因、抑癌基因相互作用的结果,多基因变化导致细胞周期紊乱,从而引起细胞失控性生长。因此,近年来对于癌基因和抑癌基因的研究成为讨论肿瘤发生发展的热点。Twist就是近年来倍受关注的... 研究表明,人类恶性肿瘤的发生发展是细胞调控的癌基因、抑癌基因相互作用的结果,多基因变化导致细胞周期紊乱,从而引起细胞失控性生长。因此,近年来对于癌基因和抑癌基因的研究成为讨论肿瘤发生发展的热点。Twist就是近年来倍受关注的癌基因之一,因其参与肿瘤细胞的上皮-间质转变（epithelial-mesenchymal transition,EMT）过程,使肿瘤细胞能通过适应周围基质环境从而获得新的上皮特性,形成转移病灶, 展开更多
关键词 twist基因 肿瘤 上皮-间质转变
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上调Twist基因对人结肠癌SW480细胞增殖凋亡及侵袭能力的影响 被引量：4
10
作者 张娟 王士杰 +3 位作者 王贵英 于跃明 史健伟 惠捷 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期540-546,共7页
目的:上调人结肠癌SW480细胞株中Twist基因的表达,观察其对细胞增殖、凋亡及侵袭能力的影响。方法:将高表达Twist基因的质粒和空载质粒稳定转染SW480细胞,分别命名为转染组和对照组,MTT法、细胞划痕实验和Matrige1侵袭实验分别检测肿瘤... 目的:上调人结肠癌SW480细胞株中Twist基因的表达,观察其对细胞增殖、凋亡及侵袭能力的影响。方法:将高表达Twist基因的质粒和空载质粒稳定转染SW480细胞,分别命名为转染组和对照组,MTT法、细胞划痕实验和Matrige1侵袭实验分别检测肿瘤细胞体外增殖、迁移及侵袭能力的变化。FCM检测细胞周期及凋亡情况。将肿瘤细胞接种至裸鼠皮下,对比转染前后肿瘤细胞的成瘤情况。结果:从第4天开始,转染组SW480细胞生长速度明显高于对照组(P<0.05):转染组SW480细胞的增殖指数(PI)和S期细胞比例[(61.279±1.709)%,(33.171±3.154)%]均高于对照组[(26.142±1.518)%,(14.112±2.137)%](P<0.05);转染组的细胞凋亡率(6.83I±1.624)%低于对照组(12.223±1.733)%(P<0.05);划痕24 h及48 h时后转染组细胞迁移率[(40.06±5.56)%,(75.77±8.06)%]均高于对照组[(25.25±2.65)%,(35.37±6.79)%](P<0.05);Matrige1侵袭实验结果显示转染组侵袭细胞个数明显高于对照组(p<0.05);将两组细胞分别接种裸鼠,16 d左右可见肿瘤结节,转染组肿瘤体积及瘤重均大于对照组(P<0.05)。结论:上调Twist基因可提高SW480细胞体外增殖、迁移和侵袭能力,降低SW480细胞凋亡率。 展开更多
关键词 结肠癌细胞 twist基因 增殖 侵袭 凋亡
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转录因子Twist的siRNA筛选、腺病毒构建及功能检测 被引量：3
11
作者 何昀 毕杨 +2 位作者 刘星 袁心刚 魏光辉 《医学分子生物学杂志》 CAS CSCD 2010年第3期236-241,共6页
目的 筛选特异性沉默人的Twist基因的siRNA序列,构建siTwist腺病毒并在MG63及143B骨肉瘤细胞中进行功能鉴定.方法 体外退火获得4组siTwist双链DNA序列,克隆至含有Twist基因的pSOS-Twist质粒中获得pSOS-siTwist质粒,脂质体转染HEK293细胞... 目的 筛选特异性沉默人的Twist基因的siRNA序列,构建siTwist腺病毒并在MG63及143B骨肉瘤细胞中进行功能鉴定.方法 体外退火获得4组siTwist双链DNA序列,克隆至含有Twist基因的pSOS-Twist质粒中获得pSOS-siTwist质粒,脂质体转染HEK293细胞,GFP检测筛选有功能的siTwist片段,将筛选出的siTwist序列构建腺病毒,感染143B骨肉瘤细胞.通过RT-PCR、Western 印迹检测Twist的表达.siTwist与Twist腺病毒共感染MG63骨肉瘤细胞,细胞计数及细胞侵袭实验检测siTwist对Twist的抑制作用.结果 在HEK293细胞中,4组siTwist中有2组GFP的表达明显降低,且siTwist腺病毒能抑制143B骨肉瘤细胞中内源性的Twist表达,Twist腺病毒能促进MG63骨肉瘤细胞的增殖和转移,而两组siTwist与Twist共感染组MG63细胞的增殖及迁徙率均明显低于Twist组（P〈0.05）.结论 筛选出两对特异性沉默Twist基因的siRNA片段,并成功构建腺病毒,转染细胞后能有效抑制内源性和外源性的Twist表达,为研究Twist在骨肉瘤细胞增殖和转移中的作用及具体机制提供了有效的分子工具. 展开更多
关键词 twist基因 腺病毒 小干扰RNA
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重组质粒pEGFP-N1-Twist对SKOV3细胞增殖、侵袭及迁移能力的影响 被引量：3
12
作者 尉春艳 张熙 +3 位作者 孙学军 彭慧霞 贺赛 王桂贤 《山西医科大学学报》 CAS 2014年第8期695-698,784,785,共6页
目的评估重组质粒pEGFP-N1-Twist对卵巢癌SKOV3细胞增殖、侵袭及迁移能力的影响。方法将pEGFP-N1-Twist转染入SKOV3细胞系,用real-time PCR和Western blot检测Twist基因与蛋白的表达情况;通过Transwell及MTT试验检测pEGFP-N1-Twist对SK... 目的评估重组质粒pEGFP-N1-Twist对卵巢癌SKOV3细胞增殖、侵袭及迁移能力的影响。方法将pEGFP-N1-Twist转染入SKOV3细胞系,用real-time PCR和Western blot检测Twist基因与蛋白的表达情况;通过Transwell及MTT试验检测pEGFP-N1-Twist对SKOV3细胞的作用。结果转染了pEGFP-N1-Twist的SKOV3细胞中Twist基因/蛋白的表达明显上调;转染组较空白对照组侵袭及迁移能力增强(P<0.05),细胞增殖能力明显增加(P<0.05)。结论成功构建了Twist基因的真核表达载体并能在细胞内稳定表达,Twist基因能增强SKOV3细胞的侵袭及迁移能力、细胞增殖能力。 展开更多
关键词 重组质粒 twist基因 卵巢癌 真核表达载体pEGFP-N1 基因克隆
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Twist基因介导肿瘤细胞耐药的研究进展 被引量：4
13
作者 张煦 孙晓红 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期561-564,共4页
Twist属于高度保守的碱性螺旋-环-螺旋(basichelix-loop-helix,bHLH)结构的转录因子家族,在动物和人的胚胎发育、诱导细胞迁移以及组织塑形中起重要作用。Twist基因具有癌基因特征,在多种恶性肿瘤中高表达,不仅参与肿瘤的发生、侵袭和转... Twist属于高度保守的碱性螺旋-环-螺旋(basichelix-loop-helix,bHLH)结构的转录因子家族,在动物和人的胚胎发育、诱导细胞迁移以及组织塑形中起重要作用。Twist基因具有癌基因特征,在多种恶性肿瘤中高表达,不仅参与肿瘤的发生、侵袭和转移,而且与肿瘤细胞产生耐药性密切相关。Twist基因可以通过抗细胞凋亡、干扰抗微管类药物、诱发上皮-间质转型、诱导产生肿瘤干细胞样特性及影响肿瘤微环境等促使肿瘤细胞耐药,因此有望成为逆转肿瘤耐药的新靶点。 展开更多
关键词 twist基因 肿瘤 耐药 机制
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宫颈癌中P16和Twist基因的表达与预后的关系 被引量：4
14
作者 杨然 冯磊 《中国妇幼保健》 CAS 2015年第15期2322-2324,共3页
目的：探讨宫颈癌中P16和Twist基因的表达情况及其与宫颈癌预后的关系。方法：选取2010年6月～2011年5月该院收治的经病理诊断确诊为宫颈癌的患者150例作为观察组,另选同期在门诊体检的健康妇女60例作为对照组。采集观察组患者宫颈癌组... 目的：探讨宫颈癌中P16和Twist基因的表达情况及其与宫颈癌预后的关系。方法：选取2010年6月～2011年5月该院收治的经病理诊断确诊为宫颈癌的患者150例作为观察组,另选同期在门诊体检的健康妇女60例作为对照组。采集观察组患者宫颈癌组织和对照组受试者的正常宫颈组织作为标本,利用免疫组化法检测P16和Twist基因在两组标本中的表达情况,并分析其与临床资料的关系。对观察组行手术治疗的患者进行为期3年的门诊随访,观察复发率。结果：观察组P16阳性表达率为80.67%,对照组为11.67%;观察组Twist阳性表达率为85.33%,对照组为6.67%;观察组P16和Twist的阳性表达率均显著高于对照组（P〈0.05）。P16的阳性表达与年龄、FIGO分期和是否发生淋巴结转移有关（P〈0.05）,而与分化程度和病理类型无关（P〉0.05）。Twist的阳性表达与年龄、FIGO分期、分化程度和病理类型均无关（P〉0.05）,只与是否发生淋巴结转移有关（P〈0.05）。有54例患者在3年内发生复发,复发率为72.00%。复发者中,P16表达阳性的复发率为46.43%（26/56）,显著高于P16表达阴性的复发率15.79%（3/19）,差异有统计学意义（P〈0.05）;Twist表达阳性的复发率为35.38%（23/65）,显著高于Twist表达阴性的复发率20.00%（2/10）,差异有统计学意义（P〈0.05）。经Spearman相关性分析发现,宫颈癌组织中P16与Twist基因的表达无相关性（r=0.228,P〉0.05）。结论：P16和Twist基因在宫颈癌组织中存在过表达的情况,可能与宫颈癌的发生有关;P16和Twist基因表达阳性的患者,肿瘤3年复发率较高,可以据此初步判定宫颈癌患者的预后。 展开更多
关键词 宫颈癌 P16蛋白 twist基因 预后
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shRNA Twist基因对人绒毛膜癌细胞JEG-3增殖、侵袭和凋亡的影响 被引量：3
15
作者 谢环 田洁 黄娅芬 《昆明医科大学学报》 CAS 2019年第5期18-23,共6页
目的 观察shRNA Twist基因对人绒毛膜癌细胞JEG-3增殖、侵袭和凋亡的影响。方法 以人源性绒毛膜癌细胞为种子细胞,构建shRNA-Twist小干扰RNA载体,通过慢病毒转染绒毛膜癌细胞,根据转染慢病毒质粒的不同分成3组,即空白对照组、空白质粒组... 目的 观察shRNA Twist基因对人绒毛膜癌细胞JEG-3增殖、侵袭和凋亡的影响。方法 以人源性绒毛膜癌细胞为种子细胞,构建shRNA-Twist小干扰RNA载体,通过慢病毒转染绒毛膜癌细胞,根据转染慢病毒质粒的不同分成3组,即空白对照组、空白质粒组和shRNA干扰组。RT-qPCR和Western Blot检测Twist和凋亡蛋白caspase-3和caspase-9的表达。Transwell法检测人绒毛膜癌细胞侵袭能力,CCK-8法检测人绒毛膜癌细胞增殖能力,AV-PI试剂盒检测人绒毛膜癌细胞凋亡水平。结果 RT-PCR结果显示,空白质粒组的Twist的mRNA的相对表达量(与空白对照组相比)为(1.011±0.125);shRNA干扰组的Twist的mRNA的相对表达量(与空白对照组相比)为(0.377±0.021),高于空白质粒组的mRNA表达水平(P < 0.05)。Caspase-3和Caspase-9的mRNA含量具有同样的趋势。Western-Blot结果显示,空白质粒组和shRNA干扰组的的Twist蛋白相对表达量(与空白对照组相比)分别为(7.211±0.934)和(0.213±0.091),2组比较差异具有统计学意义(P < 0.05)。Caspase-3和Caspase-9的蛋白含量具有同样的趋势。空白对照组、空白质粒组和shRNA干扰组的Transwell结果比较具有明显的统计学差异(F = 23.983,P < 0.05)。shRNA干扰组与空白质粒组的Transwell结果比较具有明显的统计学差异(q =10.322,P < 0.05)。CCK-8和AV-PI检测结果具有同样的趋势。结论 shRNA-Twist可以明显的抑制绒毛膜癌细胞的增殖和侵袭,促进细胞凋亡,可以作为绒毛膜癌新的治疗靶基因。 展开更多
关键词 twist基因 绒毛膜癌 细胞增殖 细胞侵袭 细胞凋亡
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Twist在宫颈鳞癌中的表达及其与临床生物学行为的关系 被引量：3
16
作者 鲍伟 刘小奕 +4 位作者 许颖 丁李 吴佳皓 李柱南 吴丹 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期547-550,共4页
目的探讨转录因子Twist在人宫颈鳞癌、宫颈上皮内瘤样变(CIN)和正常宫颈上皮组织中的表达及临床病理意义。方法收集宫颈鳞癌标本(宫颈鳞癌组,n=61)、CINⅠ期标本(CINⅠ期组,n=22)、CINⅡ～Ⅲ期标本(CINⅡ～Ⅲ期组,n=44)以及正常宫颈组... 目的探讨转录因子Twist在人宫颈鳞癌、宫颈上皮内瘤样变(CIN)和正常宫颈上皮组织中的表达及临床病理意义。方法收集宫颈鳞癌标本(宫颈鳞癌组,n=61)、CINⅠ期标本(CINⅠ期组,n=22)、CINⅡ～Ⅲ期标本(CINⅡ～Ⅲ期组,n=44)以及正常宫颈组织标本(正常对照组,n=22),采用免疫组织化学方法检测宫颈组织中Twist蛋白的表达情况,并分析其与宫颈鳞癌临床生物学行为的关系。结果正常对照组、CINⅠ期组、CINⅡ～Ⅲ期组和宫颈鳞癌组的Twist蛋白阳性率呈逐渐上升趋势,分别为0、40.90%、68.18%和70.49%;CINⅠ期组、CINⅡ～Ⅲ期组和宫颈鳞癌组的Twist蛋白阳性率与正常对照组比较,差异均具有统计学意义(P<0.01);在CINⅠ期组、CINⅡ～Ⅲ期组及宫颈鳞癌组间比较,Twist蛋白阳性率差异无统计学意义(P>0.05)。结合临床病理分析,在宫颈鳞癌组中,不同年龄、FIGO临床分期及有无淋巴血管间隙浸润的患者间比较,Twist蛋白阳性率差异均无统计学意义(P>0.05);Twist蛋白在低分化和未分化肿瘤中的阳性率(94.44%)明显高于高、中分化肿瘤(60.47%),差异有统计学意义(P<0.05);有淋巴结转移者Twist蛋白阳性率(93.75%)较无淋巴结转移者(62.22%)明显升高(P<0.05)。结论 Twist蛋白在宫颈鳞癌中高表达,在判断肿瘤分化程度及转移潜能方面有辅助诊断价值。 展开更多
关键词 twist基因 转录因子 宫颈鳞癌 宫颈上皮内瘤样变 免疫组织化学
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肝癌细胞中Twist基因表达变化与WNT信号传导通路的关系 被引量：3
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作者 刘瑞鸣 徐静 马晓飞 《山东医药》 CAS 北大核心 2009年第6期16-17,共2页
目的探讨肝癌细胞中Twist基因表达与WNT信号传导通路激活的关系。方法将0.05mol/L氯化锂加入人肝癌SMMC7721细胞中培养2h激活WNT通路,然后分别培养6、12、24h,分别为A1、A2、A3组;将0.1mol/L氯化锂加入人肝癌SMMC7721细胞中培养2h激活WN... 目的探讨肝癌细胞中Twist基因表达与WNT信号传导通路激活的关系。方法将0.05mol/L氯化锂加入人肝癌SMMC7721细胞中培养2h激活WNT通路,然后分别培养6、12、24h,分别为A1、A2、A3组;将0.1mol/L氯化锂加入人肝癌SMMC7721细胞中培养2h激活WNT通路,然后分别培养6、12、24h,分别为B1、B2、B3组;另设空白对照组。用RT-PCR及荧光定量PCR法检测各组细胞的TwistmRNA。结果RT-PCR法测得TwistmRNA在A1、A2、A3组分别为0.38±0.05、0.60±0.08、0.69±0.06,B1、B2、B3组分别为0.56±0.05、0.59±0.06、0.69±0.04,以上各组细胞TwistmRNA与对照组的0.18±0.03相比,P均<0.05。荧光定量法测得TwistmRNA在A1、A2、A3组分别为0.43±0.01、0.56±0.01、0.67±0.01,B1、B2、B3组分别为0.52±0.01、0.58±0.00、0.65±0.00,以上各组细胞TwistmRNA与对照组的0.21±0.00相比,P均<0.05。结论肝癌细胞中Twist基因的表达程度与WNT通路的激活有关。 展开更多
关键词 肝肿瘤 肝细胞癌 twist基因 WNT通路 聚合酶链反应
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Twist基因在卵巢癌中的研究进展 被引量：3
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作者 洪莉 杨将 邢辉 《中国全科医学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第32期4019-4022,共4页
卵巢癌是继子宫内膜癌和宫颈癌发病率居第三位的妇科恶性肿瘤,其病死率居妇科恶性肿瘤之首。碱性螺旋-环-螺旋(b HLH)转录因子家族成员Twist基因在卵巢癌组织中高度表达,其异常表达在卵巢癌的发生、发展及恶化过程中发挥着重要作用。对T... 卵巢癌是继子宫内膜癌和宫颈癌发病率居第三位的妇科恶性肿瘤,其病死率居妇科恶性肿瘤之首。碱性螺旋-环-螺旋(b HLH)转录因子家族成员Twist基因在卵巢癌组织中高度表达,其异常表达在卵巢癌的发生、发展及恶化过程中发挥着重要作用。对Twist基因沉默处理后,卵巢癌细胞的增殖及迁移将受到明显的影响。本文通过结合近年来国内外的研究成果,简述了Twist基因在卵巢癌发生、发展中最新的作用机制。 展开更多
关键词 卵巢肿瘤 twist基因 细胞增殖 综述
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转化生长因子-β_1诱导人脐静脉内皮细胞间质转化的实验研究 被引量：1
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作者 张静静 刘廷 董晓光 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2009年第9期653-658,共6页
目的观察外源性转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)对人脐静脉内皮细胞系EA.hy926细胞迁移和间质标志蛋白表达的影响及其发生的机制。方法体外培养EA.hy926,随机分为2组:(1)对照组:培养液中添加PBS;(2)TGF-β1组... 目的观察外源性转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)对人脐静脉内皮细胞系EA.hy926细胞迁移和间质标志蛋白表达的影响及其发生的机制。方法体外培养EA.hy926,随机分为2组:(1)对照组:培养液中添加PBS;(2)TGF-β1组:培养液中添加10μg.L-1TGF-β1。倒置相差显微镜观察细胞形态变化,MTT法检测TGF-β1对细胞增殖的影响,划痕实验检测细胞迁移能力的变化,免疫荧光方法检测VE-钙黏蛋白、β-连环蛋白、波形蛋白和Twist表达变化,RT-PCR检测VE-钙黏蛋白、波形蛋白和Twist基因表达变化。结果对照组内皮细胞呈铺路石样生长,TGF-β1组内皮细胞由铺路石样变为梭形。对照组培养24h、48h和72h时吸光度A值分别为0.4483±0.0172、0.5633±0.0087、0.7005±0.0479,TGF-β1组分别为0.3792±0.0231、0.4708±0.0185、0.5580±0.0159,2组不同时间点间比较差异均有统计学意义(t=4.779、9.058、5.648,P均<0.05);划痕实验检测对照组和TGF-β1组内皮细胞迁移个数分别为每视野(47.17±8.28)个、(63.00±11.33)个,2组比较差异有统计学意义(t=2.763,P=0.02)。免疫荧光检测可见TGF-β1组VE-钙黏蛋白和β-连环蛋白在细胞连接处表达减少,胞浆内游离的β-连环蛋白增多,波形蛋白和Twist表达增多。RT-PCR检测结果显示,对照组和TGF-β1组VE-钙黏蛋白目的基因灰度值与内参GAPDH灰度值的比值分别为0.8344±0.1933、0.4821±0.0909,波形蛋白分别为0.9687±0.1632、1.4404±0.1502,Twist分别为0.2316±0.0785、2.1626±0.2956,2组比较差异均有统计学意义(t=4.038、9.933、15.465,P均<0.05)。结论TGF-β1促进内皮细胞迁移,诱导内皮细胞表达间质细胞标志蛋白,同时抑制VE-钙黏蛋白表达。TGF-β1介导的Twist表达增多,可能在内皮细胞表达间质标志蛋白中起着重要作用。 展开更多
关键词 转化生长因子-Β1 内皮细胞间质转化 twist基因 twist蛋白
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结直肠癌组织中Twist、Fascin mRNA的表达变化 被引量：3
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作者 张井松 李亚晨 戚峰 《山东医药》 CAS 北大核心 2015年第27期42-43,共2页
目的观察结直肠癌组织中Twist、Fascin mRNA的表达变化。方法结直肠癌患者81例,术中留取肿瘤组织与癌旁正常组织,采用real-time PCR法检测Twist、Fascin mRNA,分析二者表达与结直肠癌临床病理参数的关系。结果结直肠癌组织中Twist、Fasc... 目的观察结直肠癌组织中Twist、Fascin mRNA的表达变化。方法结直肠癌患者81例,术中留取肿瘤组织与癌旁正常组织,采用real-time PCR法检测Twist、Fascin mRNA,分析二者表达与结直肠癌临床病理参数的关系。结果结直肠癌组织中Twist、Fascin mRNA相对表达量分别为0.003 6±0.000 7、0.026 5±0.005 9,正常结直肠组织中分别为0.000 9±0.000 1、0.007 3±0.001 6,两组相比,P均<0.05。不同淋巴结转移情况、TNM分期的结直肠癌患者肿瘤组织中Twist、Fascin mRNA相对表达量相比,P均<0.05。结直肠癌组织中Twist mRNA与Fascin mRNA的表达水平呈正相关关系(r=0.753,P=0.000)。结论结直肠癌组织中Twist、Fascin mRNA表达上调,且二者表达水平存在相关性,可能协同参与了结直肠癌的发生发展。 展开更多
关键词 结直肠肿瘤 大肠癌 结直肠癌 twist基因 Fascin基因
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