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PEP-1-SOD1融合蛋白抑制血管紧张素Ⅱ诱导的大鼠心脏成纤维细胞Ⅰ型胶原的合成 被引量:3
1
作者 杨波 谭利国 +5 位作者 张蕾 郑飞 孔霞 郭凌郧 杨建业 王家宁 《新乡医学院学报》 CAS 2013年第8期613-618,共6页
目的研究穿透肽(PEP-1)介导的铜-锌超氧化物歧化酶1(SOD1)(PEP-1-SOD1)融合蛋白对血管紧张素Ⅱ(ANGⅡ)诱导的大鼠心脏成纤维细胞(CFbs)Ⅰ型胶原合成的影响,并探讨其机制。方法利用基因工程技术表达和纯化PEP-1-SOD1融合蛋白。提取原代大... 目的研究穿透肽(PEP-1)介导的铜-锌超氧化物歧化酶1(SOD1)(PEP-1-SOD1)融合蛋白对血管紧张素Ⅱ(ANGⅡ)诱导的大鼠心脏成纤维细胞(CFbs)Ⅰ型胶原合成的影响,并探讨其机制。方法利用基因工程技术表达和纯化PEP-1-SOD1融合蛋白。提取原代大鼠CFbs并传代培养,采用2~5代细胞进行实验,实验分为对照组、ANGⅡ诱导组、SOD1预处理组和PEP-1-SOD1预处理组。SOD1预处理组和PEP-1-SOD1预处理组细胞分别以2μmol.L-1的SOD1和PEP-1-SOD1预处理2 h后,再给1μmol.L-1的ANGⅡ诱导24 h,用免疫荧光法检测细胞内超氧阴离子(O2-)水平,微量丙二醛(MDA)检测试剂盒检测各组细胞MDA含量。结果 Western blot和细胞免疫荧光结果显示PEP-1-SOD1成功穿透入CFbs;Western blot结果显示,与ANGⅡ诱导组比较,PEP-1-SOD1预处理组Ⅰ型胶原和α平滑肌肌动蛋白表达显著降低(P<0.01),细胞内O2-和MDA水平也显著降低(P<0.01)。结论 PEP-1-SOD1融合蛋白穿透入大鼠心脏CFbs内,通过降低细胞内O2-水平,抑制CFbs的激活,减少Ⅰ型胶原的合成。 展开更多
关键词 穿透肽 铜-锌超氧化物歧化酶1 心脏成纤维细胞 血管紧张素Ⅱ Ⅰ型胶原
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貉血清铜锌超氧化物歧化酶活力研究
2
作者 魏韬 何志鹏 李荣辉 《微量元素与健康研究》 CAS 2012年第3期53-54,共2页
目的:测定貉血清铜锌超氧化物歧化酶活力,探究其药用价值和营养功能。方法:采用可见光分光光度法测定貉血清铜锌超氧化物歧化酶活力。结果:白鼻子病幼、成年貉与健康幼、成年貉血清铜锌超氧化物歧化酶活力分别为50.039±2.749 U/ml... 目的:测定貉血清铜锌超氧化物歧化酶活力,探究其药用价值和营养功能。方法:采用可见光分光光度法测定貉血清铜锌超氧化物歧化酶活力。结果:白鼻子病幼、成年貉与健康幼、成年貉血清铜锌超氧化物歧化酶活力分别为50.039±2.749 U/ml、38.468±14.290 U/ml和52.833±3.768 U/ml、48.743±7.083 U/ml,且各组间存在差异。结论:与正常貉相比,随着年龄的增加,白鼻子病貉血清铜锌超氧化物歧化酶活力会显著降低。 展开更多
关键词 可见光分光光度法 铜锌超氧化物歧化酶
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牙鲆幼鱼饲料中铜的适宜添加量研究 被引量:14
3
作者 魏万权 李爱杰 李德尚 《海洋湖沼通报》 CSCD 2001年第2期54-59,共6页
在含铜4.16mg/kg的基础饲料中分别添加铜0,0.5,1.5,3.0和5.0mg/kg制成五种实验饲料,分别投喂初始平均重量为32.85~35.20g的牙鲆(Paralichthys olivaceus)幼鱼,饲养31天.实验结束时,各组鱼的成活率和增重率没有显著差异,平均值分别为92... 在含铜4.16mg/kg的基础饲料中分别添加铜0,0.5,1.5,3.0和5.0mg/kg制成五种实验饲料,分别投喂初始平均重量为32.85~35.20g的牙鲆(Paralichthys olivaceus)幼鱼,饲养31天.实验结束时,各组鱼的成活率和增重率没有显著差异,平均值分别为92.50~100.00%和96.21~106.21%.肝脏和肌肉的铜含量都随着饲料中铜添加量的增加而显著上升,且在每一饲料铜水平下,肝脏铜含量都远比肌肉中高,表明肝脏对铜具有很强的积累能力.基础饲料中添加铜,肝脏铜锌超氧化物歧化酶(Cu,Zn-SOD,EC1.15.1.1)活性迅速上升,但在1.5~5.0mg/kg的添加范围内出现了近似的平台期.因此,根据生长和铜锌超氧化物歧化酶活性的变化,本实验条件下牙鲆幼鱼实用饲料中铜的适宜添加量为1.5mg/kg,饲料总铜为5.6mg/kg左右. 展开更多
关键词 牙鲆幼鱼 饲料 铜锌超氧化物歧化酶 肝脏 肌肉 成活率 增重率
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桃果实铜锌超氧化物歧化酶基因PpCuZnSOD的克隆与分析 被引量:10
4
作者 吴军帅 李培环 +2 位作者 李鼎立 董晓颖 段艳欣 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期408-417,共10页
从已构建的硬肉桃(Prunus persica L.)双久红果实SSH文库中获得4条铜锌超氧化物歧化酶(CuZnSOD)基因的ESTs,通过blast比对和电子克隆后进行了序列拼接和经RT-PCR方法,获得桃果实铜锌超氧化物歧化酶基因PpCuZnSOD全长cDNA序列(GenBank登... 从已构建的硬肉桃(Prunus persica L.)双久红果实SSH文库中获得4条铜锌超氧化物歧化酶(CuZnSOD)基因的ESTs,通过blast比对和电子克隆后进行了序列拼接和经RT-PCR方法,获得桃果实铜锌超氧化物歧化酶基因PpCuZnSOD全长cDNA序列(GenBank登录号:JX217743)。该基因全长665bp,包含一个459bp的ORF(120bp-578bp),编码152个氨基酸,推测蛋白分子量为15.38kDa,理论等电点为5.60。该基因具有典型的高度保守的Cu2+和Zn2+活化中心及特征信号,其氨基酸序列与其他植物的CuZnSOD具有很高的相似性。生物信息学分析结果表明,该蛋白定位于细胞质中,是非跨膜的非分泌性亲水蛋白。二级结构分析结果表明,该蛋白主要由无规则卷曲和延伸链等蛋白质二级结构元件构成,三维结构预测结果显示,PpCuZnSOD有3个转角环和8个折叠构成桶状的活性中心。系统进化分析结果表明PpCuZnSOD与小金海棠(Malus xiaojinensis)sod2同源关系最近,而与荔枝(Lichichinensis)、龙眼(Dimocarpus longan)和拟南芥(Arabidopsis trifoliate)等亲缘关系较远。QPCR结果表明,PpCuZnSOD在幼果中表达量最高,雌蕊和雄蕊次之,花瓣和叶片中表达量最少;果实成熟前后,PpCuZnSOD在硬肉芽变桃双久红果实中的表达量显著高于软肉桃川中岛白桃中的表达量,表明该基因可能在维持果实质地和硬度方面有一定作用。本研究结果为进一步研究该基因在桃果实成熟软化中的作用奠定了基础。 展开更多
关键词 PpCuZnSOD基因 克隆 生物信息学 基因表达
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银杏叶绿体铜锌超氧化物歧化酶基因GbCuZnSOD的克隆与表达 被引量:7
5
作者 李琳玲 程华 +3 位作者 许锋 王燕 姜德志 程水源 《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2010年第6期35-42,共8页
利用RACE技术首次从银杏中克隆得到铜锌型超氧化物歧化酶基因(GbCuZnSOD)的cDNA序列。GbCuZnSOD的cDNA全长为783bp。基因内部含有1个长度为642bp开放阅读框,编码长度为213个氨基酸残基的蛋白质,预测分子质量为21.95ku,等电点为6.82。三... 利用RACE技术首次从银杏中克隆得到铜锌型超氧化物歧化酶基因(GbCuZnSOD)的cDNA序列。GbCuZnSOD的cDNA全长为783bp。基因内部含有1个长度为642bp开放阅读框,编码长度为213个氨基酸残基的蛋白质,预测分子质量为21.95ku,等电点为6.82。三维结构预测结果显示,GbCuZnSOD含有3个转角环和8个β折叠构成桶状的活性中心。GbCuZnSOD氨基酸序列与其他植物的CuZnSOD具有很高的相似性。进化树分析结果表明GbCuZnSOD和其他物种的CuZnSOD源自于相同的祖先。信息学分析显示,得到的GbCuZnSOD属于叶绿体SOD。Southern杂交证实,GbCuZnSOD属于一个小的多基因家族。Northern杂交表明GbCuZnSOD在银杏的茎、叶和果中有表达,根中没有表达,在叶中的表达量最高。ABA和36℃高温能诱导GbCuZnSOD的转录表达,而低温和渗透压处理结果不明显。 展开更多
关键词 银杏 CuZnSOD基因 表达分析
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水杨酸与烟草铜锌超氧化物歧化酶的相互作用 被引量:4
6
作者 盛良全 刘少民 +3 位作者 贾莉莉 徐小龙 解永树 刘清亮 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2003年第3期283-286,共4页
利用邻苯三酚自氧化法监测了磷酸盐缓冲体系中水杨酸 (SA)对超氧化物歧化酶 (SOD)活力的影响。通过荧光光谱法研究了水杨酸与超氧化物歧化酶的相互作用机制 ,求得两者结合的形成常数和配位数 ,使用F rster非辐射能量转移技术求出了两者... 利用邻苯三酚自氧化法监测了磷酸盐缓冲体系中水杨酸 (SA)对超氧化物歧化酶 (SOD)活力的影响。通过荧光光谱法研究了水杨酸与超氧化物歧化酶的相互作用机制 ,求得两者结合的形成常数和配位数 ,使用F rster非辐射能量转移技术求出了两者的结合位置距色氨酸残基间的距离为 2 .60nm。 展开更多
关键词 水杨酸 铜锌超氧化物歧化酶 酶活力 荧光光谱 烟草 相互作用 邻苯三酚自氧化法
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突变的人铜、锌超氧化物歧化酶基因的克隆、测序及表达 被引量:4
7
作者 施惠娟 孙建新 +3 位作者 范立强 魏东芝 吴祥甫 袁勤生 《中国生化药物杂志》 CAS CSCD 1999年第3期109-112,共4页
目的:通过基因工程的方法将rhCu,Zn-SOD cDNA基因改造以得到更加稳定的酶。方法:以本实验室构建的 rhCu,Zn-SOD cDNA为模板,利用含有突变核苷酸的引物进行 PCR扩增,将正确测定的含 rhCu, Z... 目的:通过基因工程的方法将rhCu,Zn-SOD cDNA基因改造以得到更加稳定的酶。方法:以本实验室构建的 rhCu,Zn-SOD cDNA为模板,利用含有突变核苷酸的引物进行 PCR扩增,将正确测定的含 rhCu, Zn-SOD突变(rhCu,Zn-MSOD)基因的重组质粒重组到表达载体PET-22b(+)中,重组质粒在大肠杆菌BL21(DE3)中表达rhCu,Zn-MSOD。结果:表达产物占菌体总蛋白的38%,具有特异性SOD酶活性。结论:从基因突变的角度改善酶的性能不仅具有理论意义,又有一定的实用价值。 展开更多
关键词 超氧化物歧化酶 PCR 基因突变 rhCu Zn-MSOD
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病理性瘢痕中脂质过氧化产物和铜锌超氧化物歧化酶的变化 被引量:4
8
作者 李伟人 岑瑛 +2 位作者 王怀胜 陈伟 刘大庆 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第7期838-841,共4页
目的了解病理性瘢痕(增生性瘢痕与瘢痕疙瘩)中脂质过氧化产物和铜锌超氧化物歧化酶(copper,zinc-superoxide dismutase,CuZn-SOD)的变化。方法取2005年5月-2005年8月收治患者自愿捐献的标本。瘢痕疙瘩组10例,年龄16~35岁,平均病程2.2年... 目的了解病理性瘢痕(增生性瘢痕与瘢痕疙瘩)中脂质过氧化产物和铜锌超氧化物歧化酶(copper,zinc-superoxide dismutase,CuZn-SOD)的变化。方法取2005年5月-2005年8月收治患者自愿捐献的标本。瘢痕疙瘩组10例,年龄16~35岁,平均病程2.2年;增生性瘢痕组10例,年龄17~32岁,平均病程8个月;正常皮肤组8例,年龄16~34岁。应用化学比色法测定3组标本中CuZn-SOD活力和丙二醛(malonaldehyde,MDA)含量,采用免疫组织化学方法观察CuZn-SOD蛋白在病理性瘢痕中的表达,并对其进行评分。结果正常皮肤组、增生性瘢痕组及瘢痕疙瘩组MDA含量分别为(0.8213±0.0864)、(1.1390±0.1067)、(1.1900±0.0748)nmol/mg prot;CuZn-SOD活力分别为(20.60±5.56)、(31.65±2.21)、(34.36±5.01)U/mg prot。增生性瘢痕组和瘢痕疙瘩组MDA含量与CuZn-SOD活力同正常皮肤组比较,差异均有统计学意义(P<0.05);增生性瘢痕组及瘢痕疙瘩组间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。免疫组织化学染色观察:3组表皮角质形成细胞和真皮成纤维细胞均有CuZn-SOD蛋白阳性表达。正常皮肤组、增生性瘢痕组及瘢痕疙瘩组在表皮角质形成细胞中免疫组织化学评分分别为(2.20±0.45)、(4.14±0.90)、(4.43±0.79)分;在真皮成纤维细胞中评分分别为(1.60±0.89)、(4.00±0.82)、(4.43±0.53)分。增生性瘢痕组和瘢痕疙瘩组CuZn-SOD蛋白表达与正常皮肤组比较,差异有统计学意义(P<0.05);增生性瘢痕组及瘢痕疙瘩组间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论病理性瘢痕中脂质过氧化产物MDA含量增加,CuZn-SOD活力升高、表达增强。 展开更多
关键词 增生性瘢痕 瘢痕疙瘩 铜锌超氧化物歧化酶 丙二醛
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茶树CSD1基因及其启动子克隆与低温胁迫下的表达 被引量:4
9
作者 郭玉琼 王仲 +7 位作者 朱晨 赵姗姗 张舒婷 常笑君 李小桢 傅海峰 林玉玲 赖钟雄 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期1122-1131,共10页
低温寒害严重影响茶树的生长发育状况及成品茶品质,Copper/zinc-superoxide dismutase(CSD)基因在植物抗胁迫响应中起着关键作用.为了解茶树CSD基因(CsCSD)响应低温胁迫的作用机制,以铁观音茶树叶片为供试材料,采用同源克隆结合RAC... 低温寒害严重影响茶树的生长发育状况及成品茶品质,Copper/zinc-superoxide dismutase(CSD)基因在植物抗胁迫响应中起着关键作用.为了解茶树CSD基因(CsCSD)响应低温胁迫的作用机制,以铁观音茶树叶片为供试材料,采用同源克隆结合RACE方法及染色体步移法,获得茶树CSD1基因的cDNA序列(GenBank登录号:KR078346)、gDNA序列及其启动子序列,并对其进行生物信息学分析,同时对低温胁迫处理下CsCSD1基因的表达模式也进行分析.结果显示,茶树CsCSD1基因cDNA全长860 bp,完整的开放阅读框(ORF)长度为459 bp,共编码152个氨基酸;gDNA基因结构分析发现CsCSD1基因由6个外显子和5个内含子构成;CpG岛预测发现启动子区域内存在1个CpG岛,CpG长度为219bp,GC含量为50.3%;CsCSD1启动子上还存在大量的顺式作用元件,包括光响应元件、激素响应元件、胁迫响应元件和其他响应元件;在低温胁迫下CsCSD1基因的表达模式显示,在低温胁迫前期,CsCSD1基因表达上调;随后CsCSD1基因的表达量不断下降.本研究表明,CsCSD1基因能够响应低温胁迫并在胁迫的不同时期发挥不同的作用,推测与低温胁迫密切相关. 展开更多
关键词 茶树 CSD1基因 低温胁迫 表达分析
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人、牛、猪血铜锌超氧化物歧化酶的纯化及其某些理化性质的鉴定 被引量:1
10
作者 吕星 方允中 陈吉中 《军事医学科学院院刊》 CSCD 北大核心 1991年第2期88-91,共4页
为进行人、牛、猪铜锌超氧化物歧化酶(CuZn-SOD)免疫学性质差异的比较研究,我们采用经典方法分别提纯了人和牛血 CuZn-SOD,并在经典方法的基础上做了适当改进,从猪血中提取了 CuZn-SOD。经聚丙烯酰胺凝胶电泳、比活性、分子量及紫外吸... 为进行人、牛、猪铜锌超氧化物歧化酶(CuZn-SOD)免疫学性质差异的比较研究,我们采用经典方法分别提纯了人和牛血 CuZn-SOD,并在经典方法的基础上做了适当改进,从猪血中提取了 CuZn-SOD。经聚丙烯酰胺凝胶电泳、比活性、分子量及紫外吸收光谱等理化性质的鉴定,证实3种不同种属来源的 CuZn-SOD 纯度均一,符合免疫学研究的要求。 展开更多
关键词 红细胞 CnZn-SOD
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小球藻病毒PBCV-1编码的Cu,Zn-SOD酶学稳定性
11
作者 刘建荣 贾红玉 +2 位作者 陈慧慧 刘晓飞 康明 《河北大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2021年第3期304-310,共7页
将小球藻病毒模式株PBCV-1编码的Cu, Zn-SOD截短突变体tcvSOD克隆到大肠杆菌表达载体pET23a(+)后,经IPTG诱导在大肠杆菌Rosetta(DE3)菌株中表达得到了可溶性tcvSOD重组蛋白.该蛋白具有典型的SOD活性,能强烈抑制邻苯三酚的自氧化作用,最... 将小球藻病毒模式株PBCV-1编码的Cu, Zn-SOD截短突变体tcvSOD克隆到大肠杆菌表达载体pET23a(+)后,经IPTG诱导在大肠杆菌Rosetta(DE3)菌株中表达得到了可溶性tcvSOD重组蛋白.该蛋白具有典型的SOD活性,能强烈抑制邻苯三酚的自氧化作用,最高抑制率为97%,反应体系中酶蛋白终质量浓度为0.2μg/mL时达到最大抑制,由此计算出其比活力为16 050 U/mg.tcvSOD的热稳定性和对蛋白变性剂SDS胁迫的反应与酶蛋白在反应体系中的质量浓度有关.终质量浓度为1μg/mL时tcvSOD可以耐90℃、30 min以及质量分数2%~10%的SDS处理而活性保持不变或略有丧失,终质量浓度为0.05和0.1μg/mL时则对上述处理非常敏感. 0.05、0.1、1μg/mL 3种质量浓度的tcvSOD对反应体系中pH4~12的变化,以及2~10 mol/L尿素和1~4 mol/L盐酸胍胁迫处理,酶活性保持恒定.实验结果表明tcvSOD具有较强热稳定性和pH稳定性,对常见蛋白变性剂也有良好抗性,有进一步开发利用的潜能. 展开更多
关键词 铜锌超氧化物歧化酶(Cu Zn-SOD) 小球藻病毒 热稳定性 pH稳定性 蛋白变性剂抗性
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补阳还五汤对球囊扩张主动脉后再狭窄其内皮PDGFR和SOD-1基因表达的探讨 被引量:67
12
作者 谢全锦 侯灿 +1 位作者 吴伟康 何勤 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 1997年第10期611-613,共3页
目的:探讨补阳还五汤防治经皮腔内冠脉成形术(PTCA)后再狭窄的消长机制。方法:仿PTCA术后再狭窄的新西兰兔模型28只,以原位引物标记法测动脉内皮钢-锌超氧化物歧化酶(SOD-1)及血小板行化生长因子受体(PDGF... 目的:探讨补阳还五汤防治经皮腔内冠脉成形术(PTCA)后再狭窄的消长机制。方法:仿PTCA术后再狭窄的新西兰兔模型28只,以原位引物标记法测动脉内皮钢-锌超氧化物歧化酶(SOD-1)及血小板行化生长因子受体(PDGFR)的基因表达,分析再狭窄消长机理。结果:主动脉球囊扩张术后7天,手术部位动脉内皮的SOD-1基因表达增强,与对照组有显著差异(P<0.05),而PDGFRmRNA的表达则减弱,与对照组也有显著性差异(P<0.05)。结论:补阳还五汤增强动脉内皮SOD-1的基因表达,改善缺血再灌注的供氧。同样情况下,补阳还五汤抑制PDGFRmRNA表达,以控制细胞的病理性增殖。 展开更多
关键词 补阳还五汤 生长因子 冠状动脉狭窄 血管成形术
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编码棉花胞质铜锌超氧物歧化酶基因的克隆与表达分析 被引量:19
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作者 胡根海 喻树迅 +1 位作者 范术丽 宋美珍 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2007年第8期1602-1609,共8页
【目的】克隆编码棉花胞质铜锌超氧化物岐化酶基因并分析其表达特性。【方法】采用RACE技术克隆基因,Northern blotting检测基因的表达谱;采用氮蓝四唑(NBT)光下还原法测定不同生育期的酶活性。【结果】获得了棉花胞质铜锌超氧化物岐化... 【目的】克隆编码棉花胞质铜锌超氧化物岐化酶基因并分析其表达特性。【方法】采用RACE技术克隆基因,Northern blotting检测基因的表达谱;采用氮蓝四唑(NBT)光下还原法测定不同生育期的酶活性。【结果】获得了棉花胞质铜锌超氧化物岐化酶基因cDNA全长序列(GenBank注册号:DQ445093);该基因cDNA全长共682bp,开放阅读框456bp,编码152个氨基酸。分子结构预测结果:酶蛋白理论分子量约为15.03kD,理论等电点为6.09,与其它植物的蛋白质氨基酸序列同源性在82%~87%之间。Southern blotting显示不同棉种该基因的拷贝数基本一致,均属于低拷贝基因。Northern blotting显示该基因在不同的组织、不同的生育期表达量不同;酶活性测定显示盛花期最高。【结论】棉花胞质铜锌超氧化物岐化酶基因在陆地棉中属于低拷贝数基因;在整个生育期中mRNA的含量呈规律性动态变化,前期较低,后期较高,在盛花期达到顶峰;变化曲线与不同时期的酶活性变化一致;不同器官的基因表达检测结果显示:基因在根中表达量最高,叶片次之,花中的表达最低。 展开更多
关键词 棉花 铜锌超氧物歧化酶 基因 克隆
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赤子爱胜蚓超氧化物歧化酶的纯化和部分性质研究 被引量:16
14
作者 刘堰 李清漪 《生物化学杂志》 CSCD 1994年第5期605-610,共6页
采用硫酸铵分级沉淀和柱层析的方法,从赤子爱胜蚓整体细胞抽提液内分离得到纯的铜锌超氧化物岐化酶(Cu,Zn-SOD)。每100g蚯蚓得到的SOD制品,总活力为11150U,比活力为5138U/mg蛋白,回收率为20%。... 采用硫酸铵分级沉淀和柱层析的方法,从赤子爱胜蚓整体细胞抽提液内分离得到纯的铜锌超氧化物岐化酶(Cu,Zn-SOD)。每100g蚯蚓得到的SOD制品,总活力为11150U,比活力为5138U/mg蛋白,回收率为20%。铜锌超氧化物岐化酶呈淡蓝绿色,最大紫外吸收波长为270nm。测得该酶分子量为33000,亚基分子量为16500。该酶亚基由156个氨基酸残基组成,不含酪氨酸。 展开更多
关键词 蚯蚓 超氧化物岐化酶 提纯
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人Cu,Zn-SOD在酵母系统中的表达 被引量:7
15
作者 施惠娟 陈哲宇 +3 位作者 李明峰 魏东芝 吴祥甫 袁勤生 《华东理工大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2000年第6期601-603,共3页
甲醇酵母 (Pichia pastoris)是一种理想的真核蛋白高水平表达系统。将人 Cu,Zn- SOD基因克隆到酵母整合型质粒载体 p PIC3.5K,经转化 his4缺陷型酵母 GS1 1 5,用 MD培养基及 PCR方法筛选阳性转化子 ,并用含 G41 8的 YPD培养基筛选多拷... 甲醇酵母 (Pichia pastoris)是一种理想的真核蛋白高水平表达系统。将人 Cu,Zn- SOD基因克隆到酵母整合型质粒载体 p PIC3.5K,经转化 his4缺陷型酵母 GS1 1 5,用 MD培养基及 PCR方法筛选阳性转化子 ,并用含 G41 8的 YPD培养基筛选多拷贝转化子 ,经甲醇诱导表达。 SDS-PAGE和蛋白质印迹杂交结果证实了表达产物为重组的人 Cu,Zn- SOD,经计算机扫描分析 ,表达量占酵母可溶性蛋白的 1 4% ,所表达的人 Cu,Zn- SOD比活可达每毫克蛋白质 77U。 展开更多
关键词 人Cu Zn-SOD 甲醇酵母 基因表达 蛋白质印迹
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Mn-SOD and CuZn-SOD polymorphisms and interactions with risk factors in gastric cancer 被引量:12
16
作者 Jian-Feng Yi Shi-Liang Kang +6 位作者 Xiang-Ting Zeng Yu-Min Li Tao Liu Jun-Qiang Zhang Wen-Ting He Xun Li Wen-Ce Zhou 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS CSCD 2010年第37期4738-4746,共9页
AIM: To investigate the effects of superoxide dismutase (SOD) polymorphisms (rs4998557 , rs4880), Helicobacter pylori (H. pylori ) infection and environmental factors in gastric cancer (GC) and malignant potential of ... AIM: To investigate the effects of superoxide dismutase (SOD) polymorphisms (rs4998557 , rs4880), Helicobacter pylori (H. pylori ) infection and environmental factors in gastric cancer (GC) and malignant potential of gastric precancerous lesions (GPL). METHODS: Copper-zinc superoxide dismutase (SOD1, CuZn-SOD)-G7958A (rs4998557 ) and manganese superoxide dismutase (SOD2, Mn-SOD)-Val16Ala (rs4880 ) polymorphisms were genotyped by SNaPshot multiplex polymerase chain reaction (PCR) in 145 patients with GPL (87 cases of gastric ulcer, 33 cases of gastric polyps and 25 cases of atrophic gastritis), 140 patients with GC and 147 healthy controls. H. pylori infection was detected by immunoblotting analysis. RESULTS: The SOD1-7958A allele was associated with a higher risk of gastric cancer [odds ratio (OR) = 3.01, 95% confidence intervals (95% CI): 1.83-4.95]. SOD216Ala/Val genotype was a risk factor for malignant potential of GPL (OR = 2.04, 95% CI: 1.19-3.49). SOD216Ala/genotype increased the risk of gastric cancer (OR = 2.85, 95% CI: 1.66-4.89). SOD1-7958A/genotype, SOD2-16Ala/genotype, alcohol drinking, positive family history and type Ⅰ H. pylori infection were associated with risk of gastric cancer, and there were additive interactions between the two genotypes and the other three risk factors. SOD2-16Ala/Val genotype and positive family history were associated with malignant potential of GPL and jointly contributed to a higher risk for malignant potential of GPL (OR = 7.71, 95% CI: 2.10-28.22). SOD1-7958A/genotype and SOD2-16Ala/genotype jointly contributed to a higher risk for gastric cancer (OR = 6.43, 95% CI: 3.20-12.91). CONCLUSION: SOD1-7958A/and SOD2-16Ala/-genotypes increase the risk of gastric cancer in Chinese Han population. SOD2-16Ala/-genotype is associated with malignant potential of GPL. 展开更多
关键词 Copper-zinc superoxide dismutase Manganese superoxide dismutase Gastric cancer Gastric precancerous lesions Gene polymorphisms Interaction
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近江牡蛎铜锌超氧化物歧化酶的纯化及部分性质研究 被引量:9
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作者 曾利荣 张尔贤 +1 位作者 林哲甫 俞丽君 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1998年第5期583-587,共5页
经65℃加热,硫酸铵分级沉淀,SephadexG-100凝胶过滤和DE-52柱层析,从近江牡蛎(OstrearivularisGould)软体部分提纯了铜锌超氧化物歧化酶(Cu,Zn-SOD).对其理化性质鉴定表明,... 经65℃加热,硫酸铵分级沉淀,SephadexG-100凝胶过滤和DE-52柱层析,从近江牡蛎(OstrearivularisGould)软体部分提纯了铜锌超氧化物歧化酶(Cu,Zn-SOD).对其理化性质鉴定表明,用此法纯化的酶纯度均一.该酶系由两个相同亚基组成的二聚体,分子量27.9kD.该酶的紫外吸收峰在272.5nm,红外光谱表现出其氨基酸组成特征,与猪血SOD存在差异.该酶在不同的升温速率下及经不同浓度的H2O2处理后的稳定性与猪血SOD不同.其氨基酸组成与不同来源的同类酶存在差异. 展开更多
关键词 牡蛎 纯化 性质 CUZN-SOD SOD
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活性氧所致超氧化物歧化酶肽链断裂的观察 被引量:8
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作者 李培峰 方允中 《生物化学杂志》 CSCD 1995年第1期76-79,共4页
探究活性氧所致铜锌超氧化物歧化酶(SOD)肽链断裂的情况。将过氧化氢或抗坏血酸-Fe(Ⅲ)分别作用于马来酰亚胺标记的SOD,然后用高效液相反相色谱(RPHPLC)分析,经1mmol/LH2O2处理后SOD用RP-HP... 探究活性氧所致铜锌超氧化物歧化酶(SOD)肽链断裂的情况。将过氧化氢或抗坏血酸-Fe(Ⅲ)分别作用于马来酰亚胺标记的SOD,然后用高效液相反相色谱(RPHPLC)分析,经1mmol/LH2O2处理后SOD用RP-HPLC分离出二个肽段,用顺磁共振检测显示只有一个肽段具有马来酰亚胺信号,经5mmol/LH2O2处理后SOD有四个肽段生成,其中有一个肽段具有马来酰亚胺信号,用5mmol/L抗坏血酸和0.01mmol/LFeCl3处理后SOD有三个肽段生成,用50mmol/L抗坏血酸及1.0mmol/LFeCl3处理后SOD也产生相同的三个肽段,只是肽段的量多.结果提示H2O2所致SOD肽链断裂无“定点”现象,而抗坏血酸-Fe(Ⅲ)所致SOD肽链断裂呈“定点”断裂。 展开更多
关键词 铜锌 超氧化物歧化酶 肽链断裂 活性氧
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重金属离子对烟叶SOD活性的影响 被引量:10
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作者 邓家军 张宇斌 +4 位作者 胡继伟 乙引 苏贤坤 黄先飞 秦樊鑫 《湖北农业科学》 北大核心 2009年第5期1171-1175,共5页
为了研究重金属对烟叶铜锌超氧化物歧化酶的作用规律,消除活体烟叶中其他因素的影响,试验采用离体方法,利用硫酸铵盐析分级分离、乙醇-氯仿沉淀除杂、丙酮再沉淀分级得到含铜锌超氧化物歧化酶的酶液。研究了不同浓度的Cu2+、Zn2+、Pb2+... 为了研究重金属对烟叶铜锌超氧化物歧化酶的作用规律,消除活体烟叶中其他因素的影响,试验采用离体方法,利用硫酸铵盐析分级分离、乙醇-氯仿沉淀除杂、丙酮再沉淀分级得到含铜锌超氧化物歧化酶的酶液。研究了不同浓度的Cu2+、Zn2+、Pb2+、Hg2+、Ag+、Ni2+对铜锌超氧化物歧化酶活性的影响,结果显示,在浓度为0~80 mg.L-1范围内,Cu2+、Zn2+都能使铜锌超氧化物歧化酶的活性先降低后升高,但在相同浓度下,Cu2+使酶活性变化的幅度大于Zn2+。Ag+使铜锌超氧化物歧化酶的活性的变化趋势与Cu2+、Zn2+基本一致,仅变化幅度不如Cu2+、Zn2+显著。Ni2+能加强铜锌超氧化物歧化酶的活性,在浓度为0~80 mg.L-1范围内,酶活性的提高率为0~144.28%。随着Pb2+、Hg2+浓度的增大,铜锌超氧化物歧化酶的活性呈现先升高后降低的趋势,在浓度为0~50 mg.L-1范围内,Pb2+、Hg2+能使铜锌超氧化物歧化酶的活性提高,提高率的范围分别为0~50.39%和0~15.68%;但当浓度为80 mg.L-1时,Pb2+、Hg2+使铜锌超氧化物歧化酶的活性的降低率分别为78.27%和59.94%。铜锌超氧化物歧化酶在重金属离子Cu2+、Zn2+、Pb2+、Hg2+、Ag+、Ni2+胁迫下,所表现出来的酶活性可能主要是受3个方面因素共同作用的结果。 展开更多
关键词 烟叶 铜锌超氧化物歧化酶 活性 重金属胁迫 响应
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微量元素铜及铜锌超氧化物歧化酶的模拟化学 被引量:12
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作者 刘临 梅光泉 《微量元素与健康研究》 CAS 2004年第6期57-59,67,共4页
铜和锌都是人体所必需的微量元素 ,铜 (Ⅱ )为铜锌超氧化物歧化酶的活性中心 ,能消除体内有害自由基 ,维护正常生理功能。综述了铜的生物学效能以及铜锌超氧化物歧化酶的模拟化学。
关键词 铜锌超氧化物歧化酶 模拟物
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