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基因编辑新技术研究进展 被引量：15
1
作者 刘蓓 尉玮 王丽华 《亚热带农业研究》 2013年第4期262-269,共8页
基因编辑是一项旨在对基因组进行定点修饰的新技术,目前主要有人工核酸酶介导的锌指核酸酶(ZFN)技术、转录激活子样效应物核酸酶(TALEN)技术和RNA引导的CRISPR-Cas核酸酶(CRISPR-Cas RGNs)技术。它们都能特异性地识别靶位点,对其单链或... 基因编辑是一项旨在对基因组进行定点修饰的新技术,目前主要有人工核酸酶介导的锌指核酸酶(ZFN)技术、转录激活子样效应物核酸酶(TALEN)技术和RNA引导的CRISPR-Cas核酸酶(CRISPR-Cas RGNs)技术。它们都能特异性地识别靶位点,对其单链或双链进行精准切割后,由细胞内源性的修复机制来完成对靶标基因的敲除和替换。本文比较了这3种基因编辑技术,并对其应用进展做了介绍。 展开更多
关键词 基因编辑 锌指核酸酶 转录激活因子样效应物核酸酶 RNA引导的CRISPR—Cas核酸酶 基因敲除
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eNOS基因敲除大鼠模型的建立及表型初步研究
2
作者 杨葳 周生来 +6 位作者 董婉维 王惟 于洋 郭晓冲 张婀娜 王宏宇 郑志红 《实验动物与比较医学》 CAS 2015年第4期271-276,共6页
目的建立内皮型一氧化氮合酶（eNOS）基因敲除大鼠模型。方法利用锌指核酸酶（ZFN）技术，通过显微注射的方法将编码eNOS特异性锌指酶的mRNA注入SD大鼠受精卵并移植到同期受孕的SD受体母鼠输卵管内。出生后仔鼠用PCR产物测序的方法鉴定... 目的建立内皮型一氧化氮合酶（eNOS）基因敲除大鼠模型。方法利用锌指核酸酶（ZFN）技术，通过显微注射的方法将编码eNOS特异性锌指酶的mRNA注入SD大鼠受精卵并移植到同期受孕的SD受体母鼠输卵管内。出生后仔鼠用PCR产物测序的方法鉴定基因型。对敲除大鼠进行外观观察，HE染色分析组织结构形态。通过Westernblot分析敲除大鼠模型的心脏和肾脏组织中eNOS的表达情况。测量8～16周大鼠体质量，分析eNOS基因敲除对体质量的影响。采用尾套法测量大鼠心率、血压、收缩压和舒张压，比较与野生型大鼠的差异。结果通过显微注射方法共注射441枚受精卵，存活365枚，分别移入12只SD大鼠输卵管，共产出23只F0代大鼠。PCR产物测序分析获得4只阳性原代大鼠，对8号大鼠筛选获得纯合子。阳性纯合子大鼠表现为肢体缺损，HE染色显示动脉血管结构形态异常。Westernblot结果显示，eNOS敲除大鼠的心脏和肾脏组织中不表达eNOS蛋白。敲除大鼠的体质量明显低于野生型大鼠，体质量增长幅度慢。血压、收缩压、舒张压均高于野生型SD大鼠，有极显著差异（P〈0．01）。eNOS敲除雌鼠心率低于野生型SD雌鼠（P〈0．05）。eNOS敲除雄鼠心率与野生型SD雄鼠相比无统计学差异。结论成功建立eNOS基因敲除大鼠模型，该模型或可成为高血压疾病研究的理想动物模型。 展开更多
关键词 内皮型一氧化氮合酶(eNOS) 锌指核酸酶(zfn) 大鼠 基因敲除 高血压
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作物基因组编辑技术国际发展态势分析 被引量：6
3
作者 李东巧 杨艳萍 《中国科学：生命科学》 CSCD 北大核心 2019年第2期179-190,共12页
基因组编辑技术是近年来飞速发展的一种对基因组DNA实现靶向修饰的新技术,主要包括归巢核酸酶、锌指核酸酶、转录激活因子样效应物核酸酶和成簇的规律间隔的短回文重复序列及其相关系统等四类.目前,基因组编辑技术在模式植物或作物的研... 基因组编辑技术是近年来飞速发展的一种对基因组DNA实现靶向修饰的新技术,主要包括归巢核酸酶、锌指核酸酶、转录激活因子样效应物核酸酶和成簇的规律间隔的短回文重复序列及其相关系统等四类.目前,基因组编辑技术在模式植物或作物的研究中得到了广泛应用,一些利用此技术研发的作物品种已获得商业化许可,预计未来几年基因组编辑作物品种将在全球范围内快速发展.本文综合利用定性调研和文献定量分析的方法,对作物基因组编辑技术的研发现状、重要国家、重要机构和研究主题进行分析,研究结果可为我国相关领域未来的研发布局和决策提供参考依据. 展开更多
关键词 作物 基因组编辑 归巢核酸酶(MN) 锌指核酸酶(zfn) 转录激活因子样效应物核酸酶(TALEN) 成簇的规律间隔的短回文重复序列及其相关系统(CRISPR/Cas)
原文传递
人工核酸酶介导的基因组编辑技术 被引量：2
4
作者 支大龙 牛昱宇 季维智 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第11期1132-1137,共6页
传统的基因组编辑技术是基于胚胎干细胞和同源重组实现生物基因组定向改造,但是该技术打靶效率低,严重制约了生命科学以及医学的研究.因此,研究新的基因组编辑技术十分重要.人工核酸酶介导的基因组编辑技术是通过特异性识别靶位点造成DN... 传统的基因组编辑技术是基于胚胎干细胞和同源重组实现生物基因组定向改造,但是该技术打靶效率低,严重制约了生命科学以及医学的研究.因此,研究新的基因组编辑技术十分重要.人工核酸酶介导的基因组编辑技术是通过特异性识别靶位点造成DNA双链断裂,引起细胞内源性的修复机制实现靶基因的修饰.与传统的基因组编辑技术相比,人工核酸酶技术打靶效率高,这对于基因功能的研究、构建人类疾病动物模型以及探索新型疾病治疗方案有着重要的意义.人工核酸酶技术有3种类型:锌指核酸酶(ZFN)、类转录激活因子核酸酶(TALEN)及规律成簇的间隔短回文重复序列(CRISPR).本文将对以上3种人工核酸酶技术的原理以及在生命科学和医学研究的应用进行综述. 展开更多
关键词 基因组编辑 锌指核酸酶 类转录激活因子核酸酶 规律成簇的间隔短回文重复序列
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新型靶向基因组编辑技术研究进展 被引量：6
5
作者 杨发誉 葛香连 谷峰 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期98-103,共6页
传统的靶向基因组编辑技术改造基因效率非常低,严重制约了基础研究和临床应用。因此,新的靶向基因组编辑工具的研究显得非常重要,以此来提高基因原位修复、定点整合及高通量基因敲除的效率。主要论述了近年来发现的新型靶向基因组编辑... 传统的靶向基因组编辑技术改造基因效率非常低,严重制约了基础研究和临床应用。因此,新的靶向基因组编辑工具的研究显得非常重要,以此来提高基因原位修复、定点整合及高通量基因敲除的效率。主要论述了近年来发现的新型靶向基因组编辑技术即锌指核酸酶(ZFN)、转录激活子样效应因子核酸酶(TALENs)、规律成簇间隔短回文重复(CRISPR)/Cas系统。从它们的发现、结构和研究进展及应用前景等方面进行了总结;通过比较三者的优缺点,发现规律成簇间隔短回文重复(CRISPRs)具有明显的优点。 展开更多
关键词 靶向基因编辑 锌指核酸酶(zfn) 转录激活子样效应因子核酸酶(TALENs) 规律成簇间隔短回文重复(CRISPRs) zinc finger nucleases(zfn) Transcription activator-like EFFECTOR nucleases (TALENs) Clustered regularly interspaced short palindromic repeats(CRISPRs)
原文传递
基因编辑技术 被引量：8
6
作者 胡小丹 游敏 罗文新 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期267-277,共11页
基因编辑是指通过核酸酶对靶基因进行定点改造,实现特定DNA的定点敲除、敲入以及突变等,最终下调或上调基因的表达,以使细胞获得新表型的一种新型技术。基因编辑技术已被广泛运用于基因结构与功能的研究和多种细胞的基因工程改造,为疾... 基因编辑是指通过核酸酶对靶基因进行定点改造,实现特定DNA的定点敲除、敲入以及突变等,最终下调或上调基因的表达,以使细胞获得新表型的一种新型技术。基因编辑技术已被广泛运用于基因结构与功能的研究和多种细胞的基因工程改造,为疾病模型的建立、动植物新品种的培育及基因治疗等的研究提供新的手段。基因编辑技术主要包括锌指核酸酶技术(ZFN)、转录激活子样效应因子技术(TALEN)和成簇的规律间隔的短回文重复序列/CRISPR相关蛋白(CRISPR/Cas)系统等。本文将对3种基因编辑技术的原理、运用及其最新进展进行综述,以期为相关技术及其运用的研究提供参考。 展开更多
关键词 基因编辑 锌指核酸酶技术 转录激活子样效应因子技术 成簇规律间隔短回文重复系统
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锌指核酸酶技术在动物转基因中的应用 被引量：2
7
作者 王刘豪 王吉田 +1 位作者 余昊 王运兵 《湖北农业科学》 北大核心 2012年第19期4177-4180,共4页
锌指核酸酶(Zinc finger nuclease,ZFN)具有特异性识别并敲除DNA片段中特定基因的特点,通过对DNA片段上的特定基因进行靶向修饰产生新型细胞,是能够应用于动物转基因上的一种新技术。该技术已在一些动物的研究上取得了一定的成果,相对... 锌指核酸酶(Zinc finger nuclease,ZFN)具有特异性识别并敲除DNA片段中特定基因的特点,通过对DNA片段上的特定基因进行靶向修饰产生新型细胞,是能够应用于动物转基因上的一种新技术。该技术已在一些动物的研究上取得了一定的成果,相对于传统的转基因技术,该技术在简化操作程序、缩短操作时间及提升成功率上都有很大的提高。就常用的动物转基因方法、锌指核酸酶技术的作用原理以及在动物转基因上的应用及其前景进行了论述。 展开更多
关键词 锌指核酸酶(zinc finger nuclease zfn) 动物转基因 靶向修饰
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