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卵黄蛋白原1(vtg1)启动子调控绿色荧光蛋白表达的转基因斑马鱼的构建 被引量:12
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作者 陈浩 杨健 +3 位作者 王跃祥 蒋璆 徐绘 宋后燕 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2006年第10期965-970,共6页
环境雌激素严重危害人类的健康.为了简便直观地检测水环境中的雌激素污染,构建了一种转基因斑马鱼,在这种鱼的体内,利用卵黄蛋白原1(vitellogenin1,vtg1)的启动子调控报告基因绿色荧光蛋白(enhancedgreenfluorescentprotein,EGFP)的表达... 环境雌激素严重危害人类的健康.为了简便直观地检测水环境中的雌激素污染,构建了一种转基因斑马鱼,在这种鱼的体内,利用卵黄蛋白原1(vitellogenin1,vtg1)的启动子调控报告基因绿色荧光蛋白(enhancedgreenfluorescentprotein,EGFP)的表达.用1ng/L的17!-炔雌醇(17'-ethynylestradiol,EE2)诱导4天后,仔鱼肝脏中出现绿色荧光.RT-PCR和整体原位杂交实验证实,仔鱼体内EGFP和vtg1的时空表达模式相同.通过在显微镜下观察转基因鱼的绿色荧光,可以直观判断水环境中是否含有雌激素活性物质.该研究为环境雌激素的监测提供了一种简便直观的新型工具. 展开更多
关键词 转基因斑马鱼 绿色荧光蛋白 卵黄蛋白原 启动子 环境雌激素
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EE2对稀有鮈鲫和斑马鱼幼鱼体内卵黄蛋白原诱导的比较 被引量:13
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作者 廖涛 徐盈 +2 位作者 钟雪萍 梁勇 王剑伟 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期513-517,共5页
利用卵黄蛋白原(Vtg)作为类雌激素污染的生物标志物,比较研究了不同浓度的17α-乙炔基雌二醇(EE2)对斑 马鱼(Brachydanio rerio)和稀有鮈鲫(Gobiocypris rarus)幼鱼体内Vtg的诱导。研究结果表明:5ng/L,20ng/L和100ng/L EE2分别暴露5d后... 利用卵黄蛋白原(Vtg)作为类雌激素污染的生物标志物,比较研究了不同浓度的17α-乙炔基雌二醇(EE2)对斑 马鱼(Brachydanio rerio)和稀有鮈鲫(Gobiocypris rarus)幼鱼体内Vtg的诱导。研究结果表明:5ng/L,20ng/L和100ng/L EE2分别暴露5d后,稀有鮈鲫幼鱼体内的Vtg即可显著诱导,并且其含量随暴露时间的增加而增加,在暴露15d时 达到最大值;而斑马鱼幼鱼虽然100ng/LEE2暴露5d时可显著诱导体内Vtg的生成,但20ng/L EE2在暴露10d后, 5ng/L EE2在暴露15d后,才可显著诱导斑马鱼体内Vtg的生成。这一结果说明EE2暴露下对稀有鮈鲫体内Vtg的 诱导要比斑马鱼敏感。 展开更多
关键词 稀有鮈鲫 斑马鱼 乙炔基雌二醇 卵黄蛋白原
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Toxicity of the brominated flame retardant tris-(2,3-dibromopropyl) isocyanurate in zebrafish (Danio rerio) 被引量:14
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作者 ZHANG Xu LI Juan +5 位作者 CHEN MinJie WU Le ZHANG Chi ZHANG Jie ZHOU QunFang LIANG Yong 《Chinese Science Bulletin》 SCIE EI CAS 2011年第15期1548-1555,共8页
Tris-(2,3-dibromopropyl) isocyanurate (TBC) is a heterocyclic brominated flame retardant that was recently detected in the environment in China.TBC is semi-volatile and can accumulate in the lipid of some species,but ... Tris-(2,3-dibromopropyl) isocyanurate (TBC) is a heterocyclic brominated flame retardant that was recently detected in the environment in China.TBC is semi-volatile and can accumulate in the lipid of some species,but little is known about its effect on aquatic organisms.We exposed adult zebrafish to 0,0.25,1 and 4mg/L TBC for 28 d and measured the effect on survival,growth,histopathology,hormone levels,enzyme activity,and gene expression.TBC exposure had no effect on survival or growth.We observed significant damage to the liver and gill,including hepatocellular swelling and fatty degeneration in the liver as well as proliferation and edema of epithelial cells in the gills.In addition,exposure to 4mg/L TBC induced proliferation of goblet cells in the intestine of both sexes,acellular areas in the testis,and thinly scattered vitellogenic granules in vitellogenic oocytes.TBC exposure had no effect on the levels of thyroid hormones,testosterone,estradiol,liver superoxide dismutase activity,malondialdehyde content,and brain cholinesterase activity.By contrast,hepatic vitellogenin and cytochrome P4501A gene expression was significantly down-regulated in both male and female zebrafish in response to TBC exposure.Our results suggest that exposure to TBC causes a variety of potential reproductive and endocrine toxic effects. 展开更多
关键词 溴化阻燃剂 异氰脲酸酯 毒性作用 斑马鱼 超氧化物歧化酶活性 丙基 二溴 基因表达
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三-(2,3-二溴丙基)异氰脲酸酯和17β-雌二醇复合暴露对雄性斑马鱼的毒性效应 被引量:9
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作者 张续 黎娟 +4 位作者 刘雅思 陈曦 张捷 周群芳 梁勇 《环境科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期450-456,共7页
三-(2,3-二溴丙基)异氰脲酸酯(TBC)是近年来在环境中新检测到的一种杂环溴化阻燃剂,但其毒性效应尚不明确.我们以雄性斑马鱼为受试动物,开展了TBC和17β-雌二醇(E2)的复合暴露实验,以研究TBC潜在的致毒机制.结果显示TBC可显著抑制E2所... 三-(2,3-二溴丙基)异氰脲酸酯(TBC)是近年来在环境中新检测到的一种杂环溴化阻燃剂,但其毒性效应尚不明确.我们以雄性斑马鱼为受试动物,开展了TBC和17β-雌二醇(E2)的复合暴露实验,以研究TBC潜在的致毒机制.结果显示TBC可显著抑制E2所引起的斑马鱼肥满度指数上升,并能改善E2暴露所造成的斑马鱼精子细胞比例降低和性腺发育迟缓;E2暴露可造成斑马鱼肝组织脂肪样病变,肝中MDA含量上升,但SOD活力没有显著改变;TBC复合暴露后,MDA含量呈现下降趋势,但鱼肝仍有明显的脂肪样病变,对肝脏中的SOD活力也没有显著影响;更重要的是,TBC可显著抑制E2单一暴露所诱导的雄鱼肝脏中卵黄蛋白原基因的表达,这些数据表明TBC具有明显的内分泌干扰效应.因此,需要进一步关注TBC这类杂环溴化阻燃剂对水环境的潜在危害. 展开更多
关键词 溴化阻燃剂 三-(2 3-二溴丙基)异氰脲酸酯 斑马鱼 卵黄蛋白原 内分泌干扰物
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双酚A替代物对雄性斑马鱼性激素及卵黄蛋白原水平的影响 被引量:7
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作者 杨倩 杨先海 +3 位作者 刘济宁 王蕾 陈英文 沈树宝 《南京工业大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2018年第5期6-13,共8页
双酚AF(BPAF)、双酚AP(BPAP)、双酚B(BPB)、双酚F(BPF)、双酚S(BPS)和双酚Z(BPZ)是几种常用的双酚A替代物。目前,这些替代物的毒理学数据还比较匮乏,难以评估其是否为安全的替代物,因此,有必要开展双酚A替代物的毒理效应研究。考虑到双... 双酚AF(BPAF)、双酚AP(BPAP)、双酚B(BPB)、双酚F(BPF)、双酚S(BPS)和双酚Z(BPZ)是几种常用的双酚A替代物。目前,这些替代物的毒理学数据还比较匮乏,难以评估其是否为安全的替代物,因此,有必要开展双酚A替代物的毒理效应研究。考虑到双酚A具有较强的内分泌干扰效应,而这些双酚A替代物也是否具有内分泌干扰效应是亟待解决的重要科学问题。基于此,选用雄性斑马鱼成鱼作为研究对象,在质量浓度为0、0.001、0.01、0.1和1 mg/L下暴露21 d后,采用酶联免疫吸附测定法分析了斑马鱼头尾匀浆液中性激素水平和卵黄蛋白原含量的变化情况。结果表明,与空白对照相比,这6种双酚A替代物能够导致睾酮(T)水平出现不同程度的显著性降低,17β-雌二醇(E2)出现不同程度的显著性升高;卵黄蛋白原(VTG)的含量也呈现显著性升高的趋势。根据这几种受试物对卵黄蛋白原诱导作用的最低可观察效应浓度(LOEC)值可以看出,双酚AF、双酚AP和双酚Z的雌激素效应强于双酚A,双酚B与双酚A处于同一等级,双酚F和双酚S相对较弱。本研究结果可作为双酚A替代物风险评价的依据。 展开更多
关键词 双酚A替代物 斑马鱼 性激素 卵黄蛋白原
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2,4'DDT对斑马鱼生长、繁殖力及卵黄蛋白原的影响 被引量:5
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作者 丁科 韩志华 +1 位作者 吴迪 单正军 《生态与农村环境学报》 CAS CSSCI CSCD 北大核心 2012年第5期532-538,共7页
以斑马鱼体内卵黄蛋白原(Vtg)作为雌激素污染物的生物标志物,比较研究了不同浓度2,4'-DDT对成年斑马鱼生长、发育、繁殖以及体内Vtg含量的影响。结果表明,当水环境中ρ(2,4'-DDT)为2和10μg·L-1时,斑马鱼产卵量和受精率与... 以斑马鱼体内卵黄蛋白原(Vtg)作为雌激素污染物的生物标志物,比较研究了不同浓度2,4'-DDT对成年斑马鱼生长、发育、繁殖以及体内Vtg含量的影响。结果表明,当水环境中ρ(2,4'-DDT)为2和10μg·L-1时,斑马鱼产卵量和受精率与空白和溶剂对照组相比均显著下降(P<0.05)。当水环境中ρ(2,4'-DDT)为0.2、2和10μg·L-1时,斑马鱼肝脏指数与空白和溶剂对照组相比显著升高(P<0.05);10μg·L-12,4'-DDT处理组雄性斑马鱼体内Vtg含量显著高于空白和溶剂对照组(P<0.05),而0.2、2和10μg·L-12,4'-DDT处理组雌性斑马鱼体内Vtg含量均显著高于空白和溶剂对照组(P<0.05),且随暴露浓度的增加而增大。SDS-PAGE检测及免疫印迹分析均显示雄鱼血液内出现Vtg特异条带,表明2,4'-DDT对斑马鱼具有雌激素效应。 展开更多
关键词 2 4'-滴滴涕 斑马鱼 卵黄蛋白原(Vtg) 激素效应
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双酚AF对雄性斑马鱼卵黄蛋白原水平与芳香化酶基因表达的影响 被引量:5
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作者 陈亚文 杨洋 +1 位作者 唐天乐 唐文浩 《生态毒理学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期320-327,共8页
双酚AF(4,4'-六氟-2-二酚,BPAF)对生物有机体具有内分泌干扰作用。为研究低剂量BPAF对水生生物的效应,本研究选择成年雄性斑马鱼为研究对象,考察了0.005、0.05和0.5 mg·L^(-1)3种浓度BAPF暴露30 d对血浆中卵黄蛋白原(VTG)含量... 双酚AF(4,4'-六氟-2-二酚,BPAF)对生物有机体具有内分泌干扰作用。为研究低剂量BPAF对水生生物的效应,本研究选择成年雄性斑马鱼为研究对象,考察了0.005、0.05和0.5 mg·L^(-1)3种浓度BAPF暴露30 d对血浆中卵黄蛋白原(VTG)含量、2种卵黄蛋白原基因(vtg^(-1)和vtg-3)表达和2种芳香酶基因(cyp 19a与cyp 19b)表达的影响。结果表明:在0.005 mg·L^(-1)浓度暴露30 d后,血浆中VTG含量显著升高,随着暴露浓度的升高,促进作用不显著;BPAF暴露对不同组织中的4种基因存在不同的影响,0.005 mg·L^(-1)BPAF暴露可诱导脑部cyp19b、肝脏中cyp19a和性腺中vtg^(-1)、vtg-3和cyp19b基因表达;0.5 mg·L^(-1)BPAF暴露可导致肝脏中vtg^(-1)、vtg-3、性腺中cyp19a等基因显著上调。实验结果表明,BPAF具有雌性激素样效应,可诱导雄性斑马鱼体内部分组织卵黄蛋白原基因和芳香酶基因的表达。BPAF可引起斑马鱼血浆中的VTG含量的上升,从而干扰由VTG所参与的下丘脑-垂体-性腺轴与免疫系统的正常生理过程。 展开更多
关键词 双酚AF 斑马鱼 卵黄蛋白原 芳香化酶
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Aroclor1254对斑马鱼胚胎发育、肝脏组织结构及其卵黄蛋白原基因的影响 被引量:5
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作者 徐娟 吴南翔 +2 位作者 陈琼姜 宋扬 陈汝家 《环境与职业医学》 CAS 北大核心 2011年第9期577-581,共5页
[目的]使用脊椎动物模型斑马鱼评价Aroclor1254对斑马鱼胚胎发育、肝脏组织结构以及卵黄蛋白原(vtg)基因表达的影响,为Aroclor1254的毒性效应研究提供基础数据,以期选择Aroclor1254污染的敏感指标,进行早期污染监测和预警。[方法]将斑... [目的]使用脊椎动物模型斑马鱼评价Aroclor1254对斑马鱼胚胎发育、肝脏组织结构以及卵黄蛋白原(vtg)基因表达的影响,为Aroclor1254的毒性效应研究提供基础数据,以期选择Aroclor1254污染的敏感指标,进行早期污染监测和预警。[方法]将斑马鱼及其胚胎暴露在不同浓度的Aroclor1254溶液中,运用斑马鱼胚胎发育技术和组织病理观察法以及实时定量反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测Aroclor1254对斑马鱼胚胎发育的影响、形态学的改变和卵黄蛋白原(vtg)基因的表达。[结果]斑马鱼胚胎试验显示,3.3、6.5、10.0mg/L Aroclor1254等均可诱导肝变性、肝脏发育不全,其中3.3mg/L Aroclor1254诱导斑马鱼卵黄部分变性,6.5、10.0mg/L Aroclor1254诱导斑马鱼卵黄大部分或者全部变性。肝脏组织病理观察发现,2.0、10.0、50.0μg/L Aroclor1254肝细胞肿大,胞质疏松,空泡明显增加,细胞质中可见脂沉积。vtg mRNA的表达在Aroclor1254暴露的斑马鱼个体中产生了显著的改变,雌鱼中表达普遍呈抑制趋势,其中以2.0μg/L抑制现象最明显,而在雄鱼中该剂量组vtg表达量被显著诱导。[结论]研究表明Aroclor1254对斑马鱼及其胚胎具有毒性效应,肝脏是产生毒性效应的重要靶器官。 展开更多
关键词 Aroclor1254 斑马鱼 肝脏 卵黄蛋白原
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金雀异黄素对雄性斑马鱼卵黄原蛋白mRNA的诱导机理 被引量:2
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作者 王德鑫 陈洁 +1 位作者 王蔚 汝少国 《环境科学研究》 EI CAS CSSCI CSCD 北大核心 2015年第1期46-51,共6页
采用质量浓度分别为1、10、100、1 000μg/L的金雀异黄素对成年雄性斑马鱼进行水体暴露28 d,通过real-time PCR技术检测雄性斑马鱼肝脏内Vtg-1(卵黄原蛋白)、ERα和ERβ1 mRNA(雌激素受体)的表达水平,并利用同位素放射免疫法检测雄... 采用质量浓度分别为1、10、100、1 000μg/L的金雀异黄素对成年雄性斑马鱼进行水体暴露28 d,通过real-time PCR技术检测雄性斑马鱼肝脏内Vtg-1(卵黄原蛋白)、ERα和ERβ1 mRNA(雌激素受体)的表达水平,并利用同位素放射免疫法检测雄性斑马鱼性腺w(睾酮)和w(E2)(E2为17β-estradiol,17β-雌二醇).结果表明:10-1 000μg/L金雀异黄素显著诱导了雄性斑马鱼肝脏Vtg-1 mRNA的表达,二者呈剂量-效应关系,同时显著上调了雌激素受体ERβ1 mRNA的表达;但1-1 000μg/L金雀异黄素却极显著地抑制了雄性斑马鱼肝脏内ERαmRNA的表达,同时造成雄性斑马鱼性腺w(E2)的升高和w(睾酮)的降低.研究结果显示,金雀异黄素可能通过提高雄性斑马鱼体内ERβ1mRNA的表达和内源w(E2),增强ERβ1对内源雌激素的介导作用,从而促进Vtg-1的表达. 展开更多
关键词 金雀异黄素 雄性斑马鱼 卵黄原蛋白 雌激素受体
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荧光转基因斑马鱼Tg(ere-vtg:egfp)质粒的构建及验证 被引量:2
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作者 孙冰 许慧慧 +3 位作者 夏敏杰 丁训城 胡晶莹 李卫华 《环境与职业医学》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期511-516,共6页
[目的]本研究旨在构建一种对17α-炔雌醇(17α-ethynylestradiol,EE2)敏感的荧光转基因斑马鱼模型,提供一种可直观地监测水中环境雌激素(environmental estrogens,EEs)污染程度的生物检测方法。[方法]构建Tg(ere-vtg:egfp)质粒,显微注射... [目的]本研究旨在构建一种对17α-炔雌醇(17α-ethynylestradiol,EE2)敏感的荧光转基因斑马鱼模型,提供一种可直观地监测水中环境雌激素(environmental estrogens,EEs)污染程度的生物检测方法。[方法]构建Tg(ere-vtg:egfp)质粒,显微注射到1~2个细胞期的斑马鱼胚胎中,经10 ng/L EE2暴露发出绿色荧光,建立能稳定遗传的Tg(ere-vtg:egfp)转基因斑马鱼系。将转基因斑马鱼纯合子幼鱼和胚胎暴露于不同浓度的EE2进行敏感性鉴定,并将转基因斑马鱼纯合子幼鱼暴露于多种EEs、雌激素结构类似物中进行特异性鉴定。[结果]经显微注射Tg(ere-vtg:egfp)质粒并进行基因筛选,成功构建Tg(ere-vtg:egfp)转基因斑马鱼。EE2诱导Tg(ere-vtg:egfp)转基因斑马鱼表达绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)与浓度、时间有关。当EE2质量浓度大于0.1 ng/L(131 hpf)时,可见转基因斑马鱼胚胎表达明显的GFP。当暴露于不同结构的雌激素类化合物时,Tg(ere-vtg:egfp)转基因斑马鱼幼鱼呈现GFP表达,而对于非雌激素类化合物在各浓度下均没有GFP表达。[结论]采用Tg(ere-vtg:egfp)转基因斑马鱼可直观地动态监测环境中EEs污染情况。 展开更多
关键词 环境雌激素 转基因斑马鱼 卵黄蛋白原 绿色荧光蛋白 环境监测
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斑马鱼卵黄原蛋白的纯化鉴定及其2种ELISA的开发
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作者 邴欣 李鹏 +1 位作者 王军 汝少国 《中国海洋大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2017年第7期56-62,共7页
斑马鱼卵黄原蛋白(Vitellogenin,VTG)是检测环境雌激素活性的重要生物标志物。为了确定最佳的斑马鱼VTG检测方法,本研究利用纯化的斑马鱼VTG及其多克隆抗体同时建立了竞争ELISA与夹心ELISA,并比较了2种方法对VTG的敏感度与精确度。采用... 斑马鱼卵黄原蛋白(Vitellogenin,VTG)是检测环境雌激素活性的重要生物标志物。为了确定最佳的斑马鱼VTG检测方法,本研究利用纯化的斑马鱼VTG及其多克隆抗体同时建立了竞争ELISA与夹心ELISA,并比较了2种方法对VTG的敏感度与精确度。采用凝胶过滤与离子交换层析相结合的方法从17β-雌二醇暴露后的斑马鱼整体匀浆液中纯化获得了2种高分子量的糖磷脂蛋白,SDS变性电泳显示分子量为180与143kDa的两条主带,证实纯化的蛋白为斑马鱼VTG。Western blot结果表明制备的抗血清对斑马鱼VTG具有很高的特异性,利用纯化的VTG及其多克隆抗体建立了定量斑马鱼VTG的竞争ELISA和夹心ELISA。与竞争ELISA相比,夹心ELISA不需要抗原抗体共孵育的过程,操作更加省时、简便,其工作范围为3.9~250ng/mL,检出限约为2.2ng/mL,组内与组间变异系数则分别为2.1~5.7和3.0~7.3,表现出更高的敏感度与精确度,推荐该方法用于环境雌激素活性的检测。 展开更多
关键词 斑马鱼 卵黄原蛋白 多克隆抗体 竞争ELISA 夹心ELISA
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芘对斑马鱼胚胎毒性的研究
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作者 温茹淑 谢丹凤 陈伟庭 《嘉应学院学报》 2020年第6期26-32,共7页
以斑马鱼的卵黄蛋白原(Vtg)为生物标志物,研究芘对斑马鱼胚胎毒性.用100、200和300μg·L^-1 3种不同浓度的芘和无水乙醇(空白对照)同时处理受精9 h后的斑马鱼胚胎,暴露至72 h与144 h,观察并统计斑马鱼胚胎孵化率、死亡率以及畸形... 以斑马鱼的卵黄蛋白原(Vtg)为生物标志物,研究芘对斑马鱼胚胎毒性.用100、200和300μg·L^-1 3种不同浓度的芘和无水乙醇(空白对照)同时处理受精9 h后的斑马鱼胚胎,暴露至72 h与144 h,观察并统计斑马鱼胚胎孵化率、死亡率以及畸形率数据以及Vtg基因表达的情况.实验结果表明:芘可以影响斑马鱼胚胎的发育,芘的暴露导致斑马鱼胚胎出现心包水肿、卵黄囊水肿、脊柱弯曲以及尾部弯曲等中毒症状.暴露72 h和144 h后,随着芘浓度升高斑马鱼胚胎孵化率下降,畸形率以及死亡率上升,而且中毒程度随暴露时间的延长而增加.与对照相比,芘对斑马鱼Vtg基因表达量均下降,Vtg基因均没有被显著诱导. 展开更多
关键词 斑马鱼 胚胎 卵黄蛋白原
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一种特异性识别斑马鱼卵黄蛋白原的噬菌体展示单链抗体的可溶性表达方案
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作者 饶瑜 钟利桥 +2 位作者 张凤 张晓华 戴和平 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期1637-1644,共8页
为了实现特异性识别斑马鱼卵黄蛋白原的噬菌体展示单链抗体的可溶性表达,将不能以可溶性蛋白形式表达的、只能以噬菌体展示形式特异性识别斑马鱼卵黄蛋白原的单链抗体F5的基因,克隆到pET 32a载体并转化入大肠杆菌ori DE3中。结果表明,... 为了实现特异性识别斑马鱼卵黄蛋白原的噬菌体展示单链抗体的可溶性表达,将不能以可溶性蛋白形式表达的、只能以噬菌体展示形式特异性识别斑马鱼卵黄蛋白原的单链抗体F5的基因,克隆到pET 32a载体并转化入大肠杆菌ori DE3中。结果表明,通过诱导表达,可获得可溶性的并且仍特异性识别斑马鱼卵黄蛋白原的单链抗体32a-F5。噬菌体展示单链抗体不能可溶性表达是噬菌体展示技术应用中常见的问题,该方法提供了一种表达可溶性单链抗体的可行性方案。 展开更多
关键词 噬菌体展示技术 单链抗体 可溶性表达 大肠杆菌 斑马鱼卵黄蛋白原
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全氟辛烷磺酸(PFOS)对斑马鱼卵黄蛋白原mRNA水平的影响 被引量:10
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作者 程艳 崔媛 +4 位作者 党志超 谢文平 李海山 殷缓缓 陈会明 《环境科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2012年第6期1865-1870,共6页
为了研究环境低剂量全氟辛烷磺酸(perfluorooctane sulfonate,PFOS)对水生生物的内分泌干扰效应和可能的作用机制,测定了PFOS对斑马鱼(Brachydanio rerio)肝脏中卵黄蛋白原(vitellogenin,VTG)mRNA水平的影响.将斑马鱼暴露于4个PFOS的环... 为了研究环境低剂量全氟辛烷磺酸(perfluorooctane sulfonate,PFOS)对水生生物的内分泌干扰效应和可能的作用机制,测定了PFOS对斑马鱼(Brachydanio rerio)肝脏中卵黄蛋白原(vitellogenin,VTG)mRNA水平的影响.将斑马鱼暴露于4个PFOS的环境低剂量浓度组(0.1、1、10、100μg.L-1)中进行21d毒性试验,收集肝脏样品,提取RNA,采用荧光定量PCR(qRT-PCR)分别检测VTG1和VTG3的mRNA水平.结果表明:①PFOS暴露引起雄性斑马鱼肝脏VTG1和VTG3 mRNA水平升高,VTG1 mRNA水平升高与剂量呈正相关,在100μg.L-1暴露浓度处与对照组呈现显著性差异;VTG3的mRNA水平变化与剂量呈倒U型曲线,呈现典型的毒物刺激荷尔蒙效应,在10和100μg.L-1暴露浓度处与对照组呈现显著性差异;②PFOS暴露引起雌性斑马鱼肝脏中VTG1 mRNA水平升高,在10μg.L-1暴露浓度处与对照组呈现显著性差异,但在高浓度(10和100μg.L-1)处试验结果误差较大;VTG3 mRNA水平只在10μg.L-1暴露浓度处升高,但相比于对照组均没有显著性差异.试验结果表明PFOS暴露对斑马鱼的内分泌干扰作用明显,其毒性作用机制可能是类雌激素效应,而肝脏中VTG1和VTG3mRNA水平可能作为PFOS内分泌干扰效应评价的敏感生物标志物,但VTG1和VTG3 mRNA水平的响应曲线呈现基因亚型和性别差异. 展开更多
关键词 全氟辛烷磺酸(PFOS) 斑马鱼(Brachydanio rerio) 卵黄蛋白原(VTG) MRNA水平 荧光定量PCR(qRT-PCR)
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