丹参注射液对模拟缺血预适应引起兔心室肌细胞动作电位和ATP敏感性钾电流变化的影响 被引量：11

1

作者 王腾 唐其柱 +3 位作者 江洪 李建军 黄从新 李庚山 《武汉大学学报（医学版）》 CAS 2005年第6期696-699,共4页

目的:探讨丹参注射液对模拟缺血预适应引起兔心室肌细胞动作电位和ATP敏感性钾电流(IK(ATP))变化的影响,试图揭示其保护心肌缺血-再灌注损伤,抗缺血性心律失常作用的离子机制。方法:采用酶解法分离兔左心室细胞,按先后顺序,用正常Tyrod... 目的:探讨丹参注射液对模拟缺血预适应引起兔心室肌细胞动作电位和ATP敏感性钾电流(IK(ATP))变化的影响,试图揭示其保护心肌缺血-再灌注损伤,抗缺血性心律失常作用的离子机制。方法:采用酶解法分离兔左心室细胞,按先后顺序,用正常Tyrode液和模拟缺血液以及模拟缺血液加丹参(750 mg.L-1)灌流,利用膜片钳全细胞记录技术记录不同条件下动作电位和IK(ATP)前后变化。结果:①模拟缺血液灌流后动作电位时程(APD)复极化的50%(APD50)和90%(APD90)分别缩短(与正常组相比P<0.05,n=12);模拟缺血液加丹参灌流,APD50和APD90缩短更加明显,分别缩短了80.46%和71.87%(与正常组相比P<0.01,与模拟缺血液组相比P<0.05,n=12)。静息电位和动作电位幅值无明显改变;②经模拟缺血液灌流,引起IK(ATP)通道的开放,膜电流显示外向性直线形,发生率为58.33%(7/12,P<0.05)。模拟缺血液加丹参,更容易引起IK(ATP)开放,膜电流曲线完全成为直线,诱发率为91.67%(11/12,与正常组和模拟缺血液组相比P<0.05);③Glibenclimide能使这种外向性直线形膜电流恢复为“N”形,证明这种膜电流为IK(ATP);经丹参作用后,改用正常Tyrode液冲洗,心肌细胞上结合的丹参可以被洗脱以及从模拟缺血液中得到恢复。结论:丹参能产生类似心肌缺预适应的病理生理过程,起到了ATP敏感性钾通道开放剂效应,这可能是丹参对心肌缺血预适应的保护作用具有增强效应电生理基础。 展开更多

关键词 丹参注射液 缺血预适应 全细胞膜片钳术 动作电位 ATP敏感性钾电流 心肌细胞

下载PDF 职称材料

碘化N-正丁基氟哌啶醇对大鼠心室肌细胞膜钾通道的影响 被引量：5

2

作者 高分飞 石刚刚 +3 位作者 郑锦鸿 黄展勤 周燕琼 刘幸平 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第7期891-895,共5页

目的研究碘化N-正丁基氟哌啶醇(F2)对大鼠心室肌细胞膜瞬时外向钾通道的影响。方法采用酶急性消化法分离得到单个大鼠心室肌细胞,应用膜片钳全细胞记录技术观察F2对大鼠心室肌细胞膜瞬时外向钾电流(Ito)的影响。结果F2可剂量依赖地抑制I... 目的研究碘化N-正丁基氟哌啶醇(F2)对大鼠心室肌细胞膜瞬时外向钾通道的影响。方法采用酶急性消化法分离得到单个大鼠心室肌细胞,应用膜片钳全细胞记录技术观察F2对大鼠心室肌细胞膜瞬时外向钾电流(Ito)的影响。结果F2可剂量依赖地抑制Ito,IC50为0.28mmol·L-1。F2可使Ito的稳态失活曲线左移,半量膜电位Vmid变负,斜率因子S变大;但对激活曲线几乎无影响;对Ito灭活后再复活时程无影响。结论F2对心室肌膜Ito具有抑制作用。 展开更多

关键词 瞬时外向钾电流 全细胞膜片钳 心室肌细胞

下载PDF 职称材料

新型重组海葵毒素hk2a对大鼠心室肌细胞离子通道的影响(英文) 被引量：3

3

作者 欧阳平 邓春玉 +4 位作者 刘文华 王磊 梁东 钱卫民 徐安龙 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2004年第6期609-613,618,共6页

目的观察新型基因重组海葵毒素rhk2a对大鼠心室肌细胞离子通道的影响。方法采用全细胞膜片钳技术分别记录rhk2a对大鼠心室肌细胞钠电流、L型钙电流和钠-钙交换电流的影响。结果与对照组相比,新型重组海葵毒素rhk2a能够明显减慢大鼠心室... 目的观察新型基因重组海葵毒素rhk2a对大鼠心室肌细胞离子通道的影响。方法采用全细胞膜片钳技术分别记录rhk2a对大鼠心室肌细胞钠电流、L型钙电流和钠-钙交换电流的影响。结果与对照组相比,新型重组海葵毒素rhk2a能够明显减慢大鼠心室肌细胞钠通道的时间依赖性失活(τh)(14.15±4.6 ms vs2.03±0.30 ms, P<0.05),而rhk2a对大鼠心室肌细胞钙通道电流(-8.86±0.35 PA/PF vs-8.99±0.64 PA/PF,P>0.05)和钠-钙交换电流(-0.65±0.2 PA/PF vs-0.69±0.15 PA/PF, P>0.05)无明显直接作用。结论rhk2a对大鼠心室肌细胞钠通道的时间依赖性失活的减慢是rhk2a对心脏具有正性肌力效应的重要机制。 展开更多

关键词 伞细胞膜片钳技术 心肌 钠通道 钙通道 钠钙交换 海葵毒素

下载PDF 职称材料

P物质对大鼠DRG神经元H^+门控电流的调制作用 被引量：1

4

作者 师春梅 赵斌 +2 位作者 谭燕 赵奉波 李之望 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期847-852,共6页

目的:观察P物质(SP)对神经元H+门控电流的调制作用及其可能存在的机制。方法:采用全细胞膜片钳技术分别记录pH 4.0、pH 5.0、pH 6.0及共加H+与SP情况下,急性分离的大鼠背根神经节(DRG)神经元H+门控电流的形式。通过胞内透析技术分析SP... 目的:观察P物质(SP)对神经元H+门控电流的调制作用及其可能存在的机制。方法:采用全细胞膜片钳技术分别记录pH 4.0、pH 5.0、pH 6.0及共加H+与SP情况下,急性分离的大鼠背根神经节(DRG)神经元H+门控电流的形式。通过胞内透析技术分析SP对H+门控电流可能的调控机制。结果:H+门控电流可划分为短暂内流型(T型)、持续内向电流型(S型)、反向电流型(O型)及双相内向电流型(B型)。SP对S型和B型中持续成分的H+门控电流有明显增强作用,这种电流幅值增强达(85.53±22.93)%,约81.8%细胞的这种增强效应不能被选择性的SP受体NK1拮抗剂阻断,而非肽类的SP受体NK1拮抗剂对约75%的DRG神经元可明显阻断这种增强效应;SP对S型和B型中持续成分的H+门控电流也有明显抑制作用,抑制的幅值达(48.46±4.45)%,并且约88.9%细胞的这种抑制效应不能被SP受体NK1拮抗剂所阻断。通过胞内透析技术在细胞内液中加入GDP-β-S后不能消除SP对H+门控电流的调制作用。结论:H+门控电流有T型、S型、O型及B型4种电流类型。SP对H+门控电流有增强和抑制的双向调节作用。SP可能通过G蛋白偶联受体通路及与H+门控离子通道的某一位点直接结合来发挥对H+门控电流的双向调节调制作用。 展开更多

关键词 全细胞膜片钳术 H^+门控电流 P物质 胞内透析

下载PDF 职称材料

缓激肽抑制大鼠DRG分离神经元的GABA激活电流

5

作者 吕承云 司军强 李之望 《生理学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第4期373-378,共6页

本文应用全细胞膜片箝技术在新鲜分离的大鼠背根神经节（DRG）神经元上研究缓激肽（BK）对γ-氨基丁酸（GABA）反应的调制作用。结果发现：在34个对GABA反应的细胞中有31个细胞对BK敏感。在对BK敏感并引起内向电流的27个细胞中预加BK，... 本文应用全细胞膜片箝技术在新鲜分离的大鼠背根神经节（DRG）神经元上研究缓激肽（BK）对γ-氨基丁酸（GABA）反应的调制作用。结果发现：在34个对GABA反应的细胞中有31个细胞对BK敏感。在对BK敏感并引起内向电流的27个细胞中预加BK，对GABA-激活电流具有明显的抑制作用，如10-6mol／L的BK可抑制GABA（10-4mol／L）激活电流30％。BK可将GABA量效曲线明显下移，并抑制其最大反应达1／3以上，而不改变其Kd值。结果提示：BK能非竞争性地抑制GABA反应。 展开更多

关键词 缓激肽 背根神经节 全细胞膜片箝 GABA

下载PDF 职称材料

碘化N-正丁基氟哌啶醇对大鼠缺氧复氧心肌细胞钠钙交换体电流的抑制作用

6

作者 黄勇攀 高分飞 石刚刚 《中国科技论文》 CAS 北大核心 2014年第3期370-374,共5页

碘化N-正丁基氟哌啶醇(N-n-butyl haloperidol iodide,F2)为本研究室改造合成的新化合物。前期研究发现F2作为L-型钙通道拮抗剂,能剂量依赖地拮抗缺血再灌注所导致的大鼠心脏损伤。研究F2对缺氧复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)大鼠心... 碘化N-正丁基氟哌啶醇(N-n-butyl haloperidol iodide,F2)为本研究室改造合成的新化合物。前期研究发现F2作为L-型钙通道拮抗剂,能剂量依赖地拮抗缺血再灌注所导致的大鼠心脏损伤。研究F2对缺氧复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)大鼠心肌细胞钠钙交换体电流的作用并探讨其保护机制。采用Langendorff灌流系统灌流SD大鼠心脏,标准酶解法消化分离得到单个心室肌细胞。正常台式液灌流5min,立即灌流充90%N2-10%CO2的缺氧液,建立体外心肌细胞H/R模型,采用全细胞膜片钳技术记录对照、模型以及不同浓度F2(0.1、1、10μmol/L)对心肌细胞钠钙交换体电流,观察H/R状态F2对心肌细胞钠钙交换体电流的影响。结果显示:缺氧抑制钠钙交换体电流主要是抑制外向电流;H/R引起钠钙交换体电流增大,尤其是外向电流的增大。F2呈浓度依赖地抑制钠钙交换体电流,钠钙交换体电流I-V曲线上移。以上表明:F2能抑制钠钙交换体电流,尤其是外向电流,防止H/R时心肌细胞的钙超载,保护心肌细胞。 展开更多

关键词 碘化N-正丁基氟哌啶醇 全细胞膜片钳 缺氧复氧 钠钙交换体电流

下载PDF 职称材料

铝对大鼠背根神经节分离神经元GABA激活电流的调制作用 被引量：1

7

作者 梁尚栋 李之望 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第6期660-663,共4页

目的　研究三氯化铝 (AlCl3)对大鼠背根神经节分离神经元γ 氨基丁酸 (GABA)激活电流的作用。方法　应用全细胞膜片钳技术在新鲜分离的大鼠背根神经节 (DRG)神经元上观察AlCl3 对GABA激活电流的影响。结果　大部分受检细胞 (4 6 /5 8)对... 目的　研究三氯化铝 (AlCl3)对大鼠背根神经节分离神经元γ 氨基丁酸 (GABA)激活电流的作用。方法　应用全细胞膜片钳技术在新鲜分离的大鼠背根神经节 (DRG)神经元上观察AlCl3 对GABA激活电流的影响。结果　大部分受检细胞 (4 6 /5 8)对GABA(1～ 10 0 0 μmol·L-1)敏感。在这 46个细胞中 ,单独加AlCl3 可引起三类膜反应 :(1)外向电流 (3/4 6 ) ;(2 )内向电流 (5 /4 6 ) ;(3)无反应 (38/4 6 )。与GABA激活的内向电流相比 ,AlCl3 激活电流幅值要小得多。预加较低浓度 (≤ 10 0 μmol·L-1)AlCl3 对GABA激活电流影响如下 :产生增强效应的细胞为 32 /38,并具有浓度依赖性 ;产生抑制作用的细胞为 4/38;无明显作用的细胞为 2 /38。较高浓度 (10 0 0 μmol·L-1)AlCl3 抑制GABA激活电流 (n2 0 0 0 0 3 16收稿 ,2 0 0 0 0 7 12修回1 江西医学院生理教研室 ,南昌　 330 0 0 6作者简介 :梁尚栋 ,男 ,41岁 ,医学硕士 ,副教授 ,主要研究方向 :神经生理学 ;李之望 ,男 ,教授 ,主要研究方向 :神经生理和药理学=8)。AlCl3 对GABA激活电流的增强作用既可增强峰电流也可增强稳态部分。结论　AlCl3 改变GABAA 受体的机能。 展开更多

关键词 背根神经节 Γ-氨基丁酸A受体 三氯化铝 调制

下载PDF 职称材料

二氧化硫衍生物对大鼠海马神经元外向钾电流特性的影响 被引量：2

8

作者 桑楠 孟紫强 《环境与职业医学》 CAS 北大核心 2003年第1期1-5,共5页

[目的 ]研究大鼠海马神经元去极化激活的外向钾电流的特征 ,并在此基础上初步探讨SO2 衍生物对此外向电流的影响。 [方法 ]利用全细胞膜片钳技术。 [结果 ]短时去极化至 -60mV以上电位可引发快速上升的外向电流 ,之后缓慢衰减至一平台... [目的 ]研究大鼠海马神经元去极化激活的外向钾电流的特征 ,并在此基础上初步探讨SO2 衍生物对此外向电流的影响。 [方法 ]利用全细胞膜片钳技术。 [结果 ]短时去极化至 -60mV以上电位可引发快速上升的外向电流 ,之后缓慢衰减至一平台。当保持电位改变时 ,该峰电流与平台电流的幅度均会发生变化 ,但前者较后者变化显著。试验中测得峰电流与平台电流的翻转电位分别为 (-76 1± 5 97)mV和 (-83 6± 4 13 )mV ,与用Nerst方程计算出的本试验细胞外液与电极内液的钾离子平衡电位EK=-88mV接近 ,说明该外向电流是钾电流 ,且提示此外向电流包括两种成分 ,即峰电流IA 和平台电流IK。SO2 衍生物可剂量依赖地增大此两种成分的外向钾电流 ,使二者增大 5 0 %的SO2 衍生物剂量分别为 2 6 19μmol/L和 14 5 0 μmol/L。[结论 ]大气SO2 污染可能与一些中枢神经系统疾病的发生以及衰老有关。 展开更多

关键词 海马神经元 外向钾电流 全细胞膜片钳技术 SO2衍生物 二氧化硫衍生物

下载PDF 职称材料

大鼠骨髓间充质干细胞L-型钙通道的表达及电流检测 被引量：3

9

作者 时飒 金连弘 +3 位作者 申景岭 孙轶华 郭筠秋 李冬梅 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期111-114,共4页

目的 探讨L-型钙通道基因和蛋白在骨髓间充质干细胞（MSCs）中的表达及离子电流，以进一步研究其在MSCs增殖和分化中的作用。方法 分离、培养和纯化大鼠骨髓间充质干细胞，细胞免疫荧光化学方法检测表面分子CD14、CD29、CD34，CD44、CD4... 目的 探讨L-型钙通道基因和蛋白在骨髓间充质干细胞（MSCs）中的表达及离子电流，以进一步研究其在MSCs增殖和分化中的作用。方法 分离、培养和纯化大鼠骨髓间充质干细胞，细胞免疫荧光化学方法检测表面分子CD14、CD29、CD34，CD44、CD45、CD106的阳性率和L-型钙通道蛋白的表达；采用RT-PCR技术观察MSCs细胞中钙离子通道不同亚基α1C、α1D、α1G、α1H、α1S mRNA的表达；全细胞膜片钳技术记录单个细胞离子电流。结果 细胞免疫荧光化学方法检测CD29、CD44、CD106阳性率在93％左右，CD14、CD34、CD45表达阴性。RT-PCR结果显示，可见L-型钙通道α1C亚基的mRNA高表达；但未见L-型钙通道α1D、α1S亚基和T-型钙通道的α1G、α1H亚基mRNA的表达。L-型钙通道蛋白（α1C）呈阳性表达。在36例细胞中16例细胞记录到电压依赖性内向电流。此电流激活电位-30mV，最大激活电位为0-10mV，可被nifedipine（10μmol／L）阻断，细胞外液中以10mmol／L Ba^2＋作为负载离子，记录的电流强度明显大于2mmol／L Ca^2＋时，证实为L-型钙电流。结论 MSCs不仅有L-型钙通道的基因和蛋白的表达，并且具有功能电流。 展开更多

关键词 骨髓间充质干细胞 L-型钙通道 离子电流 全细胞膜片钳技术 大鼠

下载PDF 职称材料

牛蛙初级感觉神经P物质对GABA激活电流的抑制作用(英文) 被引量：1

10

作者 姚开辉 姬明丽 +1 位作者 千智斌 杨云雷 《新乡医学院学报》 CAS 2001年第4期229-232,共4页

目的　在牛蛙背根神经节神经元研究P物质对γ -氨基丁酸激活电流的调制作用。方法　实验采用的方法是全细胞膜片钳技术 ,实验材料为急性分离的牛蛙背根神经节神经元。结果　在受检的神经元中大多数神经元 ( 95% )对γ -氨基丁酸 ( 1～ 1... 目的　在牛蛙背根神经节神经元研究P物质对γ -氨基丁酸激活电流的调制作用。方法　实验采用的方法是全细胞膜片钳技术 ,实验材料为急性分离的牛蛙背根神经节神经元。结果　在受检的神经元中大多数神经元 ( 95% )对γ -氨基丁酸 ( 1～ 1 0 0 0um)敏感 ,并且能被荷包牡丹碱 (GABA受体的阻断剂 )所阻断。另一方面 ,P物质能抑制γ -氨基丁酸激活电流的 3 0 .85%。结论　由于P物质受体和γ -氨基丁酸受体共存于牛蛙DGR神经元膜 ,并且P物质受体的激活可以调制γ -氨基丁酸受体激活的反应 ,从背角神经元释放的P物质可以逆转由γ 展开更多

关键词 Γ-氨基丁酸 P物质 背根神经节神经元 抑制 全细胞膜片钳技术

下载PDF 职称材料

全细胞膜片钳技术在遗传性长QT综合征和不明原因猝死中的研究进展

11

作者 舒俊杰 陈红羽 +1 位作者 刘凯 雷普平 《昆明医科大学学报》 CAS 2022年第6期154-158,共5页

基因突变导致的心脏离子通道疾病被认为是引起不明原因猝死的首要死因,长QT综合征作为最常见的心脏离子通道疾病之一,其致病基因突变在各类SUD中被不断报道。利用全细胞膜片钳技术进行心脏离子通道功能验证对于评估基因突变的致病性、明... 基因突变导致的心脏离子通道疾病被认为是引起不明原因猝死的首要死因,长QT综合征作为最常见的心脏离子通道疾病之一,其致病基因突变在各类SUD中被不断报道。利用全细胞膜片钳技术进行心脏离子通道功能验证对于评估基因突变的致病性、明确SUD死者的死亡原因、筛查SUD危险人群具有重要的法医学意义。对全细胞膜片钳技术的基本原理及其在长QT综合征的发病机制与不明原因猝死研究中的应用进行综述。 展开更多

关键词 全细胞膜片钳技术 遗传性长QT综合征 不明原因猝死

下载PDF 职称材料

人心肌细胞的分离方法和充血性心力衰竭患者心房肌细胞钾电流的特征

12

作者 许正新 孙云 《徐州医学院学报》 CAS 2002年第5期385-389,共5页

目的　探索人类心房肌细胞的分离方法及充血性心力衰渴 (CHF)患者心房肌细胞延迟整流钾电流 (IK)和内向整流钾电流 (IK1 )的特征。方法　酶法分离心肌细胞 ;全细胞膜片钳法记录电流。结果　两种酶学分离方法均能成功地分离出合格的心肌... 目的　探索人类心房肌细胞的分离方法及充血性心力衰渴 (CHF)患者心房肌细胞延迟整流钾电流 (IK)和内向整流钾电流 (IK1 )的特征。方法　酶法分离心肌细胞 ;全细胞膜片钳法记录电流。结果　两种酶学分离方法均能成功地分离出合格的心肌细胞。其中 ,用Ⅰ型胶原酶和蛋白酶分离出的活细胞的比例约为 4 0 %～ 5 0 % ,而且理想的细胞较多 ;而用V型胶原酶则仅能分离出 1%～ 3%的活细胞。细胞分离过程受消化酶的类型、季节、病种、心功能等多种因素的影响。以上任一因素发生变化 ,分离细胞的质和量均会发生改变。利用掌握的全细胞膜片钳技术 ,我们对人心肌细胞上的钾电流进行了探索。结果显示 ,在充血性心衰患者心房肌细胞上 ,存在着IK 和IK1 。其中 ,IK 的激活较慢 ,其电流轨迹在刺激开始后缓慢上升 ,至刺激中止前达到顶点。复极至 - 30mV时 ,可引导出IK 的尾电流。与时间依赖性电流相比 ,此电流的幅值较小。与IK 相比 ,IK1 的激活较快 ,激活后迅即趋于稳态 ,不失活。当膜电位处于不同的电位水平时 ,IK1 分别表现为内向电流和外向电流 ,并且随着膜电位的增大 ,内向电流逐渐减小 ,外向电流则越来越大。结论　人心肌细胞的分离过程受多种因素的影响。对于CHF患者而言 ,其心房肌细胞上存在着IK 和IK1 。 展开更多

关键词 人心肌细胞 分离方法 充血性心力衰竭 心房肌细胞 钾电流

下载PDF 职称材料

β淀粉样蛋白25～35急性给药和慢性孵育对神经元Ca2+非依赖性的K+电流作用的比较

13

作者 张鹏俊 杨小荣 +3 位作者 董斌 孙萍 王永 张策 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期379-384,共6页

目的探讨β-淀粉样蛋白25-35（Aβ25-35）急性给药和慢性孵育对神经元Ca^2＋非依赖性的K^＋电流作用的区别。方法急性分离大鼠海马及培养皮层神经元;Aβ25-35急性给药（3min）或慢性孵育（24h）;利用全细胞膜片钳技术记录Ca^2＋非依赖性... 目的探讨β-淀粉样蛋白25-35（Aβ25-35）急性给药和慢性孵育对神经元Ca^2＋非依赖性的K^＋电流作用的区别。方法急性分离大鼠海马及培养皮层神经元;Aβ25-35急性给药（3min）或慢性孵育（24h）;利用全细胞膜片钳技术记录Ca^2＋非依赖性的K^＋电流以及Calcein-AM法检测神经元活力。结果Aβ25-35急性给药使急性分离的海马神经元Ca^2＋非依赖性的K^＋电流幅度明显降低（n=11）,而慢性孵育则使培养的皮层神经元该电流幅度明显升高（n=11）。前者是Aβ25-35通过对K^＋通道直接的效应发挥其抑制作用,而后者可能主要是通过Aβ25-35上调通道蛋白,改变通道数量而发挥作用。结论不同的给药方式通过不同的机制对海马和皮层神经元的Ca^2＋非依赖性的K^＋电流产生不同的作用。 展开更多

关键词 β-淀粉样肽25-35 电压激活的钾通道 离子电流 神经元 全细胞膜片钳技术 大鼠

下载PDF 职称材料

百日咳毒素对抗性及敏感棉铃虫神经细胞L型钙通道的调制作用

14

作者 赵强 王勇 +4 位作者 孙丹 刘燕强 范贤林 贺秉军 刘安西 《南开大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期100-106,共7页

通过催化抑制性G蛋白α亚基(Gαi／o)的ADP核糖基化,百日咳毒素(PTX)使Gαi／o不能活化,继而抑制Gαi／o-腺苷酸环化酶(AC)-cAMP-蛋白激酶A(PKA)-L型电压门控钙(Ca(L)2+)通道．Ca(L)2+通道可能是拟除虫菊酯类杀虫剂的靶标．本实验观察了... 通过催化抑制性G蛋白α亚基(Gαi／o)的ADP核糖基化,百日咳毒素(PTX)使Gαi／o不能活化,继而抑制Gαi／o-腺苷酸环化酶(AC)-cAMP-蛋白激酶A(PKA)-L型电压门控钙(Ca(L)2+)通道．Ca(L)2+通道可能是拟除虫菊酯类杀虫剂的靶标．本实验观察了PTX对三氟氯氰菊酯(Cy)抗性及敏感棉铃虫神经细胞Ca(L)2+通道的影响, 以期从Ca(L)2+通道动力学的角度探讨棉铃虫对拟除虫菊酯类杀虫剂产生抗性的机制．急性分离并经12-16 h无菌培养3-4龄棉铃虫神经细胞．实验分4组:①Cy敏感组(Cy-S组);②Cy抗性组(Cy-R组);③Cy-S-PTX组; ④Cy-R-PTX组．400 ng／mL PTX加入培养基中．采用全细胞膜片钳技术记录各组,ICa(L)．结果显示:(1)各组 Ca(L)2+通道的激活电压均是-35--30 mV,最大激活电压是0 mV,但Cy-S-PTX组的最大激活电压是 -10 mV;(2)分别与Cy-S组和Cy-R-PTX组峰值电流密度相比,Cy-S-PTX组峰值电流密度分别增高52．06 ％和44．81％(P<0．01),提示Cy-S-PTX组Ca(L)2+通道电导可能增大．Cy-S组和Cy-R组间的峰值电流密度无统计学差异;(3)与Cy-S组相比,Cy-S-PTX组神经细胞Ca(L)2+通道的半数激活电压向超极化方向移动5．1 mV (P<0．05),半数失活电压向超极化方向移动5．93 mV(P<0．05),提示PTX使敏感组神经细胞的Ca(L)2+通道更容易激活和失活;(4)与Cy-R组相比,Cy-R-PTX神经细胞Ca(L)2+通道的半数激活电压几乎未变,半数失活电压向去极化方向移动2．42 mV(P>0．05),提示PTX对抗性组神经细胞的影响不明显;(5)Cy-R组与Cy-S组神经细胞Ca(L)2+通道的半数激活电压和半数失活电压无显著性差异．结果提示:(1)棉铃虫神经细胞存在(Gαi／o)-AC- cAMP-PKA-Ca(L)2+通道信号传导途径;(2)PTX敏感的抑制性Gi／o蛋白的基础活性对棉铃虫神经细胞Ca(L)2+通道有影响;(3)PTX对敏感虫神经细胞的Ca(L)2+通道的影响较对抗性棉铃虫神经细胞Ca(L)2+通道的影响明显,提示抗性棉铃虫对拟除虫菊酯类� 展开更多

关键词 百日咳毒素 L型钙通道 Gαi/o蛋白 全细胞膜片钳技术 棉铃虫 抗性

下载PDF 职称材料

薯蓣皂苷对大鼠心室肌细胞钙离子通道的影响 被引量：7

15

作者 张铭慧 尹永强 +2 位作者 何海燕 康毅 娄建石 《中药药理与临床》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期23-26,共4页

目的:研究薯蓣皂苷对正常大鼠心室肌细胞L-钙电流(ICa,L)的影响,旨在探讨薯蓣皂苷对心肌缺血再灌注(I/R)损伤保护作用的可能机制。方法:酶解法分离大鼠单个心室肌细胞,应用全细胞膜片钳技术记录薯蓣皂苷低(10μg/ml)、中(20μg/ml)、高... 目的:研究薯蓣皂苷对正常大鼠心室肌细胞L-钙电流(ICa,L)的影响,旨在探讨薯蓣皂苷对心肌缺血再灌注(I/R)损伤保护作用的可能机制。方法:酶解法分离大鼠单个心室肌细胞,应用全细胞膜片钳技术记录薯蓣皂苷低(10μg/ml)、中(20μg/ml)、高(30μg/ml)三个剂量对大鼠单个心室肌细胞ICa,L的影响。结果:薯蓣皂苷10μg/ml不影响ICa,L峰值,而20μg/ml和30μg/ml能使ICa,L峰值降低,抑制呈剂量依赖性;20μg/ml和30μg/ml薯蓣皂苷使I-V曲线上移,内向电流减小,但基本不改变曲线的形状。30μg/ml薯蓣皂苷使失活曲线向负电位方向变化,曲线左移,各剂量均对激活曲线无影响。结论:薯蓣皂苷通过促进ICa,L失活的过程抑制正常大鼠心室肌细胞I,减小I峰值,这可能是其抗缺血再灌所致心律失常的作用机制之一。 展开更多

关键词 薯蓣皂苷 心肌细胞 心肌缺血 钙通道 全细胞膜片钳技术

原文传递