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广东地区两种兰花病毒病害的分子鉴定及检测 被引量：32
1
作者 周国辉 陈晓琴 +5 位作者 李梅辉 周洁浪 唐添华 冯盛祥 郭丽晶 张旺 《中国病毒学》 CAS CSCD 2004年第2期149-152,共4页
根据已报道的建兰花叶病毒(CyMV)和齿兰环斑病毒(ORSV)基因组核苷酸序列,在其cp基因上下游设计PCR引物。CyMV预计扩增产物784bp,ORSV预计扩增产物604bp。以采集自广东省顺德的墨兰和文心兰表现病毒病症状的病株叶组织总RNA为模板,进行RT... 根据已报道的建兰花叶病毒(CyMV)和齿兰环斑病毒(ORSV)基因组核苷酸序列,在其cp基因上下游设计PCR引物。CyMV预计扩增产物784bp,ORSV预计扩增产物604bp。以采集自广东省顺德的墨兰和文心兰表现病毒病症状的病株叶组织总RNA为模板,进行RT-PCR扩增。对预期大小的5个扩增产物进行克隆和测序,结果表明,来源于不同兰种或同一兰种不同兰场的病样CyMV引物扩增产物核苷酸序列存在少量差异,但均与世界各地的CyMV分离物cp基因高度同源;而来源于不同兰种的病样ORSV引物扩增产物核苷酸序列完全相同,与世界各地的ORSV分离物cp基因高度同源。因此可将侵染广东兰花的两种病毒鉴定为CyMV和ORSV。混合上述两种病毒的 PCR引物,采用双重RT-PCR扩增,对采自广东顺德23个兰场共153份样品进行病毒检测,76份(49.7%)检出CyMV,52份(34.0%)检出ORSV,2份(1.3%)同时检出CyMV和ORSV。 展开更多
关键词 广东地区 兰花 病毒病害 分子鉴定 检测 建兰花叶病毒 CyMV 齿兰环斑病毒 ORSV 基因组 核苷酸序列
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基因芯片技术检测黄瓜花叶病毒、烟草花叶病毒和马铃薯Y病毒 被引量：19
2
作者 贾慧 王艳辉 +2 位作者 王进忠 王升启 董金皋 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2011年第1期83-86,共4页
黄瓜花叶病毒、烟草花叶病毒和马铃薯Y病毒是世界性分布的重要植物病毒,对农业生产危害较大。农作物感病多为复合侵染,症状表现较为复杂,急需建立快速、准确、能够一次检测多种病毒的检测方法。本研究根据3种病毒的外壳蛋白基因序列,设... 黄瓜花叶病毒、烟草花叶病毒和马铃薯Y病毒是世界性分布的重要植物病毒,对农业生产危害较大。农作物感病多为复合侵染,症状表现较为复杂,急需建立快速、准确、能够一次检测多种病毒的检测方法。本研究根据3种病毒的外壳蛋白基因序列,设计引物和探针,制备基因芯片;用Cy3标记下游引物,RT-PCR扩增产物与芯片杂交,荧光扫描仪检测并分析信号。结果表明,该芯片可以从病毒侵染样本中检测到特异性识别信号,检测灵敏度比RT-PCR高10～100倍,该技术能对植物病毒做出快速、准确的检测。 展开更多
关键词 黄瓜花叶病毒 烟草花叶病毒 马铃薯Y病毒 基因芯片 检测
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基因芯片技术及口蹄疫病毒基因芯片研究进展 被引量：16
3
作者 王建东 郭建宏 +1 位作者 杨春生 刘在新 《动物医学进展》 CSCD 2007年第B08期37-40,共4页
口蹄疫的暴发与流行给世界各国的畜牧生产、社会经济和国际贸易构成严重威胁并造成巨大的经济损失,经典的血清学和PCR检测方法越来越不适应进出口动物检疫的快速、准确、高通量的要求。建立一种快速的诊断方法,使其在很短时间能够区别... 口蹄疫的暴发与流行给世界各国的畜牧生产、社会经济和国际贸易构成严重威胁并造成巨大的经济损失,经典的血清学和PCR检测方法越来越不适应进出口动物检疫的快速、准确、高通量的要求。建立一种快速的诊断方法,使其在很短时间能够区别各血清型口蹄疫和其他水泡性疾病是非常必要的。口蹄疫病毒基因芯片包括155个寡核苷酸探针,总长35bp～45bp,设计在VP3-VP1-2A区,既有共有的病毒型别,也包含特异的血清型别。这项技术的优点是能在单一的芯片上检测多元病原体。 展开更多
关键词 口蹄疫病毒 基因芯片 检测
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检测猪伪狂犬病病毒gE抗体红细胞凝集试验的建立及应用 被引量：11
4
作者 廖文军 吴健敏 +4 位作者 覃绍敏 袁书智 陈凤莲 华俊 谢彬 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2010年第2期162-165,共4页
以纯化的抗人红细胞单链抗体(ScFv)—猪伪狂犬病病毒(PRV)gE蛋白双功能融合蛋白为抗原,建立了检测猪伪狂犬病毒gE抗体的红细胞凝集试验。利用方阵滴定试验筛选出最佳抗原工作浓度为55μg/mL,血清最佳稀释度为1∶20,作用时间15 min,与猪... 以纯化的抗人红细胞单链抗体(ScFv)—猪伪狂犬病病毒(PRV)gE蛋白双功能融合蛋白为抗原,建立了检测猪伪狂犬病毒gE抗体的红细胞凝集试验。利用方阵滴定试验筛选出最佳抗原工作浓度为55μg/mL,血清最佳稀释度为1∶20,作用时间15 min,与猪瘟(CSF)、猪细小病毒(PPV)、猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)、猪乙型脑炎(JE)、猪布氏杆菌病(Brucellosis)阳性血清和PRV gE缺失疫苗接种的猪免疫血清均不出现红细胞凝集现象,与PRV标准阳性血清反应出现肉眼可见的凝集圈。与美国进口的PRV抗体检测gE-ELISA诊断试剂盒检测结果比较,50份猪血清的阴、阳性检出符合率均为100%。红细胞凝集试验检测方法具有操作简便、敏感性和特异性较高的特点,可用于PRV野毒感染的快速筛查。 展开更多
关键词 猪伪狂犬病病毒 红细胞凝集试验 GE基因 抗体检测
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猪伪狂犬病病毒gE抗体胶体金免疫层析检测方法的建立及应用 被引量：9
5
作者 廖文军 吴健敏 +4 位作者 谭攀 覃绍敏 陈凤莲 马玲 张伟 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2010年第9期12-16,32,共6页
以纯化的抗人红细胞单链抗体(ScFv)-猪伪狂犬病病毒(PRV)gE蛋白双功能融合蛋白为诊断抗原和胶体金标记物,以羊抗猪IgG包被硝酸纤维膜作为质控带,制作检测猪伪狂犬病毒gE抗体的双抗原胶体金试纸条。利用方阵滴定试验筛选出金标抗原最佳... 以纯化的抗人红细胞单链抗体(ScFv)-猪伪狂犬病病毒(PRV)gE蛋白双功能融合蛋白为诊断抗原和胶体金标记物,以羊抗猪IgG包被硝酸纤维膜作为质控带,制作检测猪伪狂犬病毒gE抗体的双抗原胶体金试纸条。利用方阵滴定试验筛选出金标抗原最佳工作浓度为17.6μg,检测线诊断抗原最佳标记量为1.76μg,血清最佳稀释度为1∶10,作用时间15 min,与猪瘟病毒(CSFV)、猪细小病毒(PPV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪乙型脑炎病毒(JEV)、猪布鲁菌(Brucella)阳性血清和PRVgE缺失疫苗接种的猪免疫血清检测线均不出现红色条带,与PRV标准阳性血清反应检测线出现红色条带。试纸条操作简单,肉眼于15 min内可判定结果;试纸条在室温保存6个月,其特异性和敏感性没有明显变化;与美国IDEXX和法国LSI gE-ELISA抗体检测诊断试剂盒检测结果比较,1 164份猪血清的符合率均为90.55%。制备的胶体金试纸条具有操作简便、敏感性和特异性较高的特点,可用于PRV野毒感染的快速筛查。 展开更多
关键词 伪狂犬病毒 金标免疫层析法 GE基因 抗体检测
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不同方法抽提血清HBVDNA得率的比较 被引量：8
6
作者 徐文胜 缪晓辉 +2 位作者 潘怡 吴文雅 孔宪涛 《肝脏》 2001年第4期219-221,共3页
目的　比较不同的HBVDNA抽提方法对PCR产物量的影响。方法　将HBVDNA阳性血清及投入了HBVDNA质粒的HBVDNA阴性血清 ,分别采用 7种不同方法抽提核酸。抽提物作PCR后 ,产物行琼脂糖凝胶电泳 ,并对阳性扩增条带进行密度定量。结果　血清直... 目的　比较不同的HBVDNA抽提方法对PCR产物量的影响。方法　将HBVDNA阳性血清及投入了HBVDNA质粒的HBVDNA阴性血清 ,分别采用 7种不同方法抽提核酸。抽提物作PCR后 ,产物行琼脂糖凝胶电泳 ,并对阳性扩增条带进行密度定量。结果　血清直接煮沸法、经典的蛋白酶裂解加酚 /氯仿抽提法、蛋白酶裂解加酚 /氯仿抽提法省缺乙醇沉淀和柱抽提法的HBVDNA抽提得率分别为 75 .2 %、13.8%、2 1.9%和 31.0 %;用碱变性裂解和蛋白酶裂解后煮沸所得上清液 ,以及血清直接作为模板 ,行PCR后不能得到阳性扩增条带。结论　核酸抽提方法选择不当能直接影响基因检测的灵敏度 ,导致基因定量准确性下降。血清直接煮沸法抽提HBVDNA得率高、操作简便、省时和经济 ,值得推荐。 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒 基因检测 聚合酶链反应 抽提方法 HBV-DNA
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南京六合地区女性HPV感染状况分析 被引量：9
7
作者 陈小伟 胡利萍 阮福明 《检验医学与临床》 CAS 2018年第23期3549-3552,共4页
目的调查该地区女性人乳头瘤病毒(HPV)感染及其亚型的分布情况。方法采用实时荧光聚合酶链反应(PCR)技术,对2016年2月至2018年2月在该院妇科就诊的5 737例女性宫颈分泌物进行HPV检测并统计分析。结果 5 737例女性感染HPV的有1 105例,感... 目的调查该地区女性人乳头瘤病毒(HPV)感染及其亚型的分布情况。方法采用实时荧光聚合酶链反应(PCR)技术,对2016年2月至2018年2月在该院妇科就诊的5 737例女性宫颈分泌物进行HPV检测并统计分析。结果 5 737例女性感染HPV的有1 105例,感染率为19.26%,其4个年龄组:≤30岁、>30～40岁、>40～50岁和>50岁女性HPV感染率分别为20.22%、19.09%、17.70%和21.53%,其中>40～50岁与>50岁年龄组女性HPV感染率差异有统计学意义(P<0.05)。1 105例HPV感染患者中,HPV单一感染的有802例(72.58%);多重感染的有303例(27.42%),以双重感染为主(219例)。1 105例HPV感染标本中共检测出HPV亚型1 537个(多重感染重复计数),其中高危型HPV共1 372例(89.26%),低危型165例(10.74%),HPV感染率排在前5位的基因型分别是HPV-52(3.68%)、HPV-16(2.96%)、HPV-53(2.75%)、HPV-58(2.63%)和HPV-81(1.83%)。结论六合地区女性感染较高的高危型HPV亚型依次为HPV-52、HPV-16、HPV-53和HPV-58型,低危型感染较多的是HPV-81型。HPV感染率随年龄增长呈"U"型变化。 展开更多
关键词 人乳头瘤病毒 宫颈癌 基因检测
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H7N9禽流感病毒基因检测技术研究进展 被引量：9
8
作者 张赛 陆军 《医学综述》 2015年第12期2226-2228,共3页
2013年3月在上海和安徽两省市率先发现人感染H7N9禽流感病例,现已累计报告数百例病例。H7N9禽流感病毒因其对人类的高致病性和迅速的传播速度引起全球的广泛关注。快速、准确的检测对H7N9禽流感的疫情监测和控制极为重要。该文就目前应... 2013年3月在上海和安徽两省市率先发现人感染H7N9禽流感病例,现已累计报告数百例病例。H7N9禽流感病毒因其对人类的高致病性和迅速的传播速度引起全球的广泛关注。快速、准确的检测对H7N9禽流感的疫情监测和控制极为重要。该文就目前应用于H7N9禽流感病毒研究中的基因检测技术(包括聚合酶链反应、环介导等温扩增、基因芯片、液相芯片、依赖核酸序列扩增法、高通量测序等)的研究进展予以综述。 展开更多
关键词 禽流感病毒 H7N9 基因检测技术
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10种猪常见病毒基因芯片检测方法的建立及初步应用 被引量：8
9
作者 罗宁 王群 +8 位作者 张小龙 房保海 姜帆 石玲玲 王冬冬 杨宗统 王守春 徐彪 尹燕博 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第10期2249-2260,共12页
旨在建立一种可同步检测猪10种常见疫病病毒,猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)、猪瘟病毒(classical swine fever virus,CSFV)、猪伪狂犬病病毒(pseudorabies virus,PRV)、猪圆环病... 旨在建立一种可同步检测猪10种常见疫病病毒,猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)、猪瘟病毒(classical swine fever virus,CSFV)、猪伪狂犬病病毒(pseudorabies virus,PRV)、猪圆环病毒2型(porcine circovirus 2,PCV2)、猪细小病毒(porcine parvovirus,PPV)、猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(transmissible gastroenteritis virus of swine,TGEV)、猪流感病毒(swine influenza virus,SIV)、猪巨细胞病毒(porcine cytomegalovirus,PCMV)和口蹄疫病毒(food-and-mouth disease virus,FMDV)的基因芯片检测技术,为临床病料的初步诊断及流行病学调查提供一个新的可靠方法。对10种病毒基因的序列进行分析,设计引物对靶基因进行PCR扩增,将纯化后的靶基因点制成芯片,通过Cy3标记特异性引物扩增病毒得到具有荧光标记的探针,然后与芯片进行杂交,扫描分析结果,建立其基因芯片检测方法,并对该方法的特异性、敏感性和稳定性进行检测。应用建立的基因芯片检测方法和普通PCR/RT-PCR方法对1 006份样品进行符合检测。试验结果表明,基因芯片检测10种病毒特异性好、灵敏度高,最低检测限度可达10^(5 )copies·μL^(-1),检测中,基因芯片与普通PCR/RT-PCR对1 006份临床样品的检测符合率为96.79%以上。初步研究表明,该基因芯片技术可同时同步检测10种猪疫病病毒,可应用于临床病料的初步诊断。 展开更多
关键词 猪病毒 PCR 基因芯片 检测
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检测伪狂犬病毒gB基因荧光定量PCR方法的建立 被引量：8
10
作者 朱淑芬 朱瑞良 +5 位作者 乔彩霞 高志强 张利峰 张鹤晓 吴亚琼 王慧珊 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第10期1413-1417,共5页
利用DNAMAN软件对GenBank登录的伪狂犬病病毒(PRV)各毒株gB基因序列进行比对分析,选择其保守区域设计合成特异性的引物和TaqMan探针,同时利用普通PCR技术扩增获得全长的伪狂犬病毒gB基因,并克隆到pMD20-T载体上作为阳性标准品。通过对... 利用DNAMAN软件对GenBank登录的伪狂犬病病毒(PRV)各毒株gB基因序列进行比对分析,选择其保守区域设计合成特异性的引物和TaqMan探针,同时利用普通PCR技术扩增获得全长的伪狂犬病毒gB基因,并克隆到pMD20-T载体上作为阳性标准品。通过对荧光定量PCR反应条件的优化,建立了一种快速检测伪狂犬病病毒的荧光定量PCR技术。该检测技术具有较高的灵敏性、特异性和可靠性。对制备的pMD-gB阳性标准品的检测结果表明,所建立的伪狂犬病毒TaqMan荧光定量PCR最低检测极限可达1.50×102拷贝/反应;同时相比于普通PCR方法其灵敏度高100～1 000倍以上,并且重复性好。在对60份临床样品的检测中,荧光定量PCR不仅检出了普通PCR检测为阳性的样品,且检出了2份普通PCR未检出的样品,进一步证实了该方法快速、灵敏性好,可用于PRV感染的早期快速定量检测和肉类食品进出口检疫。 展开更多
关键词 伪狂犬病毒 GB基因 荧光定量PCR 检测
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193份大豆品系对SMV抗性鉴定与分子标记检测 被引量：7
11
作者 王大刚 陈圣男 +3 位作者 黄志平 吴倩 胡国玉 李杰坤 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2019年第24期8138-8151,共14页
大豆花叶病毒(soybean mosaic virus,SMV)是中国最主要的大豆病害之一,了解大豆对SMV的抗性,掌握SMV抗病基因的分布,可为合理种植抗病品种提供理论依据。本研究采用SMV株系SC3和SC7,接种鉴定193份大豆品系对SMV的抗性,同时利用分子标记... 大豆花叶病毒(soybean mosaic virus,SMV)是中国最主要的大豆病害之一,了解大豆对SMV的抗性,掌握SMV抗病基因的分布,可为合理种植抗病品种提供理论依据。本研究采用SMV株系SC3和SC7,接种鉴定193份大豆品系对SMV的抗性,同时利用分子标记检测不同品系所含的抗病基因位点。结果表明,鉴定品系中对SC3和SC7分别表现高抗的有28份和31份,占14.51%和16.06%;均表现高抗的有15份,占7.77%。标记检测结果显示,感病对照‘南农1138-2’和54份品系中未检测到抗病基因位点;检测到1个和2个抗病基因位点的品系数分别有26份和41份,中抗以上的分别为13份和25份,占50.00%和60.98%;含有3个及以上抗病基因位点的品系数有72份,中抗以上的有65份,占90.28%,表现感病型(感病和高感)的仅4份,占5.56%。总之,含抗病位点较多的品系对SMV株系抗性强的品系数多,今后应育成多基因聚合的持久抗性大豆品种。 展开更多
关键词 大豆 大豆花叶病毒 抗病鉴定 抗病基因 分子检测
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包皮环切术在防治夫妻共患高危型人乳头瘤病毒感染中的作用 被引量：7
12
作者 赵学英 刘学伟 +1 位作者 李莉蕊 宋志超 《中国医药导报》 CAS 2016年第16期38-41,共4页
目的 探讨包皮环切术在防治夫妻共患高危型人乳头瘤病毒（HPV）感染中的作用。方法 选择2012年1月～2014年12月于华北石油管理局总医院就诊的120对夫妻,经检测夫妻双方均为高危型HPV感染,且男方均患有包皮过长。56对男性行包皮环切术的... 目的 探讨包皮环切术在防治夫妻共患高危型人乳头瘤病毒（HPV）感染中的作用。方法 选择2012年1月～2014年12月于华北石油管理局总医院就诊的120对夫妻,经检测夫妻双方均为高危型HPV感染,且男方均患有包皮过长。56对男性行包皮环切术的夫妻为手术组,64对男性未行包皮环切术的夫妻为对照组,1年后复查HPV感染情况。结果 两组夫妻入组时高危型HPV的感染状况差异无统计学意义（P〉0.05）。1年后复测,男性转阴率手术组为41.1%（23/56）,对照组为21.9%（14/64）,差异有统计学意义（P〈0.05）;女性转阴率手术组37.5%（21/56）,对照组20.3%（13/64）,组间差异有统计学意义（P〈0.05）。夫妻共同转阴率手术组23.2%（13/56）,对照组6.3%（4/64）,组间差异有统计学意义（P〈0.05）。结论 男性包皮环切术是减少男性自身和其配偶高危型HPV患病率和发病率的有效措施,在防治女性高危型HPV感染相关癌症中具有一定的作用。 展开更多
关键词 人乳头瘤病毒 包皮环切术 病毒清除 基因检测
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H7N9亚型禽流感综合防控技术现状分析与对策研究 被引量：7
13
作者 黄珍霞 廖晓东 《中国卫生事业管理》 北大核心 2015年第12期949-952,共4页
文章全面梳理了国内外H7N9亚型禽流感综合防控技术研究发展现状,通过分析研究国内禽流感病毒检测技术、疫苗研发技术、药物治疗技术、消毒与禽类饲养技术的专利申请现状,并针对H7N9亚型禽流感综合防控技术存在的问题,提出树立综合防控... 文章全面梳理了国内外H7N9亚型禽流感综合防控技术研究发展现状,通过分析研究国内禽流感病毒检测技术、疫苗研发技术、药物治疗技术、消毒与禽类饲养技术的专利申请现状,并针对H7N9亚型禽流感综合防控技术存在的问题,提出树立综合防控技术观,形成防控技术集成体系;强化病毒研究,开发新药物靶标;开发并储备特异性疫苗,应对病毒变异风险等对策建议。 展开更多
关键词 禽流感 H7N9 防控技术 基因检测技术
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逆转录-聚合酶链反应检测风疹病毒基因 被引量：6
14
作者 陈国亮 卢亦愚 严菊英 《中国计划免疫》 2003年第2期72-74,共3页
针对风疹患者发病早期血清中特异性风疹IgM抗体阳性率低的特点 ,以及对胎儿风疹病毒感染检测的需要 ,采用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)直接从风疹减毒活疫苗BRDⅡ株、风疹GOS株、临床风疹患者的含漱液和咽拭子中检测出 411bp特异性片... 针对风疹患者发病早期血清中特异性风疹IgM抗体阳性率低的特点 ,以及对胎儿风疹病毒感染检测的需要 ,采用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)直接从风疹减毒活疫苗BRDⅡ株、风疹GOS株、临床风疹患者的含漱液和咽拭子中检测出 411bp特异性片段 ;而麻疹、流行性腮腺炎、流行性感冒病毒均未检测出相应片段。通过对RT PCR一次产物的再次扩增 ,可以使检测的灵敏度达到 0 1TCID50 。该技术可作为风疹酶联免疫吸附试验 (ELISA)的一种补充 ,同时对控制先天性风疹综合征与优生优育工作具有积极的作用。 展开更多
关键词 逆转录-聚合酶链反应 检测 风疹病毒基因 风疹
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乙型流行性感冒病毒的基因快速检测 被引量：6
15
作者 严菊英 卢亦愚 王立新 《中国卫生检验杂志》 CAS 2004年第4期402-404,共3页
〔目的〕建立乙型流行性感冒病毒的核酸快速诊断技术。〔方法〕采用RT -PCR方法对乙型流感病毒的HA基因进行检测 ,我们对乙型流感病毒的HA基因保守区域设计相关引物 ,进行扩增 ,并作了特异性与灵敏度比较。〔结果〕该引物只能扩增乙型... 〔目的〕建立乙型流行性感冒病毒的核酸快速诊断技术。〔方法〕采用RT -PCR方法对乙型流感病毒的HA基因进行检测 ,我们对乙型流感病毒的HA基因保守区域设计相关引物 ,进行扩增 ,并作了特异性与灵敏度比较。〔结果〕该引物只能扩增乙型流感病毒的特异性片段 ,而对其它型别的流感病毒以及麻疹、风疹、腮腺炎病毒无交叉反应。检测的灵敏度一次PCR可达 1TCID50 ,二次PCR反应可达 0 .1TCID50 。〔结论〕采用该方法从临床患者含漱液标本中的检出率 ,比采用MDCK细胞分离的阳性率更高 ,可达到迅速、正确地诊断乙型流感的实用目的。 展开更多
关键词 乙型流行性感冒病毒 基因检测 RT-PCR 快速诊断
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伪狂犬病毒gB基因的研究进展 被引量：6
16
作者 邹伟斌 陈晓珍 +3 位作者 陈丹 谢少霞 朱炜斌 齐冬梅 《广东畜牧兽医科技》 2016年第4期9-13,共5页
伪狂犬病毒(Pseudorabies virus,PRV)主要感染猪,能够引起感染动物的死亡和流产,给世界养猪业带来了严重危害。随着分子生物学的发展,伪狂犬病毒的研究取得了显著进展。综述了PRV的主要保护性抗原基因g B的结构特点和功能研究进展以及... 伪狂犬病毒(Pseudorabies virus,PRV)主要感染猪,能够引起感染动物的死亡和流产,给世界养猪业带来了严重危害。随着分子生物学的发展,伪狂犬病毒的研究取得了显著进展。综述了PRV的主要保护性抗原基因g B的结构特点和功能研究进展以及其编码的糖蛋白g B在PRV疫苗研究和伪狂犬病防控研究中取得的进展。 展开更多
关键词 伪狂犬病毒 g B基因 PCR检测 ELISA检测 基因工程疫苗
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基因芯片检测鱼类病毒的方法建立与优化 被引量：6
17
作者 王胜强 耿伟光 +2 位作者 李晋 粟子丹 史成银 《中国动物检疫》 CAS 2015年第7期77-81,84,共6页
本研究建立并优化了一种基因芯片检测方法，可以同步检测7种重要的海水养殖鱼类病毒（淋巴囊肿病毒、细胞肿大病毒属虹彩病毒、赤点石斑鱼神经坏死病毒、传染性造血器官坏死病毒、传染性胰脏坏死病毒、病毒性出血败血症病毒、传染性鲑... 本研究建立并优化了一种基因芯片检测方法，可以同步检测7种重要的海水养殖鱼类病毒（淋巴囊肿病毒、细胞肿大病毒属虹彩病毒、赤点石斑鱼神经坏死病毒、传染性造血器官坏死病毒、传染性胰脏坏死病毒、病毒性出血败血症病毒、传染性鲑贫血病毒）。该基因芯片包含10条病毒特异性的寡核苷酸探针（25~30 mer）分别与病毒的CP、N、VP5、G、NS、MA等基因位点互补。将各病毒基因探针以50% DMSO稀释至20μmol/L，使用PersonalArrayer 16个人点样仪在醛基修饰玻片上点样，然后与Cy3标记的扩增产物在47℃条件下杂交1.5 h，最后在LuxScan 10K扫描仪上采集荧光信号、判断检测结果。初步应用表明，该基因芯片检测方法具有良好的特异性和可靠性，在鱼类病毒高通量检测技术领域有广泛的应用前景。 展开更多
关键词 病毒 基因芯片 高通量检测 鱼类
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猪伪狂犬病毒纳米PCR检测方法的建立 被引量：6
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作者 张悦勇 南文龙 +4 位作者 秦立得 巩明霞 吴发兴 单虎 陈义平 《中国动物检疫》 CAS 2017年第3期102-105,共4页
[目的 ]快速灵敏检测猪伪狂犬病毒(PRV)[方法 ]根据PRV g B基因设计特异性引物,建立了PRV纳米PCR检测方法。[结果 ]PRV纳米PCR方法的最低检出限为10拷贝/μL,其敏感性比未添加纳米金的对照PCR提高100倍;建立的纳米PCR与猪细小病毒、猪... [目的 ]快速灵敏检测猪伪狂犬病毒(PRV)[方法 ]根据PRV g B基因设计特异性引物,建立了PRV纳米PCR检测方法。[结果 ]PRV纳米PCR方法的最低检出限为10拷贝/μL,其敏感性比未添加纳米金的对照PCR提高100倍;建立的纳米PCR与猪细小病毒、猪圆环病毒Ⅱ型、猪繁殖与呼吸综合征病毒等常见猪病毒性病原均无交叉反应。应用纳米PCR和PRV国家标准中的PCR方法,对2014—2016年期间采集自17个省市发病猪场的148份临床样品进行平行检测,PRV纳米PCR的阳性检出率为49.3%(73/148),PRV国标PCR方法的阳性检出率为23.6%(35/148),并且PRV纳米PCR检测为阳性,而PRV国标PCR方法检测为阴性的38份样品,测序结果均确认为PRV阳性。[结论 ]本研究建立的纳米PCR检测方法敏感特异,可用于猪伪狂犬病的病原学检测。 展开更多
关键词 猪伪狂犬病毒 纳米PCR g B基因
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环介导等温扩增技术与横向流动试纸条法快速检测鸡贫血病毒的研究 被引量：5
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作者 李秀梅 石瑜 +3 位作者 朱雅宁 袁雪涛 杨爱华 杨颖 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2018年第1期25-31,共7页
本研究将环介导等温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)与横向流动试纸条技术(lateral flow dipstick,LFD)联合应用,针对鸡贫血病毒Cux-1 VP2基因设计了4条特异性引物和1条异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyana... 本研究将环介导等温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)与横向流动试纸条技术(lateral flow dipstick,LFD)联合应用,针对鸡贫血病毒Cux-1 VP2基因设计了4条特异性引物和1条异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanate,FITC)标记的探针,并对其反应条件进行优化,建立了一种快速、便捷的鸡贫血病毒LAMP-LFD检测方法。结果显示,优化后的扩增温度和时间为63℃反应50 min,完成检测全过程仅需80 min。该方法检测灵敏度为10 fg,是利用外引物建立的PCR方法的100倍;可特异性地检出鸡贫血病毒;重复性、稳定性好。对30份样品的病毒分离鉴定和LAMP-LFD检测表明,二者符合率为100%。本研究建立的LAMP-LFD方法能够快速、特异地检测鸡贫血病毒,并且不需要其他辅助仪器,结果可直观判断,适合基层实验室、应急检测或现场监测等使用。 展开更多
关键词 鸡贫血病毒 VP2基因 环介导等温扩增 横向流动试纸条 检测
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乙型肝炎病毒基因变异与临床 被引量：5
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作者 耿颖 张建军 《医学综述》 2008年第4期544-546,共3页
HBV在多种因素影响下发生基因变异,以实现自身生存的目的。乙型肝炎病毒(HBV)基因变异对慢性乙型肝炎患者病情发展、严重程度以及对抗病毒治疗效果都有一定的影响。随着聚合酶链反应及其扩增产物直接测序等分子生物学技术的应用和发展,... HBV在多种因素影响下发生基因变异,以实现自身生存的目的。乙型肝炎病毒(HBV)基因变异对慢性乙型肝炎患者病情发展、严重程度以及对抗病毒治疗效果都有一定的影响。随着聚合酶链反应及其扩增产物直接测序等分子生物学技术的应用和发展,使人们能够从分子水平认识病毒及其变异,包括HBV不同基因区段变异的频率和类型。本文就HBV基因变异、临床意义及其检测方法的最新研究进展做一综述。 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒 基因变异 检测方法
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