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山东地区肠道病毒中枢神经系统感染187例分析 被引量：33
1
作者 陈宗波 范希文 +2 位作者 董永绥 孙金峤 刘远昌 《中华儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期199-202,共4页
目的　探讨山东地区中枢神经系统肠道病毒 (EV)感染的实验和临床特点。方法　采用逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)和病毒培养技术 ,检测 187例临床诊断为无菌性脑膜炎病人的脑脊液 (CSF)和部分病人的血清及尿液标本中EVRNA。结果　 187例... 目的　探讨山东地区中枢神经系统肠道病毒 (EV)感染的实验和临床特点。方法　采用逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)和病毒培养技术 ,检测 187例临床诊断为无菌性脑膜炎病人的脑脊液 (CSF)和部分病人的血清及尿液标本中EVRNA。结果　 187例无菌性脑膜炎患儿中 ,CSF中RT PCR和病毒培养同时阳性者 62例 (3 3 16% ) ;病毒培养阴性的 12 5例中 ,RT PCR阳性 93例 (74% ) ;此 93例中 ,4例同时在血清或尿分离到EV。本实验中 ,RT PCR检测EV脑膜炎的阳性率为 82 89%(15 5 / 187) ,而病毒培养的阳性率为 3 3 16% (62 / 187)。包括EVRNA的提取 ,RT PCR的全部过程在4小时内可以完成 ,而病毒培养繁杂 ,平均需要 4 6天得出结果。肠道病毒脑膜炎可以散发或局部暴发 ,临床特点在各个年龄组有所不同 ,5岁以内者以发热、呕吐、激惹多见 ,5岁以上者以头痛、畏光、疲劳、肌痛多见。结论　EV是山东地区无菌性脑膜炎最常见的病原体 ,临床症状一般较轻、无特异性 ;RT PCR检测能快速、敏感的诊断EV感染 ;快速确诊可减少抗生素的应用和住院天数 。 展开更多
关键词 山东地区 肠道病毒中枢神经系统感染 逆转录聚合酶链反应 病毒培养 临床特点 诊断 治疗 病毒性脑膜炎
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流感病毒实验室检测方法研究进展 被引量：21
2
作者 王江 徐轶 +2 位作者 陈俊峰 解立新 磨国鑫 《中华医院感染学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期308-312,共5页
流感是目前严重威胁人类健康的疾病之一。准确和早期诊断流感病毒感染对迅速开展抗病毒治疗至关重要,可减少季节性流行和大流行期间相关发病率和病死率。目前常见的流感病毒检测方法有病毒培养、抗原检测、核酸检测、血清学和二代测序... 流感是目前严重威胁人类健康的疾病之一。准确和早期诊断流感病毒感染对迅速开展抗病毒治疗至关重要,可减少季节性流行和大流行期间相关发病率和病死率。目前常见的流感病毒检测方法有病毒培养、抗原检测、核酸检测、血清学和二代测序技术等。本研究就上述方法在流感病毒中的应用进行综述。 展开更多
关键词 流感病毒 实验室诊断 病毒培养 抗原检测 核酸检测 血清学检测 二代测序
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2013—2015年度甘肃省流感病毒病原学特征分析 被引量：13
3
作者 李保娣 李红育 +2 位作者 张慧 于德山 何健 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 2016年第5期448-451,共4页
目的分析甘肃省2013-2015年流行性感冒（流感）的流行特征，为今后的流感防控工作提供科学依据。方法采集全省19家国家级流感监测哨点医院门诊流感样病例（influenza-like illness，ILI）的咽拭子，以荧光定量PCR方法检测病毒核酸，核... 目的分析甘肃省2013-2015年流行性感冒（流感）的流行特征，为今后的流感防控工作提供科学依据。方法采集全省19家国家级流感监测哨点医院门诊流感样病例（influenza-like illness，ILI）的咽拭子，以荧光定量PCR方法检测病毒核酸，核酸检测阳性标本用犬肾细胞（MDCK）进行病毒分离培养鉴定。结果对37 332份ILI咽拭子进行流感病毒核酸检测，阳性5 928份，阳性率为15.88%；2013年第14周-2016年第13周三个监测年度流感病毒核酸阳性率依次为14.52%、12.36%和20.15%。按年龄组分析，〈5岁婴幼儿阳性率最低为12.78%，显著低于其他年龄组；15-24岁阳性率最高为24.75%。对6 285份标本进行了流感病毒分离，分离到流感病毒1 630株，检出率为25.93%，其中395株甲型H1N1、524株季节性H3N2、342株乙型Victorian系、367株乙型Yamagata系。结论甘肃省流感病毒型别表现为交替流行规律，应积极采取综合性防控措施。 展开更多
关键词 流感病毒 人群监测 病毒培养 聚合酶链反应
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致急性呼吸道感染人腺病毒的体外感染特性初步比较 被引量：13
4
作者 陈诗颖 樊晔 +2 位作者 张玲 田新贵 周荣 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期741-747,共7页
致急性呼吸道感染人腺病毒(Human adenoviruses,HAdV)的型别特异性体外感染可能与细胞因子诱导的差异有关,并推测型别特异性体外感染可能与肺细胞中型别特异性细胞因子的诱导有关。为了比较致急性呼吸道感染人腺病毒3型、5型、7型和55... 致急性呼吸道感染人腺病毒(Human adenoviruses,HAdV)的型别特异性体外感染可能与细胞因子诱导的差异有关,并推测型别特异性体外感染可能与肺细胞中型别特异性细胞因子的诱导有关。为了比较致急性呼吸道感染人腺病毒3型、5型、7型和55型的体外感染特性,临床分离多株人腺病毒3型、7型和55型接种人肺腺癌细胞(A549细胞)或人胚肺成纤维细胞(MRC-5细胞),比较其感染滴度;将人腺病毒3型、5型、7型和55型毒株接种MRC-5细胞和A549细胞进行空斑试验,比较其空斑形成以及大小、形态;接种感染MRC-5细胞,分别于感染后10h和26h收集细胞培养上清,用人炎症细胞因子抗体芯片同步检测10个主要炎症相关细胞因子包括IL-1α、IL-1β、IL-4、IL-6、IL-8、IL-10、IL-13、MCP-1、IFN-γ以及TNF-α的表达水平并进行分析。结果显示,与MRC-5细胞相比,A549细胞对这几种人腺病毒更加敏感;人腺病毒55型毒株与其它型别相比产毒量较高。人腺病毒在MRC-5细胞上难以形成空斑,而用A549细胞进行的空斑试验显示人腺病毒5型和55型毒株有较高的空斑形成单位,并且形成的空斑为规则的圆形且边缘清晰,空斑直径较大;而人腺病毒7型和3型毒株感染滴度较低,人腺病毒7型形成的空斑大小不均匀,形状不规则,人腺病毒3型形成的空斑直径很小,呈点状。炎症细胞因子检测结果显示,与正常对照组相比,野生型人腺病毒55型表达差异的炎症细胞因子是IL-1α、IL-1β和TNF-α;改造的人腺病毒3型感染MRC-5细胞后,两个时间点的各炎症细胞因子基本低表达。与正常对照组相比,人腺病毒感染MRC-5细胞后表达有差异的炎症细胞因子主要为IL-6和IL-8。 展开更多
关键词 人腺病毒(HAdV) 病毒培养 人胚肺成纤维细胞(MRC-5细胞) 抗体芯片 炎症细胞因子
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用微载体培养Vero细胞制备狂犬疫苗 被引量：11
5
作者 李平忠 沈伟 +3 位作者 余芬 温嘉纳 黄成 孙明波 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第23期2374-2376,共3页
目的研究微载体培养Vero细胞生产狂犬疫苗。方法搅拌式生物反应器培养Vero细胞,待细胞在微载体上长成单层后,用狂犬病毒aG株感染细胞。培养5d后,开始灌流收获病毒液,每天取样测定病毒滴度。经灭活后制备成试验疫苗,进行效力试验。结果3... 目的研究微载体培养Vero细胞生产狂犬疫苗。方法搅拌式生物反应器培养Vero细胞,待细胞在微载体上长成单层后,用狂犬病毒aG株感染细胞。培养5d后,开始灌流收获病毒液,每天取样测定病毒滴度。经灭活后制备成试验疫苗,进行效力试验。结果3次培养,细胞密度均达到1×106/ml以上,病毒滴度都在106LD50以上,3批试验疫苗的效价分别达到5.88、6.49和5.98IU/ml。结论在生物反应罐中用微载体培养Vero细胞制备狂犬疫苗工艺合理,所获免疫原性良好,适用于工业化生产,有较好的应用前景。 展开更多
关键词 生物反应器 细胞培养 病毒培养 狂犬疫苗
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人副流感病毒的快速分离培养与鉴定 被引量：10
6
作者 秦笙 伍时冠 +4 位作者 孟少伟 郑贵星 陈德晖 李际强 陈茶 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2016年第8期858-861,共4页
目的副流感病毒是婴幼儿下呼吸道感染的重要病原体，为快速准确诊断副流感病毒感染，文中探讨一种从鼻拭子快速分离培养及鉴定副流感病毒的方法。方法采集0—5岁诊断为急性呼吸道感染的患儿鼻拭子标本，以3000r／min离心1h接种至96孔板... 目的副流感病毒是婴幼儿下呼吸道感染的重要病原体，为快速准确诊断副流感病毒感染，文中探讨一种从鼻拭子快速分离培养及鉴定副流感病毒的方法。方法采集0—5岁诊断为急性呼吸道感染的患儿鼻拭子标本，以3000r／min离心1h接种至96孔板预制LLC—MK2细胞以及按照传统培养法进行接种，最后补充含4ug/mLTPCK胰酶的病毒维持培养基。每天观察细胞病变，培养第2、5、8天分别作血吸附、血凝试验，试验阳性时作免疫荧光鉴定。结果从83份鼻拭子标本中分离鉴定6株副流感病毒，阳性率7．2％。离心培养法与传统培养法在标本培养2d后其分离率分别为7．2％和0，差异有统计学意义（P〈0．05）。阳性标本感染的细胞镜下可见局部变长、融合、破碎的细胞病变，血凝试验4℃凝集而室温不凝集，血吸附试验4℃阳性而室温阴性，免疫荧光可见细胞内特异性苹果绿荧光。结论快速分离培养方法可最快在2d内从鼻拭子标本中获得有毒力和生物活性的副流感病毒并进行鉴定。 展开更多
关键词 副流感病毒 分离培养 病毒鉴定
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呼吸道感染人腺病毒的分离培养和型别鉴定 被引量：8
7
作者 王瑞琨 商蕾 +4 位作者 王迎晨 金玉霞 齐桂云 黄冬娟 曲章义 《哈尔滨医科大学学报》 CAS 北大核心 2013年第5期385-387,F0004,共4页
目的从临床呼吸道感染样品中分离人腺病毒毒株并进行型别鉴定。方法将经免疫荧光检测确认为人腺病毒感染的痰标本经处理后接种宫颈癌HeLa细胞进行培养,用空斑试验进行病毒分离和纯化。从纯化后的毒株中提取DNA作为模板,用PCR法扩增腺病... 目的从临床呼吸道感染样品中分离人腺病毒毒株并进行型别鉴定。方法将经免疫荧光检测确认为人腺病毒感染的痰标本经处理后接种宫颈癌HeLa细胞进行培养,用空斑试验进行病毒分离和纯化。从纯化后的毒株中提取DNA作为模板,用PCR法扩增腺病毒六邻体高变区基因,对扩增产物进行核酸序列测定,测序结果运用基本局部比对搜索工具以确定其型别。结果从临床样品中分离到一株人腺病毒毒株,其六邻体基因高变区序列同人3型腺病毒六邻体基因的同源性为100%。结论从哈尔滨地区呼吸道感染患者痰标本中分离到人3型腺病毒一株。 展开更多
关键词 腺病毒 呼吸道感染 病毒培养 空斑试验 PCR
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呼吸道感染人腺病毒的分离及鉴定 被引量：7
8
作者 宁莉莉 孙颖 +4 位作者 齐桂云 黄冬娟 韩珊珊 王迎晨 曲章义 《哈尔滨医科大学学报》 CAS 北大核心 2012年第4期329-331,共3页
目的进行呼吸道感染人腺病毒的分离以及型别鉴定。方法标本来源于本实验室检测腺病毒阳性的1例呼吸道感染临床患者痰标本,将该例标本经处理后接种肺癌A549细胞进行病毒培养,用空斑实验进行病毒的分离和纯化,以纯化后的病毒核酸提取物为... 目的进行呼吸道感染人腺病毒的分离以及型别鉴定。方法标本来源于本实验室检测腺病毒阳性的1例呼吸道感染临床患者痰标本,将该例标本经处理后接种肺癌A549细胞进行病毒培养,用空斑实验进行病毒的分离和纯化,以纯化后的病毒核酸提取物为模板用PCR方法扩增腺病毒六邻体蛋白基因,对扩增产物进行序列测定,测序结果进行BLAST序列分析确定其型别。结果分离到一株人腺病毒毒株,对其六邻体蛋白基因PCR产物测序和BLAST分析结果证明该腺病毒株的六邻体序列与人7型腺病毒六邻体基因同源性均为100%。结论从哈尔滨地区呼吸道感染患者痰标本中检测到的1例腺病毒经分离鉴定为人腺病毒7型。 展开更多
关键词 腺病毒 病毒培养 空斑实验:PCR
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不同方法检测急性呼吸道感染患儿咽拭子与鼻拭子标本诊断呼吸道合胞病毒感染的评价 被引量：6
9
作者 秦笙 刘文宽 +3 位作者 原铁 李际强 陈茶 陈德晖 《中国当代医药》 2016年第21期118-120,133,共4页
目的比较不同方法检测急性呼吸道感染患儿咽拭子与鼻拭子标本的检测结果。方法收集2011年3月-2012年2月本院临床诊断为急性呼吸道感染的315名患儿的咽拭子和鼻拭子标本，采用实时荧光定量qPCR法和传统病毒培养鉴定两种方法同时检测病毒... 目的比较不同方法检测急性呼吸道感染患儿咽拭子与鼻拭子标本的检测结果。方法收集2011年3月-2012年2月本院临床诊断为急性呼吸道感染的315名患儿的咽拭子和鼻拭子标本，采用实时荧光定量qPCR法和传统病毒培养鉴定两种方法同时检测病毒核酸或抗原，比较其结果。结果病毒培养鉴定方法中的鼻拭子和咽拭子阳性率分别为12．1％、6．7％，鼻拭子阳性率高于咽拭子（P〈0．01）。qPCR检测中的鼻拭子阳性率分别为17．1％和6．9％，鼻拭子阳性率高于咽拭子（P〈0．01）。鼻拭子和咽拭子标本分别用两种检测方法进行比较，qPCR的阳性率均高于病毒培养鉴定方法（P〈0．01）。以咽拭子培养与鉴定呼吸道合胞病毒（RSV）结果为标准，鼻拭子培养与鉴定、鼻拭子qPCR检测、咽拭子qPCR检测的敏感性分别为57％、91％、24％；特异性分别为91％、88％、94％。结论鼻拭子标本检测RSV的敏感度高于相应的口咽拭子，且qPCR方法检测RSV的敏感度高于传统病毒培养鉴定法。 展开更多
关键词 呼吸道合胞病毒 实时荧光定量PCR病毒培养与鉴定 鼻咽拭子
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应用KMB17细胞培养柯萨奇病毒B族1、2、3型的研究
10
作者 邓自君 靳玮华 +16 位作者 李艳艳 张伟 杨凤梅 张名 陈丽雄 徐鸿界 李明学 刘权 唐洁 段素琴 孙文亭 李咏洁 马绍辉 赵远 杨明 和占龙 杨净思 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2024年第1期10-14,共5页
目的 采用人胚肺二倍体细胞(human embryonic lung diploid cell)KMB17株对柯萨奇病毒B族(Coxsackievirus B,CVB)1、2、3型进行适应性培养,探索应用KMB17细胞培养CVB1-3型病毒的相关参数,为基于KMB17细胞研发CVB多价疫苗提供参考。方法 ... 目的 采用人胚肺二倍体细胞(human embryonic lung diploid cell)KMB17株对柯萨奇病毒B族(Coxsackievirus B,CVB)1、2、3型进行适应性培养,探索应用KMB17细胞培养CVB1-3型病毒的相关参数,为基于KMB17细胞研发CVB多价疫苗提供参考。方法 将CVB 1-3型分别设置8个不同的感染复数(mulitiplicity of infection, MOI)梯度(0.05、0.1、0.15、0.2、0.25、0.3、0.35、0.4),在KMB17细胞上进行培养观察,对病毒培养结果进行统计分析。结果 CVB 1-3型病毒均能KMB17细胞中复制,并使细胞产生明显的细胞病变(cytopathic effect, CPE)。其中CVB 1型在KMB17细胞上适宜的种毒MOI值为0.25~0.3,病毒收获液的平均滴度为7.25 lgCCID50/mL,适宜MOI范围内病毒培养时间的95%置信区间为96.1~97.6 h;CVB 2型在KMB17细胞上适宜的种毒MOI值为0.20~0.25,病毒收获液平均滴度为7.375 lgCCID50/mL,适宜MOI范围内病毒培养时间的95%置信区间为74.8~76.8 h。CVB 3型在KMB17细胞上适宜的种毒MOI值为0.30~0.35,病毒收获液的平均滴度为7.25 lgCCID50/mL,适宜MOI范围内病毒培养时间的95%置信区间为82.7~84.7 h。结论 KMB17为一株理想的用于CVB1、2、3型培养的基质细胞,可为基于KMB17细胞研发CVB多价疫苗提供参考。 展开更多
关键词 KMB17细胞 柯萨奇病毒B 1、2、3型 病毒培养
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人7型腺病毒的分离与鉴定 被引量：6
11
作者 杨金峰 商蕾 +7 位作者 董妥 齐桂云 王迎晨 高虹 刘振卫 于惠崧 郭微媛 曲章义 《哈尔滨医科大学学报》 CAS 北大核心 2014年第5期353-357,共5页
目的对哈尔滨医科大学附属第二医院呼吸道感染患者的痰或咽拭子标本进行检测、分离鉴定和分型。方法应用直接免疫荧光法对标本进行初步筛检,将筛检得到的腺病毒阳性标本接种到A549细胞进行病毒培养,并用空斑法进行纯化。采用PCR技术扩... 目的对哈尔滨医科大学附属第二医院呼吸道感染患者的痰或咽拭子标本进行检测、分离鉴定和分型。方法应用直接免疫荧光法对标本进行初步筛检,将筛检得到的腺病毒阳性标本接种到A549细胞进行病毒培养,并用空斑法进行纯化。采用PCR技术扩增腺病毒五邻体、六邻体基因,将扩增的PCR产物进行基因测序,并将测序结果 BLAST比对,初步判断其型别。结果从采集的标本中分离到1株人腺病毒毒株。BLAST比对五邻体、六邻体测序结果,表明该毒株与人7型腺病毒五邻体、六邻体的同源性为100%,初步判定该毒株为人7型腺病毒。结论从哈尔滨医科大学附属第二医院呼吸道感染患者的痰或咽拭子标本中分离到1株人7型腺病毒。 展开更多
关键词 直接免疫荧光 腺病毒 病毒培养 空斑试验
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辛德比斯病毒和伪狂犬病毒制备方法的优化 被引量：3
12
作者 王卓妍 任芙蓉 +3 位作者 周锡鹏 许金波 吕秋霜 龚晓燕 《中国输血杂志》 CAS CSCD 2008年第11期852-854,共3页
目的优化辛德比斯病毒(Sindbis virus)和伪狂犬病毒(Pseudorabies virus,PRV)的培养和制备方法,建立高效价病毒制备方法。方法从选用不同宿主细胞、不同的宿主细胞培养方式、以及不同的病毒悬液收集方式3方面考察病毒效价。病毒效价测... 目的优化辛德比斯病毒(Sindbis virus)和伪狂犬病毒(Pseudorabies virus,PRV)的培养和制备方法,建立高效价病毒制备方法。方法从选用不同宿主细胞、不同的宿主细胞培养方式、以及不同的病毒悬液收集方式3方面考察病毒效价。病毒效价测定采用细胞病变法,按Karber氏法计算病毒效价。结果用非洲绿猴肾(Vero)细胞培养的Sindbis病毒效价(8.63±0.45)明显高于用幼仓鼠肾(BHK)细胞培养的病毒效价(7.63±0.30)(P<0.05);用Vero细胞培养的PRV效价(8.13±0.59)也明显高于用BHK细胞培养的病毒效价(6.94±0.71)(P<0.05);宿主细胞长满单层后继续换液培养或再传代培养2种提高病毒效价的方式所制备的病毒效价(7.69±0.98vs 7.54±0.69)的差异无统计学意义(P>0.05),可任选其一;收获病毒时,直接收集培养悬液离心组(直收-冻组)病毒效价(8.66±0.83)较先冻融2次再离心组(冻-收-冻组)病毒效价(8.14±0.91)高(P<0.05)。结论建立了制备高效价Sindbis病毒和PRV的方法;制备Sindbis病毒和PRV宜选用Vero细胞;病毒培养悬液直接离心分装即可,既简化操作又可获高效价病毒。 展开更多
关键词 病毒培养 指示病毒 病毒效价 Sindbis病毒 伪狂犬病毒
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一株小反刍兽疫病毒的分离鉴定与生长曲线测定 被引量：4
13
作者 张永强 吴晓东 +3 位作者 邹艳丽 包静月 王筱真 王志亮 《中国动物检疫》 CAS 2015年第10期76-79,共4页
将含高滴度小反刍兽疫病毒的新鲜病料研磨后接种VERO DS细胞系进行病毒分离,出现细胞病变后连续传代,取3代以上培养物,进行RT-PCR和间接免疫荧光试验及生长曲线测定。生长曲线测定分别以0.01和0.1MOI接种VERO DS细胞,每隔12h测定病毒滴... 将含高滴度小反刍兽疫病毒的新鲜病料研磨后接种VERO DS细胞系进行病毒分离,出现细胞病变后连续传代,取3代以上培养物,进行RT-PCR和间接免疫荧光试验及生长曲线测定。生长曲线测定分别以0.01和0.1MOI接种VERO DS细胞,每隔12h测定病毒滴度,连续培养168h,绘制病毒生长曲线,分析生长特性。结果显示,病料接种细胞72h后,出现细胞病变,经RT-PCR和间接免疫荧光试验鉴定为小反刍兽疫病毒;生长特性研究显示,0.01和0.1 MOI两种病毒接种量,病毒滴度最高均为106 TCID50左右,但峰值出现时间和下降速度存在差异,0.01 MOI接种量出现峰值晚,但是维持高滴度时间较长。本文成功分离一株小反刍兽疫病毒,并对两种接毒量的生长特性差异进行了初步分析,为探索该病毒培养方法和收毒时间提供了借鉴。 展开更多
关键词 小反刍兽疫病毒 病毒分离 病毒培养 TCID50 生长曲线
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大黄鱼肿大细胞病毒不同毒株的细胞培养及主要衣壳蛋白基因比较 被引量：1
14
作者 杨西西 池洪树 +5 位作者 郑在予 刘晓东 罗潘潘 许斌福 陈秀霞 龚晖 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第9期145-154,共10页
为建立大黄鱼肿大细胞病毒的培养方法,明确其分类地位,用肿大细胞病毒检测呈阳性的大黄鱼幼鱼病料(FD201807和SA201808)肾组织匀浆液感染鳜仔鱼细胞系(mandarin fish fry cell line-1,MFF-1)并连续传代,从病料组织匀浆液和细胞冻融液中... 为建立大黄鱼肿大细胞病毒的培养方法,明确其分类地位,用肿大细胞病毒检测呈阳性的大黄鱼幼鱼病料(FD201807和SA201808)肾组织匀浆液感染鳜仔鱼细胞系(mandarin fish fry cell line-1,MFF-1)并连续传代,从病料组织匀浆液和细胞冻融液中提取病毒DNA,克隆病毒主要衣壳蛋白基因(mcp),测序后与NCBI GenBank中的虹彩病毒科肿大细胞病毒属病毒mcp以及2018—2020年所检出的15株大黄鱼肿大细胞病毒mcp进行比对分析。结果显示,病毒传至第4代才可引起MFF-1细胞病变,细胞病变的主要特征为细胞脱壁、变圆、折光度增强;感染时间越长脱壁细胞越多,同时培养液中的颗粒增加;透射电镜下可见感染细胞的细胞质散在大小为130~150 nm的六边形病毒粒子和空壳。感染细胞的病变周期随传代代次的增加而缩短,第15代次的FD201807株感染细胞80%细胞病变的时间为3 d,第15代次的SA201808株感染细胞80%细胞病变的时间为7~8 d。mcp序列比对和聚类分析发现,SA201808株与FD201807株的mcp序列存在21个碱基差异,二者的mcp序列分别与大黄鱼虹彩病毒(largeyellowcroakeriridovirus,LYCIV)LYCIVZhoushan(GenBank:MW139932.1)和花鲈虹彩病毒(Lateolabrax maculatus iridovirus,LMIV)(GenBank:MH577517.1)相近。15株从大黄鱼病料检出的肿大细胞病毒中,12株的mcp序列与SA201808株聚类;3株与FD201807聚类。本研究利用MFF-1细胞系分离培养了大黄鱼肿大细胞病毒,揭示了大黄鱼肿大细胞病毒存在差异,为更好地了解大黄鱼肿大细胞病毒提供了数据参考。 展开更多
关键词 大黄鱼 肿大细胞病毒 细胞培养 主要衣壳蛋白
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流行性感冒病毒检测方法的研究进展 被引量：4
15
作者 赵娣伟 《职业与健康》 CAS 2014年第11期1553-1555,共3页
近几年,流行性感冒(流感)在全球范围频繁暴发,2009年暴发了甲型流感(甲流),2013年又暴发了H7N9的禽流感疫情,势必会威胁着动物和人类的生存和社会的经济的发展,从而使医学工作者关注的焦点转移到流感病毒的鉴定上,所以建立快速、高效的... 近几年,流行性感冒(流感)在全球范围频繁暴发,2009年暴发了甲型流感(甲流),2013年又暴发了H7N9的禽流感疫情,势必会威胁着动物和人类的生存和社会的经济的发展,从而使医学工作者关注的焦点转移到流感病毒的鉴定上,所以建立快速、高效的流感病毒检测方法,对于流感患者的临床诊断、有效及时的治疗有着非常重大的意义。作者综述了国内外流感病毒的检测方法,主要有血清免疫学检测、流感病毒分离培养、流感病毒核酸检测、环介导等温扩增法、基因芯片技术等。但每一种方法都有一定的优点和不足。随着科学技术水平的提高,更多的方法将应用到流感病毒检测中,同时方法间的互相融合更加提升了现有的检测水平,从而一定会在流感的监测、控制和预防工作中发挥更为积极有效的作用。 展开更多
关键词 流感病毒 病毒培养 免疫学检测 核酸检测
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3种检测生殖器疱疹方法的对比研究 被引量：3
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作者 张帆 莫银娟 朱丽婷 《检验医学与临床》 CAS 2015年第21期3182-3183,3185,共3页
目的寻找更为准确、经济、实用的生殖器疱疹病毒感染的检测方法。方法取根据病史及典型的临床症状表现的生殖器疱疹疑似病例患者标本50例,分别采用病毒培养、荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)及酶联免疫吸附试验(ELISA)3种方法进行实验室检... 目的寻找更为准确、经济、实用的生殖器疱疹病毒感染的检测方法。方法取根据病史及典型的临床症状表现的生殖器疱疹疑似病例患者标本50例,分别采用病毒培养、荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)及酶联免疫吸附试验(ELISA)3种方法进行实验室检测,比较各种方法检测的阳性率。结果病毒培养阳性30例,阳性率60.0%;FQ-PCR检测阳性34例,阳性率68.0%;ELISA检测阳性32例,阳性率64.0%,经χ2检验,三者差异无统计学意义(χ2=0.69,P>0.05)。水疱和脓疱标本的阳性率分别为94.6%和83.3%,明显高于其他来源标本的阳性率。结论 3种检测方法对临床疑似生殖器疱疹患者的检测阳性率差异无统计学意义(P>0.05)。相对另外两种检测方法,ELISA因其便宜、实用的优点而适用于临床推广应用。水疱和脓疱标本阳性率明显高于其他类型标本的阳性率,对临床疑似病例的实验诊断,标本以采集水疱和脓疱液为佳。 展开更多
关键词 生殖器疱疹 病毒培养 荧光定量聚合酶链反应 酶联免疫吸附试验
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HIV毒株分离及体外感染实验研究 被引量：3
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作者 黎志东 徐志凯 《中国艾滋病性病》 CAS 2003年第2期70-72,共3页
目的　从艾滋病病毒 (HIV)感染者 (万某 )分离获得HIV毒株 ,应用此毒株在体外攻击与HIV感染者长期无保护性行为未引发感染者 (张某 )及健康人的淋巴细胞 ,检测病毒感染细胞情况 ,研究抗感染保护的机制。方法　采用RT测定法和P2 4抗原检... 目的　从艾滋病病毒 (HIV)感染者 (万某 )分离获得HIV毒株 ,应用此毒株在体外攻击与HIV感染者长期无保护性行为未引发感染者 (张某 )及健康人的淋巴细胞 ,检测病毒感染细胞情况 ,研究抗感染保护的机制。方法　采用RT测定法和P2 4抗原检测法。将HIV感染者淋巴细胞与健康人淋巴细胞共培养 ,并将获得的HIV毒株体外攻击张某及健康人的淋巴细胞 ,分别观察细胞病变并检测P2 4抗原及逆转录酶的活性。结果　从万某血中分离获得了HIV 1毒株 ,连续 8周显微镜观察 ,从第 2周开始可见HIV特有的细胞病变 ,逆转录酶的活性检测和P2 4抗原检测结果从第 2周为阳性 ,说明病毒分离成功。健康人淋巴细胞自HIV 1感染后 2周开始 ,显微镜可观察到HIV 1特有的细胞病变 ,逆转录酶的活性检测和P2 4抗原检测结果均为阳性 ,表明HIV侵入。张某的淋巴细胞在HIV感染后显微镜下观察 ,始终未见特有的细胞病变 ,逆转录酶的活性检测和P2 4抗原检测结果均为阴性 ,表明HIV病毒未侵入细胞。结论　分离的毒株可以感染健康人淋巴细胞 ,说明病毒本身无变异 ;病毒不能侵入张某的淋巴细胞 ,可能是其淋巴细胞表面HIV 1受体或辅受体的基因或功能发生突变 ,导致病毒无法侵入机体。 展开更多
关键词 HIV毒株 分离 体外感染 实验研究 艾滋病病毒
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肠道病毒71型在Vero细胞中培养条件的优化 被引量：3
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作者 陈丽 江元翔 +2 位作者 夏德镇 杨志建 张高峡 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2013年第1期105-108,共4页
目的优化肠道病毒71型(Enterovirus 71,EV71)在Vero细胞中的培养条件。方法分别采用吸附法和直接接种法将EV71接种于Vero细胞中进行增殖,检测病毒滴度;选择最佳接种方法接种病毒,考察血清浓度、收毒方式、病毒接种量(MOI)和收毒时间对... 目的优化肠道病毒71型(Enterovirus 71,EV71)在Vero细胞中的培养条件。方法分别采用吸附法和直接接种法将EV71接种于Vero细胞中进行增殖,检测病毒滴度;选择最佳接种方法接种病毒,考察血清浓度、收毒方式、病毒接种量(MOI)和收毒时间对病毒滴度的影响。结果将MOI为0.02～0.2的病毒直接接种于不含血清的培养基中,培养60 h,胞外收毒,可获得较高的病毒滴度。结论优化了EV71在Vero细胞中的培养条件,为EV71的大规模培养及其疫苗研发奠定了基础。 展开更多
关键词 肠道病毒71型 VERO细胞 病毒培养
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新型甲型H7N9禽流感病毒实验室检测及防控策略 被引量：2
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作者 赵娣伟 《中国城乡企业卫生》 2015年第5期45-47,共3页
2013年3月中国报道了首例因感染新型甲型H7N9流感病毒而致死的病例,引发疫情的H7N9禽流感病毒是一种鸟类的禽流感病毒毒株基因重配的新型病毒,该病毒是首次从人群中发现的一种新型H7N9亚型禽流感病毒,也是全球首次发现的新亚型流感病毒... 2013年3月中国报道了首例因感染新型甲型H7N9流感病毒而致死的病例,引发疫情的H7N9禽流感病毒是一种鸟类的禽流感病毒毒株基因重配的新型病毒,该病毒是首次从人群中发现的一种新型H7N9亚型禽流感病毒,也是全球首次发现的新亚型流感病毒。禽流感是一种新亚型、起病急、进展快、致死率高等为特点的急性传染病,新型H7N9病毒最显著的特征之一是在家禽中无明显致病性,却能感染人类并引起较高的病死率。可以预见这种新型H7N9亚型禽流感还将会持续并引起严重的公共卫生问题,必须对此加以高度重视,建立健全防控体系建设和联动机制,加强健康教育工作,从而最大限度地减少禽流感对人类健康和生命的危害。本文对该病毒的病原学特点及实验室检测方法及防控策略进行简要综述。 展开更多
关键词 新型H7N9亚型禽流感病毒 核酸检测 病毒培养
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流行性出血热病毒在患者中枢神经系统中的定位研究 被引量：1
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作者 杨为松 姚志强 +1 位作者 张文彬 白雪帆 《第四军医大学学报》 1990年第2期112-114,共3页
作者应用免疫组化、反向间接血凝及病毒培养等技术,对25倒流行性出血热(EHF)患者中枢神经系统进行了病毒定位研究。EHF患者脑脊液中可检出可溶性病毒抗原(2/8);脑脊液中单核、淋巴细胞中病毒抗原亦为阳性(6/20);首次从患者脑脊液中分离... 作者应用免疫组化、反向间接血凝及病毒培养等技术,对25倒流行性出血热(EHF)患者中枢神经系统进行了病毒定位研究。EHF患者脑脊液中可检出可溶性病毒抗原(2/8);脑脊液中单核、淋巴细胞中病毒抗原亦为阳性(6/20);首次从患者脑脊液中分离到并鉴定为EHF病毒(4/25);进一步用多种染色方法(IFA,FA,PAP,ABC)在患者尸脑组织神经胶质细胞中发现病毒抗原荧光及酶染颗粒。以上结果证明EHF病毒可以穿过患者血脑屏障,侵入中枢神经系统造成感染。 展开更多
关键词 流行性出血热 病毒 中枢神经系统
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