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乙型肝炎病毒核心启动子及其上游顺序对其基因表达的调控 被引量：16
1
作者 傅磊 吴雪 +1 位作者 孔玉英 汪垣 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第3期215-223,共9页
构建了线性化的、从基本核心启动子（Ｃｐ）开始并有不同长度Ｃｐ上游顺序的、含完整转录单元的ＨＢＶ基因组克隆，以研究Ｃｐ及其上游顺序对ＨＢＶ基因表达的调控及对ＨＢＶ子代ＤＮＡ复制的影响。发现从基本核心启动子Ｃｐ开始的ＨＢ... 构建了线性化的、从基本核心启动子（Ｃｐ）开始并有不同长度Ｃｐ上游顺序的、含完整转录单元的ＨＢＶ基因组克隆，以研究Ｃｐ及其上游顺序对ＨＢＶ基因表达的调控及对ＨＢＶ子代ＤＮＡ复制的影响。发现从基本核心启动子Ｃｐ开始的ＨＢＶ转录单元能够有效地起始３．５ｋｂｍＲ－ＮＡ转录。Ｃｐ上游ＥＮＩ顺序对子代ＤＮＡ复制有极强的刺激作用，而ＥＮⅡ更上游顺序对ＥＮⅡ的刺激作用又有所抑制，证明Ｃｐ的转录受其上游顺序的正负双重调控。另外，Ｃｐ上游还存在与ＨＢＶ基因表达的细胞专一性有关的调控顺序。 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒 核心启动子 上游调控顺序 表达
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萝卜磷脂氢谷胱甘肽过氧化物酶基因结构及其调控序列分析(英文) 被引量：6
2
作者 杨晓东 刘进元 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第7期649-656,共8页
磷脂氢谷胱甘肽过氧化物酶(PHGPx)是谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)家族的重要一员,是目前已知能直接保护生物膜免受过氧化损伤的唯一酶类.此前的研究表明,萝卜磷脂氢谷胱甘肽过氧化物酶基因(RsPHGPx)编码一个有生理功能的过氧化物酶,并且RsPH... 磷脂氢谷胱甘肽过氧化物酶(PHGPx)是谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)家族的重要一员,是目前已知能直接保护生物膜免受过氧化损伤的唯一酶类.此前的研究表明,萝卜磷脂氢谷胱甘肽过氧化物酶基因(RsPHGPx)编码一个有生理功能的过氧化物酶,并且RsPHGPx基因的表达可能受发育和环境胁迫信号的复杂调控.要深入了解该基因的表达调控机制首先必须阐明RsPHGPx基因的结构及其上游调控序列.DNA印迹表明萝卜RsPHGPx基因以单拷贝的形式存在于基因组中.以基因组DNA为模板,通过常规PCR与染色体步行相结合的方法克隆到了一段3.3kb长的RsPHGPx基因组序列.分析发现,该基因由7个外显子和6个内含子组成,所有内含子的剪切位点均符合真核生物GT-AG规则.另外还发现该基因的上游基因是生物素合成酶基因;位于RsPHGPx基因上游的调控序列只有不足300bp.这些结构特征与拟南芥AtGPX3基因极其相似.顺式作用元件的数据库搜索发现RsPHGPx基因的上游调控序列含有多个响应激素(如E-Box和W-Box)、胁迫(如转录因子MYB和MYC的结合位点)和光(如BoxⅡ和Ⅰ-Box)信号的元件.RNA印迹分析表明RsPHGPx基因的表达受到脱落酸(ABA)和连续光照(在黄化苗中)处理的负调控,受到冷胁迫(4℃)的正调控,这暗示了预测的顺式作用元件的调控作用.然而,除草剂paraquat对该基因表达的正调控作用,暗示了某些与氧化胁迫相关的未知元件的存在.这些结果进一步印证了RsPHGPx基因的表达受发育和环境胁迫信号复杂调控的推测.这是迄今为止首个关于植物PHGPx基因结构和上游调控序列的系统报道,为今后全面认识植物PHGPx基因的表达调控机制奠定了必要基础. 展开更多
关键词 萝卜 磷脂氢谷胱甘肽过氧化物酶 基因结构 上游调控序列 顺式作用元件
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瓜实蝇雄性决定因子基因MoY功能及其上游调控序列活性分析
3
作者 符竣凯 温健 +2 位作者 曹凤勤 颜日辉 林先武 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期339-345,共7页
【目的】本研究旨在鉴定瓜实蝇Zeugodacus cucurbitae雄性决定因子基因MoY上游调控序列,并探索该序列在胚胎早期驱动MoY表达对瓜实蝇性别决定的影响,为后续的瓜实蝇转基因品系的构建提供参考依据以及可用元件。【方法】使用基因组步移... 【目的】本研究旨在鉴定瓜实蝇Zeugodacus cucurbitae雄性决定因子基因MoY上游调控序列,并探索该序列在胚胎早期驱动MoY表达对瓜实蝇性别决定的影响,为后续的瓜实蝇转基因品系的构建提供参考依据以及可用元件。【方法】使用基因组步移法扩增瓜实蝇Y染色体连锁的MoY上游序列并测序,将获得的上游序列连接MoY的CDS区构建其驱动MoY表达的质粒;将MoY表达质粒注射进瓜实蝇新鲜的胚胎中,待胚胎孵化后观察成虫的表型以及性比并提取基因组DNA,通过使用基因组DNA扩增MoY以判断获得的MoY上游调控序列是否具有驱动MoY表达的功能,同时分析MoY在胚胎中的表达对性别决定的影响。【结果】克隆并获得瓜实蝇MoY上游1660 bp序列,构建该序列驱动MoY表达的质粒p1660。由注射胚胎发育而来的瓜实蝇雄成虫18头和雌成虫13头及另外发现3头成虫的生殖器发育异常且MoY的扩增结果为阴性,确认为间性个体。【结论】本研究通过对MoY进行基因组步移扩增发现所获得的瓜实蝇MoY上游调控序列具有驱动MoY表达的活性,当MoY于瓜实蝇胚胎早期表达可使原本发育为雌性的个体出现性别逆转的现象。 展开更多
关键词 瓜实蝇 MoY 上游调控序列 性别逆转 间性个体
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棉纤维蔗糖合酶基因SS3上游调控序列的克隆及其表达分析 被引量：1
4
作者 罗小英 肖月华 +5 位作者 李德谋 罗明 侯磊 李先碧 杨霞 裴炎 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期335-340,共6页
棉纤维蔗糖合酶基因SS3在棉纤维发育过程中起着重要作用.采用YADE技术克隆了该基因5′上游1717bp的调控区,该调控区含有典型的启动子核心元件TATA box ,以及TATC box、G box、GCN4 -motif、Prolamin box、Skn 1 likemotif、TCA element... 棉纤维蔗糖合酶基因SS3在棉纤维发育过程中起着重要作用.采用YADE技术克隆了该基因5′上游1717bp的调控区,该调控区含有典型的启动子核心元件TATA box ,以及TATC box、G box、GCN4 -motif、Prolamin box、Skn 1 likemotif、TCA element、HSE和O2 site等各种顺式调控元件和其他一些反应元件.将此序列和报告基因GUS融合在烟草、棉花中表达.组织化学分析结果显示棉花SuSyR序列启动GUS基因在烟草的子房、胎座、种子以及在棉花花蕾与棉铃中表达.在棉花花蕾蕾长为3mm、6mm、9mm和15mm花蕾中表达主要存在于雄蕊及雄蕊管、胎座等器官;在棉铃中,1DPA棉铃的花柱、花药、子房及胚珠中出现了蓝色,6DPA棉铃的子房及胚珠被染成蓝色,在2 0DPA的棉铃中蓝色只出现在胚珠及其纤维中、在胚珠中只有珠心被染成蓝色,在4 0DPA胚珠中只有纤维呈蓝色.研究结果揭示,棉花的SuSyR调控序列启动GUS基因主要在子房、胚珠和纤维等器官和主叶脉、茎微管束等输导组织中表达,在棉花中尤为明显,表明棉纤维蔗糖合酶基因SS3除参与棉花蕾铃发育、纤维素的合成外,还参与了光合产物的运输与分配过程. 展开更多
关键词 棉花蔗糖合成酶 上游序列 表达分析
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葡萄芪合酶基因家族上游调控序列分析 被引量：1
5
作者 王超霞 张雅丽 卢江 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期1-6,共6页
【目的】通过预测葡萄芪合酶(Stilbene synthase,STS)基因上游调控序列的顺式作用元件及分析不同STS基因上游调控序列,为进一步揭示STS基因在葡萄生长发育及胁迫应答过程中的作用提供理论依据。【方法】通过Plant CARE数据库,在线对欧... 【目的】通过预测葡萄芪合酶(Stilbene synthase,STS)基因上游调控序列的顺式作用元件及分析不同STS基因上游调控序列,为进一步揭示STS基因在葡萄生长发育及胁迫应答过程中的作用提供理论依据。【方法】通过Plant CARE数据库,在线对欧洲种葡萄PN40024全基因组里的48条STS基因上游调控序列及目前已报道来自其他葡萄品种(圆叶葡萄Noble、华东葡萄白河35-1和欧亚种葡萄无核白、红地球、赤霞珠等)的8条STS基因启动子序列进行顺式作用元件分析。【结果】STS基因上游调控区域含有多种顺式作用元件,可以分为过程特异元件、诱导子特异元件、结合位点特异元件、环境特异元件、植物组织特异元件、调控特异元件、光响应元件及转录相关元件八大类,其中与抗病相关且出现次数较多的元件有TCA-element、ABRE、ERF、P-box、Box-W1、TC-rich repeats等。STS基因上游调控序列中含有数量不同的作用元件,其中欧亚种佳丽酿Vv Pin STS26上游调控序列含有的顺式作用元件数量最多(49个),而Vv Pin STS24上游调控序列含有的顺式作用元件数量最少(2个)。【结论】葡萄STS基因家族大部分成员的表达受水杨酸、脱落酸、赤霉素、乙烯、真菌诱导子等因素影响,从而调节白藜芦醇参与葡萄生物胁迫或非生物胁迫的防御过程。 展开更多
关键词 葡萄 芪合酶 基因 顺式作用元件 上游调控序列
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满江红鱼腥藻glnA基因上游调控区的克隆及其序列分析
6
作者 高志环 刘祥林 +2 位作者 印莉萍 吴晓强 邱泽生 《北京师范学院学报（自然科学版）》 1998年第2期54-58,共5页
以满江红鱼腥藻（Ａａｃ）提取总ＤＮＡ为模板，通过ＰＣＲ技术，扩增得到其谷氨酰胺合成酶基因（ｇｌｎＡ）上游区．经酶切得到４０９ｂｐ的片段，并将其连接到ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔⅡｋｓ＋上测序．将测序结果与Ａｎａｂａｅｎａ７... 以满江红鱼腥藻（Ａａｃ）提取总ＤＮＡ为模板，通过ＰＣＲ技术，扩增得到其谷氨酰胺合成酶基因（ｇｌｎＡ）上游区．经酶切得到４０９ｂｐ的片段，并将其连接到ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔⅡｋｓ＋上测序．将测序结果与Ａｎａｂａｅｎａ７１２０调控序列比较，有９８２％的同源性．在上游调控中也具有ｎｉｆｌｉｋｅ和Ｅ．ｃｏｌｉｌｉｋｅ启动子，值得注意的是，调节蛋白ＶＦ１的结合位点正好位于ｎｉｆｌｉｋｅ启动子上．所克隆的片段不但对蓝藻固氮、泌氨的基因调控研究具有意义，也对表达载体的构建具有实用价值． 展开更多
关键词 满江红鱼腥藻 AAC glnA基因 上游调控区 克隆 序列分析 PCR技术 谷氨酰胺合成酶 GS 总DNA 结合位点
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玉米反式因子基因分离初报
7
作者 萧灿 金振华 马诚 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 1998年第10期977-980,共4页
发育是一个严格有序的选择性基因表达过程。在这一过程中，序列特异的反式因子（ｔｒａｎｓａｃｔｉｎｇｆａｃｔｏｒｓ）通过与基因调控序列中顺式调控元件（ｃｉｓａｃｔｉｎｇｅｌｅｍｅｎｔｓ）的互作启动基因转录，因此，它们... 发育是一个严格有序的选择性基因表达过程。在这一过程中，序列特异的反式因子（ｔｒａｎｓａｃｔｉｎｇｆａｃｔｏｒｓ）通过与基因调控序列中顺式调控元件（ｃｉｓａｃｔｉｎｇｅｌｅｍｅｎｔｓ）的互作启动基因转录，因此，它们又被称为转录因子［１］。基于这类因... 展开更多
关键词 DC59.5′上游调控序列 玉米cDNA表达文库 反式因子
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小麦中外源基因瞬间表达调控研究及兔防御素(NP-1)基因的转化 被引量：21
8
作者 郭殿京 傅荣昭 +4 位作者 李文彬 陈颖 张晓东 张利明 孙勇如 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 1999年第2期168-173,共6页
将不同５’上游调控序列驱动下的ＧＵＳ基因用基因枪法导入小麦幼胚和胚性愈伤组织，通过组织化学分析法和荧光分析法对ＧＵＳ基因的表达进行定量检测，比较了几种启动子和烟草花叶病毒（ＴＭＶ）增强子序列对小麦中外源基因瞬间表达的... 将不同５’上游调控序列驱动下的ＧＵＳ基因用基因枪法导入小麦幼胚和胚性愈伤组织，通过组织化学分析法和荧光分析法对ＧＵＳ基因的表达进行定量检测，比较了几种启动子和烟草花叶病毒（ＴＭＶ）增强子序列对小麦中外源基因瞬间表达的调控作用；然后将其中效率最高的玉米Ｕｂｉｌ启动子与兔防御素（ＮＰ－１）基因连接起来，并加上Ｎｏｓ终止子，构建成ＮＰ－１基因小麦表达载体，并转化小麦幼胚。经ＰＣＲ－Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ分析，初步确定ＮＰ－１基因已整合到小麦基因组中。转基因植株的抑菌试验正在进行中。 展开更多
关键词 小麦 外源基因 防御素基因 表达调控
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