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中国南方汉族散发早发性帕金森综合征的parkin基因突变分析 被引量:7
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作者 聂利珞 郭纪锋 +8 位作者 张海南 张学伟 王磊 罗林紫 沈璐 江泓 夏昆 唐北沙 严新翔 《中华神经科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第10期692-696,共5页
目的 探讨中国南方汉族散发早发性帕金森综合征(early onset parkinsonism,EOP)的parkin基因突变特点.方法 应用实时荧光定量PCR技术结合DNA直接测序技术对156例中国南方汉族散发EOP患者进行parkin基因突变分析.结果 19例患者parkin... 目的 探讨中国南方汉族散发早发性帕金森综合征(early onset parkinsonism,EOP)的parkin基因突变特点.方法 应用实时荧光定量PCR技术结合DNA直接测序技术对156例中国南方汉族散发EOP患者进行parkin基因突变分析.结果 19例患者parkin基因突变,包括15例杂合突变、2例纯合突变、2例复杂杂合突变.17例患者外显子重排突变,其中12例外显子缺失突变,5例外显子双重重复突变.此外,3例患者存在点突变和(或)小片段缺失突变,其中ⅣS9+18C>T、c.202-203delAG为已报道突变,c.813delT为未报道的新突变;parkin基因突变位点主要分布在其1~7号外显子.无parkin基因突变与有parkin基因突变的患者在临床表现及病情严重程度方面差异无统计学意义,但发病年龄[(40.9±6.8)岁与(35.5±10.0)岁,Z=-2.271,P=0.023)]、病程[(4.4±3.6)年与(7.6±4.0)年,Z=-3.680,P=0.000)]等方面差异有统计学意义.结论 中国南方汉族散发EOP患者parkin基因突变的频率为12.18%(19/156),外显子重排突变是其重要突变类型;外显子缺失突变是主要的突变形式;parkin基因1~7号外显子为突变热点.parkin基因突变与无parkin基因突变的EOP患者在临床表型上无明显差异,但其发病年龄较轻,病程较长,进展较缓慢. 展开更多
关键词 帕金森障碍 泛素蛋白连接酶类 有机化学品 聚合酶链反应 突变.
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靶向Cullin-RING E3泛素连接酶的抗肿瘤策略及相关药物研发进展 被引量:6
2
作者 俞卿 熊秀芳 孙毅 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期1-19,共19页
Cullin-RING E3泛素连接酶(CRL)是泛素-蛋白酶体系统的重要组分,参与催化蛋白质的泛素化,促进随后的蛋白质降解,从而影响细胞周期、细胞凋亡、DNA复制、信号转导等多种细胞生理活动,且在多种肿瘤细胞中异常活化。以MLN4924为代表的拟素... Cullin-RING E3泛素连接酶(CRL)是泛素-蛋白酶体系统的重要组分,参与催化蛋白质的泛素化,促进随后的蛋白质降解,从而影响细胞周期、细胞凋亡、DNA复制、信号转导等多种细胞生理活动,且在多种肿瘤细胞中异常活化。以MLN4924为代表的拟素化抑制剂的成功研发有力地证实了CRL是可行的抗肿瘤靶点,具有很好的药物研发潜力。近年来,不断有新的研究通过高通量筛选、基于计算机辅助的虚拟筛选或基于结构的药物设计技术寻找特异的CRL抑制剂,但由于CRL复合物具有多种亚单位,呈蛋白-蛋白相互作用和多变的蛋白构象,缺乏典型的小分子药物结合位点等特性,其相关药物研发仍面临巨大挑战。截至目前,CRL小分子抑制剂主要以研究最为透彻的SCF泛素连接酶复合体的底物识别亚基F-box蛋白家族为靶点。此外,也发现数个通过靶向UBE2M-DCN1相互作用,特异性阻断CRL3/CRL1拟素化,从而抑制CRL3/CRL1泛素连接酶活性的小分子化合物。另一方面,也有CRL激动剂的报道,主要见于植物生长素吲哚乙酸和免疫调节性酰亚胺类药物。此外,靶蛋白水解嵌合体(PROTAC)是一项靶向蛋白-蛋白相互作用的新技术,其通过特异性小分子抑制剂链接一个CRL E3泛素连接酶来精确降解特定促癌靶蛋白,已成为近年来利用E3泛素连接酶设计抗肿瘤靶向药物的热点。 展开更多
关键词 泛素蛋白连接酶类 抗肿瘤/治疗学 Cullin-RING E3泛素连接酶 酶抑制剂 酶激动剂类 靶蛋白水解嵌合体 综述
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泛素连接酶Pirh2与恶性肿瘤相关性的研究进展 被引量:6
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作者 邱艳艳 董兰兰 +3 位作者 朱果果 刘永娟 何小华 刘万红 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期369-373,共5页
泛素连接酶Pirh2(p53-induced RING-H2 protein)是一种具有E3连接酶活性的新蛋白,能促进p53发生泛素化而降解,从而使p53抑制肿瘤生长的功能减弱或消失,导致肿瘤发生和进一步恶化。近年来研究发现,多种恶性肿瘤中Pirh2蛋白的表达量有明... 泛素连接酶Pirh2(p53-induced RING-H2 protein)是一种具有E3连接酶活性的新蛋白,能促进p53发生泛素化而降解,从而使p53抑制肿瘤生长的功能减弱或消失,导致肿瘤发生和进一步恶化。近年来研究发现,多种恶性肿瘤中Pirh2蛋白的表达量有明显变化,这提示Pirh2在恶性肿瘤的发生、发展中可能具有重要的作用;Pirh2可能作为一个癌基因,在肿瘤发生过程中调节一些信号转导通路。因此,推测Pirh2可作为肿瘤基因治疗的一个潜在靶点。本文就Pirh2与恶性肿瘤相关性的最新研究进展作一简要综述。 展开更多
关键词 肿瘤形成过程 泛素蛋白连接酶类 肿瘤抑制蛋白质P53 PIRH2
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HECT型E3泛素连接酶在肿瘤中作用的研究现状和进展 被引量:4
4
作者 刘志敏 柏斗胜 +2 位作者 张弛 王谦 彭睿 《国际外科学杂志》 2020年第2期135-138,共4页
肿瘤的发生和发展是多因素、多步骤的复杂过程。而泛素化是多步级联的蛋白质修饰过程,是维持真核细胞内稳态的重要机制。其中E3泛素连接酶家族是泛素-蛋白酶体系统的重要成分,可催化多种蛋白底物的泛素化,促进其被蛋白酶体系统降解。迄... 肿瘤的发生和发展是多因素、多步骤的复杂过程。而泛素化是多步级联的蛋白质修饰过程,是维持真核细胞内稳态的重要机制。其中E3泛素连接酶家族是泛素-蛋白酶体系统的重要成分,可催化多种蛋白底物的泛素化,促进其被蛋白酶体系统降解。迄今为止,E3泛素连接酶在多种肿瘤细胞生物学过程中发挥着重要作用,包括细胞增殖、凋亡及周期调控。而HECT型E3泛素连接酶作为E3泛素连接酶最早被研究的一种,其主要参与蛋白质翻译后转录调控的泛素化修饰过程。本文就HECT型E3泛素连接酶及其在肿瘤中作用的现状和最新研究进展进行综述。 展开更多
关键词 泛素蛋白连接酶类 肿瘤 治疗应用 HECT型E3酶
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胰腺癌中Ring1B、LSD1及P16表达及其与预后的关系 被引量:5
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作者 陈辉星 陈实 +3 位作者 李小燕 陈明源 严茂林 黄龙 《中国普通外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第9期1148-1154,共7页
目的:探讨胰腺癌中E3泛素连接酶亚单位Ring1B、组蛋白赖氨酸特异性去甲基化酶1(LSD1)及细胞周期调节因子P16表达与及其与患者预后的关系。方法:用免疫组化法检测85例胰腺癌患者手术标本(癌组织与癌旁组织)中LSD1、Ring1B与P16蛋白的表... 目的:探讨胰腺癌中E3泛素连接酶亚单位Ring1B、组蛋白赖氨酸特异性去甲基化酶1(LSD1)及细胞周期调节因子P16表达与及其与患者预后的关系。方法:用免疫组化法检测85例胰腺癌患者手术标本(癌组织与癌旁组织)中LSD1、Ring1B与P16蛋白的表达及分布,并选取其中6对癌组织和癌旁组织,用qRT-PCR和Western blot法检测mRNA和蛋白表达;分析三者在胰腺癌组织中表达的相关性,及其与患者生存的关系。结果:免疫组化结果显示,Ring1B与LSD1蛋白主要表达于细胞浆,P16主要表达于胞核;Ring1B与LSD1在胰腺癌组织中表达明显高于癌旁组织,而P16的表达明显低于癌旁组织(均P<0.05);在胰腺癌组织中Ring1B、LSD1的表达与P16的表达均呈负相关(r=-476;r=-0.673,均P<0.05)。qRTPCR结果显示,胰腺癌组织中Ring1B和LSD1的mRNA的平均相对表达量均明显高于癌旁组织(8.908vs.1.947;7.126 vs.1.940,均P<0.05),P16的mRNA的平均相对表达量明显低于癌旁组织(1.269vs.5.237,P<0.05);Western blot结果显示,三者的蛋白表达趋势与mRNA表达一致。生存分析显示,Ring1B、LSD1高表达患者生存率均分别低于其低表达患者(χ~2=8.958,P=0.012;χ~2=8.856,P=0.010),而P16高表达患者生存率高于其低表达患者(χ~2=7.867,P=0.024)。结论:胰腺癌组织中Ring1B与LSD1表达升高,P16表达降低;Ring1B、LSD1可能分别通过组蛋白泛素化和去甲基化调控P16的表达,从而影响胰腺癌预后。 展开更多
关键词 胰腺肿瘤 泛素蛋白连接酶类 组蛋白赖氨酸N-甲基转移酶 周期素依赖激酶抑制剂p16 预后
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应用SYBR Green I实时荧光定量聚合酶链反应检测常染色体隐性遗传早发性帕金森综合征的parkin基因外显子重排突变 被引量:5
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作者 聂利珞 郭纪锋 +7 位作者 张海南 张学伟 王磊 沈璐 江泓 夏昆 唐北沙 严新翔 《中华神经科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期301-305,共5页
目的建立应用SYBR Green I实时荧光定量聚合酶链反应(Real—time PCR,RT—PCR)检测parkin基因外显子重排突变的技术平台,应用该技术对常染色体隐性遗传早发型帕金森综合征(autosomal recessive early—onset parkinsonism,AREP)... 目的建立应用SYBR Green I实时荧光定量聚合酶链反应(Real—time PCR,RT—PCR)检测parkin基因外显子重排突变的技术平台,应用该技术对常染色体隐性遗传早发型帕金森综合征(autosomal recessive early—onset parkinsonism,AREP)家系进行parkin基因外显子重排突变分析。方法应用SYBR Green I RT—PCR技术对32个中国AREP家系进行parkin基因外显子重排突变分析。结果14个家系先证者存在parkin基因外显子重排突变,其中3个为纯合缺失突变、3个为复杂杂合缺失突变和8个杂合缺失突变,未发现外显子重复突变,突变主要累及第2~4号外显子。结论建立了应用SYBR Green IRT-PCR技术检测parkin基因外显子重排突变的基因检测平台;中国AREP家系的parkin基因外显子重排突变频率为43.8%,与国外报道相似。 展开更多
关键词 帕金森障碍 泛素蛋白连接酶类 突变 有机化学品 荧光染料 逆转录聚 合酶链反应
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结肠癌组织中WWP1、C-myc的表达及临床意义 被引量:5
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作者 孙光源 武亮 +3 位作者 张月 薛军 史玉洁 李文贤 《中国现代医学杂志》 CAS 2019年第10期21-26,共6页
目的检测WWP1、C-myc在结肠癌组织中的表达,探究其与结肠癌患者病情进展、预后的关系。方法采用免疫组织化学法检测河北北方学院附属第一医院收治的135例结肠癌患者的癌组织、癌旁正常组织中WWP1、C-myc蛋白表达情况,分析癌组织中WWP1、... 目的检测WWP1、C-myc在结肠癌组织中的表达,探究其与结肠癌患者病情进展、预后的关系。方法采用免疫组织化学法检测河北北方学院附属第一医院收治的135例结肠癌患者的癌组织、癌旁正常组织中WWP1、C-myc蛋白表达情况,分析癌组织中WWP1、C-myc表达与患者临床病理参数、无进展生存期(PFS)及总生存期(OS)的关系,用Cox回归分析结肠癌预后的危险因素。结果结肠癌组织WWP1、C-myc蛋白阳性表达率高于癌旁正常组织(P<0.05);结肠癌组织WWP1、C-myc蛋白表达受Dukes分期、肿瘤浸润深度及淋巴结转移的影响较大(P<0.05);Kaplan-Meier生存分析表明,结肠癌组织WWP1、C-myc阳性表达患者术后PFS、OS较短(P<0.05);Cox回归分析结果显示,分化程度[RlR=29.203(95%CI:4.759,179.192)]、肿瘤Dukes分期[RlR=16.817(95%CI:2.765,102.271)]、浸润深度[RlR=3.285(95%CI:1.450,7.442)]、淋巴结转移[RlR=18.723(95%CI:4.131,84.861)]、WWP1表达[RlR=11.344(95%CI:3.472,37.060)]及C-myc表达[RlR=12.873(95%CI:3.092,53.592)]为影响结肠癌患者预后的独立危险因素。结论结肠癌组织中WWP1、C-myc异常高表达,且与患者病情恶性进展、预后不良关系密切,WWP1、C-myc可作为预测结肠癌患者预后的参考指标。 展开更多
关键词 结肠肿瘤 泛素蛋白连接酶类 基因 myc Kaplan-Meiers评估
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蛋白降解靶向嵌合体在抗肿瘤治疗中的研究进展
8
作者 汪子肖 李永生 +3 位作者 范婷 张玲 杨红 毕学苑 《中国新药与临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期428-435,共8页
随着蛋白降解靶向嵌合体(PROTAC)的发展,利用蛋白质降解机制来降解致癌蛋白的治疗策略取得了突破性进展。PROTAC能通过多聚泛素化-蛋白酶体途径诱导致病蛋白降解,有望克服传统肿瘤抑制剂易脱靶或靶标突变带来的耐药性等问题。近年来,多... 随着蛋白降解靶向嵌合体(PROTAC)的发展,利用蛋白质降解机制来降解致癌蛋白的治疗策略取得了突破性进展。PROTAC能通过多聚泛素化-蛋白酶体途径诱导致病蛋白降解,有望克服传统肿瘤抑制剂易脱靶或靶标突变带来的耐药性等问题。近年来,多款PROTAC小分子降解剂相继进入Ⅰ期或Ⅱ期临床试验,如何通过优化其分子结构及探索新靶点来开发更多临床有效的PROTAC小分子降解剂已成为新热点。 展开更多
关键词 蛋白降解靶向嵌合体 泛素蛋白连接酶类 分子结构 抗肿瘤活性
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泛素特异性蛋白酶在抗病毒感染免疫中的作用研究进展 被引量:4
9
作者 朱惠惠 赵西宝 +1 位作者 胡未伟 陈玮琳 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期578-583,共6页
泛素特异性蛋白酶(USP)属于半胱氨酸蛋白酶,是去泛素化酶家族的重要成员之一。USP家族分子通过多种途径正向或负向调控I型干扰素的产生,从而启动或削弱抗病毒感染免疫应答。例如USP2b、USP3、USP18、USP25、U136USP和HAUSP发挥抗病... 泛素特异性蛋白酶(USP)属于半胱氨酸蛋白酶,是去泛素化酶家族的重要成员之一。USP家族分子通过多种途径正向或负向调控I型干扰素的产生,从而启动或削弱抗病毒感染免疫应答。例如USP2b、USP3、USP18、USP25、U136USP和HAUSP发挥抗病毒效应,而USP4、USP13、USP15和USP17则对机体的抗病毒免疫应答起负向调节的作用。本文对USP家族成员在抗病毒感染免疫应答中的调控作用及研究进展进行了综述。 展开更多
关键词 泛素化 半胱氨酸内肽酶类 泛素蛋白连接酶类 转录因子 单纯疱疹病毒属 综述
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肾透明细胞癌中miRNA-224-5p靶向NEDD4L调控轴的识别与研究
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作者 陈勇全 吴波 +3 位作者 邵渊 胡玮璟 张琳 王东文 《肿瘤研究与临床》 CAS 2023年第2期104-110,共7页
目的基于生物信息学方法筛选肾透明细胞癌关键基因,识别可能的微RNA(miRNA)-mRNA作用轴,探讨相关基因在肾透明细胞癌组织和细胞中的表达。方法选取基因表达综合(GEO)数据库基因表达谱GSE40435、GSE71302数据集,肾透明细胞癌TCGA-KIRC数... 目的基于生物信息学方法筛选肾透明细胞癌关键基因,识别可能的微RNA(miRNA)-mRNA作用轴,探讨相关基因在肾透明细胞癌组织和细胞中的表达。方法选取基因表达综合(GEO)数据库基因表达谱GSE40435、GSE71302数据集,肾透明细胞癌TCGA-KIRC数据集来自癌症基因组图谱(TCGA)数据库。采用R软件筛选差异表达的mRNA和miRNA,并对mRNA进行功能富集分析。采用STRING数据库和Cytoscape软件进行蛋白质互作分析。采用Oncomir数据库筛选预后相关的差异表达miRNA。采用TargetScan和miRDB靶基因预测工具筛选miRNA可能调控的靶基因。收集2021年6月至12月山西医科大学第一医院收治的34例肾透明细胞癌患者的组织样本及临床资料,并选择正常肾细胞株293T和肾透明细胞癌细胞株786O。采用实时荧光定量聚合酶链反应检测基因的相对表达量;蛋白质印迹法、免疫组织化学染色法检测目的蛋白的表达水平;双荧光素酶报告基因实验验证基因间的靶向关系。结果差异分析筛选得到1351个差异表达mRNA和50个差异表达miRNA。功能富集分析提示肾透明细胞癌中脂肪酸代谢、异生物质代谢等途径被抑制,细胞凋亡、免疫应答途径被激活。蛋白质互作分析提示肾透明细胞癌中信号转导、蛋白泛素化等途径起到关键作用。筛选结果显示miRNA-224-5p(miR-224-5p)与肾透明细胞癌进展关系最紧密,且在肿瘤组织中高表达,其预后相关靶基因为NEDD4L。肾透明细胞癌组织与癌旁组织的NEDD4L mRNA相对表达量分别为0.138±0.103、1.000±0.026(t=46.23,P<0.05);miR-224-5p相对表达量分别为1.000±0.043、0.129±0.108(t=45.28,P<0.05)。不同分级及分期肾透明细胞癌组织NEDD4L mRNA、miR-224-5p的表达差异均有统计学意义(均P<0.05)。NEDD4L蛋白在肾透明细胞癌中表达降低。293T与786O细胞中NEDD4L基因相对表达量分别为1.000±0.125、0.210±0.044(t=17.52,P<0.05);miR-224-5p基因相对表达 展开更多
关键词 肾肿瘤 微RNAS 泛素蛋白连接酶类 预后
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MARCH1在多器官功能障碍综合征病程中对脾脏树突细胞MHC-Ⅱ类分子泛素化作用的研究 被引量:4
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作者 李菲 陆江阳 刘茜 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期455-458,共4页
目的观察多器官功能障碍综合征(MODS)小鼠脾脏树突细胞(DCs)中MARCH1和MHC-Ⅱ类分子的蛋白及mRNA表达情况,探讨MARCH1对MHC-Ⅱ类分子的泛素化调控作用。方法 110只C57BL/6小鼠随机分为1、3、5、7、10d组和正常对照组,前5个实验组小鼠采... 目的观察多器官功能障碍综合征(MODS)小鼠脾脏树突细胞(DCs)中MARCH1和MHC-Ⅱ类分子的蛋白及mRNA表达情况,探讨MARCH1对MHC-Ⅱ类分子的泛素化调控作用。方法 110只C57BL/6小鼠随机分为1、3、5、7、10d组和正常对照组,前5个实验组小鼠采用腹腔注射酵母多糖法复制MODS模型(每组20只),正常对照组(10只)不做特殊处理。使用磁珠和Mini MACS分选磁场分离出小鼠脾脏DCs,分别采用Western blotting和Real Time PCR检测脾脏DCs中MARCH1和MHC-Ⅱ类分子的蛋白及mRNA表达情况,并观察其变化规律与病程的关系。结果脾脏DCs中MHC-Ⅱ类分子蛋白的表达在MODS 1d时即明显升高并达到峰值(P<0.05),而后逐渐下降,至10d时达到最低(P<0.05)。MHC-Ⅱ类分子mRNA的表达在整个病程中无明显变化(P>0.05)。MARCH1蛋白表达在MODS 1d时即显著降低(P<0.05),后开始回升,至7d时达到较高水平,而在10d时又再次下降,但与正常对照组相比,均无统计学差异。MARCH1 mRNA表达的变化与蛋白表达变化规律一致。结论在MODS病程中,MHC-Ⅱ类分子和MARCH1蛋白表达变化的趋势相反,MARCH1可能通过泛素化MHC-Ⅱ类分子来调控其表达水平,进而调控DCs的成熟状态及启动免疫应答反应。 展开更多
关键词 多器官功能衰竭 树突细胞 泛素连接酶类 MHC-Ⅱ类分子
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Cbl-b基因shRNA干扰载体的构建及鉴定 被引量:3
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作者 胡彬 倪娜娜 +3 位作者 吕雅琳 陈浩 刘毅 孙建方 《中华皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期204-207,共4页
目的 构建小鼠Cbl-b基因RNA干扰(RNAi)的真核表达质粒,并初步鉴定其干扰效果,为后续研究Cbl-b在黑素瘤免疫治疗中的作用奠定基础.方法 根据基因库提供的Cbl-b cDNA序列,设计并合成4对短发夹结构的互补DNA序列,克隆至载体PGPU6/GFP/Ne... 目的 构建小鼠Cbl-b基因RNA干扰(RNAi)的真核表达质粒,并初步鉴定其干扰效果,为后续研究Cbl-b在黑素瘤免疫治疗中的作用奠定基础.方法 根据基因库提供的Cbl-b cDNA序列,设计并合成4对短发夹结构的互补DNA序列,克隆至载体PGPU6/GFP/Neo构建重组质粒,并予以DNA测序鉴定.重组干扰质粒构建成功后,将干扰质粒与Cbl-b过表达载体共转染293T细胞,于转染后48 h,通过实时荧光定量PCR法及蛋白质印迹法检测各质粒对Cbl-b基因的表达抑制效应.结果 测序分析证实,4对shRNA寡核苷酸序列分别成功插入至shRNA真核表达载体PGPU6/GFP/Neo中,将构建成功的PGPU6/GFP/Neo-shRNA质粒与Cbl-b真核表达载体共转染细胞48 h后,通过荧光实时定量PCR法及Western印迹测定,发现4条shRNA序列对Cbl-b的表达均有一定的抑制效应,其中以1号shRNA序列重组质粒对Cbl-b表达的抑制程度最高(P<0.05).结论 成功构建并筛选出沉默效应最高的Cbl-b shRNA真核细胞表达载体. 展开更多
关键词 泛素蛋白连接酶类 RNA 小分子干扰 黑色素瘤
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泛素-蛋白酶体系统在肺动脉高压中的研究进展 被引量:1
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作者 丁超伟 郭畅 袁雅冬 《实用心脑肺血管病杂志》 2022年第11期18-25,共8页
泛素化是真核细胞中最重要的蛋白质翻译后修饰形式之一,可参与调节细胞的各种生理过程,包括细胞周期进程、细胞分化、细胞凋亡以及先天性和适应性免疫反应。目前越来越多的靶向泛素-蛋白酶体系统(UPS)的药物被开发出来。有证据表明,肺... 泛素化是真核细胞中最重要的蛋白质翻译后修饰形式之一,可参与调节细胞的各种生理过程,包括细胞周期进程、细胞分化、细胞凋亡以及先天性和适应性免疫反应。目前越来越多的靶向泛素-蛋白酶体系统(UPS)的药物被开发出来。有证据表明,肺动脉高压(PH)发病过程中存在UPS功能紊乱,但其机制尚不明确,也无相关药物应用于临床。本文回顾了UPS的结构和功能,并对PH中功能异常的UPS相关蛋白及其作用机制进行综述,以为临床精准诊断及靶向治疗方案的制定提供新思路。 展开更多
关键词 肺动脉高压 泛素-蛋白酶体系统 泛素蛋白连接酶类 泛素连接酶E3 去泛素化酶 综述
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Effect of compound Guizhu capsule on phosphate and tension homology deleted on chromsome ten and murine double mimute 2 gene expression in lung cancer of mice 被引量:1
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作者 Cao Yong Zhang Shuyong +7 位作者 Zhang Ge Zhang Na Zhang Lixia Huang Yuanliang Yuan Naijun Tang Xiaojuan Du Jiajin Fang Jiuyun 《Journal of Traditional Chinese Medicine》 SCIE CAS CSCD 2017年第4期461-465,共5页
OBJECTIVE: To observe the inhibitory effect of the Chinese herbal compound Guizhu capsule(CGZC)on lung cancer and explore the possible mechanism underlying its actions by evaluating its effects on the expression of ph... OBJECTIVE: To observe the inhibitory effect of the Chinese herbal compound Guizhu capsule(CGZC)on lung cancer and explore the possible mechanism underlying its actions by evaluating its effects on the expression of phosphate and tension homology deleted on chromsome ten(PTEN) and murine double mimute 2(MDM2) in lung cancer model mice.METHODS: A mouse model of transplanted lung cancer was established by subcutaneous inoculation of cancer cells into the axillae of mice. Twenty-four hours later, the mice were weighed and randomly divided into the model control group, cisplatin group(DDP group), and high, moderate and low dosage CGZC groups, with ten mice in each group. The control mice received an equal volume of distilled water. DDP was intraperitoneally injected at 1 mg/kg in the DDP group, once a day for 3days. CGZC diluted with distilled water was admin-istered at 20 g/kg(10 times the clinical adult dosage) in the high-dose group, 10 g/kg(5 times the clinical adult dosage) in the moderate-dose group and 5 g/kg(2.5 times the clinical adult dosage) in the low-dose group once a day for 10 days. On the11 th day, the mice were weighed and killed. The tumor tissues were weighed and the tumor inhibition rate was calculated. PTEN and MDM2 protein expression were detected by immunohistochemical analysis of tumor tissues.RESULTS: The CGZC high-and moderate-dose groups showed a significant inhibitory effect on tumor growth(P < 0.05); there was no significant difference between the high dose group and the DDP group(P > 0.05). The CGZC high-dose group also showed enhanced expression of PTEN protein(P <0.01) and decreased expression of MDM2 protein(P < 0.01) in lung cancer cells of the mice. There was no significant difference between the high dose group and the DDP group.CONCLUSION: CGZC has a significant inhibitory effect on transplanted lung cancer in mice. The mechanism may involve reducing expression of PTEN and decreasing the expression of MDM2 in the lung cancer tissues of the mice. 展开更多
关键词 Lung neoplasms Transplantion IMMUNOHISTOCHEMISTRY PTEN phosphohydrolase Proto-oncogene proteins c-mdm2 ubiquitin-protein ligases Compound Guizhu capsule
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F-BOX蛋白家族在生殖领域的研究进展 被引量:2
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作者 金一枚 孙斯曼 +1 位作者 闫菽灵 李默 《国际生殖健康/计划生育杂志》 CAS 2018年第5期393-396,共4页
由于卵母细胞中转录水平的改变不显著,因此翻译后修饰如泛素-蛋白酶系统(UPS)可能起到重要的调控作用。其核心成员F-BOX在UPS中负责特异性识别底物,以帮助泛素系统泛素化并降解目的蛋白。F-BOX蛋白广泛存在于生殖细胞及胚胎中,但对其底... 由于卵母细胞中转录水平的改变不显著,因此翻译后修饰如泛素-蛋白酶系统(UPS)可能起到重要的调控作用。其核心成员F-BOX在UPS中负责特异性识别底物,以帮助泛素系统泛素化并降解目的蛋白。F-BOX蛋白广泛存在于生殖细胞及胚胎中,但对其底物功能的研究却十分缺乏。有研究报道,F-BOX蛋白通过对上皮细胞间质转化(EMT)、细胞信号转导及细胞增殖与凋亡中的关键蛋白进行泛素化,参与到卵母细胞的发育和成熟、卵母细胞-胚胎转化(OET)及早期胚胎发育的进程中,其还可以调控体内雌孕激素的水平。本文通过介绍F-BOX在UPS中的作用,综述其在卵母细胞、OET和胚胎发生发展中的生物学作用,及其对雌孕激素水平的调控,以期F-BOX可以作为潜在的干预靶点,为人类生殖健康和计划生育的研究提供新的思路。 展开更多
关键词 泛素蛋白连接酶类 卵母细胞 胚胎发育 F-BOX蛋白
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c-CBL过表达对神经病理性痛大鼠脊髓星形胶质细胞活化的影响:与Kindlin-1的关系 被引量:1
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作者 潘永英 张高龙 赵柏松 《中华麻醉学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第9期1089-1092,共4页
目的评价c-CBL过表达对神经病理性痛大鼠脊髓星形胶质细胞活化的影响及其与Kindlin-1的关系。方法清洁级健康雄性SD大鼠18只,10~12周龄,体重250~280 g,采用随机数字表法分为3组(n=6):假手术组(S组)、神经病理性痛组(NP组)和c-CBL过表达... 目的评价c-CBL过表达对神经病理性痛大鼠脊髓星形胶质细胞活化的影响及其与Kindlin-1的关系。方法清洁级健康雄性SD大鼠18只,10~12周龄,体重250~280 g,采用随机数字表法分为3组(n=6):假手术组(S组)、神经病理性痛组(NP组)和c-CBL过表达组(c-CBL组)。采用坐骨神经慢性压迫性损伤法制备大鼠神经病理性痛模型。于制备模型前1 d时c-CBL组鞘内注射c-CBL过表达载体10μl,S组和NP组鞘内注射空载载体10μl。分别于制备模型前1 d(T0)、制备模型1、4和7 d(T1~3)时测定大鼠机械缩足反应阈和热缩足反应阈。T3时痛阈测定结束后处死大鼠取L4~6脊髓,采用Western blot法检测脊髓Kindlin-1、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、TNF-α和IL-Iβ的表达。采用免疫共沉淀法检测Kindlin-1与c-CBL共表达情况。结果与S组比较,NP组和c-CBL组T2,3时机械缩足反应阈降低,热缩足反应阈缩短,NP组脊髓Kindlin-1、GFAP、TNF-α和IL-1β表达、c-CBL组脊髓c-CBL表达上调(P<0.05);与NP组比较,c-CBL组T2,3时机械缩足反应阈升高,热缩足反应阈延长,c-CBL组背髓Kindlin-1、GFAP、TNF-α和IL-1β表达下调,c-CBL表达上调(P<0.05)。免疫共沉淀结果显示:NP组Kindlin-1与c-CBL存在蛋白交互共表达。与NP组比较,c-CBL组脊髓Kindlin-1与c-CBL共表达增强。结论c-CBL过表达可通过下调脊髓Kindlin-1表达,抑制星形胶质细胞活化,进而减轻炎症反应,缓解大鼠神经病理性痛。 展开更多
关键词 泛素蛋白连接酶类 神经痛 脊髓 小神经胶质细胞 Kindlin-1
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蛋白水解靶向嵌合体应用于恶性肿瘤治疗的实验研究进展 被引量:1
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作者 占莹 王涛 柳长柏 《中国新药与临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第7期393-398,共6页
蛋白水解靶向嵌合体(PROTAC)是一种靶向蛋白降解技术,可将许多“不可成药”的疾病相关蛋白作为靶点,具有良好的靶向性和高效的降解性,在恶性肿瘤治疗领域显示出较好的前景。PROTAC包含三个部分,两端分别是E3泛素连接酶招募元件和靶蛋白... 蛋白水解靶向嵌合体(PROTAC)是一种靶向蛋白降解技术,可将许多“不可成药”的疾病相关蛋白作为靶点,具有良好的靶向性和高效的降解性,在恶性肿瘤治疗领域显示出较好的前景。PROTAC包含三个部分,两端分别是E3泛素连接酶招募元件和靶蛋白结合配体,中间由一个连接两端配体的连接体组成,通过劫持E3泛素连接酶活性将靶蛋白泛素化降解。近年来PROTAC已从第一代肽基PROTAC发展到靶向激素受体、溴结构域和超末端结构域(BET)蛋白家族、蛋白激酶等的第二代小分子基PROTAC,为靶向治疗恶性肿瘤提供可能。目前已有两种PROTAC药物通过Ⅰ期临床试验。第三代光控式PROTAC解决了非肿瘤特异性的难题,降低了毒性,在未来可被应用于局部疾病的治疗。 展开更多
关键词 蛋白水解靶向嵌合体 泛素蛋白连接酶类 肿瘤 受体 雌激素 受体 雄激素
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微小RNA-194-5p与cullin4A在肺结核病人中的表达及意义 被引量:2
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作者 闫书娜 马腾 +2 位作者 李国锋 李金洲 曾俊风 《安徽医药》 CAS 2021年第3期489-493,共5页
目的探讨微小RNA-194-5p(miR-194-5p)与泛素连接酶cullin4A(CUL4A)在肺结核病人中的表达及其意义。方法选取2016年12月至2018年12月中国平煤神马集团职业病防治院结核病病人为研究对象,确诊为肺结核病人50例作为肺结核组,潜伏结核感染病... 目的探讨微小RNA-194-5p(miR-194-5p)与泛素连接酶cullin4A(CUL4A)在肺结核病人中的表达及其意义。方法选取2016年12月至2018年12月中国平煤神马集团职业病防治院结核病病人为研究对象,确诊为肺结核病人50例作为肺结核组,潜伏结核感染病人50例作为潜伏结核感染组,同期该院体检健康者50例作为对照组。实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miR-194-5p、CUL4A mRNA、鸟苷酸结合蛋白5(GBP5)mRNA的表达;酶联免疫吸附测定(ELISA)检测可溶性Tim-3(sTim-3)、可溶性Gal-9(sGal-9)水平;采用Pearson相关性分析检验肺结核病人miR-194-5p、CUL4A表达量与GBP5、sTim-3、sGal-9的相关性。结核分枝杆菌(Mtb)感染人巨噬细胞系U937,ELISA检测白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平。蛋白质印迹法(Western blotting)检测Wnt/β-连环素(Wnt/β-catenin)信号通路相关蛋白T细胞因子(TCF)、糖原合成酶激酶-3(GSK-3β)、β-catenin表达量。结果与对照组相比,潜伏结核感染组与肺结核组病人血清miR-194-5p、GBP5 mRNA的表达水平升高(P<0.05),其中miR-194-5p:(1.01±0.23)比(2.32±0.53)比(3.35±0.20),sTim-3、sGal-9水平升高(P<0.05),CUL4A mRNA的表达水平显著降低[(1.03±0.11)比(0.73±0.12)比(0.41±0.15),P<0.05],潜伏结核感染组与肺结核组各指标间相比差异有统计学意义(P<0.05);miR-194-5p与CUL4A呈负相关(r=-0.421,P<0.001),miR-194-5p与GBP5、sTim-3、sGal-9呈正相关(P<0.05);Mtb感染细胞后,IL-6、TNF-α的表达水平升高(P<0.05),TCF、GSK-3β、β-catenin表达量升高(P<0.05)。结论miR-194-5p在肺结核病人中表达上调,CUL4A表达下调,二者可能参与肺结核发生及发展过程。 展开更多
关键词 结核 结核分枝杆菌 微小RNA-194-5p 泛素蛋白连接酶类 cullin4A 炎症
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下调泛素蛋白连接酶E3A表达对三阴性乳腺癌细胞生物学行为的影响 被引量:2
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作者 谢少利 王碧娟 +4 位作者 刘家有 李金穗 赵小波 邓世山 侯令密 《中国普通外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第11期1417-1423,共7页
目的:探讨降低泛素蛋白连接酶E3A(UBE3A)的表达对三阴性乳腺癌细胞生物学行为的影响。方法:采用慢病毒载体分别将构建的3条UBE3A shRNA序列转染人三阴性乳腺癌细胞株MDAMB-231,检测干扰效率后,筛选出干扰效率最高的序列用于实验。分别采... 目的:探讨降低泛素蛋白连接酶E3A(UBE3A)的表达对三阴性乳腺癌细胞生物学行为的影响。方法:采用慢病毒载体分别将构建的3条UBE3A shRNA序列转染人三阴性乳腺癌细胞株MDAMB-231,检测干扰效率后,筛选出干扰效率最高的序列用于实验。分别采用CCK8法、Transwell小室实验、流式细胞术观察MDA-MB-231细胞经所选用的UBE3A shRNA序列转染后侵袭能力、增殖能力与细胞周期的变化,以转染阴性对照组序列和无处理的MDA-MB-231细胞作为阴性对照及空白对照。结果:成功构建UBE3A shRNA慢病毒表达载体并筛选出干扰率最高的UBE3A shRNA序列(UBE3A基因和蛋白表达抑制率分别为89.5%、45.3%)。与空白对照组细胞比较,下调UBE3A的MDAMB-231细胞的增殖、侵袭能力均明显降低,且细胞周期出现明显的S期阻滞(均P<0.05);阴性对照组细胞各项观察指标无统计学差异(均P>0.05)。结论:下调UBE3A表达能诱导三阴性乳腺癌细胞的细胞周期阻滞,从而抑制其增殖与侵袭能力,提示UBE3A在三阴性乳腺癌细胞的恶性生物学行为中发挥了重要作用。 展开更多
关键词 三阴性乳腺癌 泛素蛋白连接酶类 RNA干扰 细胞周期
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miR-126-5p通过靶向Peli2影响糖尿病肾病肾小管上皮细胞上皮-间质转化发生 被引量:2
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作者 刘仁海 穆伽俐 +7 位作者 陈小莲 张玉佳 高霞 李黎黎 罗琴 冯秋秋 何思宇 蒲丹岚 《安徽医药》 CAS 2021年第7期1428-1432,共5页
目的探讨微小RNA-126-5p(miR-126-5p)通过靶向pellino E3泛素蛋白连接酶家族成员2(Peli2)影响糖尿病肾病肾小管上皮细胞上皮-间质转化(EMT)发生的分子机制。方法本研究起止时间为2018年12月至2019年12月。体外培养人肾小管上皮细胞HK-2... 目的探讨微小RNA-126-5p(miR-126-5p)通过靶向pellino E3泛素蛋白连接酶家族成员2(Peli2)影响糖尿病肾病肾小管上皮细胞上皮-间质转化(EMT)发生的分子机制。方法本研究起止时间为2018年12月至2019年12月。体外培养人肾小管上皮细胞HK-2(美国ATCC),分别使用5 mmol/L、30 mmol/L的D-葡萄糖处理细胞48 h,分别记作对照组、模型组。采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)与蛋白免疫印迹法(Western blot)分别检测miR-126-5p、Peli2的表达水平。利用脂质体转染法分别将miR-126-5p寡核苷酸模拟物(miR-126-5p mimics)及阴性对照mimic NC序列(miR-NC)、Peli2小分子干扰RNA(si-Peli2)及其阴性对照(si-NC)转染至HK-2细胞,使用30 mmol/L的D-葡萄糖处理细胞48 h。Western blot检测上皮型钙黏蛋白(E-Cadherin)、神经型钙黏蛋白(N-Cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、锌指蛋白(Snail)表达量;双荧光素酶报告实验验证miR-126-5p与Peli2的靶向关系。结果与对照组相比,模型组miR-126-5p[(1.00±0.10)比(0.32±0.03)]、E-Cadherin[(0.86±0.09)比(0.35±0.04)]的表达水平显著降低(P<0.05),Peli2[(0.42±0.04)比(1.05±0.11)]、N-Cadherin[(0.45±0.05)比(0.99±0.10)]、Vimentin[(0.32±0.03)比(0.92±0.09)]、Snail[(0.22±0.02)比(0.75±0.08)]的表达水平显著升高(P<0.05);转染miR-126-5p mimics,与转染miR-NC相比,E-Cadherin[(0.34±0.03)比(0.75±0.08)]的表达水平显著升高(P<0.05),N-Cadherin[(1.02±0.11)比(0.53±0.05)]、Vimentin[(0.95±0.10)比(0.48±0.05)]、Snail[(0.72±0.07)比(0.36±0.04)]的表达水平显著降低(P<0.05);转染si-Peli2后,与转染si-NC相比,E-Cadherin[(0.24±0.03)比(0.70±0.07)]的表达水平显著升高(P<0.05),N-Cadherin[(1.05±0.12)比(0.50±0.05)]、Vimentin[(0.96±0.10)比(0.38±0.04)]、Snail[(0.74±0.07)比(0.40±0.04)]的表达水平显著降低(P<0.05);miR-126-5p能够特异性结合Peli2,Peli2是miR-126-5p的靶基因;Peli2过表达后可明显逆转miR-126-5p过表达对高糖诱导的HK-2细胞EMT的影响。结 展开更多
关键词 糖尿病肾病 泛素蛋白连接酶类 微小RNA-126-5p pellino E3泛素蛋白连接酶家族成员2 肾小管上皮细胞 上皮-间质转化
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