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绵羊精子冻融前后差异蛋白质组学研究 被引量:5
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作者 李鸿岩 赵兴绪 +2 位作者 张勇 贺钰烜 杨永新 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第24期5092-5099,共8页
【目的】检测和分析绵羊精子冻融前后的差异蛋白质。【方法】用二维凝胶电泳分离精子蛋白,凝胶用考马斯亮蓝染色,用PDQuest8.0软件检测分析差异蛋白质斑点并经液相色谱串联离子阱质谱鉴定。【结果】鲜冻精凝胶图谱分析后得到14个差异蛋... 【目的】检测和分析绵羊精子冻融前后的差异蛋白质。【方法】用二维凝胶电泳分离精子蛋白,凝胶用考马斯亮蓝染色,用PDQuest8.0软件检测分析差异蛋白质斑点并经液相色谱串联离子阱质谱鉴定。【结果】鲜冻精凝胶图谱分析后得到14个差异蛋白斑点,在国际生物信息学中心数据库搜索到相对应的5种蛋白质:推定的热休克蛋白70.1、转录因子AP-2α蛋白、烯醇酶、烯醇酶1和血清白蛋白前体。在解冻精子中,推定的热休克蛋白70.1、烯醇酶和烯醇酶1含量减少,转录因子AP-2α蛋白含量增加,血清白蛋白前体来源于精浆。【结论】绵羊精子经冷冻、解冻后,蛋白质存在差异,对差异蛋白质的研究有利于探索绵羊精子在冷冻过程中的生理状态,为进一步研究绵羊精子蛋白质组学及揭示精子冻伤机理提供依据。 展开更多
关键词 绵羊 精子蛋白质 二维凝胶电泳分析 蛋白质组
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绵羊精浆蛋白质组2-DE图谱的构建及初步分析 被引量:2
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作者 李鸿岩 赵兴绪 +2 位作者 张勇 张红 王燕玲 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2011年第4期127-131,共5页
本研究比较了丙酮沉淀法制备蛋白质不同上样量对绵羊精浆蛋白质二维电泳图谱的影响。结果显示,精浆总蛋白经SDS-PAGE电泳,得到分子质量在14.4~116 ku的28条蛋白质条带。二维电泳图经PDQuest 8.0分析,上样量为0.8、1.0、1.2 mg时检测出... 本研究比较了丙酮沉淀法制备蛋白质不同上样量对绵羊精浆蛋白质二维电泳图谱的影响。结果显示,精浆总蛋白经SDS-PAGE电泳,得到分子质量在14.4~116 ku的28条蛋白质条带。二维电泳图经PDQuest 8.0分析,上样量为0.8、1.0、1.2 mg时检测出的蛋白质点分别为207±10、281±13和374±16个,分子质量基本分布在20~80 ku、等电点为4~9的区域内,随着上样量的增加,分子质量在20~80 ku的蛋白质点明显增多,但每个分子质量区间的蛋白质点所占的比率较为恒定。研究结果表明,采丙酮沉淀制备精浆蛋白结合合适的上样量能够建立绵羊精浆全蛋白质图谱,为进一步研究绵羊精浆蛋白质组学奠定基础。 展开更多
关键词 绵羊 精浆蛋白质 二维凝胶电泳分析 蛋白质组
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Differential Proteomic Analysis of Carbon Ion Radiation in Sheep Sperm
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作者 HE Yu-xuan LI Hong-yan +3 位作者 ZHANG Yong HE Jian-hua ZHANG Hong ZHAO Xing-xu 《Journal of Integrative Agriculture》 SCIE CAS CSCD 2013年第9期1629-1637,共9页
This study is first to investigate proteomic changes in sheep sperm induced by carbon ion radiation using two-dimensional electrophoresis (2-DE) analysis in the project of breeding a new variety of sheep. Differenti... This study is first to investigate proteomic changes in sheep sperm induced by carbon ion radiation using two-dimensional electrophoresis (2-DE) analysis in the project of breeding a new variety of sheep. Differential expression proteins were detected using the PDQuest 8.0 software after staining with Coomassie blue. Valid spots were then analyzed through liquid chromatography tandem mass spectrometry (LC-MS/MS). Among the 480 total protein spots displayed in 2-D gels, 6 specific protein spots were observed in sperm gels. A search against protein sequences in the National Center for Biotechnology Information databases (NCBI) indicated that differentially expressed proteins correspond to two proteins, identified to be enolase and transcription factor AP-2-alpha (TFAP-2c0. The two proteins were up-regulated in the irradiated sperm. To the best of our knowledge, this study is the first to identify proteomic changes induced by carbon ion radiation in sheep sperm. The analysis of differential expression protein may be useful in identifying new breeding markers in sheep reproduction and in clarifying the mechanisms involved in irradiation or space breeding. 展开更多
关键词 SHEEP sperm protein two-dimensional polyacrylamide gel electrophoresis analysis PROTEOME carbon ionradiation irradiation breeding
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两种剂量重离子辐照绵羊精子差异蛋白质组学研究 被引量:1
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作者 李鸿岩 赵兴绪 +5 位作者 张红 王燕玲 贺钰烜 李发弟 马友记 张勇 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期609-615,共7页
为检测和分析0.5和3.0Gy 2种剂量重离子辐照绵羊精子差异表达的蛋白质,用二维凝胶电泳分离精子蛋白,凝胶用硝酸银染色,PDQuest8.0检测分析差异表达蛋白斑点并经高效液相色谱串联离子阱质谱鉴定,结果显示:2种剂量凝胶图谱分析后得到8个... 为检测和分析0.5和3.0Gy 2种剂量重离子辐照绵羊精子差异表达的蛋白质,用二维凝胶电泳分离精子蛋白,凝胶用硝酸银染色,PDQuest8.0检测分析差异表达蛋白斑点并经高效液相色谱串联离子阱质谱鉴定,结果显示:2种剂量凝胶图谱分析后得到8个共同差异蛋白斑点,鉴定为3种表达上调的蛋白质(谷氧还蛋白1、转录因子AP-2α蛋白和烯醇酶)。研究表明:绵羊精子经不同剂量重离子辐照后蛋白质的表达存在差异,对差异表达蛋白质的研究有利于探索绵羊精子在重离子辐照过程中的生理状态,可为进一步研究重离子辐照绵羊精子蛋白质组学奠定基础。 展开更多
关键词 绵羊 精子蛋白质 二维凝胶电泳分析 蛋白质组 重离子辐照
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重离子辐照对绵羊精子的蛋白质组学影响研究
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作者 贺钰烜 李鸿岩 +10 位作者 张红 张勇 贺建华 李润红 赵兴绪 张晶 张小宇 阚威 李展 王朝凤 马艳粉 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期1473-1478,共6页
本研究为了分析由重离子辐照引起的绵羊精子蛋白质组学变化,用二维凝胶电泳分离精子蛋白,凝胶用考马斯亮蓝染色。PDQuest8.0软件检测分析差异表达蛋白斑点并经高效液相色谱串联离子阱质谱鉴定。结果显示:辐照后的精子凝胶图谱上有4个蛋... 本研究为了分析由重离子辐照引起的绵羊精子蛋白质组学变化,用二维凝胶电泳分离精子蛋白,凝胶用考马斯亮蓝染色。PDQuest8.0软件检测分析差异表达蛋白斑点并经高效液相色谱串联离子阱质谱鉴定。结果显示:辐照后的精子凝胶图谱上有4个蛋白质斑点表达上调,1个蛋白质斑点缺失,这5个蛋白质斑点经鉴定后,在国际生物信息学中心数据库搜索到相对应的2种蛋白质:烯醇酶和烯醇酶1,在辐照后的精子中这2种蛋白质表达上调。研究表明:重离子辐照会引起绵羊精子蛋白质组学变化,通过对差异蛋白质的研究探索重离子辐照对绵羊精子生理功能的影响,为重离子辐照绵羊育种提供理论依据。 展开更多
关键词 绵羊 二维凝胶电泳分析 蛋白质组 重离子辐射
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