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低温胁迫下棉花子叶蛋白质差异表达的双向电泳分析 被引量:16
1
作者 邰付菊 李扬 +1 位作者 陈良 李学宝 《华中师范大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 2008年第2期262-266,共5页
采用TCA-丙酮沉淀法,改良优化了棉花蛋白质组研究中的双向电泳技术.通过对根和子叶全细胞蛋白的提取、蛋白的溶解、胶条的选择及电泳等环节的优化,得到了重复性很高、分辨率很好的蛋白质图谱.进一步对5 d苗龄的棉花进行4℃低温处理12 h... 采用TCA-丙酮沉淀法,改良优化了棉花蛋白质组研究中的双向电泳技术.通过对根和子叶全细胞蛋白的提取、蛋白的溶解、胶条的选择及电泳等环节的优化,得到了重复性很高、分辨率很好的蛋白质图谱.进一步对5 d苗龄的棉花进行4℃低温处理12 h后,提取子叶的蛋白质,利用双向电泳技术分离全细胞蛋白.并用PDQuest软件分析比较棉花子叶在低温处理下的蛋白表达谱,得到了49个有显著差异的蛋白点.其中,低温处理上调表达的蛋白点有27个,减弱表达的蛋白点有22个,推测这些差异蛋白点可能与低温胁迫相关. 展开更多
关键词 棉花 低温处理 双向电泳
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“醒脑开窍”针刺法对局灶性脑缺血大鼠海马蛋白质组学影响的研究 被引量:15
2
作者 温景荣 赵晓峰 +1 位作者 王舒 石学敏 《天津中医药》 CAS 2007年第6期447-451,共5页
[目的]寻找与脑缺血相关及针刺起效的靶蛋白,从蛋白质组学层面探讨脑缺血的病理机制及针刺治疗脑缺血性损伤的作用机制。[方法]将Wistar大鼠随机分为正常组、假手术6h组,模型6h组和针刺6h组,采用改进的线栓法制备动物模型。在规定时间... [目的]寻找与脑缺血相关及针刺起效的靶蛋白,从蛋白质组学层面探讨脑缺血的病理机制及针刺治疗脑缺血性损伤的作用机制。[方法]将Wistar大鼠随机分为正常组、假手术6h组,模型6h组和针刺6h组,采用改进的线栓法制备动物模型。在规定时间快速断头取脑,剥离缺血侧海马,提取脑组织总蛋白进行双向电泳,以Image Master 2DV3.01 Elite软件进行图像分析。选取差异蛋白质点进行胶内酶解,以基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MAL-DI-TOF-MS)测肽质量指纹图,检索Swiss-Port数据库,对蛋白质进行鉴定。[结果]共鉴定出30个差异蛋白质。正常组与假手术组比较无差异蛋白表达;模型组与正常组比较鉴定出差异蛋白质点29个,其中在模型6h组新出现1个,在模型6h表达上调的11个,表达下调的17个;针刺组与模型组比较鉴定出差异蛋白质点21个,其中在针刺组上调有16个,下调的有5个。[结论]以双向电泳联合质谱技术,初步发现与脑缺血相关以及针刺治疗脑缺血的部分靶蛋白质,有助于深入研究脑缺血性损伤病理机制及针刺治疗脑缺血性损伤的作用机制。 展开更多
关键词 “醒脑开窍”针刺法 脑缺血 蛋白质组学 双向电泳 基质辅助激光解析电离飞行时间质谱
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正常与脑缺血大鼠的脑皮质蛋白质差异分析鉴定 被引量:11
3
作者 赵晓峰 温景荣 +1 位作者 王舒 石学敏 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期934-941,共8页
Wistar大鼠随机分为正常组和模型组,采用改进的线栓法制备模型,在规定的时间点快速断头取脑,分离脑皮质组织,提取蛋白质后双向电泳展示,以ImageMaster2DElitev3.01软件对2_DE图谱进行差异表达分析,目标蛋白点用基质辅助激光解析电离质... Wistar大鼠随机分为正常组和模型组,采用改进的线栓法制备模型,在规定的时间点快速断头取脑,分离脑皮质组织,提取蛋白质后双向电泳展示,以ImageMaster2DElitev3.01软件对2_DE图谱进行差异表达分析,目标蛋白点用基质辅助激光解析电离质谱测定肽质量指纹图进行鉴定。线粒体应激70蛋白前体、血小板活化因子乙酰基水解酶IBβ亚单位、ADP核糖基化因子蛋白3、电压依赖性阴离子选择通道蛋白1、泛素C末端水解酶同工酶L1、突触结合蛋白等11个蛋白在模型6h组表达上调,谷胱甘肽S_转移酶omega1、谷胱甘肽S_转移酶P、Cu_Zn超氧化物歧化酶、ATP合酶D链、G蛋白β亚单位1、微管蛋白β链15、苹果酸脱氢酶等15个蛋白在模型6h组表达上调。胆绿素还原酶B、细胞因子A4前体为模型组新出现点,腺苷酸激酶同工酶1在模型组消失,Thioredoxinperoxidase1在模型组分为2个点。以双向电泳技术得到分辨率较好的电泳图谱,并初步鉴定脑缺血后差异表达蛋白,为深入研究缺血性脑损伤病理机制奠定了基础。 展开更多
关键词 比较蛋白质组学 双向电泳 基质辅助激光解析电离质谱 脑缺血
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大豆质核互作雄性不育系NJCMS1A和其保持系的不同器官蛋白质组比较 被引量:8
4
作者 曾维英 杨守萍 +1 位作者 盖钧镒 喻德跃 《大豆科学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期8-14,共7页
质核互作雄性不育在杂种优势利用中起着重要作用,探讨质核互作雄性不育发生的机理具有重要的理论和实践意义。本研究开展大豆质核互作雄性不育系NJCMS1A与其保持系NJCMS1B的不同器官蛋白质组比较分析。以大豆质核互作雄性不育系NJCMS1A... 质核互作雄性不育在杂种优势利用中起着重要作用,探讨质核互作雄性不育发生的机理具有重要的理论和实践意义。本研究开展大豆质核互作雄性不育系NJCMS1A与其保持系NJCMS1B的不同器官蛋白质组比较分析。以大豆质核互作雄性不育系NJCMS1A和其保持系NJCMS1B的种子、叶片和花药为材料,采用双向凝胶电泳技术对其蛋白质进行分离,考马斯亮蓝染色,获得重复性好的蛋白质双向电泳图谱,利用PDQuest软件处理分析,寻找差异表达蛋白。结果发现不育系NJCMS1A与其保持系NJCMS1B的种子2-DE图谱间存在7个差异表达蛋白点,其中3个在NJCMS1A中表达而在NJCMS1B中缺失,3个在NJCMS1A中缺失而在NJCMS1B中表达,1个在NJCMS1A中表达量明显增强;苗期叶片2-DE图谱间基本一致,没有差异表达蛋白点;单核小孢子期花药2-DE图谱间有9个差异表达蛋白点,其中3个在NJCMS1A中表达而在NJCMS1B中缺失,6个在NJCMS1A中缺失而在NJCMS1B中表达;二胞花粉期花药2-DE图谱间有24个差异表达蛋白点,其中10个在NJCMS1A中表达而在NJC-MS1B中缺失,12个在NJCMS1A中缺失而在NJCMS1B中表达,2个在NJCMS1B中表达量明显增强。两系花药间存在较多差异表达蛋白点,种子间仅有少量差异表达蛋白点,而苗期叶片间基本没有差异表达蛋白点,说明不育基因表达具有时空性和器官特异性,与育性有关的蛋白主要在花药中表达。 展开更多
关键词 大豆 质核互作雄性不育 不同器官 蛋白质组 双向凝胶电泳
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Identification of differentially expressed proteins in poplar leaves in-duced by Marssonina brunnea f. sp. Multigermtubi 被引量:6
5
作者 Kun Yuan Bo Zhang +3 位作者 Yanmei Zhang Qiang Cheng Mingxiu Wang Minren Huang 《Journal of Genetics and Genomics》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2008年第1期49-60,共12页
Black spot disease in poplar is a disease of the leaf caused by fungus. The major pathogen is Marssonina brunnea f. sp. multigermtubi. To date, little is known about the molecular mechanism of poplar (M. brunnea) in... Black spot disease in poplar is a disease of the leaf caused by fungus. The major pathogen is Marssonina brunnea f. sp. multigermtubi. To date, little is known about the molecular mechanism of poplar (M. brunnea) interaction. In order to identify the proteins related to disease resistance and understand its molecular basis, the clone "NL895" (P. euramericana CL"NL895"), which is highly resistant to M. brunnea f. sp. multigermtubi, was used in this study. We used two-dimensional gel electrophoresis (2-DE) and mass spectrometry (MS) to identify the proteins in poplar leaves that were differentially expressed in response to black spot disease pathogen, M. brunnea f. sp. multigermtubi. Proteins extracted from poplar leaves at 0, 12, 24, 48, and 72 h after pathogen-inoculation were separated by 2-DE, About 500 reproducible protein spots were detected, of which 40 protein spots displayed differential expression in levels and were subjected to Matrix assisted laser desorption/ionization time of flight mass spectrometry (MALDI-TOF MS) followed by database searching. According to the function, the identified proteins were sorted into five categories, that is, protein synthesis, metabolism, defense response and unclassified proteins. 展开更多
关键词 black spot disease defense response two-dimensional gel electrophoresis 2-de matrix assisted laser desorption/ionization time of flightmass spectrometry (MALDI-TOF MS) POPLAR
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大鼠脑皮质表达蛋白质组学研究 被引量:6
6
作者 赵晓峰 温景荣 +1 位作者 王舒 石学敏 《生物物理学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期29-39,共11页
文章用蛋白质组学方法初步分析大鼠脑皮质蛋白质的表达。提取大鼠脑皮质蛋白质,双向凝胶电泳分离,考马斯亮蓝染色,胰蛋白酶胶内酶解,用基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱对酶解后的肽段进行分析,根据肽质量指纹图谱,检索专业数据库(Swi... 文章用蛋白质组学方法初步分析大鼠脑皮质蛋白质的表达。提取大鼠脑皮质蛋白质,双向凝胶电泳分离,考马斯亮蓝染色,胰蛋白酶胶内酶解,用基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱对酶解后的肽段进行分析,根据肽质量指纹图谱,检索专业数据库(Swissprot),对蛋白质进行鉴定。鉴定出84个蛋白,分别属于代谢酶、细胞骨架蛋白、热休克蛋白、抗氧化蛋白、信号传导蛋白、蛋白酶体相关蛋白、神经元特异蛋白及神经胶质蛋白等。文章结果丰富了大鼠脑皮质蛋白质组数据库,为在大鼠模型上研究神经疾病奠定了基础。 展开更多
关键词 脑蛋白质组学 双向凝胶电泳 基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱
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鼻息肉、鼻息肉病及对照鼻黏膜蛋白质双向电泳图谱的建立 被引量:3
7
作者 孙虹 贺广湘 +3 位作者 王天生 李萃 冯雪萍 肖志强 《中国耳鼻咽喉颅底外科杂志》 CAS 2004年第2期86-89,93,共5页
目的 建立鼻息肉、鼻息肉病及对照鼻黏膜组织蛋白质双向凝胶电泳 (2 DE)图谱。方法 收集并- 80℃冻存鼻息肉、鼻息肉病及鼻黏膜组织样本各 3例 ,双向凝胶电泳分离样本总蛋白、银染凝胶显色 ,扫描图像 ,ImageMaster 2 DEElite4 .0 1... 目的 建立鼻息肉、鼻息肉病及对照鼻黏膜组织蛋白质双向凝胶电泳 (2 DE)图谱。方法 收集并- 80℃冻存鼻息肉、鼻息肉病及鼻黏膜组织样本各 3例 ,双向凝胶电泳分离样本总蛋白、银染凝胶显色 ,扫描图像 ,ImageMaster 2 DEElite4 .0 1软件分析。结果 鼻息肉、鼻息肉病和鼻黏膜组织同一样本三块凝胶平均蛋白质点数分别为 82 5± 78个 ,891± 6 7个和 936± 6 2个 ;平均匹配点数分别为 6 82± 96个 ,76 7± 83个和 82 1± 78个 ,其平均匹配百分率分别为 82 .7%、86 .1%和 87.7% ;位置重复性分析 ,IEF方向平均偏差为 1.13± 0 .16mm ,SDS PAGE方向平均偏差为 1.4 5± 0 .2 1mm。鼻息肉、鼻息病和鼻黏膜三种组织各 3例样品的平均蛋白质点数分别为 876± 95个 ,95 3± 84个和 10 16± 79个。三种组织的 2 DE平均凝胶图谱 :鼻息肉、鼻息肉病和鼻黏膜蛋白质点数分别为116 2个、12 74和 1336个 ,平均匹配点数为鼻息肉与鼻黏膜之间 75 7个 ;鼻息肉病与鼻黏膜之间为 82 5个 ;鼻息肉与鼻息肉病之间为 883个。结论 本实验建立了图像清晰、分辨率高和重复性好的鼻息肉、鼻息肉病及鼻黏膜组织的固相PH梯度 2 DE图谱 ,有助于进一步识别鉴定三者差异表达的蛋白质。 展开更多
关键词 鼻息肉 鼻黏膜 双向凝胶电泳
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不同光长条件下大豆蛋白质组比较研究 被引量:5
8
作者 赫卫 姜振峰 +2 位作者 赵琳 韩英鹏 李文滨 《大豆科学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期388-393,共6页
对大豆光周期敏感型品种东农42分别进行16h光照和8h光照处理,提取处理和对照相同叶位叶片的全蛋白质进行双向电泳,通过PDQuest和液相离子阱质谱(LC-ESI-MS)技术对差异表达蛋白进行分析,获得二级质谱图谱,用Mascot软件搜索NCBInr数据库,... 对大豆光周期敏感型品种东农42分别进行16h光照和8h光照处理,提取处理和对照相同叶位叶片的全蛋白质进行双向电泳,通过PDQuest和液相离子阱质谱(LC-ESI-MS)技术对差异表达蛋白进行分析,获得二级质谱图谱,用Mascot软件搜索NCBInr数据库,鉴定出16个差异表达蛋白,其中12个表达量上调,4个表达量下调。对谷胱甘肽S-转移酶、二硫键异构酶、TCTP、半胱氨酸合成酶、Rieske铁硫蛋白前体、金属蛋白酶等主要差异蛋白进行功能分析,表明这些蛋白与植物的光合作用、信号转导、细胞凋亡的调控、防卫解毒和能量代谢等多种植物的生理生化功能相关。 展开更多
关键词 大豆 双向电泳(2-de) 蛋白质组学 光周期 离子阱质谱分析
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血清蛋白组学技术筛选寻常性银屑病相关蛋白的初步研究 被引量:6
9
作者 刘占奎 谭升顺 +3 位作者 于春水 樊靖华 白转丽 李俊杰 《中国皮肤性病学杂志》 CAS 北大核心 2007年第11期644-646,650,共4页
目的初步探讨应用血清蛋白组学技术建立寻常性银屑病相关蛋白的优化筛选方法,筛选寻常性银屑病的相关蛋白,期望从中发现有意义的寻常性银屑病血清标志物。方法取寻常性银屑病患者及正常对照血清,应用ProteoExtract Albumin/IgG Removal ... 目的初步探讨应用血清蛋白组学技术建立寻常性银屑病相关蛋白的优化筛选方法,筛选寻常性银屑病的相关蛋白,期望从中发现有意义的寻常性银屑病血清标志物。方法取寻常性银屑病患者及正常对照血清,应用ProteoExtract Albumin/IgG Removal Kit纯化血清蛋白,去除白蛋白和IgG,采用固相pH梯度(IPG)、等电聚焦(IEF)为第一向、SDS-PAGE垂自电泳为第二向的双向凝胶电泳(2-DE)和质谱分析鉴定差异蛋白。结果获得重复性和分辨率较好的血清双向凝胶电泳图谱,鉴定得到3个仅在银屑病组血清中表达和9个与对照组血清表达有差异的蛋白质。结论在寻常性银屑病患者血清与健康人血清中存在差异表达蛋白质,利用蛋白质组学这一高通量的筛查技术可望从中发现与寻常性银屑病相关的标志物。 展开更多
关键词 双向凝胶电泳 银屑病 寻常性 蛋白组学 生物学
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人胰腺癌胰液蛋白质差异表达分析 被引量:6
10
作者 朱峰 吕顺莉 +2 位作者 高军 龚燕芳 李兆申 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期265-268,共4页
目的:应用蛋白质组学方法分析人胰腺癌患者胰液蛋白质表达。方法:通过内镜下逆行胰胆管造影术(ERCP)中放置鼻胰管引流收集患者胰液,利用双向凝胶电泳,分离5例胰腺癌、6例慢性胰腺炎和3例胆总管结石等量混合胰液(200μg)的总蛋白质,用图... 目的:应用蛋白质组学方法分析人胰腺癌患者胰液蛋白质表达。方法:通过内镜下逆行胰胆管造影术(ERCP)中放置鼻胰管引流收集患者胰液,利用双向凝胶电泳,分离5例胰腺癌、6例慢性胰腺炎和3例胆总管结石等量混合胰液(200μg)的总蛋白质,用图像分析软件识别差异表达的蛋白质;应用质谱仪得到相应的肽质指纹图谱,搜索数据库鉴定部分差异蛋白质点。结果:1)经ERCP留置鼻胰管成功收集胰液标本,胰液量约为35~200ml,Brad-ford法测定蛋白质浓度为0.8~4.6μg/μl。同一胰液标本(200μg)的3块胶在蛋白质点位置上有较好的重复性;5例胰腺癌、6例慢性胰腺炎和3例胆总管结石等量混合胰液自身比较后可重复的蛋白质点均在75%以上。2)对图像分析软件识别的9个差异蛋白质点进行基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)分析,鉴定出胰腺癌相关的差异表达蛋白质。结论:人胰腺癌、慢性胰腺炎和胆总管结石患者胰液的蛋白质谱存在一定的差异。 展开更多
关键词 胰腺癌 胰液 双向凝胶电泳 MALDI—TOF—MS
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成年无精子症男性睾丸活检组织双向电泳分析技术的初步建立及其优化 被引量:5
11
作者 李飞 邹亚光 +6 位作者 赵亮 周其赵 李铁求 郭文兵 景晓玮 李建明 毛向明 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2009年第24期4139-4142,共4页
目的:建立并优化成年无精子症男性睾丸活检组织双向凝胶电泳图谱。方法:采用固相pH梯度等电聚焦为第一向,SDS-PAGE垂直电泳为第二向的双向电泳分离技术进行分离,凝胶经银染显色后,用Melanie 4软件分析双向凝胶电泳技术(2-DE)图谱。对聚... 目的:建立并优化成年无精子症男性睾丸活检组织双向凝胶电泳图谱。方法:采用固相pH梯度等电聚焦为第一向,SDS-PAGE垂直电泳为第二向的双向电泳分离技术进行分离,凝胶经银染显色后,用Melanie 4软件分析双向凝胶电泳技术(2-DE)图谱。对聚焦参数的设置和样品的处理等步骤进行优化。结果:优化后成功地获得了成年无精子症男性睾丸活检组织分辨率高、重复性好的双向电泳图谱。结论:应用2-DE初步建立了成年无精子症男性睾丸活检组织分辨率较高且重复性好双向凝胶电泳图谱,为从睾丸蛋白质组学水平进一步研究无精子症奠定了基础。 展开更多
关键词 无精子症 双向凝胶电泳 睾丸 蛋白质组
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大豆雄性不育系与其保持系不同器官蛋白质比较 被引量:4
12
作者 曾维英 杨守萍 +1 位作者 喻德跃 盖钧镒 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第8期1619-1624,共6页
采用双向凝胶电泳技术对大豆质核互作雄性不育系NJCMS2A及其保持系NJCMS2B的种子、叶片和花药等不同器官蛋白质进行比较分析.结果显示,不育系NJCMS2A与其保持系NJCMS2B的花药2-DE图谱间存在较多差异表达蛋白点,种子2-DE图谱间仅有少量... 采用双向凝胶电泳技术对大豆质核互作雄性不育系NJCMS2A及其保持系NJCMS2B的种子、叶片和花药等不同器官蛋白质进行比较分析.结果显示,不育系NJCMS2A与其保持系NJCMS2B的花药2-DE图谱间存在较多差异表达蛋白点,种子2-DE图谱间仅有少量差异表达蛋白点,而叶片2-DE图谱间基本没有差异表达蛋白点.结果表明,不育基因表达具有时空性和器官特异性,与育性有关的蛋白主要在花药中表达. 展开更多
关键词 大豆 质核互作雄性不育 双向凝胶电泳(2-de) 蛋白质
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人肺鳞癌组织及癌旁组织蛋白质双向电泳图谱的差异分析 被引量:2
13
作者 李萃 陈主初 +8 位作者 肖志强 吴晓英 詹显全 李茂玉 冯雪萍 章晓鹏 李建玲 陈平 梁宋平 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2004年第1期28-35,共8页
背景与目的:肺鳞癌的发生发展是一个多因素、多步骤的过程,虽然从基因和转录水平已对肺癌进行了许多成功的研究,但其癌变机制仍不十分明确,目前尚缺乏有效的用于肺鳞癌早期诊断和预后监测的特异性分子标志物。本研究的目的是利用蛋白质... 背景与目的:肺鳞癌的发生发展是一个多因素、多步骤的过程,虽然从基因和转录水平已对肺癌进行了许多成功的研究,但其癌变机制仍不十分明确,目前尚缺乏有效的用于肺鳞癌早期诊断和预后监测的特异性分子标志物。本研究的目的是利用蛋白质组学方法,建立分辨率高和重复性好的人肺鳞癌组织及其癌旁正常支气管上皮组织的双向凝胶电泳图谱,并识别鉴定其差异表达的蛋白质。方法:利用固相pH梯度(immobilizedpHgradient,IPG)双向凝胶电泳(two-dimensionalelectrophoresis,2-DE),分离人肺鳞癌组织及癌旁正常支气管上皮组织的总蛋白质,用图像分析软件比较分析,以识别差异表达的蛋白质;应用质谱仪(massspectrometry)得到相应的肽质指纹图谱(peptidemassfingerprint,PMF),然后搜索数据库鉴定部分差异蛋白质点。结果:(1)建立双向凝胶电泳图谱:癌组织和癌旁正常支气管上皮组织3块凝胶的平均蛋白质点数分别为1349±67和1297±73,平均匹配的点数分别为1235±48和1183±56,匹配率达91.5%和91.2%;同一癌组织的3块胶在蛋白质点位置上有较好的重复性,不同胶间蛋白质点在等电聚焦(Isoelectricfocusing,IEF)方向的偏差是(0.873±0.125)mm,在十二烷基磺酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳SDS-PAGE方向上的偏差为(1.025±0.213)mm。(2)肽质指? 展开更多
关键词 肺鳞癌 癌旁组织蛋白质 双向电泳图谱 差异分析 鳞癌组织
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白鲢鱼肌原纤维蛋白双向电泳分析体系的建立 被引量:5
14
作者 仪淑敏 李睿智 +6 位作者 陈杨 励建荣 李学鹏 徐永霞 李春 丁浩宸 郁晓君 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2017年第1期41-46,共6页
以白鲢鱼为研究对象,建立并优化其肌原纤维蛋白的双向电泳技术。结果表明,选用固相p H值梯度预制胶条p H 4~7,上样量120μg,等电聚焦程序Ⅲ(50 V主动水化15 h,250 V、2 h,1 000 V、2.5 h及4 000 V、3 h三段式除盐,8 000 V、2 h和10 000 ... 以白鲢鱼为研究对象,建立并优化其肌原纤维蛋白的双向电泳技术。结果表明,选用固相p H值梯度预制胶条p H 4~7,上样量120μg,等电聚焦程序Ⅲ(50 V主动水化15 h,250 V、2 h,1 000 V、2.5 h及4 000 V、3 h三段式除盐,8 000 V、2 h和10 000 V、1.5 h两段式升压,10 000 V聚焦80 000 V·h,500 V保持10 h)以及12%的十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳分离胶条件下进行双向电泳,凝胶银染后用PDQuest软件分析,得到具有高分离度的肌原纤维蛋白双向电泳图谱,蛋白点清晰。 展开更多
关键词 白鲢鱼 肌原纤维蛋白 双向电泳
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盐胁迫下西伯利亚蓼蛋白质双向电泳分析及质谱鉴定 被引量:4
15
作者 郑磊 刘关君 +1 位作者 杨传平 王大海 《哈尔滨师范大学自然科学学报》 CAS 2007年第2期101-105,共5页
通过蛋白质双向电泳和质谱技术,对盐胁迫前后西伯利亚蓼的蛋白质组进行了比较分析.在pH 3~10范围内,在西伯利亚蓼地下茎蛋白表达图谱中发现23个蛋白质点胁迫后的表达量与对照有明显差异(±2倍以上),其中包括一个新增蛋白点.对表达... 通过蛋白质双向电泳和质谱技术,对盐胁迫前后西伯利亚蓼的蛋白质组进行了比较分析.在pH 3~10范围内,在西伯利亚蓼地下茎蛋白表达图谱中发现23个蛋白质点胁迫后的表达量与对照有明显差异(±2倍以上),其中包括一个新增蛋白点.对表达量变化较大的11个蛋白点进行质谱分析,并通过数据库检索进行蛋白质鉴定与功能预测,确定了4种蛋白质.其中的两种蛋白甘油醛-3-磷酸脱氢酶(Glyceraldehyde 3-phosphate dehydrogenase)和丙酮酸正磷酸二激酶(Pyruvate,orthophosphate dikinase)胁迫后高表达,说明地下茎细胞内正进行着旺盛的呼吸代谢,以提供维持植物生长发育以及抵抗外界胁迫所需的能量. 展开更多
关键词 西伯利亚蓼 盐胁迫 双向电泳
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大豆种子萌发中蛋白质组成的双向电泳分析 被引量:4
16
作者 徐晓燕 郑蕊 +1 位作者 李春梅 喻德跃 《大豆科学》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期355-359,共5页
采用双向电泳技术分析了大豆种子萌发时期蛋白质的差异表达。研究发现,在考染胶上,通过PDQuest分析,在成熟干种子和萌发种子的2-DE图谱上分别获得341和376个蛋白斑点,两个时期的2-DE图谱非常相近,说明绝大部分大豆种子贮藏蛋白在萌发期... 采用双向电泳技术分析了大豆种子萌发时期蛋白质的差异表达。研究发现,在考染胶上,通过PDQuest分析,在成熟干种子和萌发种子的2-DE图谱上分别获得341和376个蛋白斑点,两个时期的2-DE图谱非常相近,说明绝大部分大豆种子贮藏蛋白在萌发期尚未开始降解。有21个蛋白点在萌发的大豆种子中表达量上调,9个表达量下调。对这些蛋白的进一步鉴定将有助于深入理解大豆种子萌发过程的生理及分子机制。 展开更多
关键词 大豆 双向电泳(2-de) 萌发
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比较蛋白组学在口腔鳞癌患者及健康人血清的初步研究 被引量:4
17
作者 马洪 王金生 +3 位作者 潘卫 宋宇峰 赵天江 曹星华 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期98-101,共4页
目的:筛选口腔鳞癌及健康人血清差异表达的蛋白质。方法:收集口腔鳞癌患者外周血清17例,健康人外周血清17例,通过固相pH梯度双向凝胶电泳以及质谱鉴定和生物信息学分析,寻找在口腔鳞癌患者血清中特异表达的蛋白质。结果:先后对口腔鳞癌... 目的:筛选口腔鳞癌及健康人血清差异表达的蛋白质。方法:收集口腔鳞癌患者外周血清17例,健康人外周血清17例,通过固相pH梯度双向凝胶电泳以及质谱鉴定和生物信息学分析,寻找在口腔鳞癌患者血清中特异表达的蛋白质。结果:先后对口腔鳞癌和健康人血清表达差异明显的11个蛋白质点进行质谱鉴定和生物信息学分析,鉴定了其中的2个点为触珠蛋白(haptoglobin,Hp),在口腔鳞癌血清中均为高表达;1个点为载脂蛋白A(apolipoprotein A)在口腔鳞癌血清中为低表达。结论:触珠蛋白和载脂蛋白A在口腔鳞癌外周血清和健康人外周血清的表达发生了改变,但其确切的调控机制有待进一步研究。 展开更多
关键词 口腔鳞癌 双向凝胶电泳 蛋白组学 质谱分析
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导向激光捕获显微切割技术在贲门腺癌差异蛋白质组学的应用研究 被引量:4
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作者 程妍 张军 +4 位作者 张蓉 刘冬 陈晓黎 谢丹红 龚均 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期557-561,564,共6页
目的建立一套适用于贲门腺癌差异蛋白质组学研究的导向激光捕获显微切割技术(navigated laser capture microdissection,NLCM)方法,并探讨其可行性。方法比较染色剂和固定剂对蛋白质影响的差异,探讨不同处理条件下贲门腺癌和癌旁组织切... 目的建立一套适用于贲门腺癌差异蛋白质组学研究的导向激光捕获显微切割技术(navigated laser capture microdissection,NLCM)方法,并探讨其可行性。方法比较染色剂和固定剂对蛋白质影响的差异,探讨不同处理条件下贲门腺癌和癌旁组织切片的镜下组织学特点,改进常规LCM,建立在染色切片指引下分离细胞的NLCM技术,并通过双向凝胶电泳分析对该技术进行评价。结果染色剂对蛋白质的影响大于700mL/L乙醇固定剂;光镜下在不染色的组织切片上,贲门腺癌细胞、肠化生细胞和正常柱状上皮细胞都有其各自的形态特异性,易于辨认;NLCM可以准确纯化贲门腺癌细胞、肠化生细胞和正常柱状细胞;LCM的苏木素染色贲门腺癌细胞(A组)、NLCM的无染色贲门腺癌细胞(B组)和未切割的新鲜贲门腺癌组织(C组)的双向电泳表达图谱非常相似。各组蛋白质点的数量之间差异无统计学意义(P>0.05)。A组碱性端蛋白等点聚焦较差,部分蛋白质点的表达量减低或消失,B组双向电泳表达图谱蛋白质点分离较好。结论 NLCM不但可以快速、准确地将贲门腺癌及其癌前病变细胞进行分离,而且有效避免了染色剂对蛋白质提取质量的影响,是一项适用于贲门腺癌蛋白质组学研究的样品制备方法。 展开更多
关键词 贲门腺癌 激光捕获显微切割 蛋白质组 双向凝胶电泳
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桃叶片总蛋白双向电泳技术的研究 被引量:4
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作者 杜保伟 李成斌 +1 位作者 熊明国 李靖 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期752-755,共4页
采用改进的O'Farrell双向电泳系统,研究适于桃树叶片蛋白质组分析的双向电泳方法。通过对不同蛋白样品提取方法、不同pH梯度范围、不同上样量的比较,探索出一套适合桃树叶片总蛋白分析的双向电泳方法,即以TCA/丙酮沉淀法提取叶片蛋... 采用改进的O'Farrell双向电泳系统,研究适于桃树叶片蛋白质组分析的双向电泳方法。通过对不同蛋白样品提取方法、不同pH梯度范围、不同上样量的比较,探索出一套适合桃树叶片总蛋白分析的双向电泳方法,即以TCA/丙酮沉淀法提取叶片蛋白质样品,采用两性电解质配比pH3~10︰pH5~7为1∶4的IEF胶条,按90μg蛋白上样量,并结合适宜的双向电泳参数,可获得背景清晰、重复性较好、蛋白分辨率高的双向电泳图谱。经此方法分离的桃叶片蛋白质经串联质谱分析(MS/MS)得到了较好的鉴定。 展开更多
关键词 叶片 蛋白质 双向电泳
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乙胺丁醇处理前后耻垢分枝杆菌mc^2155细胞蛋白双向电泳图谱的差异分析 被引量:4
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作者 湛垚垚 龙潜 +3 位作者 卢小霞 杨楠 周艳 辛毅 《大连医科大学学报》 CAS 2007年第1期1-3,共3页
[目的]利用蛋白质组学方法,识别乙胺丁醇处理前后耻垢分枝杆菌mc2155细胞后差异表达的蛋白质,为进一步探讨乙胺丁醇抑制分枝杆菌生长的作用机制及寻找新的抗结核药物作用靶标奠定基础。[方法]采用载体两性电解质pH梯度双向凝胶电泳技术... [目的]利用蛋白质组学方法,识别乙胺丁醇处理前后耻垢分枝杆菌mc2155细胞后差异表达的蛋白质,为进一步探讨乙胺丁醇抑制分枝杆菌生长的作用机制及寻找新的抗结核药物作用靶标奠定基础。[方法]采用载体两性电解质pH梯度双向凝胶电泳技术分离乙胺丁醇处理前后耻垢分枝杆菌mc2155细胞的总蛋白质,用PDQuest7.3.1图像分析软件比较分析,以识别差异表达的蛋白质。[结果]空白对照组有268个斑点,Ethambutol(EMB)处理组有蛋白斑点195个,在相对分子质量和pI值分布的任一区域,EMB处理组蛋白斑点数均少于空白对照组,其中在EMB处理组中特异表达的蛋白质斑点有23个。[结论]乙胺丁醇处理前后耻垢分枝杆菌mc2155细胞的蛋白质组具有差异,这种蛋白质组的差异分析有助于进一步研究乙胺丁醇抑制分枝杆菌生长的作用机制并为寻找新的抗结核药物作用靶标奠定基础。 展开更多
关键词 乙胺丁醇 耻垢分枝杆菌mc^2155 双向电泳 蛋白质组比较
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