目的观察转染转移相关基因1(metastasis-associated 1,MTA1)基因对人宫颈癌细胞HeLa迁移、侵袭、粘附能力以及β-catenin、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达的影响。方法 Western blot法检测HeLa、SiHa细胞中MTA1表达;以脂质体Lipofectamine...目的观察转染转移相关基因1(metastasis-associated 1,MTA1)基因对人宫颈癌细胞HeLa迁移、侵袭、粘附能力以及β-catenin、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达的影响。方法 Western blot法检测HeLa、SiHa细胞中MTA1表达;以脂质体LipofectamineTM2000介导的方法将含MTA1全长基因的质粒pEGFP-C1-MTA1转染HeLa细胞,Western blot法检测目的基因表达;划痕、侵袭、粘附试验分别检测HeLa细胞迁移、侵袭、粘附能力变化;Western blot法检测β-catenin、MMP-9表达变化。结果与SiHa细胞相比,MTA1在HeLa细胞中表达较低(P<0.05);MTA1质粒转染的HeLa细胞中,MTA1表达、划痕愈合、Matrigel侵袭、Matrigel粘附能力均明显高于未转染及转染空载体对照组(均P<0.05);β-catenin、MMP-9表达在转染后均上调(均P<0.05)。结论 MTA1基因过表达可促进HeLa细胞转移、侵袭和粘附,上调β-catenin、MMP-9表达,MTA1基因可能成为肿瘤治疗靶点。展开更多
目的:探讨miRNA-1181(miR-1181)对人胰腺癌细胞侵袭转移能力的影响以及机制。方法:选取胰腺癌细胞系PANC-1和MIA Pa Ca-2进行实验并构建miR-1181过表达慢病毒载体(miR-1181U),低表达慢病毒载体(miR-1181D)以及空载慢病毒载体(NC),采用...目的:探讨miRNA-1181(miR-1181)对人胰腺癌细胞侵袭转移能力的影响以及机制。方法:选取胰腺癌细胞系PANC-1和MIA Pa Ca-2进行实验并构建miR-1181过表达慢病毒载体(miR-1181U),低表达慢病毒载体(miR-1181D)以及空载慢病毒载体(NC),采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测感染效率;Transwell实验以及划痕实验检测miR-1181对胰腺癌细胞侵袭转移能力的影响,免疫荧光检测miR-1181对细胞骨架的影响,Western bolt检测STAT3的表达;构建si-STAT3并转染miR-1181低表达组(miR-1181D),重复transwell实验验证STAT3是其靶基因。结果:qRT-PCR显示3条不同序列的si-STAT3均能显著下调STAT3的表达;Transwell实验及划痕实验显示上调miR-1181后能显著抑制胰腺癌细胞的侵袭转移(P<0.05),下调miR-1181后能显著促进胰腺癌的侵袭转移(P<0.05);Western blot显示miR-1181U能抑制STAT3的表达,miR-1181D能促进STAT3的表达;免疫荧光显示在PANC-1细胞中过表达miR-1181后,F-肌动蛋白(F-actin)被剪切,呈现低表达,导致其运动结构和极性的缺失,从而迁移能力变弱;si-STAT3以后能减弱miR-1181D组对侵袭转移的促进作用。结论:miR-1181可能通过抑制STAT3来抑制人胰腺癌细胞的侵袭转移能力,有望成为胰腺癌治疗的潜在靶点。展开更多
文摘目的:探讨miRNA-1181(miR-1181)对人胰腺癌细胞侵袭转移能力的影响以及机制。方法:选取胰腺癌细胞系PANC-1和MIA Pa Ca-2进行实验并构建miR-1181过表达慢病毒载体(miR-1181U),低表达慢病毒载体(miR-1181D)以及空载慢病毒载体(NC),采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测感染效率;Transwell实验以及划痕实验检测miR-1181对胰腺癌细胞侵袭转移能力的影响,免疫荧光检测miR-1181对细胞骨架的影响,Western bolt检测STAT3的表达;构建si-STAT3并转染miR-1181低表达组(miR-1181D),重复transwell实验验证STAT3是其靶基因。结果:qRT-PCR显示3条不同序列的si-STAT3均能显著下调STAT3的表达;Transwell实验及划痕实验显示上调miR-1181后能显著抑制胰腺癌细胞的侵袭转移(P<0.05),下调miR-1181后能显著促进胰腺癌的侵袭转移(P<0.05);Western blot显示miR-1181U能抑制STAT3的表达,miR-1181D能促进STAT3的表达;免疫荧光显示在PANC-1细胞中过表达miR-1181后,F-肌动蛋白(F-actin)被剪切,呈现低表达,导致其运动结构和极性的缺失,从而迁移能力变弱;si-STAT3以后能减弱miR-1181D组对侵袭转移的促进作用。结论:miR-1181可能通过抑制STAT3来抑制人胰腺癌细胞的侵袭转移能力,有望成为胰腺癌治疗的潜在靶点。
