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不同长度马铃薯GBSS基因启动子的块茎专一性表达的初报 被引量：10
1
作者 宋东光 黄大庆 +1 位作者 王光清 汪训明 《复旦学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 1998年第4期559-563,共5页
将0．4，0．8，1．6，2．9kbGBSS基因的5＇侧翼区与GUS基因融合，构建了双元表达载体．0．8kbGBSS－GUS通过基因枪转化法在块茎切片中获得了瞬间表达．已将上述构建体通过农杆菌转化法导入了马铃薯．X－Gluc染色及PCR结果均证实已获得... 将0．4，0．8，1．6，2．9kbGBSS基因的5＇侧翼区与GUS基因融合，构建了双元表达载体．0．8kbGBSS－GUS通过基因枪转化法在块茎切片中获得了瞬间表达．已将上述构建体通过农杆菌转化法导入了马铃薯．X－Gluc染色及PCR结果均证实已获得转基因再生植株．在离体诱导块茎中，2．9，1．6，0．4kbGBSS启动子驱动的GUS活性均明显高于茎段，高出1～15倍；1．6，2．9kbGBSS启动子驱动的GUS活性则大大高于0．8，0．4kbGBSS启动子驱动的GUS活性；其中2．9kb的GBSS启动子显示最强烈的块茎表达专一性． 展开更多
关键词 马铃薯 GBSS GUS 块茎专一表达 基因表达 启动子
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马铃薯P_(GBSS)-GUS融合基因在块茎中专一性表达的初步研究 被引量：1
2
作者 蓝晓东 汪训明 《复旦学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 1997年第5期531-536,共6页
从GBSS（Granule－boundstarchsynthase）基因克隆上，酶切得到5’上游区1．2kb的序列，与GUS报告基因融合，构建了PGBSS1．2表达载体．通过农杆菌介导的方式，将pGBSS1．2转入马铃薯品种Desiree．卡那霉素筛选获得抗性再生植株和微薯... 从GBSS（Granule－boundstarchsynthase）基因克隆上，酶切得到5’上游区1．2kb的序列，与GUS报告基因融合，构建了PGBSS1．2表达载体．通过农杆菌介导的方式，将pGBSS1．2转入马铃薯品种Desiree．卡那霉素筛选获得抗性再生植株和微薯．利用PCR特异性扩增和SouthernBlotting的方法证明了融合基因在马铃薯基因组中的整合．X－Gluc活体染色表明，微薯切片具有高GUS酶活性．而茎段中GUS活性相对较低．初步证明GBSS启动子是高效和块茎专一性的启动子，从而为马铃薯生物反应器的研究打下良好的基础． 展开更多
关键词 马铃薯 GBSS 块茎 专一性表达 GUS 融合基因
原文传递
口蹄疫病毒VP1基因转化马铃薯及其块茎专一性表达 被引量：6
3
作者 宋东光 张辉松 +5 位作者 聂呈荣 黄林旋 王惠珍 张英慧 何丽烂 邓日烈 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期107-109,173,共4页
报道了FMDV VP1基因与马铃薯块茎专一性表达class Ipatatin基因5′区融合,经农杆菌介导导入马铃薯植株,PCR、RT-PCR证实了其整合及转录表达。ELISA结果进一步表明,VP1在转基因马铃薯块茎中具有免疫活性。为探讨在马铃薯块茎中高表达VP1... 报道了FMDV VP1基因与马铃薯块茎专一性表达class Ipatatin基因5′区融合,经农杆菌介导导入马铃薯植株,PCR、RT-PCR证实了其整合及转录表达。ELISA结果进一步表明,VP1在转基因马铃薯块茎中具有免疫活性。为探讨在马铃薯块茎中高表达VP1蛋白及进一步开发其作为FMDV口服疫苗生物反应器奠定基础。 展开更多
关键词 FMDV VP1基因 转基因马铃薯 块茎专一表达
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马铃薯GBSS基因5′侧翼区调控作用的研究 被引量：10
4
作者 宋东光 孙国枫 +4 位作者 单海燕 彭翔寅 王光清 汪训明 谈家桢 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 1998年第9期796-802,共7页
将０．４、０．８、１．６、２．９ｋｂＧＢＳＳ基因的５′侧翼区与ＧＵＳ基因融合，构建了双元表达载体。０．８ｋｂＧＢＳＳＧＵＳ通过基因枪介导在块茎切片中获得了瞬间表达。以上建构物通过农杆菌介导转入了马铃薯（Ｓｏｌａｎｕ... 将０．４、０．８、１．６、２．９ｋｂＧＢＳＳ基因的５′侧翼区与ＧＵＳ基因融合，构建了双元表达载体。０．８ｋｂＧＢＳＳＧＵＳ通过基因枪介导在块茎切片中获得了瞬间表达。以上建构物通过农杆菌介导转入了马铃薯（ＳｏｌａｎｕｍｔｕｂｅｒｏｓｕｍＬ．ｃｖ．Ｄｅｓｉｒｅｅ）。ＸＧｌｕｃ染色及ＰＣＲ结果证实已获得转基因植株。利用离体块茎诱导系统，ＧＵＳ表达用荧光进行定量检测，结果显示，２．９、１．６、０．４ｋｂＧＢＳＳＧＵＳ的表达均以块茎明显高于茎段，达２～１０倍。０．８、１．６、２．９ｋｂＧＢＳＳＧＵＳ表达高于０．４ｋｂＧＢＳＳＧＵＳ。蔗糖浓度的升高可诱导ＧＢＳＳＧＵＳ的表达，而光照抑制了ＧＢＳＳＧＵＳ的表达。 展开更多
关键词 马铃薯 基因调控 GBSS基因 块茎专一表达 诱导
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马铃薯GBSS基因的克隆与DNA顺序分析 被引量：4
5
作者 戴卫列 邓炜 +2 位作者 崔伟英 赵寿元 汪训明 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 1996年第10期777-784,共8页
构建了中国马铃薯 (Solanum tuberosum)栽培品种“东农 30 3”基因文库 ,用 PCR扩增得到淀粉粒结合淀粉合成酶基因 (GBSS,granule- bound starch synthase)的部分顺序 (GB3) ,以此为探针从基因文库中筛选到 2 0个阳性克隆。测定其中 1... 构建了中国马铃薯 (Solanum tuberosum)栽培品种“东农 30 3”基因文库 ,用 PCR扩增得到淀粉粒结合淀粉合成酶基因 (GBSS,granule- bound starch synthase)的部分顺序 (GB3) ,以此为探针从基因文库中筛选到 2 0个阳性克隆。测定其中 1个克隆 (GBSS1 7- 1 )的 DNA顺序共 542 8bp;它包括 GBSS基因 5′侧翼区 1 82 3 bp、结构基因 2 964 bp和 3′侧翼区 641 bp。该顺序与已报道的 GBSS顺序同源性很高 ,但 5′侧翼区最上游 730 bp尚未见文献报道 ;并存在较多的茎环结构。 展开更多
关键词 马铃薯 淀粉粒 淀粉 合成酶基因 DNA
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