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二价HIV-1融合抑制剂的设计、合成与活性评价
被引量:
3
1
作者
凌彦博
王昆
+2 位作者
姜喜凤
蔡利锋
刘克良
《高等学校化学学报》
SCIE
EI
CAS
CSCD
北大核心
2013年第9期2102-2107,共6页
针对人免疫缺陷病毒跨膜糖蛋白(HIV-1 gp41)N末端重复序列靶标设计二价融合抑制剂,以C肽为模板,通过共价交联形成类似发夹结构的相互平行的2条肽链,研究了二价C肽分子不同连接位点与不同连接臂对抗HIV融合活性的影响.细胞-细胞融合活性...
针对人免疫缺陷病毒跨膜糖蛋白(HIV-1 gp41)N末端重复序列靶标设计二价融合抑制剂,以C肽为模板,通过共价交联形成类似发夹结构的相互平行的2条肽链,研究了二价C肽分子不同连接位点与不同连接臂对抗HIV融合活性的影响.细胞-细胞融合活性测试表明,与单价分子相比,所设计的基于N末端交联的C34或T20的二价分子在前体共价交联后,活性明显提升.基于C34或T20的N末端与C末端均存在发生协同效应的可能性,在C34的N末端设计中β-丙氨酸为最适连接臂,而在C末端的设计中C34C的融合活性提高最大.单价分子CβAC34经过氧化形成二硫键连接的二价分子BiCβAC34,融合活性从43.7 nmol/L提高到6.4 nmol/L,表明二价抑制剂中2条C肽链间具有良好的协同效应.本文结果表明,针对gp41靶标设计的二价融合抑制剂能够相互协同.
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关键词
跨膜糖蛋白
gp
41
人免疫缺陷病毒(HIV)
二价分子
融合抑制剂
多肽
下载PDF
职称材料
HIV-1型gp41抗原蛋白在大肠杆菌无细胞体系中的表达和免疫反应性检测
被引量:
2
2
作者
来力
杨修亮
+3 位作者
盛嘉元
黄磊
蔡谨
徐志南
《药物生物技术》
CAS
2016年第1期7-11,共5页
HIV-1型gp41抗原蛋白在HIV初筛诊断中有重要应用。该研究合成了gp41全长基因序列,将其与p IVEX2.4c酶切连接构建表达载体,在大肠杆菌无细胞体系中实现了目标蛋白的全长可溶表达。考察了添加不同浓度非离子型去污剂Brij78对蛋白可溶性的...
HIV-1型gp41抗原蛋白在HIV初筛诊断中有重要应用。该研究合成了gp41全长基因序列,将其与p IVEX2.4c酶切连接构建表达载体,在大肠杆菌无细胞体系中实现了目标蛋白的全长可溶表达。考察了添加不同浓度非离子型去污剂Brij78对蛋白可溶性的影响,在0.2%Brij78条件下,可溶性gp41重组蛋白的表达水平达到650μg/m L。Ni2+亲和层析纯化目标蛋白,纯度达到95.6%;超滤浓缩后,蛋白浓度为0.9 mg/m L,总回收率为70.8%。免疫反应性检测结果显示该gp41重组抗原制备的乳胶HIV抗体诊断试纸能与不同滴度的HIV-1型阳性标本反应,在检测线位置出现红色条带,而与HIV-1型阴性标本无反应。该研究制备了具有完整氨基酸序列的HIV-1型gp41重组抗原,为进一步提高HIV抗体诊断试剂的质量打下了基础。
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关键词
人类免疫缺陷病毒
跨膜蛋白
gp
41
无细胞体系
去污剂
亲和层析
乳胶免疫层析
试纸
免疫反应性
原文传递
HIV-1 gp41重组抗原的表达及其免疫反应性检测
被引量:
1
3
作者
张昕
梁权
王缦
《现代免疫学》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第3期230-233,共4页
为了在大肠杆菌中表达具有良好免疫反应性的HIV-1gp41重组抗原,本实验运用基因工程技术,经PCR扩增gp41的主要抗原表位序列,BamHⅠ、XhoⅠ双酶切后与E3质粒连接,转化克隆宿主菌DH5α,再提取重组质粒进一步转化表达宿主菌BL21(DE3),经IPT...
为了在大肠杆菌中表达具有良好免疫反应性的HIV-1gp41重组抗原,本实验运用基因工程技术,经PCR扩增gp41的主要抗原表位序列,BamHⅠ、XhoⅠ双酶切后与E3质粒连接,转化克隆宿主菌DH5α,再提取重组质粒进一步转化表达宿主菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达重组蛋白,纯化后标记HRP,通过双抗原夹心酶联免疫方法检测其免疫反应性和特异性。结果表明,获得的HIV-1gp41重组抗原能够与相应抗体特异性结合,与多种无关抗体间无交叉反应,对825份HIV阴性标本检测无错检。检测结果说明该重组抗原具有良好的免疫反应性,在HIV-1抗体诊断试剂中具有潜在的应用价值,为进一步研究gp41抗原奠定了基础。
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关键词
HIV-1
跨膜蛋白
gp
41
重组抗原
酶联免疫吸附法
原文传递
题名
二价HIV-1融合抑制剂的设计、合成与活性评价
被引量:
3
1
作者
凌彦博
王昆
姜喜凤
蔡利锋
刘克良
机构
军事医学科学院毒物药物研究所
出处
《高等学校化学学报》
SCIE
EI
CAS
CSCD
北大核心
2013年第9期2102-2107,共6页
基金
国家自然科学基金(批准号:81072581
81273434)
国家重大新药创制科技重大专项(批准号:2012ZX09301003)资助
文摘
针对人免疫缺陷病毒跨膜糖蛋白(HIV-1 gp41)N末端重复序列靶标设计二价融合抑制剂,以C肽为模板,通过共价交联形成类似发夹结构的相互平行的2条肽链,研究了二价C肽分子不同连接位点与不同连接臂对抗HIV融合活性的影响.细胞-细胞融合活性测试表明,与单价分子相比,所设计的基于N末端交联的C34或T20的二价分子在前体共价交联后,活性明显提升.基于C34或T20的N末端与C末端均存在发生协同效应的可能性,在C34的N末端设计中β-丙氨酸为最适连接臂,而在C末端的设计中C34C的融合活性提高最大.单价分子CβAC34经过氧化形成二硫键连接的二价分子BiCβAC34,融合活性从43.7 nmol/L提高到6.4 nmol/L,表明二价抑制剂中2条C肽链间具有良好的协同效应.本文结果表明,针对gp41靶标设计的二价融合抑制剂能够相互协同.
关键词
跨膜糖蛋白
gp
41
人免疫缺陷病毒(HIV)
二价分子
融合抑制剂
多肽
Keywords
transmembrane
glycoprotein
gp
41
Human
immunodefieieney
virus
(HIV)
Bivalent
molecule
Fusion
inhibitor
Peptide
分类号
O629.72 [理学—有机化学]
下载PDF
职称材料
题名
HIV-1型gp41抗原蛋白在大肠杆菌无细胞体系中的表达和免疫反应性检测
被引量:
2
2
作者
来力
杨修亮
盛嘉元
黄磊
蔡谨
徐志南
机构
浙江大学化学工程与生物工程学院
山东金城生物药业有限公司
出处
《药物生物技术》
CAS
2016年第1期7-11,共5页
基金
863项目(No.2014AA021302)
文摘
HIV-1型gp41抗原蛋白在HIV初筛诊断中有重要应用。该研究合成了gp41全长基因序列,将其与p IVEX2.4c酶切连接构建表达载体,在大肠杆菌无细胞体系中实现了目标蛋白的全长可溶表达。考察了添加不同浓度非离子型去污剂Brij78对蛋白可溶性的影响,在0.2%Brij78条件下,可溶性gp41重组蛋白的表达水平达到650μg/m L。Ni2+亲和层析纯化目标蛋白,纯度达到95.6%;超滤浓缩后,蛋白浓度为0.9 mg/m L,总回收率为70.8%。免疫反应性检测结果显示该gp41重组抗原制备的乳胶HIV抗体诊断试纸能与不同滴度的HIV-1型阳性标本反应,在检测线位置出现红色条带,而与HIV-1型阴性标本无反应。该研究制备了具有完整氨基酸序列的HIV-1型gp41重组抗原,为进一步提高HIV抗体诊断试剂的质量打下了基础。
关键词
人类免疫缺陷病毒
跨膜蛋白
gp
41
无细胞体系
去污剂
亲和层析
乳胶免疫层析
试纸
免疫反应性
Keywords
Human
immunodeficiency
virus
transmembrane
glycoprotein
gp
41
Cell-free
system
Detergent
Affinity
chromatogra
phy
Latex
immunochromatography
assay
Test
strip
Immunoreactivity
分类号
Q81 [生物学—生物工程]
原文传递
题名
HIV-1 gp41重组抗原的表达及其免疫反应性检测
被引量:
1
3
作者
张昕
梁权
王缦
机构
华东理工大学生物化学与分子生物学系
上海科华生物工程股份有限公司
出处
《现代免疫学》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第3期230-233,共4页
基金
上海市科学技术委员会科研计划项目(09DZ2251200)
文摘
为了在大肠杆菌中表达具有良好免疫反应性的HIV-1gp41重组抗原,本实验运用基因工程技术,经PCR扩增gp41的主要抗原表位序列,BamHⅠ、XhoⅠ双酶切后与E3质粒连接,转化克隆宿主菌DH5α,再提取重组质粒进一步转化表达宿主菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达重组蛋白,纯化后标记HRP,通过双抗原夹心酶联免疫方法检测其免疫反应性和特异性。结果表明,获得的HIV-1gp41重组抗原能够与相应抗体特异性结合,与多种无关抗体间无交叉反应,对825份HIV阴性标本检测无错检。检测结果说明该重组抗原具有良好的免疫反应性,在HIV-1抗体诊断试剂中具有潜在的应用价值,为进一步研究gp41抗原奠定了基础。
关键词
HIV-1
跨膜蛋白
gp
41
重组抗原
酶联免疫吸附法
Keywords
HIV-1
transmembrane
glycoprotein
gp
41
recombinant
antigen
ELISA
分类号
R392.11 [医药卫生—免疫学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
二价HIV-1融合抑制剂的设计、合成与活性评价
凌彦博
王昆
姜喜凤
蔡利锋
刘克良
《高等学校化学学报》
SCIE
EI
CAS
CSCD
北大核心
2013
3
下载PDF
职称材料
2
HIV-1型gp41抗原蛋白在大肠杆菌无细胞体系中的表达和免疫反应性检测
来力
杨修亮
盛嘉元
黄磊
蔡谨
徐志南
《药物生物技术》
CAS
2016
2
原文传递
3
HIV-1 gp41重组抗原的表达及其免疫反应性检测
张昕
梁权
王缦
《现代免疫学》
CAS
CSCD
北大核心
2012
1
原文传递
已选择
0
条
导出题录
引用分析
参考文献
引证文献
统计分析
检索结果
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