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题名磷脂酶Cβ1过表达对葡萄糖刺激胰岛素分泌的影响
被引量：2
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作者
周恒宇
邓华聪
郑宏庭
蒋文
南静
陈丹燕
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机构
重庆医科大学附属第一医院内分泌科
第三军医大学新桥医院内分泌科
重庆市中医院急诊科
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出处
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第15期1471-1474,共4页
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基金
国家自然科学基金(30700384)
重庆市自然科学基金(2006BB5098)~~
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文摘
目的观察过表达磷脂酶Cβ1(phospholipase Cβ1,PLCβ1)对葡萄糖刺激胰岛素分泌(glucose-stimulated insulin secretion,GSIS)的影响。方法设定葡萄糖浓度梯度:10、20、40、80、100mmol/L,分别刺激INS-1细胞40min,检测细胞培养上清液中胰岛素含量,确定最适的葡萄糖刺激浓度;设定时间梯度:20、40、60、80、120min,以最适葡萄糖浓度刺激,检测胰岛素含量,确定最适的刺激时间。②以最适葡萄糖浓度刺激INS-1细胞适当时间后,RT-PCR检测PLCβ1表达变化。③构建PLCβ1真核表达载体(PCMV-HA-PLCβ1),转染INS-1细胞,Western blot检测INS-1细胞中PLCβ1蛋白的表达。④收集转染后INS-1细胞培养上清液,检测胰岛素含量。结果用40mmol/L葡萄糖刺激60min,INS-1细胞的胰岛素分泌量最大;RT-PCR观察刺激后PLCβ1表达显著升高;过表达PLCβ1的INS-1细胞培养上清液中胰岛素含量为(1.906±0.080)ng/ml,较转染PCMV-HA载体的对照组(0.740±0.091)ng/ml显著升高(P<0.01)。结论过表达PLCβ1显著增加INS-1细胞的胰岛素分泌,提示PLCβ1可能参与GSIS信息传递。
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关键词
磷脂酶Cβ1
葡萄糖刺激胰岛素分泌
过表达
胰岛素
瞬时转染
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Keywords
phospholipase C β1
glucose-stimulated insulin secretion
overexpression
insulin
transient transfeetion
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分类号
R335.6
[医药卫生—人体生理学]
R345
[医药卫生—基础医学]
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