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题名犬子宫内膜上皮细胞和基质细胞的分离培养与鉴定
被引量：6
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作者
宗振平
朱琪
钱婉莹
钟友刚
许剑琴
刘凤华
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机构
中国农业大学动物医学院
北京农学院动物科学技术学院
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出处
《中国兽医杂志》
CAS
北大核心
2016年第1期20-23,I0001,共5页
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基金
"十二五"国家科技支撑计划重点项目:防制畜禽呼吸
消化系统常见病证中兽药创制及应用示范(2011BAD34B-01)
北京市教委创新团队的建设与教师职业发展的项目(PXM2-013_014207_000067)
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文摘
为了探究犬子宫内膜细胞的培养方法,采用组织块培养法和酶消化培养法进行细胞培养并使用倒置显微镜观察细胞的形态结构和生长状态,对细胞进行免疫组化鉴定。结果表明,组织块培养法需要1周左右培养出犬子宫内膜上皮细胞,且细胞不易纯化;酶消化培养法节省时间,获得的细胞活力强、纯度高。综上所述酶消化培养法更适于培养犬子宫内膜细胞,为后期细胞水平研究奠定基础。
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关键词
犬
子宫内膜细胞
组织块培养法
酶消化培养法
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Keywords
canine
endometrial cells
tissue block culture method
enzymatic digestion culture method
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分类号
S858.292
[农业科学—临床兽医学]
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题名改良法原代培养人脂肪间充质干细胞及其鉴定
被引量：2
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作者
王慧
王翠菊
郑钧元
王华
郭宝娟
陈培
杨旭芳
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机构
牡丹江医学院病理生理学教研室
牡丹江医学院形态学实验室
牡丹江心血管病医院放射诊疗中心
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出处
《中国组织工程研究》
CAS
北大核心
2022年第31期5002-5007,共6页
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基金
牡丹江市应用技术研究与开发计划项目(HT2020JG084),项目负责人:杨旭芳。
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文摘
背景:采用常规酶消化法提取人脂肪间充质干细胞,由于消化的时间过长,导致获得的细胞活性变差,为满足组织工程对种子细胞数量的需求,该实验旨在寻找一种改良的人脂肪间充质干细胞培养方法。目的:胶原酶Ⅰ消化联合组织块培养法获取人脂肪间充质干细胞并进行相关生物学特性的鉴定。方法:将脂肪组织剪碎后分别应用胶原酶Ⅰ消化联合组织块培养法、常规胶原酶消化法进行培养;通过锥虫蓝拒染法计数细胞,比较不同方法获取细胞的产量、活力及增殖能力;利用流式细胞仪检测改良组细胞表面抗原CD105、CD73与CD44的表达;成骨或成脂诱导后,用碱性磷酸酶染色和油红O染色鉴定细胞分化能力。结果与结论:①胶原酶Ⅰ消化联合组织块培养法获取的细胞数量远多于常规酶消化法;②胶原酶Ⅰ消化联合组织块培养法获取的人脂肪间充质干细胞增殖能力强,细胞活力好,比常规酶消化法早1 d进入平台期,传代一次需5 d左右;③第3代改良组人脂肪间充质干细胞CD105、CD73与CD44表达均呈阳性,且纯度均达93%以上;④改良法获取的人脂肪间充质干细胞有良好的成骨与成脂分化能力;⑤结果表明,胶原酶Ⅰ消化法联合组织块培养法较常规酶消化法可获得数量多、活力好、增殖能力强的人脂肪间充质干细胞,且能够稳定传代,具有良好的分化能力,这满足了组织工程学的需求。
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关键词
人脂肪间充质干细胞
原代培养
胶原酶Ⅰ消化法
组织块培养法
改良
产量
增殖
活力
分化
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Keywords
human adipose-derived mesenchymal stem cells
primary culture
collagenase I digestion method
tissue block culture method
modification
yield
proliferation
vitality
differentiation
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分类号
R459.9
[医药卫生—治疗学]
R318
[医药卫生—临床医学]
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题名原代胃癌相关成纤维细胞的分离培养与鉴定方法比较
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作者
梅晶晶
吴霏
支慧
徐慧秋
江玉华
李佳嘉
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机构
皖南医学院弋矶山医院病理科
皖南医学院临床医学院
皖南医学院病理学教研室
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出处
《右江民族医学院学报》
2021年第6期710-713,共4页
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基金
国家自然科学基金项目(21906122)
皖南医学院科研基金项目(WK2020S04)。
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文摘
目的 通过优化人原代胃癌相关成纤维细胞的分离培养方法来提高分离培养细胞的纯度和效率,以期为胃癌的治疗建立相关模型。方法 采用胰酶消化法和组织块消化法相结合,二次筛网过滤、差速贴壁法分离培养人原代胃癌相关成纤维细胞,观察胃癌相关成纤维细胞的形态和生长特点。HE染色和免疫组化鉴别胃癌相关成纤维细胞的表面标志物。结果 0.25%胰酶消化3~4h后,经过筛网过滤,可以得到较少的胃癌相关成纤维细胞,过滤后的组织块继续在培养瓶中培养可以得到较多的胃癌相关成纤维细胞。胰酶消化法得到的细胞在20d后可以铺满瓶底,组织块培养法得到的细胞可以在14d铺满瓶底。结论 胃癌相关成纤维细胞在第5代后的生长速度开始缓慢,并且随着传代次数的增多,细胞的形态发生相应的改变,细胞触角增多,胞体变短。所获得的细胞ɑ-平滑肌肌动蛋白和波形蛋白都是呈阳性表达,角蛋白CK-18呈阴性表达。
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关键词
癌相关成纤维细胞
胰酶消化法
组织块培养法
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Keywords
cancer-associated fibroblasts
trypsin digestion
tissue block culture method
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分类号
R735.2
[医药卫生—肿瘤]
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