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鼠胸腺树状突细胞株表达的化学趋化因子的类型分析 被引量：2
1
作者 郭静竹 龚顺友 +2 位作者 谢来平 钱晓萍 陈慰峰 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期93-96,共4页
目的　分析小鼠胸腺树突状细胞株 (MTDC)中化学趋化因子的类型。方法　以自行设计的引物 ,用逆转录聚合酶链式反应 (RT PCR)方法 ,从小鼠MTDC细胞株扩增SDF 1,IP 10 ,KC等几种化学趋化因子的cDNA片段 ,并对部份扩增产物进行核苷酸测序 ,... 目的　分析小鼠胸腺树突状细胞株 (MTDC)中化学趋化因子的类型。方法　以自行设计的引物 ,用逆转录聚合酶链式反应 (RT PCR)方法 ,从小鼠MTDC细胞株扩增SDF 1,IP 10 ,KC等几种化学趋化因子的cDNA片段 ,并对部份扩增产物进行核苷酸测序 ,或dotblotting杂交分析 ,以MTDC浓缩上清进行趋化实验。结果　自MTDC中扩增出了SDF 1、IP 10、KC、MCP 1和Lymphotactin等 5种化学趋化因子的cDNA片段 ,并对SDF 1、KC和Lymphotactin的PCR产物做了核苷酸测序鉴定证明 ,对MCP 1、IP 10和Lymphotactin亦进行dotblotting分析证实。MTDC浓缩上清对小鼠胸腺CD-4 CD-8细胞的趋化指数 (CI)为 3.0 4。结论　MTDC细胞株中存在着多种化学趋化因子。MTDC的浓缩培养上清对小鼠胸腺CD-4 、CD-8细胞具有中等强度的趋化活性 ,符合SDF 1的生物功能。 展开更多
关键词 胸腺树突状细胞 趋化因子 化学分析 类型
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IL-7对胸腺T细胞及树突状细胞体外分化发育的影响 被引量：1
2
作者 许云云 王泳 +4 位作者 李毅平 李芳 徐小霞 朱守兵 张学光 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期108-112,共5页
目的:探讨IL-7对胸腺T细胞及胸腺树突状细胞分化的影响。方法:摘取15～16日龄胎鼠胸腺进行体外器官培养(胚胎胸腺器官培养-FTOC),分别将细胞因子IL-7和培养基滴加在胸腺小叶上,12天后收集不同条件下经FTOC培养获得的胸腺细胞,流式细胞... 目的:探讨IL-7对胸腺T细胞及胸腺树突状细胞分化的影响。方法:摘取15～16日龄胎鼠胸腺进行体外器官培养(胚胎胸腺器官培养-FTOC),分别将细胞因子IL-7和培养基滴加在胸腺小叶上,12天后收集不同条件下经FTOC培养获得的胸腺细胞,流式细胞仪检测细胞表面分子CD4、CD8、CD11c、B220、Ia等的表达,通过光学显微镜观察细胞形态,通过细胞计数检测细胞数目的变化。再将经FTOC培养获得的胸腺细胞和异源的T细胞进行混合淋巴细胞反应,通过MTT法检测T细胞的增殖情况。结果:细胞计数结果表明添加外源性IL-7组的胸腺细胞数目明显减少,流式细胞仪检测结果显示其中胸腺CD4-CD8-双阴性细胞及CD8+单阳性细胞比例有所增加,而CD4+CD8+双阳性细胞比例显著下降,CD4+单阳性细胞比例没有明显变化;此外,B细胞和树突状细胞、NK细胞数量均有不同程度的增加。结论:IL-7在胸腺T细胞及胸腺树突状细胞的分化发育中发挥重要的调节作用。 展开更多
关键词 胚胎胸腺器官培养 IL-7 胸腺T细胞 胸腺树突状细胞
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Flt3L对小鼠胸腺树突状细胞在FTOC体系中分化发育的作用
3
作者 许云云 李毅平 +4 位作者 李芳 朱雪明 汪健 王泳 张学光 《现代免疫学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期450-455,共6页
为了借助FTOC体系探讨Flt3L对小鼠胸腺树突状细胞分化发育的影响。摘取15～16d龄胎鼠胸腺进行体外器官培养(胎鼠胸腺器官培养-FTOC),根据所使用培养基的不同实验分为两组:对照组(基础培养基)和Flt3L组(培养基中含有细胞因子Flt3L),在体... 为了借助FTOC体系探讨Flt3L对小鼠胸腺树突状细胞分化发育的影响。摘取15～16d龄胎鼠胸腺进行体外器官培养(胎鼠胸腺器官培养-FTOC),根据所使用培养基的不同实验分为两组:对照组(基础培养基)和Flt3L组(培养基中含有细胞因子Flt3L),在体外进行FTOC常规培养,12d后分别收集两实验组的胸腺细胞,流式细胞仪检测细胞表面分子CD4、CD8、CD11c、Ia等的表达,通过光学显微镜观察细胞形态。骨髓来源的c-kit+造血干细胞通过悬滴培养方法种植入2-脱氧鸟苷处理过的胸腺,随后将胸腺放置于组织器官培养皿中所使用的培养基为基础培养基或加入细胞因子Flt3L的培养基,进行为期12d的FTOC常规培养。12d后收集不同条件下FTOC培养的胸腺细胞,通过流式细胞仪对胸腺细胞的表型进行分析;将在不同条件下FTOC培养获得的胸腺细胞进行MACS分选,从而获得胸腺树突状细胞(CD11c+DC),再与异源的CD4+T细胞进行混合淋巴细胞反应,通过MTT法检测T细胞的增殖情况。结果:在正常FTOC体系中,流式细胞仪检测结果和细胞形态学结果显示:Flt3L组胸腺DC有明显的增加,且FTOC联合悬滴培养体系中Flt3L组胸腺DC的生成率明显高于对照组;MTT检测结果也显示:没有CpG2006刺激时,胸腺DC刺激T细胞增殖的能力比较弱,但添加CpG2006刺激后,胸腺DC趋向于成熟表型,刺激T细胞增殖的能力有所增强。提示,Flt3L在小鼠胸腺DC的分化发育中发挥重要的调节作用,明显促进小鼠骨髓来源的c-kit+造血干细胞向胸腺DC的分化。 展开更多
关键词 FTOC FLT3L 胸腺树突状细胞 c-kit+造血干细胞
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