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题名热休克蛋白增加大肠杆菌抗逆性和乙醇产量的研究
被引量:2
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作者
李伟丽
李海燕
李良
曾一梅
汪浩勇
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机构
湖北工业大学
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出处
《生物技术》
CAS
CSCD
2008年第5期54-58,共5页
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基金
湖北省优秀中青年团队计划项目("构建乙醇高温发酵基因工程菌"
T200705)资助
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文摘
目的:研究热休克蛋白对增加大肠杆菌抗逆性和乙醇产量的影响。方法:运用基因工程技术,用大肠杆菌的Lac启动子、运动发酵单胞菌的丙酮酸脱羧酶基因(pdc)和乙醇脱氢酶基因(adhB),构建可以在大肠杆菌中表达的Lac-AP操纵子。Lac-AP操纵子导入大肠杆菌,可使大肠杆菌发酵糖生产乙醇。再用来自超嗜热菌强烈火球菌(Pyrococcus furiosus)的小分子热休克蛋基因(sHsp),构建在大肠杆菌中表达的Lac-APH操纵子。结果:成功地构建了耐高温产生乙醇的大肠杆菌LAPH和LAP,它们发酵后乙醇的产量分别为11.5g/L、7.9g/L,而对照菌LH的产量只有为0.5g/L。与对照菌LH相比,LAPH和LAP的产量分别提高了23倍和15.8倍。结果证明:与对照LAP相比,热休克蛋白使菌种LAPH的45℃温度耐受性提高15.75倍、50℃温度耐受性提高40.7倍,乙醇的产量增高高达4.74倍。结论:研究表明,小分子热休克蛋白的表达,可使细菌在致死温度下的存活率显著提高,耐受温度明显增强,乙醇产量显著提高。
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关键词
丙酮酸脱羧酶基因(pdc)
乙醇脱氢酶基因(adhB)
大肠杆菌
燃料乙醇
热休克蛋白基因(shsp)
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Keywords
pyruvate decarboxylase gene (pdc)
alcohol dehydrogenase Ⅱ gene (adhB)
Escherichia coli
fuel ethanol
the small heat shockprotein gene (shsp)
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分类号
Q785
[生物学—分子生物学]
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