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含第1内含子的猪生长激素cDNA基因的构建 被引量:8
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作者 仲飞 刘维全 +3 位作者 孙丽翠 张玉国 刘朋朋 齐顺章 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第4期347-351,共5页
以 PCR方法扩增了猪生长激素 ( p GH)基因的第 1内含子 ,经测序表明 ,扩增的 p GH基因第 1内含子的序列与 Vize发表的序列存在 6个碱基的差异 ,同源性达 97.5%,说明 p GH基因第 1内含子具有多态性。此外 ,还发现此内含子存在有转录因子 ... 以 PCR方法扩增了猪生长激素 ( p GH)基因的第 1内含子 ,经测序表明 ,扩增的 p GH基因第 1内含子的序列与 Vize发表的序列存在 6个碱基的差异 ,同源性达 97.5%,说明 p GH基因第 1内含子具有多态性。此外 ,还发现此内含子存在有转录因子 ATF的结合位点。利用第 2外显子的 Hinf 位点 ,采用将 3个 DNA片段一步连接的方法 ,将扩增的第 1内含子插入到 p GHc DNA的正确位置上 ,从而构建出含第 1内含子的p GHc DNA。 展开更多
关键词 猪生长激素基因 CDNA 病毒载体
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拟南芥FRUITFULL(FUL)基因的表达调控模式 被引量:8
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作者 褚婷婷 谢华 +1 位作者 徐勇 马荣才 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第11期1546-1554,共9页
FRUITFULL(FUL)基因是一类MADS box基因,在控制开花时间、花分生组织分化、茎生叶形态以及心皮和果实的发育中发挥重要作用。为了阐明FUL的表达调控模式,克隆了拟南芥Arabidopsis thaliana FUL启动子区(-2148bp^+96bp)及其第一内含子,... FRUITFULL(FUL)基因是一类MADS box基因,在控制开花时间、花分生组织分化、茎生叶形态以及心皮和果实的发育中发挥重要作用。为了阐明FUL的表达调控模式,克隆了拟南芥Arabidopsis thaliana FUL启动子区(-2148bp^+96bp)及其第一内含子,并构建一系列启动子分段缺失表达载体及含FUL第一内含子的融合载体。并进一步构建了各顺式作用元件融合拟南芥TUBULIN和ACTIN启动子的表达载体。转基因拟南芥分析结果表明,FUL启动子的上游存在2个抑制其表达的顺式作用元件,其中一个很可能与转录因子AP1的结合有关;2个存在于上游调控区的CArG-box对FUL基因表达起到重要的调控作用;FUL基因第一内含子参与拟南芥心皮和雄蕊的发育调控,而且有增强基因表达的作用。 展开更多
关键词 拟南芥 FUL基因 启动子 第一内含子 缺失分析 GUS活性
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含第一内含子猪生长激素cDNA基因在COS7细胞中的表达 被引量:5
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作者 李秀锦 仲飞 齐顺章 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期49-53,共5页
以CMV真核生物启动子构建了含第一内含子猪生长激素(pGH)cDNA基因(pGHcDNA in)的表达载体,经DEAE 葡聚糖介导在COS7细胞进行了瞬时表达,通过PP95生物学测定法测定,证明含第一内含子pGHcDNA基因能够在真核细胞中进行分泌性表达,表达出的... 以CMV真核生物启动子构建了含第一内含子猪生长激素(pGH)cDNA基因(pGHcDNA in)的表达载体,经DEAE 葡聚糖介导在COS7细胞进行了瞬时表达,通过PP95生物学测定法测定,证明含第一内含子pGHcDNA基因能够在真核细胞中进行分泌性表达,表达出的pGH具有生物学活性。这说明通过该基因转录出的前体mR NA能够在COS7细胞中进行正确剪接,从而翻译出具有生物活性的pGH。加入第一内含子在一定程度上可提高pGHcDNA基因的表达效率。 展开更多
关键词 第一内含子 生长激素 CDNA基因 COS7细胞 表达
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Relationship Between the First Base of the Donor Splice Site of Waxy Gene Intron 1 and Amylose Content in Yunnan Indigenous Rice Varieties 被引量:2
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作者 ZHANG Ya 1i Xu Ming hui +2 位作者 ZENG Ya wen YAO Chun xin CHEN Shan na 《Rice science》 SCIE 2007年第3期189-194,共6页
There exists a single nucleotide polymorphism, G or T, at the first base of the donor splice site of waxy gene intron 1 in rice. In order to study the relationship between the first base of the donor splice site of wa... There exists a single nucleotide polymorphism, G or T, at the first base of the donor splice site of waxy gene intron 1 in rice. In order to study the relationship between the first base of the donor splice site of waxy gene intron 1 and amylose content in rice, the one-step PCR method was used to determine whether it is G or T in 220 Yunnan indigenous rice varieties from 14 districts, 55 towns/counties of Yunnan Province, and 101 varieties of which were validated by the PCR-Acc I method. According to the G/T polymorphism, 164 rice varieties showed GG-genotype, while the other 56 fell into TT- genotype, accounting for 74.5% and 25.5% of all the test varieties, respectively. When all the rice varieties were divided into indica and japonica subspecies, it was found that 80.5% of indica rice and 67.0% of japonica rice belonged to GG-genotype. The rice varieties with GG-genotype had significantly higher amylose content (18.95% on average) than those with TT- genotype (all below 16%), but 33 rice varieties with GG-genotype still had low amylose content ranging from 3.91% to 15.93%, and most of them came from the Dai minority area in the Southwest of Yunnan Province. However, there was no significant difference in the mean amylose content of the same GG or TT genotypes between indica and japonica rice, suggesting that different genetic backgrounds, indica or japonica, had no effect on amylose content. The coefficient of correlation between the genotype and amylose content was 0.733 (P〈0.01). 展开更多
关键词 Yunnan indigenous rice varieties waxy gene intron the first base of donor splice site amylose content genotype RELATIONSHIP
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杂交水稻骨干亲本Wx基因第一内含子+1位碱基多态性分析 被引量:3
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作者 连玲 潘丽燕 +8 位作者 朱永生 许惠滨 郑燕梅 何炜 罗曦 王颖姮 蔡秋华 谢华安 张建福 《福建农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第12期1355-1363,共9页
【目的】直链淀粉含量是影响稻米品质的重要因素,而编码颗粒结合型淀粉合成酶(granule-bound starch synthetase,GBSS)的蜡质基因(Wx)是影响直链淀粉含量的主效基因。本研究拟分析120份杂交水稻亲本的Wx基因第一内含子+1位碱基的多态性... 【目的】直链淀粉含量是影响稻米品质的重要因素,而编码颗粒结合型淀粉合成酶(granule-bound starch synthetase,GBSS)的蜡质基因(Wx)是影响直链淀粉含量的主效基因。本研究拟分析120份杂交水稻亲本的Wx基因第一内含子+1位碱基的多态性,以期研究其对内含子的剪接效率及Wx的表达的影响,为亲本育种筛选提供理论参考。【方法】选取120份水稻亲本材料,采用CTAB法提取基因组DNA,并以此为模版PCR扩增Wx基因片段;采用限制性内切酶Acc I对PCR产物进行酶切分析,根据琼脂糖电泳结果分析Wx基因第一内含子+1位碱基类型;同时测定其中19份亲本的直链淀粉含量、胶稠度和碱消值。【结果】PCR扩增结果显示所有材料中均可扩增出清晰且单一的目的条带;PCR产物的Acc I酶切分析结果显示,其中81份亲本的Wx基因第一内含子+1位碱基是T,即为T型,占总数的67.5%,38份亲本为G型,占总数的31.67%,而仅有1份亲本为杂合型,即GT型,占总数的0.83%。19份亲本的直链淀粉含量测定结果表明,7份G型亲本的直链淀粉含量比12份T型亲本的高,且其中6个G型亲本的直链淀粉含量平均值均超过20%。另外,测定结果表明T型亲本和G型亲本的胶稠度和碱消值差别不明显。【结论】120份杂交水稻骨干亲本的Wx基因第一内含子+1位碱基类型测定结果表明,与T型亲本相比,G型亲本的直链淀粉含量明显较高,而胶稠度和碱消值没有明显差别。 展开更多
关键词 WX基因 第一内含子 碱基多态性 直链淀粉含量
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THE ROLE OF INTRONIC HSE IN THE HEAT SHOCK INDUCED EXPRESSION OF HUMAN hsp 90β GENE 被引量:1
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作者 Wang Xiaozhe, Wang Yanlin, Liu Juhong , Wu Ninghua and Shen Yufei (沈) National Laboratory of Medical Molecular Biology, Institute of Basic Medical Sciences, CAMS & PUMC, Beijing 100005 《Chinese Medical Sciences Journal》 CAS CSCD 1998年第4期8-12,共5页
The first intron of human hsp90β gene is not only essential in maintaining high constitutive expression but also critical for heat shock inducibility of the hsp90β gene. Typical HSEs in ... The first intron of human hsp90β gene is not only essential in maintaining high constitutive expression but also critical for heat shock inducibility of the hsp90β gene. Typical HSEs in the first intron play a vital role in the heat induced expression of human hsp90β gene. Slot blot analysis shows that hsp90β gene mRNA transcripts initiated from the 3’ of the first intron dominates over that of the first exon. The intronic HSEs of the hsp90β gene show much higher binding affinity toward the recombinant heat shock factor HSF1 than that of the recombinant heat shock factor HSF2. 展开更多
关键词 hsp90β GENE HEAT shock ELEMENT the first intron
全文增补中
腺病毒介导的含第一内含子pGH cDNA在CHO细胞中的表达 被引量:1
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作者 李秀锦 仲飞 +1 位作者 王辛中 齐顺章 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期193-197,共5页
通过同源重组的方法分别构建了在CMV启动子控制下的带有第一内含子和不带内含子的pGHcDNA基因的重组腺病毒。通过感染CHO细胞表明 ,构建的重组腺病毒能够介导pGH基因在CHO细胞中表达 ,加入第一内含子的pGHcDNA基因的表达效率比不加内含... 通过同源重组的方法分别构建了在CMV启动子控制下的带有第一内含子和不带内含子的pGHcDNA基因的重组腺病毒。通过感染CHO细胞表明 ,构建的重组腺病毒能够介导pGH基因在CHO细胞中表达 ,加入第一内含子的pGHcDNA基因的表达效率比不加内含子的提高了 117% ,这说明pGH基因的第一内含子有促进该基因在真核细胞中表达的功能。 展开更多
关键词 猪生长激素基因 第一内含子 腺病毒载体 CHO细胞 表达
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青萝卜晚抽薹性状回交转育及FLC2第1内含子PCR扩增检测 被引量:2
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作者 刘春香 隋铭 +4 位作者 刘春霞 向春玲 曹红祥 常天利 尹晨霖 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2019年第5期83-92,共10页
FLC2基因作为影响成花的关键枢纽基因,在十字花科植物成花转变过程中具有重要作用。为了培育适于早春栽培的晚抽薹青萝卜新品种,在充分考虑FLC2基因对抽薹开花作用的基础上,以晚抽薹基因型白玉春萝卜为供体,通过回交转育的方法将晚抽薹... FLC2基因作为影响成花的关键枢纽基因,在十字花科植物成花转变过程中具有重要作用。为了培育适于早春栽培的晚抽薹青萝卜新品种,在充分考虑FLC2基因对抽薹开花作用的基础上,以晚抽薹基因型白玉春萝卜为供体,通过回交转育的方法将晚抽薹性状转移到潍县青萝卜中,并在转育过程中对FLC2扩增多态性进行了研究,以探索晚抽薹植株FLC2的特征,并开发其对早春品种选育的作用。结果表明:FLC2第1内含子在晚抽薹供体中具有长约1 628 bp的插入突变,该基因型对晚抽薹作用较大,纯合的插入突变对晚抽薹作用大于杂合型。通过对该插入突变的PCR扩增可知,不同春化时期对插入突变内含子扩增的影响不同,短期春化主要影响野生型FLC2第1内含子的扩增,较长时间的春化主要影响插入突变内含子的扩增,而在抽薹开花期2种基因型的扩增基本不受影响,扩增效率高。通过改进引物,可以提高扩增效率,但不能消除春化对FLC2第1内含子扩增的影响,苗期未经春化植株不及抽薹开花期检测效果好。萝卜晚抽薹回交转育可以连续进行,每次转育只要获得杂合基因型即可传递晚抽薹性状,最后的自交后代,通过花期对插入突变内含子的PCR检测可以准确鉴定植株是否为纯合突变型晚抽薹植株,获得遗传稳定的晚抽薹基因型,从而可防止后代晚抽薹性状的分离。 展开更多
关键词 萝卜 晚抽薹 FLC2第1内含子 春化 回交
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