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纳米材料的概述、制备及其结构表征 被引量:21
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作者 蔡元霸 梁玉仓 《Chinese Journal of Structural Chemistry》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2001年第6期425-438,共14页
纳米材料在电子、光学、化工、陶瓷、生物和医药等诸多方面的重要应用而引起人们的高度重视。本文从以下3个方面加以论述。 一、纳米材料的概述:从分子识别、分子自组装、吸附分子与基底的相互关系、分子操作与分子器件的构筑,并通过具... 纳米材料在电子、光学、化工、陶瓷、生物和医药等诸多方面的重要应用而引起人们的高度重视。本文从以下3个方面加以论述。 一、纳米材料的概述:从分子识别、分子自组装、吸附分子与基底的相互关系、分子操作与分子器件的构筑,并通过具体的例证加以阐述,包括在STM操作下单分子反应;有机小分子在半导体表面的自指导生长;多肽-半导体表面特异性选择结合;生物分子/无机纳米组装体;光驱动多组分三维结构组装体;DNA分子机器。 二、纳米材料的若干制备方法和结构表征方法:制备方法包括:物理的蒸发冷凝法,分子束外延法(MBE),机械球磨法,扫描探针显微镜法(SPM)。化学的气相沉淀法(VCD),液相沉淀法,溶胶-凝胶法(Sol-gel),L-B膜法,自组装单分子层和表面图案化法,水热/溶剂热法,喷雾热解法,样板合成法或化学环境限制法及自组装法。 三、若干结构表征方法包括:X-射线法(XRD),扩展X射线精细结构吸收谱(EXAFS),X-射线光电子能谱(XPS),光谱法,扫描隧道显微镜/原子力显微镜(STM/AFM)和有机质谱法(OMS)。 展开更多
关键词 纳米材料 制备 自组装 结构表征 纳米器件 物理方法 化学方法
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合成生物学技术的研究进展——DNA合成、组装与基因组编辑 被引量:17
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作者 李诗渊 赵国屏 王金 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期343-360,共18页
合成生物学作为一门新兴学科,其目标主要有两点:一是利用非天然的分子使其出现生命的现象,也就是―人造生命‖;二是―改造生命‖,比如利用一种生命体的元件(或经过人工改造),组装到另一个生命体中,使其产生特定功能。无论是哪种目的,对... 合成生物学作为一门新兴学科,其目标主要有两点:一是利用非天然的分子使其出现生命的现象,也就是―人造生命‖;二是―改造生命‖,比如利用一种生命体的元件(或经过人工改造),组装到另一个生命体中,使其产生特定功能。无论是哪种目的,对生命遗传物质DNA的操作都非常关键,其具体包括DNA的从头合成、组装和编辑等。同时,这些使能技术的进步也促进了合成生物学其他领域的发展。本文介绍了DNA操作相关的合成生物学使能技术的最新进展。 展开更多
关键词 合成生物学 使能技术 DNA组装 基因合成 基因组编辑
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自动化合成生物技术与工程化设施平台 被引量:14
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作者 唐婷 付立豪 +7 位作者 郭二鹏 张振坤 王子宁 马辰飞 张智彧 张建志 黄建东 司同 《科学通报》 EI CAS CSCD 北大核心 2021年第3期300-309,共10页
合成生物学采用工程化设计理念,对生物体进行有目标的设计、改造,甚至从头合成具有特定功能的“人造生命”,用于探索生命活动规律和进行生物技术创新.由于生命系统高度复杂,人工设计的合成生命体很难完全按照预期工作,往往需要长时间的... 合成生物学采用工程化设计理念,对生物体进行有目标的设计、改造,甚至从头合成具有特定功能的“人造生命”,用于探索生命活动规律和进行生物技术创新.由于生命系统高度复杂,人工设计的合成生命体很难完全按照预期工作,往往需要长时间的反复调谐.目前,“试错”过程主要依靠研究者手动完成,存在通量低、重复性差、迭代慢等局限.针对这一难题,自动化合成生物技术通过低成本、多循环地完成海量工程试错性实验,提高研究通量和效率,大幅增加实验设计的复杂度和系统性,从而快速实现特定功能,揭示人工生命体的设计原理.近年来,在合成生物学“设计-构建-测试-学习”的各个研究环节,自动化技术正在以前所未有的速度加速发展.与此对应,在全球范围内已建成或在建多个大型工程化平台,用于支撑相关研究和应用.本文旨在对自动合成生物技术的关键要素进行总结,并对合成生物研究基础设施的发展情况和未来方向进行讨论. 展开更多
关键词 合成生物学 自动化 高通量 生物铸造厂 云端实验室 DNA组装
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Enabling technology and core theory of synthetic biology 被引量:7
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作者 Xian-En Zhang Chenli Liu +8 位作者 Junbiao Dai Yingjin Yuan Caixia Gao Yan Feng Bian Wu Ping Wei Chun You Xiaowo Wang Tong Si 《Science China(Life Sciences)》 SCIE CAS CSCD 2023年第8期1742-1785,共44页
Synthetic biology provides a new paradigm for life science research(“build to learn”)and opens the future journey of biotechnology(“build to use”).Here,we discuss advances of various principles and technologies in... Synthetic biology provides a new paradigm for life science research(“build to learn”)and opens the future journey of biotechnology(“build to use”).Here,we discuss advances of various principles and technologies in the mainstream of the enabling technology of synthetic biology,including synthesis and assembly of a genome,DNA storage,gene editing,molecular evolution and de novo design of function proteins,cell and gene circuit engineering,cell-free synthetic biology,artificial intelligence(AI)-aided synthetic biology,as well as biofoundries.We also introduce the concept of quantitative synthetic biology,which is guiding synthetic biology towards increased accuracy and predictability or the real rational design.We conclude that synthetic biology will establish its disciplinary system with the iterative development of enabling technologies and the maturity of the core theory. 展开更多
关键词 synthetic biology quantitative synthetic biology genome synthesis and assembly DNA storage molecular evolution de novo design computer-aided design cell engineering gene circuit chassis cell artificial intelligent(AI) biofoundry
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合成生物学使能技术的研究进展 被引量:8
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作者 李雷 姜卫红 +2 位作者 覃重军 薛小莉 芦银华 《中国科学:生命科学》 CSCD 北大核心 2015年第10期950-968,共19页
作为一门拥有巨大潜力的新兴工程学科,合成生物学的发展主要得益于各种使能技术(enabling technology)的创新开发与应用.从基本功能元件的构建与标准化,到高通量的微芯片基因合成技术与各种尺度(从bp至Mb)的DNA拼接组装方法,再到强大的... 作为一门拥有巨大潜力的新兴工程学科,合成生物学的发展主要得益于各种使能技术(enabling technology)的创新开发与应用.从基本功能元件的构建与标准化,到高通量的微芯片基因合成技术与各种尺度(从bp至Mb)的DNA拼接组装方法,再到强大的基因组编辑工具,在过去十几年里合成生物学使能技术取得了长足的进步.同时,新颖的使能技术也为遗传学、癌症治疗、疾病监测以及生物制造等领域提供了优秀的研究工具,促进了多个学科的发展.如果将这些使能技术作为"配件工具",那么相对应的"主体设备"——底盘细胞也因工具的不断创新得到了快速发展.微生物最小基因组的分析以及对基因组的连续删简优化,为构建一个具有可预测、可控制表型的优良底盘细胞奠定了基础.为促进基于细胞疗法的人类疾病治疗,哺乳动物细胞作为底盘细胞也正在开发中.本文对合成生物学使能技术的最新发展进行了深入总结和梳理,探讨了这些使能技术在合成生物学乃至整个生命科学研究中的应用及其重要意义. 展开更多
关键词 合成生物学 使能技术 生物元件 基因合成 DNA组装 基因组编辑 底盘细胞
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萜类合成生物学研究进展 被引量:7
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作者 汪建峰 蒙海林 王勇 《中国科学:生命科学》 CSCD 北大核心 2015年第10期1040-1050,共11页
萜类合成生物学的研究已经使萜类微生物异源合成显示出了巨大的应用潜力.但由于植物源萜类代谢的复杂性,大量萜类合成途径仍未获得完全解析.因此当前大部分萜类仅能通过微生物异源合成获得非常简单的中间体,并且大多数产物的产量仍然较... 萜类合成生物学的研究已经使萜类微生物异源合成显示出了巨大的应用潜力.但由于植物源萜类代谢的复杂性,大量萜类合成途径仍未获得完全解析.因此当前大部分萜类仅能通过微生物异源合成获得非常简单的中间体,并且大多数产物的产量仍然较低,通常局限在毫克每升的水平.针对以上2个亟待突破的瓶颈,本文将从萜类合成途径解析与下游途径装配,高产萜类底盘细胞设计与构建,以及萜类异源合成系统的适配性研究3个方面阐述萜类合成生物学研究的最新策略与进展. 展开更多
关键词 萜类 合成生物学 途径解析 途径装配 系统适配
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合成生物学中的DNA组装技术 被引量:7
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作者 赵鹃 王霞 +2 位作者 李炳志 程景胜 元英进 《生命科学》 CSCD 2013年第10期983-992,共10页
合成生物学旨在应用工程学的研究思路及手段去设计或改造生物系统,是一个综合了科学与工程的拥有发展潜力的新兴学科,在生物医药、农业、能源、环保等方面发挥着巨大作用。DNA组装技术是合成生物学中的关键技术,也是合成生物学快速发展... 合成生物学旨在应用工程学的研究思路及手段去设计或改造生物系统,是一个综合了科学与工程的拥有发展潜力的新兴学科,在生物医药、农业、能源、环保等方面发挥着巨大作用。DNA组装技术是合成生物学中的关键技术,也是合成生物学快速发展的限制性技术。综述了众多DNA组装技术的发展及其在合成生物学研究中的意义和应用。 展开更多
关键词 合成生物学 DNA组装 基因合成 生物途径构建 基因组合成
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介孔金属氧化物/复合物的合成方法 被引量:4
8
作者 王燕刚 王遥俊 +3 位作者 李常林 刘晓晖 王艳芹 卢冠忠 《化学进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2006年第10期1338-1344,共7页
介孔金属氧化物及其复合物由于其特有的组成与结构,在催化、传感、光、电、磁等领域有着广泛的应用,是近年来国内外跨学科领域研究的热点。本文对近几年来介孔金属氧化物及其复合物的合成方法进行了归纳总结,其合成途径大致可以分为软... 介孔金属氧化物及其复合物由于其特有的组成与结构,在催化、传感、光、电、磁等领域有着广泛的应用,是近年来国内外跨学科领域研究的热点。本文对近几年来介孔金属氧化物及其复合物的合成方法进行了归纳总结,其合成途径大致可以分为软模板法、硬模板法及纳米晶粒组装法。 展开更多
关键词 介孔金属氧化物 合成方法 软模板 硬模板 纳米晶粒组装法
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合成生物学在蛋白质功能材料领域的研究进展 被引量:6
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作者 王盼 朱晨辉 +1 位作者 赵婧 范代娣 《合成生物学》 CSCD 2021年第1期46-58,共13页
蛋白质功能材料具有良好的生物相容性、可降解性和多功能性,在医药、军事和纺织等领域应用价值巨大。然而,材料蛋白具有分子量大、高频氨基酸多和翻译后修饰特殊等独特性,导致其在人工细胞合成中存在表达率低、各功能元件与底盘细胞适... 蛋白质功能材料具有良好的生物相容性、可降解性和多功能性,在医药、军事和纺织等领域应用价值巨大。然而,材料蛋白具有分子量大、高频氨基酸多和翻译后修饰特殊等独特性,导致其在人工细胞合成中存在表达率低、各功能元件与底盘细胞适配性差、结构及功效不稳定等瓶颈,严重限制了这些蛋白的高效生产与应用。掀起第三次生物技术革命的合成生物学技术,以“基因调控,工程设计”为核心,可用于产品的精准化设计与高效合成,实现人类对可持续发展工业模式的期待。本文介绍了蛋白质功能材料的应用及发展,以蛋白高效合成及功能需求为导向,从蛋白分子的定向设计、细胞工厂构建与适配调控以及蛋白材料加工应用等方面阐述蛋白质功能材料的合成策略,以实现其功能定向强化及工业化生产。目前以合成生物学的科学理念为指导,对生命体进行不断改造与优化,以实现细胞工厂定向合成蛋白,结合理性设计的材料模块,赋予蛋白质在生产过程的智能可控以及性能的更新升级是研究的热点。展望未来,讨论了蛋白质功能材料在面向产业应用过程中需要克服的挑战,为性能优异的蛋白质功能材料广泛应用提供可能。 展开更多
关键词 合成生物学 蛋白质功能材料 高频氨基酸 适配调控 装配加工
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同源重组方法在制备DNA大片段中的应用 被引量:5
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作者 倪现朴 季州翔 夏焕章 《沈阳药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第8期663-668,共6页
目的介绍快速、简便制备DNA大片段的新方法。方法查阅国内外近年关于DNA大片段制备方法的文献33篇,对这些方法进行归纳和总结。结果综述了大肠杆菌Red/ET重组系统和基于酿酒酵母重组系统的DNA自组装和TAR克隆在DNA片段制备中的应用。结... 目的介绍快速、简便制备DNA大片段的新方法。方法查阅国内外近年关于DNA大片段制备方法的文献33篇,对这些方法进行归纳和总结。结果综述了大肠杆菌Red/ET重组系统和基于酿酒酵母重组系统的DNA自组装和TAR克隆在DNA片段制备中的应用。结论同源重组系统不仅提高了克隆DNA大片段的效率,而且简化了操作流程。这些方法在制备DNA大片段用于组合生物合成和合成生物学制备药物中具有重要的应用前景。 展开更多
关键词 合成生物学 同源重组 RecET系统 DNA自组装 酵母TAR克隆
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Total Chemical Synthesis, Assembly of Human Torque Teno Virus Genome 被引量:4
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作者 Zheng Hou Gengfu Xiao 《Virologica Sinica》 SCIE CAS CSCD 2011年第3期181-189,共9页
Torque teno virus(TTV) is a nonenveloped virus containing a single-stranded,circular DNA genome of approximately 3.8kb.We completely synthesized the 3 808 nucleotides of the TTV(SANBAN isolate) genome,which contains a... Torque teno virus(TTV) is a nonenveloped virus containing a single-stranded,circular DNA genome of approximately 3.8kb.We completely synthesized the 3 808 nucleotides of the TTV(SANBAN isolate) genome,which contains a hairpin structure and a GC-rich region.More than 100 overlapping oligonucleotides were chemically synthesized and assembled by polymerase chain assembly reaction(PCA),and the synthesis was completed with splicing by overlap extension(SOEing).This study establishes the methodological basis of the chemical synthesis of a viral genome for use as a live attenuated vaccine or gene therapy vector. 展开更多
关键词 Torque teno virus(TTV) synthetic biology Polymerase chain assembly reaction(PCA) Gene splicing by overlap extension(SOEing)
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Chiral supramolecular 2D halogen-bonded organic frameworks constructed by post-synthetic modified cross-linking strategy
12
作者 Ning Xia Jiahao Zhao +5 位作者 Guanfei Gong Hongqiang Dong Haohu Li Jike Wang Lu Wang Shigui Chen 《Science China Chemistry》 SCIE EI CAS CSCD 2023年第11期3169-3177,共9页
The development of preparation methods for XOFs,as a new class of organic frameworks,plays a crucial role in shaping their structures,functions,and potential applications.In this study,we presented the construction of... The development of preparation methods for XOFs,as a new class of organic frameworks,plays a crucial role in shaping their structures,functions,and potential applications.In this study,we presented the construction of chiral supramolecular 2D halogen-bonded organic frameworks(XOFs)through a post-synthetic modification strategy.A linear halogen-bonded organic polymer(XOP),XOP-DPBA,decorated with aldehyde groups,was initially prepared to validate the feasibility of post-synthetic modification for XOF construction and functionalization.XOP-DPBA exhibited excellent reactivity with amines,forming imine bonds.By utilizing this reactivity,a series of cross-linked 2D XOFs were efficiently prepared through post-synthetic modified cross-linking reactions.Furthermore,we successfully introduced chiralα/β-cyclodextrins(α/β-CD)into the XOF skeletons via host-guest interactions,resulting in the fabrication of chiral supramolecular 2D XOFs.These chiral XOFs displayed the induced circular dichroism(ICD)signals and assembled them into helical fibers.The post-synthetic modification strategy demonstrated its versatility and simplicity for the construction and functionalization of XOFs. 展开更多
关键词 supramolecular halogen-bonded organic frameworks [N···I~+···N]halogen bond post-synthetic modification supramolecular self-assembly chirality induction
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DNA组装技术 被引量:4
13
作者 常汉臣 王琛 +2 位作者 王培霞 周见庭 李炳志 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第12期2215-2226,共12页
DNA组装是合成生物学研究的核心技术。随着合成生物学的发展,研究者开发了依赖于DNA聚合酶或DNA连接酶的不同DNA组装技术;为了降低组装成本和便于实现DNA组装的自动化,也发展了一些非酶依赖的DNA组装技术;而几百kb到Mb的大片段DNA的组... DNA组装是合成生物学研究的核心技术。随着合成生物学的发展,研究者开发了依赖于DNA聚合酶或DNA连接酶的不同DNA组装技术;为了降低组装成本和便于实现DNA组装的自动化,也发展了一些非酶依赖的DNA组装技术;而几百kb到Mb的大片段DNA的组装则多数依赖于微生物体内重组。文中主要综述了酶依赖、非酶依赖和体内同源重组三类DNA组装技术及其发展情况。 展开更多
关键词 合成生物学 DNA组装 酶依赖 同源重组 合成
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DNA纳米技术与合成生物学 被引量:3
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作者 施茜 吴园园 杨洋 《合成生物学》 CSCD 2022年第2期302-319,共18页
合成生物学突破了经典生物学“格物致知”的研究范式,开启了“建物致知”“建物致用”的研究时代。合成生物学是以系统生物学为基础,结合工程学设计,运用现代生物学技术方法,通过构建新的生物体系以揭示生命规律和开发颠覆性技术的交叉... 合成生物学突破了经典生物学“格物致知”的研究范式,开启了“建物致知”“建物致用”的研究时代。合成生物学是以系统生物学为基础,结合工程学设计,运用现代生物学技术方法,通过构建新的生物体系以揭示生命规律和开发颠覆性技术的交叉学科。以DNA为主要建筑材料进行纳米尺度结构自组装的DNA纳米技术,具有高度可设计性、精确可寻址性、生物亲和性、模块化组装等独特优势,已经成为合成生物学重要的支持技术。本文介绍了利用DNA纳米结构实现核酸、蛋白质、磷脂等生物大分子的有序装配;构建仿生细胞元件(例如核孔、人工膜通道、网格蛋白),生物过程(例如膜融合、脂质转移、成管过程)和生化体系(例如RNA挤出纳米工厂、体外病毒衣壳蛋白合成和凝血系统);及其在药物递送、肿瘤治疗等领域的应用。此外,未来的研究有望通过DNA纳米结构来更好地合成、模拟和调节天然生物体系。例如,如何一定程度恢复和利用DNA纳米结构携载遗传信息的能力;如何提高结构设计复杂性的同时,兼顾人工体系的简单性和生产的高效性;如何扩大生产规模,降低成本;如何在细胞中生产结构并组装。同时,临床应用层面仍有许多亟待解决的问题,比如增加药物的搭载效率,增强结构的靶向性,维持机体中结构稳定性,以及通过修饰进行免疫治疗。DNA纳米技术在合成生物学具有广泛的应用前景,将有助于认识生命本质、模拟生命过程、建立人工体系、开发改变未来的技术。 展开更多
关键词 合成生物学 DNA纳米技术 有序装配 人工体系 医疗健康
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基因合成与基因组编辑 被引量:3
15
作者 刘晓 王慧媛 +2 位作者 熊燕 赵国屏 王金 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2019年第11期2072-2082,共11页
合成生物学被认为是继"发现DNA双螺旋"和"人类基因组测序计划"之后的又一次生物技术革命,有望在工业制造、医药、农业、环境和能源等诸多领域带来变革。DNA合成和基因编辑是合成生物学的基石,其技术进步也是推动合... 合成生物学被认为是继"发现DNA双螺旋"和"人类基因组测序计划"之后的又一次生物技术革命,有望在工业制造、医药、农业、环境和能源等诸多领域带来变革。DNA合成和基因编辑是合成生物学的基石,其技术进步也是推动合成生物学快速发展的主要动力。该文重点介绍了DNA合成和基因编辑领域的主要技术及其研究进展,包括利用芯片oligo池的高通量基因合成技术和CRISPR介导的第三代基因组编辑系统等。 展开更多
关键词 合成生物学 基因合成 DNA组装 基因组编辑 CRISPR
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2013合成生物学专刊序言 被引量:3
16
作者 陈国强 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第8期1041-1043,共3页
合成生物学目前在全球得到迅猛发展。在此专刊中,综述了一些相关技术在合成生物学领域的进展,其中有:链霉菌无痕敲除方法、基因合成技术、DNA组装新方法、最小化基因组的方法及分析、合成生物系统的组合优化。也讨论了应用合成生物学策... 合成生物学目前在全球得到迅猛发展。在此专刊中,综述了一些相关技术在合成生物学领域的进展,其中有:链霉菌无痕敲除方法、基因合成技术、DNA组装新方法、最小化基因组的方法及分析、合成生物系统的组合优化。也讨论了应用合成生物学策略优化光合蓝细菌底盘、产溶剂梭菌分子遗传操作技术、蛋白质预算(Protein budget)作为合成生物学的成本标尺。最后,用几个例子说明了合成生物学的应用,包括复杂天然产物合成人工生物系统的设计与构建、微生物木糖代谢途径改造制备生物基化学品以及构建酿酒酵母工程菌合成香紫苏醇。 展开更多
关键词 合成生物学 DNA合成技术 DNA组装 工业生物技术
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DNA组装新方法的研究进展 被引量:2
17
作者 李雷 芦银华 姜卫红 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第8期1113-1122,共10页
2010年,蕈状支原体Mycoplasma mycoides的人工合成,迎来了合成生物学的崭新时代。这种突破性的进展主要得益于酵母自身强大的DNA体内重组能力。近几年来,除了利用体内重组的DNA大片段拼接技术,基于连接或聚合思想的不同尺度的DNA体外组... 2010年,蕈状支原体Mycoplasma mycoides的人工合成,迎来了合成生物学的崭新时代。这种突破性的进展主要得益于酵母自身强大的DNA体内重组能力。近几年来,除了利用体内重组的DNA大片段拼接技术,基于连接或聚合思想的不同尺度的DNA体外组装方法也相继出现,如Biobrick\Bglbrick、SLIC与Gibson等温一步法等,这些方法的应用加快了合成生物学功能元件库、生物合成途径乃至微生物染色体的人工构建。事实上,目前所建立的各种DNA组装方法,均是由DNA分子拼接理念(包括两分子衔接思想与多片段组装模式)衍生而来。文中将在介绍DNA组装基本理念的基础上,对体内、体外主要的DNA组装方法进行简要梳理,希望为不同类型的合成生物学功能器件及生物合成途径的构造提供参考与借鉴。 展开更多
关键词 合成生物学 DNA组装 功能器件 生物合成途径
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甲醇合成塔试制的关键技术 被引量:1
18
作者 吴国臣 吕震宇 +1 位作者 王连峰 宋祥春 《锅炉制造》 2001年第2期25-27,共3页
介绍了甲醇合成塔的结构特点和关键技术要求 ,叙述了产品研制的关键技术要点 ,介绍了甲醇合成塔关键零件制造的技术方案 ,支持技术方案的技术保证措施 ,以及技术方案的实施后检测结果 ,叙述了甲醇合成塔全部技术方案的合理性和推广价值。
关键词 合成塔 冷成型 装焊 尺寸检验 机械加工 技术要求 技术方案 甲醇
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基于基因组编辑技术的大片段克隆新策略 被引量:1
19
作者 曾哲 任晓丹 杨晟 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期401-408,共8页
基因组大片段克隆技术是合成生物学研究领域关键的使能技术。传统的大片段克隆技术获取目的大片段的手段存在各种缺陷,比如随机建库克隆需要依靠高通量筛选;PCR难以扩增10 kb以上片段,从小片段拼装费时费力且突变率高;基于限制性酶切连... 基因组大片段克隆技术是合成生物学研究领域关键的使能技术。传统的大片段克隆技术获取目的大片段的手段存在各种缺陷,比如随机建库克隆需要依靠高通量筛选;PCR难以扩增10 kb以上片段,从小片段拼装费时费力且突变率高;基于限制性酶切连接难以找到片段两端适宜的限制性内切酶酶切位点。最近全基因组合成等前沿研究创造了全新的高性能大片段克隆方法,比如CRISPR/cas9系统中cas9可识别并切割20 bp核酸序列解决了识别位点设计难题,可用来获取任意目的基因片段;组合Gibson或者酵母偶联重组技术组装技术,可高效克隆大片段基因。本文将分类介绍基因组大片段克隆技术,并提出适用不同尺度大小基因克隆的技术选择参考标准。 展开更多
关键词 大片段克隆 合成生物学 基因组编辑 Gibson组装
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合成生物学在链霉菌次级代谢产物研发中的应用 被引量:1
20
作者 李晓梅 林春燕 +2 位作者 逄爱萍 李晓波 赵广荣 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期92-97,共6页
链霉菌是革兰氏阳性丝状细菌,其次级代谢产物具有抗感染、抗虫、抗肿瘤、免疫调节等生理活性,在医药、食品和农业领域具有重要应用价值。链霉菌的遗传操作技术是发现和改良新次级代谢产物的基础,近年来合成生物学的兴起为链霉菌的研发... 链霉菌是革兰氏阳性丝状细菌,其次级代谢产物具有抗感染、抗虫、抗肿瘤、免疫调节等生理活性,在医药、食品和农业领域具有重要应用价值。链霉菌的遗传操作技术是发现和改良新次级代谢产物的基础,近年来合成生物学的兴起为链霉菌的研发提供了全新的视角。综述了合成生物学在链霉菌次级产物生物合成基因簇克隆与组装、底盘细胞设计与改造、调节两者适配性方面的应用进展。 展开更多
关键词 合成生物学 链霉菌 次级代谢产物 生物合成基因簇 克隆与组装 最小化基因组 底盘细胞
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