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兔脾淋组织液增强猪瘟细胞苗免疫抗体效价的试验 被引量:5
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作者 刘新平 许宝华 《南昌高专学报》 2006年第4期111-113,共3页
采用1%健康兔脾淋组织液稀释猪瘟细胞苗分别免疫10日龄经猪瘟乳前免疫的仔猪和经60。65日龄采用细胞苗二免的120日龄中猪,与生理盐水稀释组对照,免疫后15d采血检测抗体(IHA法)。二次试验结果表明:用兔脾淋组织液稀释猪瘟细胞苗免... 采用1%健康兔脾淋组织液稀释猪瘟细胞苗分别免疫10日龄经猪瘟乳前免疫的仔猪和经60。65日龄采用细胞苗二免的120日龄中猪,与生理盐水稀释组对照,免疫后15d采血检测抗体(IHA法)。二次试验结果表明:用兔脾淋组织液稀释猪瘟细胞苗免疫猪比用生理盐水稀释猪瘟细胞苗免疫猪可产生更高的保护性抗体效价,两者的差异均极显著(P〈0.01)。 展开更多
关键词 兔脾淋组织液 猪瘟细胞苗 抗体效价 增强试验
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猪瘟病毒E2蛋白靶向化树突状细胞疫苗诱导的BALB/c小鼠体内/外免疫应答的研究 被引量:3
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作者 董炳梅 谢金文 +5 位作者 魏凤 孙全文 王爱华 张春玲 沈志强 王金良 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期305-309,共5页
为确定猪瘟病毒(CSFV)糖基化E2蛋白(Gly-E2)的免疫效力,本研究首先利用体外糖基化修饰技术,在对E2蛋白(E2)进行N-糖基化修饰的基础上,分别进行Gly-E2、DCs与T细胞体外共培养并接种BALB/c小鼠。通过ELISA方法对细胞上清液及BALB/c小鼠血... 为确定猪瘟病毒(CSFV)糖基化E2蛋白(Gly-E2)的免疫效力,本研究首先利用体外糖基化修饰技术,在对E2蛋白(E2)进行N-糖基化修饰的基础上,分别进行Gly-E2、DCs与T细胞体外共培养并接种BALB/c小鼠。通过ELISA方法对细胞上清液及BALB/c小鼠血清中IFN-γ、IL-4及IgG含量进行测定,结合体外试验中CTL特异性杀伤率的检测,综合评价该疫苗的免疫效果。结果显示,CSFV E2的糖基化修饰显著增强了DCs的抗原提呈功能,可以同时促进Th1与Th2免疫应答,但主要以Th2体液免疫应答为主,刺激机体产生了快而持久的抗体保护,并且具有良好的免疫记忆,其免疫效果显著优于CSFV与E2;同时,随着Gly-E2浓度的提高,效应细胞的杀伤率均明显升高,表明Gly-E2可以更有效的刺激效应细胞的杀伤作用。以上结果表明,Gly-E2对提高CSFV的免疫反应具有良好的效果,作为新型疫苗开发的优选抗原,Gly-E2具有很深的开发潜力。 展开更多
关键词 猪瘟病毒 E2蛋白 树突状细胞疫苗 免疫效力
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家兔与BALB/c小鼠对猪瘟病毒E2蛋白靶向化树突状细胞疫苗敏感性的比较 被引量:1
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作者 王金良 董炳梅 +5 位作者 魏凤 孙全文 王爱华 唐娜 张春玲 沈志强 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2014年第1期80-83,共4页
为比较家兔与BALB/c小鼠对猪瘟病毒E2蛋白靶向化树突状细胞疫苗的敏感性,本研究首先根据小鼠与家兔体重比,分别免疫糖基化E2蛋白与E2蛋白(家兔2mg/只,小鼠20μg/只),在不同时间采血制备血清,通过ELISA方法测定血清中IgG水平。结果显示,... 为比较家兔与BALB/c小鼠对猪瘟病毒E2蛋白靶向化树突状细胞疫苗的敏感性,本研究首先根据小鼠与家兔体重比,分别免疫糖基化E2蛋白与E2蛋白(家兔2mg/只,小鼠20μg/只),在不同时间采血制备血清,通过ELISA方法测定血清中IgG水平。结果显示,接种后BALB/c小鼠出现了轻度的免疫应答,而家兔产生了强而持久的免疫保护。本研究对BALB/c小鼠的接种量进行了进一步摸索,结果表明,50与100μg/只免疫效果明显优于20μg/只;其中50μg/只E2蛋白与糖基化E2蛋白免疫后,血清IgG水平较高且稳定;而100μg/只糖基化E2蛋白免疫后,免疫初期,糖基化E2蛋白组产生了免疫抑制,至21d抗体水平逐渐升高且达极高水平;但100μg/只E2蛋白免疫后,整个免疫期内抗体水平均较低,只有轻微波动。以上结果表明,家兔对糖基化E2蛋白与E2蛋白的敏感性均显著高于BALB/c小鼠,且糖基化E2蛋白免疫效果明显好于E2蛋白,BALB/c小鼠的糖基化E2蛋白最佳免疫剂量为50μg/只。 展开更多
关键词 家兔 BALB C小鼠 猪瘟病毒 E2蛋白 树突状细胞疫苗 敏感性
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植物血凝素PHA与猪瘟细胞源苗联合应用免疫效果观察 被引量:1
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作者 秦建辉 李思远 +2 位作者 陶田谷晟 段靖峰 肖啸 《中兽医医药杂志》 2014年第5期27-29,共3页
探讨猪瘟活疫苗和PHA联合使用对猪免疫效果的影响。选取30日龄健康仔猪60头,随机分成5组(A、B、C、D、E组,组均12头),每组仔猪注射猪瘟细胞源苗1头份,B、C、D、E为试验组,分别同时肌肉注射低剂量(B组0.05 mg/kg)、中剂量(C组0.1 mg/kg)... 探讨猪瘟活疫苗和PHA联合使用对猪免疫效果的影响。选取30日龄健康仔猪60头,随机分成5组(A、B、C、D、E组,组均12头),每组仔猪注射猪瘟细胞源苗1头份,B、C、D、E为试验组,分别同时肌肉注射低剂量(B组0.05 mg/kg)、中剂量(C组0.1 mg/kg)、高剂量(D组0.2 mg/kg)、超高剂量(E组0.4 mg/kg)PHA,A组为对照组。结果高剂量PHA组(D组0.2 mg/kg)与其他组比较,免疫效果最佳,抗体转阳率与4倍增长率分别比对照组高出8.34%、16.67%;D组平均抗体滴度为1∶169.81,离散度为1∶64-1∶256,而对照组平均抗体滴度1∶47.91,离散度为1∶16-1∶256,两者比较差异极显著(P<0.01)。 展开更多
关键词 猪瘟细胞源苗 植物血凝素 免疫效果 平均抗体滴度
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不同类型猪瘟疫苗不同剂量的免疫比对试验研究
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作者 高权利 兰天驰 +4 位作者 李彦明 张靖 刘阳 赵力 熊伟曼 《畜牧兽医杂志》 2016年第4期1-3,6,共4页
为研究不同来源、不同剂量和不同生产工艺的猪瘟疫苗免疫仔猪后抗体效价之间的区别,本研究采用正向间接血凝试验(IHA)对某规模化猪场进行猪瘟疫苗免疫检测和分析。结果表明:不同来源相同剂量的猪瘟疫苗免疫仔猪抗体效价差别不明显;猪瘟... 为研究不同来源、不同剂量和不同生产工艺的猪瘟疫苗免疫仔猪后抗体效价之间的区别,本研究采用正向间接血凝试验(IHA)对某规模化猪场进行猪瘟疫苗免疫检测和分析。结果表明:不同来源相同剂量的猪瘟疫苗免疫仔猪抗体效价差别不明显;猪瘟细胞苗和猪瘟脾淋苗相同免疫剂量比对效果不显著;仔猪抗体水平和免疫剂量呈正相关,增加免疫剂量可以很好的提高免疫效果;猪瘟母源抗体效价随着仔猪日龄的增长而呈逐渐下降的趋势;23日龄仔猪母源抗体效价合格率达到100%,抗体效价均值8.9log2,29日龄合格率为80%,抗体效价均值6.9log2,所以考虑群体免疫合格率和抗体效价均值,仔猪猪瘟疫苗应该在29日龄左右进行首免。 展开更多
关键词 猪瘟疫苗 细胞膜 脾淋苗 免疫剂量 抗体水平
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猪瘟牛睾丸细胞苗生产工艺改进试验
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作者 乔云龙 高斌战 孙建刚 《中国兽药杂志》 2002年第10期39-39,38,共2页
在猪瘟牛睾丸细胞苗常规培养中,延长收获间隔时间,由原来的4 d收一次改为8 d收一次;增加营养液的装量,每10 000 mL瓶装量由1 000 mL改为3 000 mL;改变营养液的配方。结果表明试验组收获6次、对照组收获8次,毒价均达到5×10-4 mL/只... 在猪瘟牛睾丸细胞苗常规培养中,延长收获间隔时间,由原来的4 d收一次改为8 d收一次;增加营养液的装量,每10 000 mL瓶装量由1 000 mL改为3 000 mL;改变营养液的配方。结果表明试验组收获6次、对照组收获8次,毒价均达到5×10-4 mL/只兔;易感猪30头份安检1次通过。用改进后工艺生产的24批疫苗完全符合《规程》要求,说明新工艺完全适用猪瘟牛睾丸细胞苗的生产。 展开更多
关键词 猪瘟 睾丸细胞苗 生产工艺 改进试验
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猪瘟病毒荧光定量RT-PCR检测方法的建立及其初步应用 被引量:1
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作者 夏芳 何玲 +1 位作者 罗满林 陈瑞爱 《广东畜牧兽医科技》 2011年第5期30-33,共4页
针对CSFV基因组5′端非编码区序列设计并合成了高度特异的一对引物和一条探针,用于猪瘟病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立。将提取的病毒的总RNA做为模板进行反转录和PCR,将PCR产物克隆到pMD18-T载体后进行大肠杆菌转化,提取阳性质粒... 针对CSFV基因组5′端非编码区序列设计并合成了高度特异的一对引物和一条探针,用于猪瘟病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立。将提取的病毒的总RNA做为模板进行反转录和PCR,将PCR产物克隆到pMD18-T载体后进行大肠杆菌转化,提取阳性质粒做为标准品绘制标准曲线,成功地建立了特异性检测CSFV的荧光定量RT-PCR方法,其灵敏度达到100拷贝/μL。将猪瘟活疫苗(细胞源)采用不同剂量免疫猪后,取全血及组织,用所建立的方法进行检测,发现病毒主要分布在猪的血液、脾脏、淋巴结、扁桃体中。 展开更多
关键词 猪瘟病毒 荧光定量 猪瘟活疫苗 病毒分布
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高效制备霍乱弧菌菌影及其增强猪瘟疫苗免疫效果的研究
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作者 姬生乐 韩美晴 +3 位作者 杜丽宏 彭名正 徐思艳 杨梦华 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第7期696-700,738,共6页
为评价霍乱弧菌菌影(VCG)对猪瘟活疫苗及猪瘟病毒E2蛋白抗原区(BC和AD区)亚单位疫苗免疫增强效果的作用,本实验首先利用含有裂解质粒的霍乱弧菌制备VCG,通过对细菌裂解前后进行平板计数及透射电镜检测VCG裂解效果,结果显示所制备的VCG... 为评价霍乱弧菌菌影(VCG)对猪瘟活疫苗及猪瘟病毒E2蛋白抗原区(BC和AD区)亚单位疫苗免疫增强效果的作用,本实验首先利用含有裂解质粒的霍乱弧菌制备VCG,通过对细菌裂解前后进行平板计数及透射电镜检测VCG裂解效果,结果显示所制备的VCG裂解率高,且基本形成一个完整的细菌空壳。在确定最佳猪瘟活疫苗使用量后探究VCG对猪瘟活疫苗(CFS ST)免疫效果的影响,实验分别用VCG+CFS ST和CFS ST免疫家兔一次,设置对照组,并在免疫第42 d后攻毒。本研究还探究了VCG作为佐剂对猪瘟E2蛋白主要抗原区蛋白亚单位疫苗免疫效果的影响,实验分别用完全弗氏佐剂(CFA)和VCG联合E2蛋白主要抗原区蛋白,通过间隔两周的方式分4次免疫家兔,设置对照组,并在免疫第56 d后攻毒。通过阻断ELISA方法每周检测家兔血清的抗体阻断率,免疫后以500 RID50的猪瘟病毒弱毒株通过耳缘静脉注射方式对家兔攻毒。结果显示,50 RID50的猪瘟活疫苗组家兔血清抗体阻断率显著降低(p<0.001);VCG+CFS ST组家兔猪瘟抗体阻断率在免疫14 d后大部分时间点显著高于CFS ST组(p<0.05),并且攻毒后仅对照组出现定型热反应;CFA(E2)组和VCG(E2)组的家兔猪瘟抗体阻断率均显著达到较高水平(p<0.001),并且攻毒后仅对照组出现定型热反应。以上结果表明VCG可作为免疫佐剂增强猪瘟活疫苗的免疫效果;VCG联合猪瘟病毒E2蛋白主要抗原区亚单位疫苗在家兔中也具有较好的免疫效果。本研究为研发廉价高效的疫苗佐剂提供重要的实验依据。 展开更多
关键词 猪瘟病毒 E2蛋白 佐剂 霍乱弧菌菌影 亚单位疫苗 猪瘟活疫苗
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