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抑制PCR富集法分离三化螟基因组微卫星分子标记 被引量:1
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作者 周宇 杨琼 +1 位作者 韩光杰 方继朝 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2013年第5期999-1004,共6页
采用抑制PCR的方法构建三化螟的微卫星文库,并分离微卫星分子标记。挑取的201个阳性克隆测序结果表明,187个克隆含有微卫星序列,抑制PCR筛选微卫星序列的准确率达到93.03%。对该187个微卫星序列进行比对,得到18个不同的微卫星序列,并成... 采用抑制PCR的方法构建三化螟的微卫星文库,并分离微卫星分子标记。挑取的201个阳性克隆测序结果表明,187个克隆含有微卫星序列,抑制PCR筛选微卫星序列的准确率达到93.03%。对该187个微卫星序列进行比对,得到18个不同的微卫星序列,并成功提交至GenBank。对这18个序列设计了30对特异性引物,检测德阳种群48个体,共得到5个三化螟微卫星分子标记。 展开更多
关键词 三化螟 微卫星 抑制pcr 富集文库
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双重抑制PCR技术分离鹅微卫星标记 被引量:13
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作者 杜文兴 虞德兵 +3 位作者 刘红林 练春兰 候水生 王林云 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期63-67,共5页
用双重抑制PCR技术分离11对鹅的特异微卫星引物,应用于浙东白鹅和太湖鹅的基因组PCR扩增。结果表明:11对引物在浙东白鹅和太湖鹅中分别扩增出37和36个清晰条带,20个等位基因为两品种所共有,11对引物中有5对呈中等多态、6对呈高度多态。... 用双重抑制PCR技术分离11对鹅的特异微卫星引物,应用于浙东白鹅和太湖鹅的基因组PCR扩增。结果表明:11对引物在浙东白鹅和太湖鹅中分别扩增出37和36个清晰条带,20个等位基因为两品种所共有,11对引物中有5对呈中等多态、6对呈高度多态。各位点产生2~6个等位基因,各位点的平均杂合度为0.456~0.772,以G07位点为最高,G06位点为最低;平均多态信息为0.375~0.737,以G07位点为最高,G01、G03和G11位点为最低。浙东白鹅和太湖鹅有效等位基因数分别为2.655和2.558,与实际测得的两品种平均值3.364和3.273较接近。研究结果表明,两品种的等位基因分布较为均匀,与鹅的实际品种特征一致,因此,双重抑制PCR技术适合于鹅的基因组结构研究。 展开更多
关键词 双重抑制pcr技术 微卫星标记
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利用双重抑制PCR技术分离鸭微卫星标记 被引量:3
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作者 王利刚 虞德兵 +5 位作者 杜文兴 徐银学 刘红林 练春兰 候水生 王林云 《扬州大学学报(农业与生命科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期72-75,90,共5页
用双重抑制PCR技术分离10对鸭的特异微卫星引物,应用于北京鸭、樱桃谷鸭、高邮鸭3个品种的基因组PCR扩增。结果表明:10对引物中有7对引物具有多态,3对呈高度多态,4对呈中度多态。7对引物在上述3个鸭品种中分别扩增出23、22、23个等... 用双重抑制PCR技术分离10对鸭的特异微卫星引物,应用于北京鸭、樱桃谷鸭、高邮鸭3个品种的基因组PCR扩增。结果表明:10对引物中有7对引物具有多态,3对呈高度多态,4对呈中度多态。7对引物在上述3个鸭品种中分别扩增出23、22、23个等位基因,其中15个等位基因为3个品种所共有;各位点产生4~7个等位基因,平均杂合度为0.494~0.650,平均多态信息含量为0.414~0.586,平均有效等位基因数为2.001~2.870。3个鸭品种的平均杂合度分别为0.578、0.566、0.594,平均多态信息含量分别为0.496、0.480、0.524;平均有效等位基因数分别为2.441、2.340、2.615,与实测平均等位基因数3.286、3.1z12、3.286较接近。 展开更多
关键词 双重抑制pcr技术 微卫星标记
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Isolation and Characterization of Novel Microsatellite Markers in Chayote[Sechium edule(Jacq.)Sw.]
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作者 Ryoko Machida-Hirano Moisés Cortés-Cruz +3 位作者 Blanca Amalia Amaro González Jorge Cadenaí Iiguez Kazuto Shirata Kazuo N.Watanabe 《American Journal of Plant Sciences》 2015年第13期2033-2041,共9页
Chayote [Sechium edule (Jacq.) Sw.] is an economically important species in Latin America;however, there are very few reports available regarding its genetic diversity. Out of 11 microsatellite markers isolated, 10 lo... Chayote [Sechium edule (Jacq.) Sw.] is an economically important species in Latin America;however, there are very few reports available regarding its genetic diversity. Out of 11 microsatellite markers isolated, 10 loci provided 1 to 7 alleles per locus in a set of Mexican chayote accessions. Observed and expected heterozygosities for each locus ranged from 0.00 to 0.85 and 0.00 to 0.73, respectively. The overall genetic diversity detected by microsatellites was compared with that detected by P450-based analogue markers, a genome-wide dominant marker. Genetic diversity values obtained by the newly designed microsatellite markers were almost equal to the value estimated by PBA markers, but genetic distances calculated by both marker systems were not significantly correlated. Additional microsatellite markers, which could detect more polymorphisms, may be necessary to analyze the genetic diversity and structure of Mexican chayote collections. 展开更多
关键词 CHAYOTE SSR Markers PBA Markers Dual-suppression-pcr Technique Genetic Diversity
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罗田甜柿Ty1-copia类逆转座子RNaseH-LTR序列的分离和特性分析 被引量:12
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作者 杜晓云 张青林 罗正荣 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期501-508,共8页
逆转座子序列信息的获得,对了解其在基因组中的行为及系统学研究有重要价值。本试验从罗田甜柿(Diospyros kaki Thunb.‘Luotian-tianshi’)基因组中分离出31个RNaseH-LTR(long terminal repeat,长末端重复)序列,并利用逆转座子间扩增... 逆转座子序列信息的获得,对了解其在基因组中的行为及系统学研究有重要价值。本试验从罗田甜柿(Diospyros kaki Thunb.‘Luotian-tianshi’)基因组中分离出31个RNaseH-LTR(long terminal repeat,长末端重复)序列,并利用逆转座子间扩增多态性(inter-retrotransposon amplified polymorphism,IRAP)技术对部分序列相应的逆转座子家族在柿属植物中的转座活性及分布情况进行初步探讨。序列分析结果表明,至少有10个Ty1-copia类逆转座子家族得到扩增;其家族间普遍表现高度异质,碱基替换、插入或缺失突变,以及翻译成氨基酸后发生不同程度的终止密码子突变、氨基酸取代和移框突变等,是产生高异质性的原因;此外,其家族内部某些序列间的相似性极高,可能是寄主基因组与逆转座子间互惠关系的体现。应用部分逆转座子引物的IRAP分析结果表明,相应的逆转座子家族在柿属植物中普遍存在,其分布广泛,拷贝数高,转座活性强,具有进一步开发为多种逆转座子分子标记的潜力。 展开更多
关键词 Ty1-copia逆转座子 抑制pcr 长末端重复 逆转座子间扩增多态性
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抑制性消减杂交技术及其应用研究进展 被引量:4
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作者 周变华 王宏伟 +3 位作者 杨自军 王国永 郝雪琴 孔涛 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2011年第12期40-42,共3页
抑制性消减杂交(SSH)技术是结合抑制性PCR和消减杂交技术发展起来的一种高效分离差异表达基因的方法,具有特异性高、假阳性率低、操作简便、速度快、效率高等优点。利用SSH技术进行不同状态下基因的表达变化分析、差异基因的克隆和鉴定... 抑制性消减杂交(SSH)技术是结合抑制性PCR和消减杂交技术发展起来的一种高效分离差异表达基因的方法,具有特异性高、假阳性率低、操作简便、速度快、效率高等优点。利用SSH技术进行不同状态下基因的表达变化分析、差异基因的克隆和鉴定对了解基因表达调控有着重要意义。为此,综述了SSH技术的原理及其在发育调控基因、疾病发生机制、药物研发、性状筛选及环境生物修复等方面的应用研究进展。 展开更多
关键词 抑制性消减杂交技术 抑制性pcr 分子生物学
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应用改进的SSP-抑制PCR技术扩增cDNA片段旁侧序列 被引量:4
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作者 陈渝萍 薛社普 《基础医学与临床》 CSCD 1999年第4期87-91,共5页
结合抑制PCR和单链特异引物PCR技术,降低RACE过程中由公用引物引发的非特异扩增、增加目的cDNA在原始模板中的相对比例,从而提高RACE特异性,有效地扩增靶序列。
关键词 RACE 抑制pcr CDNA片段 旁侧序列
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数据库搜索及ISSR-抑制PCR法开发香菇微卫星标记 被引量:6
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作者 肖扬 陈隆钟 +1 位作者 吴茜 边银丙 《菌物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期548-552,共5页
采用数据库搜索及ISSR-抑制PCR法开发香菇微卫星标记。由数据库搜索法开发出21对引物,11对有多态性,各位点平均产生3.3个等位基因;通过ISSR-抑制PCR法开发出8对引物,5对具多态性,各位点平均产生3个等位基因。结果表明,在香菇SSR开发中,... 采用数据库搜索及ISSR-抑制PCR法开发香菇微卫星标记。由数据库搜索法开发出21对引物,11对有多态性,各位点平均产生3.3个等位基因;通过ISSR-抑制PCR法开发出8对引物,5对具多态性,各位点平均产生3个等位基因。结果表明,在香菇SSR开发中,两种方法均是行之有效的。 展开更多
关键词 香菇 简单系列重复 数据库搜索 ISSR-抑制pcr
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