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肝癌细胞靶向肽的筛选与鉴定 被引量：1
1
作者 赵红蕾 韩文瑜 +6 位作者 刁昱文 冯新 韩东 朱僧 刘晓贺 路荣 雷连成 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期202-206,共5页
利用噬菌体环七肽库筛选与肝癌细胞特异性结合的多肽,并对其亲和力进行生物学鉴定。以HL-7702为消减细胞,HepG2为筛选靶细胞,对噬菌体随机环七肽库进行4轮全细胞消减筛选,并随机挑取60个阳性噬菌体克隆,以ELISA法鉴定其与HepG2细胞的结... 利用噬菌体环七肽库筛选与肝癌细胞特异性结合的多肽,并对其亲和力进行生物学鉴定。以HL-7702为消减细胞,HepG2为筛选靶细胞,对噬菌体随机环七肽库进行4轮全细胞消减筛选,并随机挑取60个阳性噬菌体克隆,以ELISA法鉴定其与HepG2细胞的结合活性,并取阳性克隆进行测序分析,并合成多肽进行免疫细胞化学染色鉴定。经4轮筛选,噬菌体在靶细胞HepG2上出现明显富集;利用ELISA从随机挑选的60个噬菌体克隆中得到15个与肝癌细胞具有高结合力的阳性克隆,测序并进行序列分析比对发现氨基酸序列无同源性,经免疫细胞化学染色鉴定后,发现1条多肽序列亲和力较高,为提高抗菌肽对肿瘤细胞的靶向杀伤作用奠定基础。 展开更多
关键词 噬菌体随机环七肽库 肝癌细胞 消减筛选 靶向
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胃癌细胞特异性结合肽的筛选及鉴定
2
作者 张东涛 袁静 +1 位作者 杨力 郭新宁 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2009年第11期917-919,953,共4页
目的筛选与胃癌细胞特异性结合的多肽。方法以正常细胞为吸附细胞,胃癌细胞为筛选靶细胞对噬菌体随机12肽库进行消减筛选,用细胞酶联免疫吸附试验(ELISA)、免疫细胞和组织化学法及裸鼠正常组织结合实验鉴定阳性克隆并进行DNA测序。结果... 目的筛选与胃癌细胞特异性结合的多肽。方法以正常细胞为吸附细胞,胃癌细胞为筛选靶细胞对噬菌体随机12肽库进行消减筛选,用细胞酶联免疫吸附试验(ELISA)、免疫细胞和组织化学法及裸鼠正常组织结合实验鉴定阳性克隆并进行DNA测序。结果经三轮筛选,利用ELISA从随机挑选的24个噬菌体克隆中得到8个与胃癌细胞具有高结合力的噬菌体阳性克隆,经免疫细胞化学及裸鼠正常组织结合试验鉴定,发现第20、24两个克隆能与胃癌细胞特异性结合,而不与正常细胞和裸鼠组织结合,噬菌体阳性克隆氨基酸序列无同源性。结论得到两个序列不同的特异性结合胃癌细胞的噬菌体克隆,这可为进一步的研究提供实验依据。 展开更多
关键词 噬菌体肽库 胃癌细胞 转移 消减筛选
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