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检测布氏杆菌病的四种血清学方法比较及国际标准单位的应用 被引量:12
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作者 宋翠平 徐辉 +1 位作者 王志亮 毕道荣 《中国动物检疫》 CAS 2003年第2期25-27,共3页
本研究通过布氏流产杆菌 (Brucellaabortus)国际标准参考血清(ISABS)的使用 ,对目的应用的补体结合试验 (CFT)、酶联免疫吸附测定法 (ELISA)、虎红平板凝集试验 (RBPT)及试管凝集试验 (SAT)等四种血清学检测方法的测定结果进行了校正和... 本研究通过布氏流产杆菌 (Brucellaabortus)国际标准参考血清(ISABS)的使用 ,对目的应用的补体结合试验 (CFT)、酶联免疫吸附测定法 (ELISA)、虎红平板凝集试验 (RBPT)及试管凝集试验 (SAT)等四种血清学检测方法的测定结果进行了校正和临界点的设定。并对42份不同抗体效价血清进行了测定 ,同时通过计算和应用标准参考血清校正系数 ,对不同方法间的测定结果如何换算成国际标准单位进行了研究和探讨。结果表明 ,该校准方法可对不同实验室间的布氏杆菌病检测结果校准到统一的国际标准上来 ,可作为血清学测定国际标准化一条途径。 展开更多
关键词 检测技术 兽医 传染病 布氏杆菌病 血清学 国际标准单位 应用
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鸡志贺氏菌凝集抗原及其标准血清的研制 被引量:6
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作者 蒋大伟 李凯 +2 位作者 许兰菊 王川庆 张玉红 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期729-732,共4页
利用分离鉴定的鸡鲍氏和鸡痢疾志贺氏菌,分别经细菌培养、灭活、浓度调整等方法研制诊断用鸡志贺氏菌凝集抗原,并用鸡志贺氏菌疫苗免疫清洁级小白鼠研制鸡志贺氏菌标准血清。结果显示,制备细菌抗原的最佳培养基是1%葡萄糖营养琼脂... 利用分离鉴定的鸡鲍氏和鸡痢疾志贺氏菌,分别经细菌培养、灭活、浓度调整等方法研制诊断用鸡志贺氏菌凝集抗原,并用鸡志贺氏菌疫苗免疫清洁级小白鼠研制鸡志贺氏菌标准血清。结果显示,制备细菌抗原的最佳培养基是1%葡萄糖营养琼脂,抗原最佳灭活温度和时间为121℃和120min,凝集抗原合适浓度为40亿/mL,最佳稀释液为pH7.2的0.5%石炭酸生理盐水。制备的鸡鲍氏和鸡痢疾志贺氏菌阳性血清经效价测定分别可达8log2和10log2,阴性血清与鸡志贺氏菌凝集抗原作用无凝集反应发生。通过研究同时确定了平板凝集试验反应的合适温度为20~35℃,结果判定时间为3~5min。研制的凝集抗原及其标准血清具有特异性强、稳定性好、使用方法简便、便于保存和检测结果准确可靠等优点,便于在基层生产单位推广应用。 展开更多
关键词 鸡志贺氏菌 凝集抗原 标准血清 研制 平板凝集试验
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鸡志贺氏菌多价凝集抗原及其标准血清的研制 被引量:2
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作者 李炜 蒋大伟 +4 位作者 程琨 宋海霞 许兰菊 张玉红 张瑞 《河南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期526-530,共5页
利用鸡鲍氏志贺氏菌和鸡痢疾志贺氏菌制备多价凝集抗原,确定其最佳反应浓度及比例.选择合适的试验鸡只,用2种鸡志贺氏菌灭活疫苗定期肌肉注射免疫和抗体效价测定,适时采血分离血清.结果显示,鸡鲍氏抗原与痢疾抗原的最佳混合浓度为6×... 利用鸡鲍氏志贺氏菌和鸡痢疾志贺氏菌制备多价凝集抗原,确定其最佳反应浓度及比例.选择合适的试验鸡只,用2种鸡志贺氏菌灭活疫苗定期肌肉注射免疫和抗体效价测定,适时采血分离血清.结果显示,鸡鲍氏抗原与痢疾抗原的最佳混合浓度为6×109mL-1,最佳比例为1∶1.制备的鸡鲍氏和鸡痢疾志贺氏菌多价阳性血清,经抗体效价测定均达6 log2,阴性血清与鸡志贺氏菌多价凝集抗原作用无凝集现象出现.研制的多价凝集抗原及其标准血清经特异性试验、重复性试验和保存方法试验,具有特异性强、敏感性高、重复性好、易保存等特点,且可省去单价凝集抗原繁琐的检测程序和时间. 展开更多
关键词 鸡志贺氏菌 多价凝集抗原 标准血清
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鸡志贺氏菌多价凝集抗原及其标准血清的应用 被引量:2
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作者 宋海霞 李炜 +4 位作者 蒋大伟 许兰菊 李凯 潘国民 贾文科 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2009年第11期136-139,共4页
利用研制的鸡志贺氏菌多价凝集抗原及其标准血清,对信阳地区18家鸡场的351份鸡待检血清进行了血清抗体检测。结果显示:351份被检血清中,鸡鲍氏和痢疾志贺氏菌混合感染的抗体阳性率达8.33%(1/12)~73.91%(17/23),平均抗体阳性率为44.16%(... 利用研制的鸡志贺氏菌多价凝集抗原及其标准血清,对信阳地区18家鸡场的351份鸡待检血清进行了血清抗体检测。结果显示:351份被检血清中,鸡鲍氏和痢疾志贺氏菌混合感染的抗体阳性率达8.33%(1/12)~73.91%(17/23),平均抗体阳性率为44.16%(155/351)。通过与鸡志贺氏菌单价凝集抗原的检测结果相比较,发现其吻合率高达98.58%(346/351),说明鸡志贺氏菌多价凝集抗原及其标准血清用于血样的检测,具有高度的特异性,准确可靠、方法简便快速。 展开更多
关键词 鸡志贺氏菌多价凝集抗原 标准血清 血清学调查 抗体阳性率
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小鼠脑脊髓炎病毒标准血清制备及间接ELISA检测方法的应用 被引量:1
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作者 谢军芳 佟巍 +5 位作者 侯丽波 乔红伟 丛喆 王卫 蒋虹 魏强 《中国比较医学杂志》 CAS 2009年第12期5-9,共5页
目的制备小鼠脑脊髓炎病毒(TMEV)标准血清,建立ELISA检测方法,实现一种病毒多种检测方法的比对研究。方法用TMEV感染3周龄SPF级BALB/c小鼠,制备免疫用抗原。分别在0、7、14d以腹腔注射的方式免疫SPF级6-8周龄BALB/c小鼠,免疫血... 目的制备小鼠脑脊髓炎病毒(TMEV)标准血清,建立ELISA检测方法,实现一种病毒多种检测方法的比对研究。方法用TMEV感染3周龄SPF级BALB/c小鼠,制备免疫用抗原。分别在0、7、14d以腹腔注射的方式免疫SPF级6-8周龄BALB/c小鼠,免疫血清用IFA、IEA法进行鉴定;TMEV感染BHK-21细胞,制备EHSA抗原,确定酶结合物、抗原和标准阳性血清的最佳工作浓度,建立TMEVEHSA检测方法,进行敏感性、特异性、重复性和稳定性实验。结果制备TMEV免疫血清,以IFA、IEA测定血清效价分别为1:640和1:320,与痘苗病毒、小鼠肺炎病毒、小鼠肝炎病毒、仙台病毒和呼肠孤病毒-Ⅲ型均无交叉反应;建立了ELISA检测方法,确立了各种试剂的最佳工作浓度,其中酶结合物最佳工作浓度为1:10000,抗原为2.5μg/mL,阳性参考血清为1:200;EHSA检测灵敏度为1:3200。板内特异抗原、正常抗原平均变异系数为4.67%和5.7%,板间为4.39%和7.61%。稳定性实验相对偏差均小于20%。结论本研究制备的TMEV免疫血清可作为血清学检测方法中的标准质控血清;建立的ELISA方法重复性、稳定性好,敏感性和特异性强,可用于小鼠脑脊髓炎病毒血清抗体检测。 展开更多
关键词 小鼠脑脊髓炎病毒(TMEV) 标准血清 ELISA
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标准品血清在ELISA室内质量控制及结果判定中的运用探讨
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作者 尹华川 《影像研究与医学应用》 2018年第13期28-30,共3页
目的:探讨标准品血清在ELISA室内质量控制及结果判定中的运用效果。方法:以乙型肝炎表面抗原的测定为例,运用不同厂家、不同批次试剂盒同时对系列标准血清进行测定,从而通过这种方式得出定标后的质控品浓度。并且采用两厂家不同批次ELIS... 目的:探讨标准品血清在ELISA室内质量控制及结果判定中的运用效果。方法:以乙型肝炎表面抗原的测定为例,运用不同厂家、不同批次试剂盒同时对系列标准血清进行测定,从而通过这种方式得出定标后的质控品浓度。并且采用两厂家不同批次ELISA试剂盒对经微粒子酶免疫分析法定量的112份低浓度HBs Ag阳性血清进行检测,分别用cut-off界值法和血清浓度界值法判断结果,并且进行相应的评价。结果:通过血清浓度界值法进行质控,会使得所进行工作的结果变异小,不受不同厂家及批号更换的影响。因此血清浓度界值法结果稳定可靠,有利于避免在进行相应工作时质量的下降。结论:采用低浓度定标法的ELISA室内质控方法明显优于以吸光度/临界值为指标的ELISA室内质控方法,可更好的判断临界值附近样本的结果,有利于帮助研究人员减少漏检率,值得推广使用。 展开更多
关键词 标准品血清 室内质量控制 血清浓度界值法
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几种脊椎动物红细胞血型的比较研究 被引量:4
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作者 艾洪滨 张静 +1 位作者 傅惠远 于乃臣 《山东师范大学学报(自然科学版)》 CAS 2002年第2期67-70,共4页
采用两种方法对脊椎动物各纲的代表动物小白鼠、家兔、家鸽、蟾蜍、鲫鱼的红细胞血型进行了研究 .方法一 :采用人类抗A、抗B标准血清与上述动物的红细胞进行反应 ,结果均未出现凝集现象 ,表明 :这几种动物的红细胞膜上 ,没有与人类抗A、... 采用两种方法对脊椎动物各纲的代表动物小白鼠、家兔、家鸽、蟾蜍、鲫鱼的红细胞血型进行了研究 .方法一 :采用人类抗A、抗B标准血清与上述动物的红细胞进行反应 ,结果均未出现凝集现象 ,表明 :这几种动物的红细胞膜上 ,没有与人类抗A、抗B标准血清起反应的A凝集原和B凝集原 .方法二 :采用同种动物的血清与同种动物不同个体的红细胞进行反应 ,结果 :上述几种动物的红细胞与同种内不同个体的血清均不发生凝集反应 . 展开更多
关键词 比较研究 红细胞血型 脊椎动物 人类标准血清 动物血清 凝集反应
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布鲁菌omp19原核表达和间接酶联免疫吸附试验检测布鲁菌方法的建立 被引量:2
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作者 王娜 呼和巴特尔 崔步云 《微生物与感染》 2014年第1期31-36,共6页
本研究原核表达并纯化了布鲁菌脂蛋白Omp19,并通过蛋白免疫印迹法对其免疫原性进行验证。采用Omp19作为包被抗原,建立检测羊种布鲁菌的间接酶联免疫吸附试验(iELISA),检测90份羊血清样本,并与标准血清凝集试验(SAT)比较,用SPSS软件进行... 本研究原核表达并纯化了布鲁菌脂蛋白Omp19,并通过蛋白免疫印迹法对其免疫原性进行验证。采用Omp19作为包被抗原,建立检测羊种布鲁菌的间接酶联免疫吸附试验(iELISA),检测90份羊血清样本,并与标准血清凝集试验(SAT)比较,用SPSS软件进行数据分析。结果显示,iELISA与SAT的阳性符合率为95.12%,阴性符合率为67.35%,Kappa值为0.607 7。对2种方法进行McNemar卡方检验,结果有显著性差异(P<0.05)。本研究建立的iELISA与SAT的总符合率达80%,可作为羊种布鲁菌病血清学诊断的备用方法。 展开更多
关键词 布鲁菌 omp19 间接酶联免疫吸附试验 标准血清凝集试验
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基于共振瑞利散射法的人血清蛋白浓度的研究
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作者 薛忠晋 冯巧玲 +3 位作者 王高 雷树峰 高曰云 周汉昌 《光散射学报》 北大核心 2012年第4期392-396,共5页
文章针对人标准血清总蛋白浓度的定量测定,建立了以四羧基金属酞菁锌为光谱探针检测蛋白质的共振光散射的新方法。该方法的实质是将人标准血清总蛋白和酞菁锌溶液混合,当光源照射到样品池中的混合液时,将激发出强烈的共振瑞利散射荧光信... 文章针对人标准血清总蛋白浓度的定量测定,建立了以四羧基金属酞菁锌为光谱探针检测蛋白质的共振光散射的新方法。该方法的实质是将人标准血清总蛋白和酞菁锌溶液混合,当光源照射到样品池中的混合液时,将激发出强烈的共振瑞利散射荧光信号,根据信号强度的强弱,计算血清蛋白浓度的大小。自行设计的测试装置采用了薄壁试管的样品皿,减小了激光光波穿过溶液时的光程,可得到更强的探测信号。测试结果表明:根据数字示波器显示的探测器信号,可得出电压的峰峰值,体现了荧光的大小,从而可以进一步计算出血清蛋白的浓度。 展开更多
关键词 共振瑞利散射 人标准血清蛋白 浓度 电压 四羧基酞菁锌
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